Universidad de Guadalajara
Centro Universitario de la Cinega
Departamento de Ciencias Medicas y
de la Vida
INMUNOENSAYO
RECOMBINANTE
Alumno:
Carlos Luis Garcia Gonzalez
Mariana Chavez
Ocotln, Jalisco a 24 de Febrero
del 2014
INMUNOENSAYO RECOMBINANTE
Tambin se les conoce como:
Ensayo Inmunoblot recombinante (RIBA)
Es una prueba en los cuales se detectan los anticuerpos
especficos para cada una de las protenas virales,
utilizados para resolver falsos positivos por prueba de
ELISA en pacientes asintomticos , donadores de sangre
o pacientes de bajo riesgo.
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INMUNOENSAYO RECOMBINANTE
La inmunotransferencia con antgenos recombinantes o
inmunoblot
recombinante
(RIBA)
es
un
enzimoinmunoanlisis cualitativo in vitro para la
deteccin de anticuerpos frente a protenas individuales
codificadas por el VHC.
Utiliza antgenos recombinantes VHC codificados y
pptidos sintticos VHC codificados que han sido
inmovilizados como bandas individuales en las tiras de
anlisis.
INMUNOENSAYO RECOMBINANTE
Igual que el ELISA, existen tres generaciones, la tercera
(RIBA-3.0) es la utilizada en la actualidad.
Tcnica
Anticuerpos
RIBA-III 1a Generacin
Anti-c 100/NS4, ANTI-5-1 (protenas de las regiones
NS3/NS4)
RIBA-III 2a Generacin
Anti-c 100/NS4, ANTI-5-1Anti-c 100/NS4,
ANTI-5-1
RIBA-III 3a Generacin
Anti-c 22/C, anti-c 100/NS3/NS4, NS5
INMUNOENSAYO RECOMBINANTE
Son aplicada en formas de bandas en una tira de
nitrocelulosa (SIA, tira inmunoabsorbente), en la cual la
muestra se diluye e incuba.
Si la muestra contiene anticuerpos especficos, stos se
fijarn a las correspondientes bandas de
recombinante y/o pptido sinttico de la tira.
antgeno
La tira se incuba en presencia de un conjugado de anti-
IgG humana de cabra, marcada con peroxidasa (SOD).
El conjugado se fija a la porcin de IgG humana del
complejo Ag-Ac. Finalmente se aade un
sistema
colorimtrico de deteccin enzimtica, y si el conjugado
se ha fijado
a la muestra, la reaccin enzimtica
originar un producto de reaccin de color azul-negro
insoluble en cada banda especfica de antgeno, pptido
o control VHC, de diferente intensidad.
INTERPRETACIN:
RIBA- 2: Es POSITIVA cuando al menos reacciona con dos
bandas especificas del VHC.
RIBA-2: INDETERMINADA cuando reacciona solo contra
un Ag.
NEGATIVA: Cuando no lo hace contra ninguno de los Ag.
Un resultado positivo se estrecha con la infectividad,
presencia de enfermedad heptica y la deteccin de
viremia.
UTILIDAD CLINICA
Diagnstico de infeccin por el virus de HCV.
Son pruebas confirmatorias que sirven para evaluar la
especificidad de un resultado positivo por ELISA.
BIBLIOGRAFIA CONSULTADA:
J. M. Herreria, A. Diaz Belmont (1996), Tratado de
Hepatologia , Espaa: Universidad Sevilla.
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2008/[Link]
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