PIGMENTOS FOTOSINTETICOS
I. INTRODUCCIN
Entre todos los caracteres ms externos de los vegetales, el ms notable y caracterstico es probablemente el color. El color no es nicamente un carcter llamativo de la vegetacin, sino que, adems, algunos de los pigmentos que lo condicionan estn estrechamente ligados a las actividades fisiolgicas del propio vegetal. Por consiguiente, el estudio de cmo las plantas viven y se desarrollan requiere el previo conocimiento de los pigmentos vegetales. Los compuestos cloroflicos estn ligados qumicamente con las estructuras internas del cloroplasto (membrana tilacoides) y se hallan retenidos en estado coloidal Los cloroplastos poseen una mezcla de pigmentos con diferentes colores: clorofila-a (verde intenso), clorofila-b (verde), carotenos (amarillo claro) y xantofilas (amarillo anaranjado) en diferentes proporciones. Los pigmentos cloroflicos son insolubles en el solvente universal llamado agua. Pero s son solubles (afinidad qumica) en solventes orgnicos como por ejemplo alcohol etlico y acetona. A los solventes que extraen simultneamente todos los pigmentos de la hoja se los suele llamar extractantes. Existen otros solventes que presentan afinidad por algunos pigmentos y se los llama separadores, como por ejemplo el tetra cloruro de carbono y el ter de petrleo. II. FUNDAMENTO
Todas estas sustancias presentan un grado diferente de solubilidad en disolventes apolares, lo que permite su separacin cuando una solucin de las mismas asciende por capilaridad a travs de una tira de papel poroso (papel de cromatografa o de filtro) dispuesta verticalmente sobre una pelcula de un disolvente orgnico (etanol), ya que las ms solubles se desplazarn a mayor velocidad, pues acompaarn fcilmente al disolvente a medida que ste asciende. Las menos solubles avanzarn menos en la tira de papel de filtro. Aparecern, por tanto, varias bandas de diferentes colores (hasta siete o ms,
dependiendo del material utilizado) que estarn ms o menos alejados de la disolucin alcohlica segn la mayor o menor solubilidad de los pigmentos. Estas bandas poseern diferente grosor, dependiendo de la abundancia del pigmento en la disolucin. III. MTODOS DE SEPARACIN DE PIGMENTOS
A. Separacin de pigmentos vegetales por separacin simple. a) Elementos: Mortero Embudo cribado Papel de filtro Tubos de ensayo Alcohol - Tetra cloruro de carbono Hojas de espinaca o Acelga b) Objetivo: Extraer los pigmentos fotosintticos y separarlos mediante una tcnica sencilla de fases Reconocer las fases e indicar que pigmentos se encuentran en las fases e indicar que pigmentos se encuentras en las fases reconocidas c) Tcnica: Lavar las hojas de espinacas o acelga, retirar los nervios y ponerlas en un mortero, junto con el solvente extractante (acetona). Triturar la mezcla hasta que las hojas se decoloren y el disolvente adquiera un color verde intenso Filtrar con un embudo, papel de filtro Pasar el filtrado en tubo de ensayo
Al tubo, se le agregar tetra cloruro de carbono y luego se lo agitar por unos segundos. Se lo dejar reposar en una gradilla por 10 minutos Los pigmentos se irn separando segn su adsorcin o afinidad con los solventes.
Al observar el tubo de ensayo donde se encuentran los dos solventes, vemos dos zonas, que corresponden a los distintos pigmentos fotosintticos presentes en las hojas de espinaca o acelga. Segn su grado de solubilidad con el alcohol y el tetra cloruro de carbono se reconocen estas zonas heterogneas y no miscibles en este orden: clorofila a + b + Tetra cloruro de C. xantofilas y carotinoides + Alcohol
B. Separacin de pigmentos vegetales por cromatografa sobre papel.
a) Elementos: Mortero Embudo cribado Papel de filtro Tubos de ensayo Acetona ter de Petrleo Hojas de espinaca o Acelga Cloruro de Calcio Capilar o Pipeta Pasteur Vaso de precipitado b) Objetivo: Extraer los pigmentos fotosintticos y separarlos mediante una tcnica compleja de cromatografa en papel Reconocer los tipos de pigmentos con la asesora del profesor e indicar sus propiedades c) Tcnica: Lavar las hojas de espinacas o acelga, retirar los nervios y ponerlas en un mortero, junto con el solvente extractante (acetona). Triturar la mezcla hasta que las hojas se decoloren y el disolvente adquiera un color verde intenso Filtrar con un embudo, papel de filtro Pasar el filtrado en un tubo de ensayo, colocar 3 a 5 perlas de Cloruro de calcio. Dejar reposar de 5 a 10 min. Colocar la sustancia sobre la placa petry y recortar un rectngulo de papel filtro 15 centmetros de ancho por 10 centmetros de alto doblado en V (para que se mantenga en pie)
Los pigmentos se irn separando segn su adsorcin o afinidad con el solvente
Al observar el papel donde hemos hecho la cromatografa, vemos cuatro bandas o zonas, que corresponden a los distintos pigmentos fotosintticos presentes en las hojas de espinaca. Segn su grado de solubilidad con el ter de petrleo se reconocen estas bandas y en este orden: clorofila b clorofila a xantofila carotenos
