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Tipos y usos de fluorocromos en fluorescencia

La fluorescencia es la propiedad de ciertos elementos químicos llamados fluoróforos de absorber luz de una longitud de onda y emitir luz de una longitud de onda mayor. Existen tres tipos principales de microscopía de fluorescencia: primaria (la muestra posee fluorescencia natural), secundaria (muestra marcada con colorantes fluorescentes), e inmunofluorescencia (marcado con anticuerpos fluorescentes). Algunos fluoróforos comunes y sus espectros de absorción y emisión se enumeran.

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Tipos y usos de fluorocromos en fluorescencia

La fluorescencia es la propiedad de ciertos elementos químicos llamados fluoróforos de absorber luz de una longitud de onda y emitir luz de una longitud de onda mayor. Existen tres tipos principales de microscopía de fluorescencia: primaria (la muestra posee fluorescencia natural), secundaria (muestra marcada con colorantes fluorescentes), e inmunofluorescencia (marcado con anticuerpos fluorescentes). Algunos fluoróforos comunes y sus espectros de absorción y emisión se enumeran.

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La fluorescencia

es la propiedad que tienen ciertos elementos


qumicos denominados fluorforos o fluorocromos
de absorber una luz de una longitud de onda
determinada (por ejemplo luz azul) y luego emiten
otra luz de una mayor longitud de onda (amarillo,
verde, rojo).
Imagen que muestra el principio de
la fluorescencia. Se observa el rayo
incidente (color azul claro) de una
determinada longitud de onda, el
cual es absorbido por las partculas
fluorescentes (esferas naranja) que
responden emitiendo otra luz, en
este caso de color verde que exhibe
una longitud de onda mayor que la
de la luz incidente.

Tipos de Microscopa de
Fluorescencia
Primaria. La propia muestra posee
fluorescencia (autofluorescencia).

Secundaria: muestra marcada con colorantes


fluorescentes.

Inmunofluorescencia: la fijacin del


colorante fluorescente se realiza con un
anticuerpo marcado.

Longitud de onda de
absorcin (nm)

Longitud de onda de
emisin (nm)

Fluorescena (FITC)

494

520

Rodamina (TRITC)

540

Naranja de acridina

460-502

526-650

Yoduro de propidio

536

617

Fluorocromo

570

Algunos de los principales fluorocromos empleados en inmunofluorescencia y sus


respectivos espectros de absorcin y emisin en valores aproximados.

Espectro de excitacin y de emisin de


dos fluorocromos de uso comn.

MICROSCOPIO DE
FLUORESCENCIA

FILTROS

LAMPARA DE
MERCURIO

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