Crecimiento Microbiano
Bibliografa:
Brock. Cap 6. 10ma edicin.
Lo que se obtiene con violencia, solamente se puede mantener con
violencia. -- Gandhi
CRECIMIENTO MICROBIANO
Definicin: Crecimiento mibrobiano es el aumento en nmero de clulas (y no
en tamao).
Divisin celular por fisin binaria
Tiempo de generacin: el tiempo
transcurrido desde que una clula
se divide y da 2 nuevas clulas.
Vara entre 0.5-6 horas.
Video
Crecimiento exponencial
La pendiente de la curva aritmtica, aumenta constantemente.
Curva de Crecimiento
Es la tasa de crecimiento de una poblacin analizada en un sistema
cerrado, monofsico, medida como el logaritmo del nmero de
clulas vs. el tiempo de incubacin.
Fase de latencia: es un perodo de inactividad en el cual las clulas se adaptan al
nuevo ambiente.
Fase exponencial: es un perodo donde los organismos crecen a su tasa mxima.
Fase estacionaria: el nmero de clulas vivas se mantiene constante. Tasa de Nacimientos
= Tasa de muerte.Se debe a la falta de nutrientes, deshechos txicos, etc.
Fase de muerte: los organismos mueren a una tasa exponencial.
Preguntas
Cunto tiempo vive una bacteria? Y una archaea?
En qu situacin podra ser que la curva de crecimiento de una bacteria no
tuviera una fase de latencia?
Mediciones del crecimiento microbiano
Medicin del nmero de clulas:
- mtodos de recuento directo
- recuento de clulas viables.
Medicin de la densidad o masa celular:
- por peso seco
- por luz dispersada
- por determinaciones bioqumicas.
Mediciones del crecimiento microbiano
Medicin del nmero de clulas:
- metodos de recuento directo
Se utiliza una cmara de recuento especial que se observa al
microscopio ptico para estimar el nmero total de clulas en el cultivo.
Desventajas:
El mtodo no sirve para cultivos poco densos, celulas mviles.
Frecuentemente es necesario teir las clulas.
Mediciones del crecimiento microbiano
Medicin del nmero de clulas:
- recuento de clulas viables.
Siembra por extensin
45-50C
Siembra por vertido en placa
Mediciones del crecimiento microbiano
Antes de la siembra, el cultivo debe diluirse para obtener 30-300 UFC en cada
placa.
Pregunta
Se ha visto que los recuentos de UFC revelan nmeros menores que los
recuentos directos al microscopio. Por qu?
- el recuento directo al microscopio incluye clulas muertas
- diferentes organismos poseen requerimientos fisiolgicos diversos
y no todos crecen en las condiciones de cultivo.
Mediciones del crecimiento microbiano
Medicin de la densidad o masa celular:
- por turbidez, mediante un espectrofotmetro.
Este mtodo requiere la preparacin de un estndard que relacione el
nmero de clulas con la turbidez.
Es problemtico para muestras de organismos que forman agregaciones
o biofilms. Se suele realizar agitacin.
Pregunta
Piensa que el mtodo de turbidez subestima o sobreestima el nmero de
bacterias presentes?
Si se le pide que realice una estimacin del nmero de bacterias
presentes en un cuerpo de agua contaminado. Qu mtodo utilizara
y por qu?