Clamidias
Su ciclo de replicación ocurre obligadamente dentro de una célula eucariota.
Son bacterias de vida intracelular OBLIGADA que infectan epitelios de humanos y animales.
Características principales
→ Bacterias intracelulares obligadas inmóviles.
→ Ciclo de replicación BIFÁSICO porque alterna entre dos estadios (cuerpo
elemental y cuerpo reticulado).
→ Frecuentemente asociadas a los organismos Gram negativos por su
membrana externa, pero carecen de pared de peptidoglicano (solo trazas en
algunas especies). Tienen LPS.
→ No se ven con tinción GRAM.
→ Tamaño pequeño (0,2-1,5 μm).
→ Su genoma es reducido (alrededor de 106 pb) y muy conservado - carece de
algunas vías metabólicas. La energía la obtienen de célula hospedadora.
→ Algunas especies tienen plásmido ≃ 7500 pb (8 ORFs).
Ciclo de replicación
Tiene 2 formas; CE (infectivo, es una partícula bien condensada, se adhiere a cel
hospedadora, porque en su superficie tiene moléculas adhesinas y la cel tiene receptores
para estas adhesinas) y CR.
La bacteria induce que la célula la fagocite, el CE es infectivo pero inerte, infecta y resiste
fuera de la célula. Una vez dentro de la vacuola el CE se pone la cromatina laxa, se
degrada la pared y ocurre la síntesis de proteínas y la fisión binaria del cuerpo reticulado,
dentro de la vacuola. Dentro de la célula hay una vacuola en el cual no se le une el
lisosoma. Luego de que se replique el CR, por señalización maduran a CE, para poder
liberarse. El CE es liberado por lisis o destrucción de la vacuola e infectar a la célula vecina.
Persistencia
Algunas situaciones pueden comprometer al ciclo sin matar a la bacteria, presencia de
interferón, penicilina; no las mata pero afecta, falta de nutrientes. Las bacterias ante esos
estímulos entran en estado de persistencia los CR no se dividen, cuando desaparecen esos
estímulos vuelven a dividirse.
Antígenos principales
LPS → igual en todos los géneros, pueden llevar a que haya reacciones cruzadas
cuando lo queremos detectar.
MOM → porina. Son distintas en todos los géneros, clave para poder detectarlas.
OMC → proteínas estructurales que dan rigidez a la pared, también funcionan
como adhesinas.
Proteínas de choque térmico → producen reacciones autoinmunes en el
hospedador.
Factor de patogenicidad
LPS
Proteínas membrana externa: MOMP, OMC, B Pmps, control sobre vías celulares,
secreción tipo 3.
Las clamidias cuando se están produciendo dentro de la vacuola toman control de la célula
y no dejan que se una el lisosoma, no se puede degradar el contenido y la bacteria puede
seguir su curso. (control sobre vias cel).
Respuesta inmunológica
El organismo intenta eliminar la célula infectada, los CD8 lo eliminan, citoquinas que puede
inhibir partes del ciclo de replicación, también hay anticuerpos sobre los CE.
Si todo sale bien la infección se resuelve. Si por algún motivo se produce la persistencia.
Otra cosa; es el daño que produce el sistema inmune tratando de eliminar la infección sin
poder hacerlo, se produce inflamación crónica localizada donde se produjo la infección.
Chlamydia psittaci
Agente causante de la psitacosis
Causa una enfermedad en las aves, con manifestaciones gastrointestinales y respiratorias.
Muy contagiosa para los humanos. Se elimina por heces y secreciones respiratorias.
9 genotipos (A-F, WC, M56, E/B) Infección sistémica en psitácidos y otras aves
Brotes en condiciones de hacinamiento
En humanos: Zoonosis. Neumonía atípica
CE son eliminados en heces.
Contacto estrecho o inhalación (aerosoles)
Tratamiento con tetraciclinas
Notificación obligatoria
Para amplificación del microorganismo (cultivo en líneas celulares): nivel de bioseguridad III.
Diagnóstico
Diagnóstico directo
Aislamiento: cultivo en líneas celulares susceptibles (en laboratorios de vigilancia o centros
de referencia).
Detección de antígenos: ELISA → buscamos ag, alguna proteína, IFD → reactivo ac
marcado, dirigido al ag.
Detección de ácidos nucleicos: PCR convencional o tiempo real y otros.
Para genotipo: RFLP, secuenciación ompA, microarrays.
Diagnóstico indirecto
Detección de anticuerpos específicos: Microinmunofluorescencia (IFI), ELISA.
Muestras de elección
C. Psittaci
-Cultivo, detección de antígeno o ácidos nucleicos en hisopados de secreciones (aves y
humanos) y materia fecal o hisopado cloacal (aves).
-Detección de anticuerpos (humanos principalmente): suero (muestras pareadas y
seroconversión).
Consideraciones importantes de transporte y conservación
AISLAMIENTO: Muestras frescas en medio de transporte 2SP o SPG (sacarosa, suero,
fosfatos, glutamato, antibióticos y antifúngicos).
Procesamiento inmediato o conservación a 4 grados por menos de 24 horas.
Conservación a -80 grados por más tiempo.
AMPLIFICACION DE ACIDOS NUCLEICOS: Aplicable a numerosa variedad de muestras.
Si son hisopados, sólo se admiten hisopos de Dacrón o similares (no algodón ni mango de
madera) o tejidos. En medio de transporte o solución fisiológica estéril. Conservación
refrigerada hasta extracción de ADN.
Suero: sin conservantes, se separa y refrigera si no se procesa de
inmediato.
DETECCIÓN DE ANTÍGENOS
INMUNOFLUORESCENCIA DIRECTA:
Ventajas: permite observar la calidad de la muestra. Buena sensibilidad
Desventajas: difícil observación - anticuerpos marcados
INMUNOENSAYOS (ELISA y otros)
Ventajas: realización sencilla, menos estricta con la conservación de la muestra
Desventajas: Distintos modelos, menos sensibilidad que PCR
Métodos moleculares
PCR en tiempo real
Primers y sondas específicos de familia o especie
Gran sensibilidad y apta para casi todo tipo de muestras previa extracción de ADN
PCR convencional
Primers específicos de familia o especie. Revelado en geles
Gran sensibilidad y apta para casi todo tipo de muestras previa extracción de ADN RFLP -
secuenciación posterior
Microarrays
Post PCR (algunos diseños con la muestra sin amplificar) permiten identificar especies y
genotipos utilizando un chip con sondas.
Indirecta
MICROINMUNOFLUORESCENCIA INDIRECTA (MIF)
Impronta: cuerpos elementales de la especie de Chlamydia a ensayar. Se informa en título
Es útil en infecciones sistémicas. Se ensaya el suero en distintas especies para evitar
positivos por entrecruzamiento.
INMUNOENSAYOS (ELISA y otros)
Diseños variados: anticuerpos anti LPS, anti CE total, anti MOMP (mayor especificidad).
FIJACIÓN DE COMPLEMENTO
Laboriosa y dependiente del sistema y preparación de antígeno. Reactividad cruzada.
