¿Qué es la microbiología?
Estudio de los organismos microscópicos
3 palabras griegas: mikros (pequeño), bios (vida) y
logos (ciencia)
estudio de la vida microscópica
Surgió como ciencia tras el descubrimiento y
perfeccionamiento del microscopio.
¿ Qué son los microorganismos?
Organismos que no pueden ser observados a
simple vista.
Organismos que viven como células aisladas o
entidades que contienen ácidos nucleicos capaces
de replicarse, por lo menos en parte de su ciclo.
Son: algas, hongos, protozoarios, bacterias y virus.
¿ Cómo afectan nuestra vida?
Muchos microorganismos causan enfermedades
y abundan casi en cualquier lugar por lo que
siempre estamos expuestos a un contagio.
Pueden afectarnos en el aspecto económico ya que
le producen enfermedades a los animales y a las
plantas dañando las cosechas y las clases de
ganados y otros animales domésticos que sirven
como fuente de alimento.
¿Qué utilidad brinda a la humanidad?
Más de cien especies microbianas son usadas en la
producción de sustancias que no pueden ser obtenidas
de forma más fácil o más barata por otros medios.
Ventajas: tamaño, alta tasa metabólica, posibilidad de
cultivarse a gran escala, estabilidad genética, etc.
DOMINIO
Actualmente considerado el nivel
taxonómico más alto.
Arquea
Halogeometricum borinquensis
Haloterrigena thermotolerans
VIRUS
MORFOLOGÍA BACTERIANA,
ESTRUCTURAS, REPRODUCCIÓN, EL
ADN BACTERIANO, ESTRUCTURA Y
FUNCIONES
BACTERIA
Organismos unicelulares y microscópicos
Carecen de núcleo u organelos limitados por
membranas.
Pared celular a base de carbohidratos.
Son muy pequeñas,
1 y 10 micrómetros (µm) de longitud
Modo variable de obtener la energía y el alimento.
Se encuentran en
el aire
el suelo
el agua
Se pueden encontrar en algunos alimentos o
viviendo en simbiosis con plantas, animales y otros
seres vivos.
MEMBRANA CITOPLASMÁTICA
Es muy delgada de 5-10 nm
observable con microscopio
electrónico.
La mayoría de los lípidos son
Fosfolípidos, asimétricos con
extremos Polares: glicerol
(con el agua, hidrófilos) y no
polares àc. grasos (internos
hidrófobos),
Son anfipáticos, permitiendo
formar una bicapa en la
membrana.
Carecen de esteroles como colesterol, pero poseen moléculas
penta-Cíclicas denominadas Hepanoides, ubicadas dentro la
bicapa.
Posee Proteínas periféricas constituye el 20-30%, ubicadas poco
Firme en la membrana interna y Proteínas Integrales, insoluble
en agua, no se extrae fácilmente con lípidos.
FUNCIONES
Actúa como barrera selectiva.
Transporta nutrientes y residuos mediado por portadores
(permeasas =proteínas d transporte)
Es lugar donde se realiza muchos procesos metabólicos: Respiración,
fotosíntesis,.proceso de síntesis de pared celular y cápsula.
Posee receptores especiales que detecta y responde a sustancias
químicas del medio exterior.
Sitio de actividad de citocromos y de generación de fuerza motriz de
protones (FMP).
Sede del centro de replicación del ADN, Punto de anclaje de
plásmidos, flagelos.
Internamente posee los mesosomas laterales y septales,
invaginaciones de membrana, forma Vesículas, túbulos o lamelas,
interviene en división celular y procesos secretorios.
PARED BACTERIANA
Christian Gram. en 1884 comprobó que las bacterias se clasifican en
Gram positivas y Gram negativas
LAS GRAM POSITIVAS tiene de 20-80nm de grosor de
peptidoglicano o mureina (formados por derivados de azúcares:N
acetilglucosamina y N acetilmuamico y grupos de aa); poseen
ácidos teicoicos (polímero de glicerol y ribitol unidos por grupos
fosfatos, pueden estar unidos aa. como D- alanina u glucosa) Al
peptidoglicano, son responsables de la carga negativa de la
bacteria.
LAS GRAM NEGATIVAS es de 2-7 nm de grosor y rodeada de una
membrana externa de 7-8nm. denominándole envoltura, posee
proteínas de membrana como la proteína de Braun o lipoproteína de
mureína
compuesta por dos capas, una de glucopeptidos rodeada de una
bicapa fosfolipídica, lipoproteínas y glucolipídica..
Los LPS-Lipopolisacáridos está constituido por Lípido A, polisacárido
central y la cadena lateral O. La membrana externa disminuye la
entrada de sales biliares, antibióticos y otras
Sustancias tóxicas.;Son más resistentes a los antibióticos
TINCIÓN GRAM
Bacteria Gram + Bacteria Gram -
Pared celular simple Pared celular
compleja
Capa de Capa de
peptidoglucano peptidoglucano fina
gruesa
No capa externa de Capa externa de
lipopolisacáridos lipopolisacáridos
Retienen cristal Retienen safranina-
violeta/iodo-color color rojo/rosado
azul/violeta
PARED CELULAR DE LAS BACTERIAS ÁCIDO ALCOHOL RESISTENTES
Se tiñen con fucsina + fenol un peptidoglucano especial (la
(forzando mediante diferencia más importante es que en vez
calentamiento) de N-acetil murámico existe N-glucolil-
Tienen resistencia a decolorarse murámico); un arabinogalactano de
por una mezcla de ácido gran peso molecular
clorhídrico al 3% en etanol de
96º. Por ello se denominan como
bacterias ácido-alcohol Ambos polímeros se encuentran
resistentes. enlazados a través de fosfodiéster entre
una unidad de murámico y una de las
Esta propiedad depende
arabinosas. Pero a su vez, este
esencialmente de la presencia,
en su pared celular de unos esqueleto se une covalentemente a los
lípidos llamados ácidos micólicos. ácidos micólicos
. Los ácidos micólicos son ß-hidroxiácidos
grasos ramificados en , cuya longitud
de cadena es grande (desde C78 a
C91 en Mycobacterium). Están unidos al
esqueleto de la P.C. de forma uniforme,
a través de enlaces con los -OH en 5 de
las unidades de arabinosa.
FUNCIONES
Resistencia para soportar altas presiones osmóticas.
Protege las dos células hijas en la reproducción
bacteriana.
Sirve como filtro molecular, impidiendo el paso de
macromoléculas y permite el paso de agua y metabolitos
esenciales.
Es un factor determinante del poder patógeno
bacteriano, pues en las gram negativas la endotoxina se
encuentra en la pared.
Contiene antígenos tipo y grupo específicos en la parte
más externa de la pared, preferiblemente en el
polisacárido superficial.
Es el sustrato sobre el que actúan, entre otros,
antimicrobianos de amplio uso, como los beta lactámicos.
Otras estructuras
Mesosomas: Prolongaciones internas de la membrana plasmática
que contienen enzimas respiratorios y colaboran en el proceso de
la división celular.
Citoplasma: Medio celular limitado por las membranas, muy
semejante al de la célula eucariota. En el se realizan la mayoría de
las reacciones metabólicas de la bacteria.
Ribosomas 70 S: Son orgánulos globulares, formado por dos
subunidades la 50 S y la 30 S, visibles únicamente al microscopio
electrónico, pueden estar libres o asociados. Intervienen en la
síntesis proteica.
Inclusiones: Son gránulos de reserva, en época de abundancia, o
bien son residuos de su metabolismo. Están formadas de
polisacáridos o gotitas de grasa.
ESTRUCTURAS ASOCIADAS
Los flagelos
Están compuestos por cerca de 20 proteínas, con
aproximadamente otras 30 proteínas para su regulación y
coordinación.
El filamento es un tubo hueco helicoidal de 20 nm de espesor.
El filamento tiene una fuerte curva justo a la salida de la
membrana externa; este "codo" permite convertir el movimiento
giratorio del eje en helicoidal.
A-Monotricas;
[Link] Fluorsecens
B-Loforicas;
C-Amfitricas;
D-Peritrica;Ej Proteus
mirabilis [Link]
Fimbrias o Pili
Son apéndices finos, semejantes a pelos, de
1 a 20 micrones de longitud y que a menudo
se presentan en grandes números sobre las
bacterias Gramnegativas en particular las
Enterobacteriaceas y Neisserias.
A diferencia de los flagelos no poseen
movilidad, pero por ser de naturaleza
proteica (pilina), poseen propiedades
antigénicas y hemoaglutinantes.
Tienen importancia médica porque algunas
fímbrias median la ligadura de bacterias a
las células a través de las adhesinas
(adhesinas bacterianas). El término fimbria
bacteriana se refiere a los pelos comunes, lo
que se debe distinguir del uso preferido de
"pelos", que se utiliza para designar a los
pelos sexuales (pili sexual).
Cápsula
Endospora
Estrucutra de supervivenvia.
Resistente a:
Calor
Disecación
Radiación
Ácidos
Desinfectantes
Químicos fuertes
Presente en bacterias del suelo
Su descubrimiento ayudó al
desarollo de métodos y técnicas
adecuadas de esterilización
Inclusiones celulares
Lugares de almacenaje
Vacuola
Granulos de almidón
La célula los utiliza como fuente de energía
Gránulo metacromático.- frecuentemente esta ubicado cerca de
los polos, contiene ácido polifosfòrico (cuerpos de Babes-Ernst o
gránulos metacromàticos ) se tiñen intensamente con los
colorantes de anilina como el azul de metileno alcalino de Loffler,
dando al bacilo una apariencia de rosario.
CLASIFICACIÓN
Mórfología
MORFOLOGIA DE LAS BACTERIAS
Crecimiento de las colonias
La morfología y tamaño de la colonia se utilizan para
identificar las especies de bacterias.
EL ADN BACTERIANO,
ESTRUCTURA Y FUNCIONES,
REPRODUCCIÓN
GEN
Unidad básica de herencia contiene la
información para síntetizar una
macromolécula con función celular
específica ejm: Proteínas, ARNm, ARN
ribosómico, ARN de transferencia y
ARN pequeños
Se disponen, a lo largo de cada uno de
los cromosomas. ocupando una
posición determinada (locus). El
conjunto de cromosomas de una
especie se denomina genoma
Mostrando el gen y las regiones
codificables y no codificables
NÚMERO DE GENES EN ALGUNOS ORGANISMOS
Cuadro 1: mostrando el num de genes y pares de bases de algunos organismos
En el microscopía electrónica Presenta proteínas y
muestra un cromosoma poliaminas de bajo
bacteriano altamente peso molecular y de
condensado y ordenado iones magnesio
("supercoiled" o remplazando a las
superenrrollado), y que se histonas
encuentra anclado Esta compuesto de
parcialmente a la membrana alrededor de 80% de
bacteriana (mesosoma) DNA, 10% de RNA y
10% de proteínas (RNA
polimerasa).
Proteínas principales de Replicación
1. Topoisomerasa (DNA girasa).- rompe una hebra y la tensión del
enrollamiento de la hélice, corta el DNA que esta súper
enrollado para liberar tensión y volver a unir .
2. Helicasa Desenrolla hélice con ayuda de Topoisomerasa
3. DNA Polimerasa III.- Papel principal en la replicación, replica
continuamente su copia de cadena conductora, las Polimerasas
I y II . repasan, corrigen el diseño del DNA. Necesitan de ATP,
GTP. La replicación de cadena rezagada es discontinua.
4. La RNA polimerasa.- (Primasa) sintetiza un Cebador
complementario del DNA. es necesario ayuda de otras
proteínas llámadose [Link] sintetiza por fragmentos
llamados Fragmentos de Okazaki. La DNA polimerasa I, elimina
al cebador ARN y sintetiza complementario apropiado.
5. La DNA ligasa.- Une los fragmentos contiguos complementarios
al patrón
MUTACIONES
El DNA contiene información en la secuencia de los nucleótidos de
los genes no se altera sustancialmente de lo contrario hay
alteración del fenotipo o genera
nuevas variedades por lo que se consideran:
Mutaciones morfológicas, mutaciones letales y mutaciones
condicionales. Sin embargo hay mutaciones que no
Alteran el fenotipo, afecta solo una localización determinada
(mutaciones puntuales).
Las mutaciones pueden ser:
Espontáneas. Ocasionado por algún factor externo, ej. radiación
natural (rayos cósmicos). pueden ocurrir durante la replicación del
DNA como errores en el apareamiento de las bases; en este caso la
frecuencia puede ser de 1 x 10-7 - 10-11 por pares de bases.
Inducidas. Se pueden inducir en forma artificial, ej. luz UV
MUTÁGENOS.
Son agentes que pueden producir mutaciones. se pueden distinguir:
Mutágenos químicos análogos de las bases. Ej. 5-Bromouracilo es
análogo de la Timina o la 2-aminopurina es análogo de la Adenina.
Mutágenos químicos que reaccionan con el DNA. Ej. Ácido Nitroso
puede transformar la base Adenina de tal manera que se aparee con
la Citosina.
Agentes alquilantes. Ej. la Mostaza Nitrogenada y Mitomicina
reaccionan con bases del DNA alterándolas químicamente.
Radiaciones. Ej. Luz UV (250 nm) provoca un dímero de bases
pirimidinas. Ionizantes (rayos X) producen radicales libres que atacan
quebrando la cadena de DNA.
Biológicos. Ej. bacteriófagos en el fenómeno de recombinación
genética de Transducción.
REPRODUCCIÓN
Intercambio genético producido cuando una bacteria es capaz de
captar fragmentos de ADN, de otra bacteria que se encuentran
dispersos en el medio donde vive.
TRANSDUCCIÓN:
En este caso la transferencia de ADN de una bacteria a otra, se
realiza a través de un virus bacteriófago, que se comporta como
un vector intermediario entre las dos bacterias.
transduccion
TIPOS DE TRANSDUCCION
.Transducción Generalizada: mecanismo por el cual potencialmente
cualquier gen bacteriano donadora puede ser transferido a la célula
receptora
El mecanismo de la transducción generalizada
CONJUGACIÓN: una bacteria donadora F+ transmite a través de
un puente o pili, un fragmento de ADN, a otra bacteria receptora
F-. La bacteria que se llama F+ posee un plásmido, además del
cromosoma bacteriano.
PLASMIDOS
son elementos genéticos extra-cromosomales que pueden llevar a
cabo una replicación autónoma. Un episoma es un plásmido que
además es capaz de integrarse al cromosoma bacteriano.
plasmido a mayor aumento
TIPOS DE PLÁSMIDOS
a) Plásmidos Conjugativos. Tienen genes responsables de su
transferencia a otra célula y de la transferencia del cromosoma
bacteriano a otras células.
b)Plásmidos Disimilatorios. Codifican la síntesis de enzimas que
catalizan el catabolismo de azúcares poco comunes y de
hidrocarburos.
c) Plásmidos Bacteriocinogénicos. Poseen genes de síntesis de
bacteriocinas (proteínas tóxicas bactericidas).
d)Plásmidos de Resistencia (Factor R). Portan genes que otorgan
resistencia a las células que los llevan, ej. resistencia a
antibióticos, metales pesados, toxinas, etc.
INGENIERIA GENETICA
Procedimientos sofisticados para la separación , manipulación y
expresión del material genético.
En ingeniería genética hay dos tipos de investigación:
[Link] BASICA que significa estudiar los
mecanismos de la replicación y de la expresión génica en virus,
procariotes y eucariotes.
2. INVESTIGACION APLICADA, desarrollo de cultivo microbiano
capaz de sintetizar productos valiosos como :
INSULINA HUMANA
HORMONA DEL CRECIMIENTO
INTERFERON
VACUNAS
ENZIMAS INDUSTRIALES
BIOTECNOLOGÍA
Aplicación de organismos, sistemas y procesos
biológicos en la industria
Sustrato + Ser vivo --- Producto
Desde hace muchos años el hombre ha usado
sin saberlo Ejm.
Pan con levadura,
Bebidas alcohólicas, vinagre, cerveza.
Penicilina y otros antibióticos
OBTENCIÓN ECONÓMICA DE PRODUCTOS YA
EXISTENTES
ADN SINTETICO
El ADN sintético u oligonucleótidos de DNA son pequeños segmentos
de ADN monohelicoidales.
APLICACIONES PRACTICAS DE INGENIERIA
GENETICA
FERMENTACIONES MICROBIANAS
Un numero de importantes productos son hechos usando
microorganismos de los cuales los antibióticos son los
mas importantes.
VACUNAS
Una vacuna es un material que puede inducir inmunidad
a un agente infeccioso.
Por ingeniería genética los genes virales de la proteína
de la cubierta pueden ser clonados y expresados en
bacteria haciendo posible el desarrollo seguro de
vacunas.