UNIDAD 2. MICOLOGÍA.
2.2. Métodos de aislamiento y
morfología colonial de hongos
filamentosos de diferentes fuentes.
FENÓMENOS FÚNGICOS
DIMORFISMO: Fenómeno en el cual un hongo
muestra en su ciclo biológico tanto un micelio
filamentoso como un aspecto levaduriforme. Algunos
hongos principalmente las especies patógenas
presentan dimorfismo.
Tipos de dimorfismo.
• Temperatura
dependiente.
• Temperatura y nutrición
dependientes.
• Nutrición
dependientes.
POLIMORFISMO.
Es la capacidad de un
agente etiológico de
generar diferentes
cuadros clínicos.
La tiña del cuerpo o
de la cabeza puede ser
producida por un solo
hongo: Microsporum
canis.
PLEOMORFISMO
• Colonia de
Es la dermatofito en
transformación
irreversible de una medio Sabouroad.
cepa por un exceso
de carbohidratos,
esta tiende a
cambiar dando un
micelio blanco,
estéril y
algodonoso.
Hongos bifásicos.
• Son aquellos que
presentan dos
formas.
1. Filamentosa.
2. No filamentosa
diferente a la
levaduriforme.
Ejemplo: Coccidiodes
immitis y Fonsecae
pedrosoie.
HONGOS DE DIFERENTES
FUENTES
Género Suelo Aire Frutas
Rhizopus sp
Mucor sp
Alternaria sp
Botrytis sp
Fusarium sp
Penicillium sp
Cladosporium
sp
Aspergillus sp
Candida sp
Geotrichum sp 8
Trichoderma
Coloración: blanca, rosada, gris ,anaranjada, verde, rojiza, negra.
9
Color en el reverso (difusión del
pigmento)
Textura
(yesosa, glabra, terrosa, granulosa,
vellosa, cérea, cremosa, algodonosa).
Aspecto.
Plegado , radiado, velloso, cerebriforme ,
crateriforme, liso.
Consistencia.
• Dura, suave, firme, membranosa ,
pastosa.
NUTRIENTES BÁSICOS EN
MEDIO DE CULTIVO
Materias nitrogenadas como peptona.
Azucares como glucosa o maltosa.
Un soporte sólido como la gelosa.
pH ácido (5 a 6).
Vitaminas (impurezas de la peptona))
AGAR SABOURAUD
USO:
Composición: Para cultivo de hongos
*Peptona 10g patógenos y no
*Glucosa 20g patógenos,
*Agar-Agar 20g particularmente
pH 5.6 ± 0.2 dermatofitos, levaduras
y microorganismos
acidúricos.
AGAR PAPA DEXTROSA (PDA)
Composición: USO:
*Infusión de Papa 200g Para cultivo, aislamiento
*Dextrosa 20g y determinación del
*Agar Bacteriológico 15 numero de hongos y
pH 5.6 ± 0.2 levaduras.
USO:
AGAR LITTMAN
Medio selectivo, que
Composición: suplementado con
*Peptona 10g estreptomicina, se
*Estreptomicina 10g emplea para el
*Dextrosa 10g aislamiento primario y
*Cristal Violeta 0.01g cultivo de hongos,
*Agar 20g especialmente
dermatofitos.
AGAR BIGGY
USO:
Composición:
*Sulfito de bismuto 3g El Agar Biggy (por sus siglas
*Dextrosa 10g en inglés Bismuth-Glucose-
*Extracto de levadura 1g Glycine-Yeast) es utilizado
*Glicina 10g para el aislamiento y
*Agar 16g diferenciación de especies de
*Citrato de Amonio y Bismuto 5g Candida. También es
pH 6.8 ± 0.2 conocido como Agar de
Nickerson.
Agar Mycosel. USO:
Composición: Selectivo para el
aislamiento de hongos
*Peptona de soya 10g
patógenos de muestras
*Dextrosa 10g
que puedan tener alto
*Cloranfenicol 0.05g
contenido de flora
*Agar 15.5g
bacteriana. No
*Cicloheximida 0.4g
recomendado para
siembra sistemática
AGAR CZAPEK DOX
Composición: USO:
Sulfato Ferroso 0.01g Se emplea para el cultivo
Cloruro de Potasio 0.5g de hongos y bacterias del
Sacarosa 30 g suelo, además de otros
Nitrato de Sodio 2g microorganismos capaces
Fosfato Dipotásico 1g de desarrollarse con
Sulfato de Magnesio 0.5g nitrógeno.
Agar 15 g
pH final: 7.3 ±0,2
AGAR DERMASEL (AGAR
MICOBIÓTICO) DTM
USO:
Componentes: Se emplea para el aislamiento de
*Cicloheximida 0.5g hongos patógenos, en especial de
dermatofitos, en medios muy
*Cloranfenicol 0.05 g contaminados.
*Glucosa 10.0 g Littman puso en evidencia que a
*Sulfato de gentamicina 0.1g pH=7,0 era cuando más se
*Rojo fenol 0.2g favorecía el crecimiento de
*Peptona de Soja 10.0 g hongos patógenos.
*Agar 17g La cicloheximida actúa de forma
selectiva en el aislamiento de
pH final: 5.5±0,2 dermatofitos, mientras que el
cloranfenicol inhibe
notablemente el crecimiento de
bacterias y mohos.
Azul de algodón lactofenol.
• El fenol destruye la flora acompañante y
organismos; el ácido láctico conserva las
estructuras fúngicas y el azul algodón tiñe la
quitina de las paredes fúngicas.
Conidioforos Dermatofitos
Aspergillus niger, A. fumigatus y A. Microsporum sp
flavus.
Penicilium sp. Trychophyton sp
Epydermophyton sp
Esporangios
Rhizhopus sp.
Mucor sp.
Absidia sp.
Contaminantes
Geotrichum sp.
Scopulariopsis sp.
Fusarium sp.
Alternaria sp.
Curvularia sp.
Helmintosporum sp.
Aspergillus flavus.
Morfología macroscópica
Colonias filamentosas.
Aterciopelados.
Verde amarillentas o cafés.
Reverso café rojizo o dorado.
Morfología microscópica
Micelio macrosifonado.
Microconidias redondas.
Conidióforos rugosos.
Vesículas de 35 a 40 micras.
Conidios radiales.
Equinulados.
Aspergillus fumigatus.
Morfología
macroscópica.
Colonias aterciopeladas
o polvosas.
Verde botella.
Micromorfología.
Conidioforos lisos y
cortos.
Vesícula de 20 a 30
micras.
Conidios paralelos al
conidioforo.
Aspergillus niger.
Morfología macroscópica.
Colonias granulosas.
Aterciopeladas.
Polvosas.
Blancas al principio.
Después café oscuro y
negras.
Reverso blanco o
anaranjado.
Morfología microscópica.
Conidios lisos y largos.
Vesícula de 50 a 75 micras.
Conidios radiales.
Redondos y lisos.
Penicillium sp.
Características
macroscópicas.
Tamaño ilimitado, ocupa
todo el medio de cultivo
Color verde con un halo
blanquecino
Forma y aspecto plana,
polvosa, aterciopelada
Micromorfologia
Micelio Macrosifonado
Microconidios entre 1 y 3
μm.
Mucor sp.
Morfología macroscópicas.
Tamaño: ilimitado, tiende a
llenar los tubos y cajas de
Petri.
Color: en un inicio (2-3 días)
es blanco, posteriormente
toma un tonalidad blanco
grisácea.
Forma y aspecto: vellos-
algodonoso seco.
Morfología microscopica
Micelio macrosifonado de 4-
8μm.
Reproducción asexuada a
base de esporangiosporas o
endosporas.
Rhizopus sp.
Morfología macroscópica.
Micelio algodonoso de
crecimiento rápido .
Color al principio es
blanco y posteriormente
se torna gris o café
amarillento, el reverso de
la colonia es blanco
grisáceo
Morfología microscópica.
Tiene esporangioforos no
ramificados con rizoides
que se originan en el
estolón.
Absidia sp
Morfología macroscópica.
Colonias de crecimiento
rápido, de micelio lanoso,
con la superficie gris y el
reverso blanquecino.
Morfología microscópica.
Hifas aseptadas, sus
esporangios están sobre
los estolones entre los
rizoides , esporangios
piriformes
Geotrichum sp.
Morfología macroscópica.
Tamaño ilimitado cubre
todo el medio.
Color blanco amarillento
Forma y aspecto plano-
vellosa –húmeda.
Morfología microscópica.
Micelio macrosifonado.
Reproducción por
artrosporas.
Scopulariopsis sp
Morfología macroscópica.
Tamaño ilimitado tiende a
cubrir el medio de cultivo
Color blanco en un inicio
posteriormente es beige
Forma y aspecto
aterciopelada, polvosa,
seca, cerebriforme
Morfología microscópica.
Micelio macrosifonado
septado e hialino
Reproducción por
microconidias redondas y
espiculadas
Fusarium sp.
Morfología
macroscópica.
Tamaño ilimitado
Color en un inicio es
blanca
posteriormente toma
tonalidades naranja o
violeta-lila
Forma y aspecto
vellosa-seca.
Morfología
microscópica.
Macroaleurioespora
en media luna
Alternaria sp.
Morfología macroscópica.
Colonias vellosas, de
superficie rugosa y borde
regular, de color gris
intenso en el anverso y
negro en el reverso.
Morfología microscópica.
Hifas septadas y
pigmentadas,
conidióforos septados de
longitud variable, del que
emerge un conidio
elipsoidal septado en
forma transversal
• Curvularia sp. • Helminthosporium sp.
Otros hongos contaminantes.
Trichophyton sp. Morfología colonial.
Trichophyton sp. Morfología microscópica.
Microsporum sp.
Morfología colonial.
Algodonoso.
Lanoso.
Pulverulento.
Blanco, crema o café.
Macroconidias.
40 a 150 micras.
Tres a quince celdas.
Pared gruesa.
Microconidias.
3 a 7 micras.
Forma de clava.
Clamidosporas.
Epidermophyton floccosum
Macroconidias.
Forma de clava.
Una a cuatro
celdas.
En racimos.
Microconidias.
No tiene.
AISLAMIENTO DE HONGOS DEL AIRE.
En una caja Exponerlas
Aislamiento de petri con agar Incubar a
hongos del aire abiertas a la temperatura
Saboraud y corriente de
otra con agar ambiente
aire por 30
Litman min.
Realizar lectura,
reportar
características
macroscópicas
Aislamiento de Hongos del suelo
25º -30º se añaden 2
Aislamiento de Pesar 0.5 g de Fundir Saboraud y gts de la mezcla de
hongos en suelo tierra y agregar Littman antibióticos.
a un tubo 4.5mL Penicilina-
de la solución Streptomicina 1:1
salina estéril
Dil 1:10
Añadir el
contenido
Diluciones
hasta alcanzar
10 -6
De las
diluciones del
paso ( * )
colocar 1 mL de
las diluciones
Incubar a en dos cajas
Realizar lectura, temperatura con agar
reportar ambiente Saboraud y dos
características con Littman
macroscópicas
Diluciones realizadas para el aislamiento
micológico del suelo
AISLAMIENTO DE HONGOS DE
VERDURAS Y FRUTOS
En el centro de
la caja
Aislamiento de Colocar un poco Sembrar en
Hongo de de tejido de la agar Saboraud
verduras y verdura o fruta y Littman
frutas que contenga el
hongo
Incubar a
temperatura
ambiente
Realizar lectura, reportar
características
macroscópicas