UNIVERSIDAD PRIVADA FRANZ TAMAYO
FACULTAD CIENCIAS DE LA SALUD
CARRERA BIOQUÍMICA Y FARMACIA
INFORME DE REACCIÓN EN CADENA DE LA
POLIMERAZA
SEMESTRE: 6to SEMESTRE
MATERIA: BIOLOGIA MOOLECULAR Y GENETICA
ESTUDIANTE:
HUANCA TOLA SIDNNY HADE
LOBO CHOQUE NAYELI
MAMANI FLORES YADIRA
PARALELO: 3
GRUPO: 5
AÑO: 2025
El Alto – Bolivia
1. Introducción
Las infecciones respiratorias representan una de las principales causas de morbilidad
y mortalidad a nivel mundial, afectando a poblaciones de todas las edades. La
necesidad de identificar de manera rápida y precisa los agentes patógenos
responsables ha impulsado el desarrollo de técnicas de diagnóstico molecular como la
Reacción en Cadena de la Polimerasa en Tiempo Real (RT-PCR). Dentro de este
contexto, el Panel Respiratorio II permite la detección simultánea de múltiples virus y
bacterias causantes de enfermedades respiratorias, mediante el análisis de ácidos
nucleicos presentes en muestras clínicas. La aplicación de este panel no solo optimiza
el tiempo de diagnóstico, sino que también aumenta la sensibilidad y especificidad del
análisis, permitiendo un abordaje terapéutico más oportuno y efectivo.
2. Objetivos
Objetivo general
Analizar la metodología y aplicación del Panel Respiratorio II basado en técnicas de
biología molecular y genética, específicamente en la identificación de patógenos
respiratorios mediante RT-PCR en tiempo real.
Objetivos específicos
Describir los principios de detección molecular utilizados en el Panel
Respiratorio II.
Identificar los materiales y equipos necesarios para la implementación del
panel.
Explicar el procedimiento de análisis desde la extracción de ARN/ADN hasta la
obtención de resultados.
Evaluar la importancia del diagnóstico y rápido preciso en infecciones
respiratorias.
3. Marco teórico
3.1. Paneles Respiratorios en Biología Molecular
Los Respiratory Panels son paneles de diagnóstico que permiten la identificación de
varios patógenos respiratorios en una sola prueba. Estos kits utilizan técnicas
avanzadas como la PCR en tiempo real (RT-PCR) para detectar ácidos nucleicos
(ARN o ADN) de virus y bacterias presentes en las muestras respiratorias. La PCR en
tiempo real es una técnica que amplifica secuencias específicas de ácido nucleico y
mide la cantidad de material genético presente en una muestra en tiempo real, lo que
permite detectar infecciones respiratorias de manera rápida y precisa.
3.2 Tipos de patógenos respiratorios
La infección respiratoria aguda es un problema de salud global causado por una
variedad de patógenos virales y bacterianos. Los virus más comunes incluyen los de la
gripe (Influenza A y B) , virus sincitial respiratorio (RSV) , parainfluenza y los
coronavirus humanos. Las infecciones bacterianas como las causadas por
Mycoplasma pneumoniae , Chlamydophila pneumoniae y Legionella pneumophila
también son responsables de enfermedades respiratorias graves.
-Virus de la influenza (A y B): Son los principales causantes de la gripe estacional. La
influenza A se divide en subtipos como H1N1, H3N2, entre otros, que pueden causar
epidemias y pandemias.
-Virus sincitial respiratorio (RSV): Es una causa frecuente de bronquiolitis y neumonía
en niños menores de 2 años, así como en adultos mayores y personas
inmunocomprometidas.
-Coronavirus humanos (HCoV): Los cuatro tipos más comunes son HCoV-229E ,
HCoV-OC43 , HCoV-NL63 , y HCoV-HKU1 , los cuales causan desde resfriados
comunes hasta enfermedades respiratorias graves.
-Parainfluenza: Se asocia con infecciones respiratorias en niños y adultos, causando
enfermedades que van desde resfriados hasta bronquiolitis y neumonía.
-Patógenos bacterianos: Mycoplasma pneumoniae es una de las principales bacterias
causantes de neumonía atípica. Chlamydophila pneumoniae es otro agente bacteriano
que puede causar neumonía y se asocia con otras condiciones respiratorias.
Legionella pneumophila causa la enfermedad del legionario, una forma grave de
neumonía.
3.2. PCR en Tiempo Real: Un Enfoque Diagnóstico
La PCR en tiempo real (RT-PCR) es una técnica molecular que permite detectar y
cuantificar ácidos nucleicos específicos en tiempo real, a medida que se amplifican.
Utilice sondas marcadas con fluorescencia para monitorear la amplificación de la
secuencia diana. En el contexto del VIASURE Respiratory Panel II, esta técnica se
emplea para detectar los ARN y ADN de los patógenos respiratorios de manera
simultánea y eficiente.
El procedimiento se lleva a cabo en un termociclador de PCR en tiempo real, que
permite amplificar y detectar los productos de PCR en un solo ciclo. Esto se logra
mediante la emisión de señales fluorescentes que indican la presencia y cantidad de
material genético de los patógenos en la muestra.
4. Materiales
Reactivos y kits
Kit de detección por PCR en tiempo real VIASURE Respiratory Panel II
(contiene cebadores, sondas específicas, polimerasa, retrotranscriptasa y
control interno).
Kit de extracción de ARN/ADN.
Equipos de laboratorio
Equipos de laboratorio
Termociclador de PCR en tiempo real compatible (por ejemplo, 7500 Fast Real-
Time PCR System de Applied Biosystems, CFX96™ Real-Time PCR Inspection
System de Bio-Rad, entre otros).
Vortex
Microcentrífuga para tubos de 1,5 mL y para placas de 96 pocillos.
Congeladores de laboratorio (-30°C, -10°C y/o -70°C).
Material de consumo
Tubos de PCR individuales, tiras de tubos o placas de 96 pocillos compatibles.
Micropipetas de diferentes volúmenes (0,5-20 μL, 20-200 μL).
Puntas con filtro.
Guantes desechables sin talco.
Sistemas de recolección y transporte de muestras respiratorias.
Otros
Control positivo y negativo para validación de ensayos.
Sobres de aluminio con material desecante para conservación de reactivos.
Software de análisis de datos de PCR en tiempo real.
5Procedimiento
6Conclusion:
El Panel Respiratorio II, basado en la Reacción en Cadena de la Polimerasa en
Tiempo Real (RT-PCR), emerge como una herramienta diagnóstica esencial en el
campo de las infecciones respiratorias. Su capacidad para detectar simultáneamente
múltiples patógenos, tanto virales como bacterianos, optimiza significativamente el
tiempo de diagnóstico y mejora la especificidad del análisis. Esta metodología
avanzada no solo facilita una identificación rápida y precisa de los agentes causantes
de enfermedades respiratorias, sino que también permite una intervención terapéutica
más oportuna y efectiva.
La RT-PCR, como técnica central del Panel Respiratorio II, amplifica secuencias
específicas de ácido nucleico presentes en las muestras respiratorias, utilizando
sondas fluorescentes para monitorear la amplificación en tiempo real. Este proceso se
lleva a cabo en termocicladores especializados y requiere reactivos, kits de extracción
de ARN/ADN, y equipos de laboratorio específicos, asegurando la detección eficiente y
simultánea de diversos patógenos como los virus de la influenza A y B, el virus sincitial
respiratorio (RSV), coronavirus humanos, parainfluenza, y bacterias como
Mycoplasma pneumoniae, Chlamydophila pneumoniae y Legionella pneumophila.
En conclusion, el Panel Respiratorio II representa un avance significativo en el
diagnóstico de infecciones respiratorias, ofreciendo una solución integral para la
detección rápida y precisa de múltiples patógenos. Su implementación en laboratorios
clínicos y hospitales contribuye a mejorar el manejo de las enfermedades respiratorias,
reducir la morbilidad y mortalidad asociadas, y optimizar los recursos sanitarios.
