¿Que es la Tecnología de
Gel?
Sistema utilizado en
inmunohematología
para investigar e
identificar antígenos
y anticuerpos
antieritrocitarios.
¿Qué estandariza?
•Técnica que estandariza la
lectura de la
reacción antígeno-anticuerpo con
facilidad y repetitividad.
•Estandariza el uso de reactivos,
tiempos y lecturas disminuyendo
sustancialmente la influencia de la
mano de operador.
Historia de la Tecnología
de Gel
• Nació en 1984 en un pequeño
laboratorio del Centro Regional de
Transfusión Sanguínea de Lyon,
Francia
• Dr. Ives Lapierre.
Historia de la Tecnología
de Gel
1985 – 1988
Primer kit comercial, la
prueba en gel fue utilizada en
el laboratorio del Dr. Lapierre
y allí se probó su calidad y
eficiencia.
1988
Disponible en Europa
Objetivo
• Encontrar una forma de
estabilizar las reacciones
de aglutinación
2. reducir los resultados
falsamente negativos a
consecuencia de una
técnica inapropiada
3. crear un método de
interpretaciones
Historia
1900 Landsteiner Sistema AB0
1939 Levine Factor Rh
1945 Coombs Pba. de la Antiglobulina Humana
Pba. en tubo
1951 Pollak Pba. de la Antiglobulina Humana
Pba. con enzimas
1960 Compatibilidad en 3 fases
1961 Hässing Albúmina
1980 LISS
1984 Lapierre Pruebas en gel
1986 Normas de transfusión sanguínea
Pruebas en gel con mayor
2005
sensibilidad DG gel
Fundamento de las Tarjetas
de Gel…
La tecnología de microtipificación en
gel se basa en la separación por
tamaño de los eritrocitos aglutinados,
durante un proceso de centrifugación
en un gel poroso.
Fundamento del Sistema de
Gel
Los eritrocitos van perdiendo
elasticidad en sus membranas de
forma que los aglutinados grandes
quedan atrapados en la zona
superior y los pequeños quedan
distribuidos a lo largo de la
columna.
Control de Calidad en las
Tarjetas de Gel
Control de Calidad en las
Tarjetas DG-Gel…
Una nueva generación
DG Gel®
Control de Calidad en las
Tarjetas de Gel
Cámara de Reacción
Sobrenadante
Gel de Sephadex
Control de Calidad en lasTarjetas
DG-Gel… Una nueva generación
Nuevo soporte
Facilidad de
dispensación Visibilidad y
definición
Diseño optimo
de la cámara Burbuja de
de reacción aire
Gel de matriz Visibilidad de
compacta la columna
Fondo en “V”
Perfil de 8
Resultados claros
columnas
Control de Calidad en lasTarjetas
DG-Gel… Una nueva generación
Cámara de
reacción
- volumen
- Forma └┘
- diámetro de
la entrada
Facilidad de dispensación
Mejora en la fase de sensibilización
Control de Calidad en lasTarjetas
DG-Gel… Una nueva generación
Cuello
-↓ Ø diámetro
estabilidad del “air-gap”
resistencia a la caída de los
reactivos
Control de Calidad en lasTarjetas
DG-Gel… Una nueva generación
Columna
- Longitud
- Diámetro
- Segmento circular
Mejora la estabilidad del gel
dentro de la columna
Visibilidad más clara
Control de Calidad en lasTarjetas
DG-Gel… Una nueva generación
Mayor definición de los
resultados negativos y
débilmente positivos
Fondo
V-
en “V”
shape
Control de Calidad en lasTarjetas
DG-Gel… Una nueva generación
Grifols Gel Technology
Tratamiento técnico en Grifols
-Tamaño partículas más uniforme
-Menor rotura de partículas
-Distribución homogénea
Alta definición -Volumen regular del gel en las columnas
de la reacción de
- Velocidad centrifugación menor
aglutinación
- Solución tamponada común para las columnas
neutras
Control de Calidad en lasTarjetas
DG-Gel… Una nueva generación
DG Gel
Sol
Diluyente único:
Facilita el
procedimiento en
la preparación de
diluciones
Control de Calidad en lasTarjetas
DG-Gel… Una nueva generación
1. Cámara de reacción
7. Diluyente único
2. Cuello
3. Columna
5. Grifols Gel Technology
4. V-shape 6. Soporte plástico
8 columnas
Instrumentación
Manual Semiautomatizado
Automatización Total
Control de Calidad en las
Tarjetas de Gel
Las Tarjetas de Gel están compuestas
de:
Gel de Sephadex
Reactivos
Control de Calidad en las
Tarjetas de Gel
Inspección visual
En la tarjeta se deberá de
observar un volumen
uniforme en todos los
pocillos y no se deben de
observar gotas de gel en la
cámara de reacción.
Control de Calidad en las
Tarjetas de Gel
Se debe observar claramente
la diferencia entre el Gel
y el sobrenadante.
Control de Calidad en las
Tarjetas de Gel
No se debe
observar ningún
cambio de OK
coloración en el
Gel.
No OK
Control de Calidad en las
Tarjetas de Gel
El Gel debe tener
una consistencia
uniforme libre de
burbujas y/o
partículas extrañas.
Control de Calidad en las
Tarjetas de Gel
Consideraciones importantes
• Leer el inserto.
• Almacenar las tarjetas a la temperatura
indicada en el inserto
Control de Calidad en
las
Tarjetas de Gel
En lo que se refiere a los reactivos
contenidos en las Tarjetas de Gel las
especificaciones están contenidas en:
NOM-222-SSA1-2002
Control de Calidad en las
Tarjetas de Gel
Avidez
Es la medida del tiempo en el cual se observa
aglutinación al reaccionar un anticuerpo con su
correspondiente antígeno
Control de Calidad en las
Tarjetas de Gel
No aplica en Tarjetas de Gel.
Control de Calidad en
las
Tarjetas de Gel
Especificidad
Es la capacidad que tiene un anticuerpo
de reaccionar solamente con su
correspondiente antígeno
Control de Calidad en las
Tarjetas de Gel
ABO
Preparar suspensiones de eritrocitos de
grupo 0, A1, A2, B, A1B, A2B y variantes
débiles del grupo A.
Control de Calidad en las
Tarjetas de Gel
Anti-D
Preparar no menos de 8 muestras de
eritrocitos R1, R2, R0, r´, r”, r, Arr
y Brr…
Control de Calidad en las
Tarjetas de Gel…
Especificidad
Los antisueros Los antisueros
contenidos en las contenidos en las
tarjetas para tarjetas para
sistema AB0 se sistema Rh-hr se
enfrentarán a : enfrentarán a :
Células A Células R1r
Células B Células rr
Células 0
Control de Calidad en las
Tarjetas de Gel… AB0, Rh
Antísueros
Preparación de eritrocitos para AB0 y Rh
Preparar la
suspensión de
eritrocitos al
5.0 %
Suspender 50µl
de células en 1ml
de diluyente.
Control de Calidad en las
Tarjetas de Gel… AB0, Rh
Antísueros
Dosificar 10 µl de la Suspensión al 5.0
% en los pocillos correspondientes
Control de Calidad en las
Tarjetas de Gel
Sistema ABO
Antísueros
Pocillo Células A1 y Células B Células AB Células 0
Anti-A A2 Negativo Positivo Negativo
Positivo
Pocillo
Anti-B Negativo Positivo Positivo Negativo
Pocillo
Anti-AB Positivo Positivo Positivo Negativo
Control de Calidad en las
Tarjetas de Gel
Sistema Rh
Antísueros
Pocillo Células R1r Células rr
Anti-D Positivo Negativo
Pocillo
Anti-D´ Positivo Negativo
Pocillo
Control Negativo Negativo
Control de Calidad en
las
Tarjetas de Gel
Sistema ABO
Células para grupo inverso
Enfrentar 50 µl células A
y B a 25 µl antisueros
Anti-A, Anti-B y AntiAB
Control de Calidad en las
Tarjetas de Gel
Anti-A Anti-B Anti-A,B
Células
Positivo Negativo Positivo
A1
Células B Negativo Positivo Positivo
Control de Calidad en las
Tarjetas de Gel
• Centrifugar 9 min a 1100 rpm
• Leer
• Lectura de tarjetas exclusiva para el
Control de Calidad
POSITIVO NEGATIVO
Control de Calidad en las
Tarjetas de Gel
Antíglobulina humana
Tarjetas de Coombs
Control de Calidad en las
Tarjetas de Gel
Lavar eritrocitos
sensibilizados y no
sensibilizados
Control de Calidad en las
Tarjetas de Gel
Preparar una suspensión al 0.8 % de
eritrocitos sensibilizados
Preparar una suspensión al 0.8 % de
eritrocitos no sensibilizados
10µl de eritrocitos
1ml de Diluyente
Control de Calidad en las
Tarjetas de Gel
Dosificar 50 µl de la suspensión
de eritrocitos
sensibilizados en un pocillo
Y 50 µl de la suspensión de
eritrocitos no sensibilizados en
otro pocillo
Control de Calidad en las
Tarjetas de Gel
Centrifugar 9 min a 1500 rpm
Leer
Lectura de tarjetas exclusiva para el
Control de Calidad
Eritrocitos Sensibilizados Eritrocitos no Sensibilizados
Control de Calidad en las
Tarjetas de Gel
Titulación
Es la prueba para medir la máxima
dilución un la cual un antisuero reacciona
con su correspondiente antígeno.
No aplica en Tarjetas de Gel
[email protected][email protected]