BUENAS PRÁCTICAS DE

LABORATORIO

UNIDAD 1. CALIDAD,
NORMATIVA Y
REGLAMENTACIÓN VIGENTE
PARA BUENAS PRÁCTICAS
DE LABORATORIO Y
LABORATORIOS DE ENSAYO
ANALÍTICOS

Objetivo

Conocer el marco normativo y la

reglamentación vigente como base de
las buenas prácticas de laboratorio y
para laboratorios de ensayo según
norma ISO 17025:2017

Introducción al Capítulo

La norma ISO 17025 al igual que las BPL,

forman parte integral de los sistemas de
gestión en las organizaciones, ambas se
deben implementar y mantener; la
primera, permite elaborar un Manual de
Calidad y la segunda, generalmente, un
Sistemas estándar de Operación (SOP),
siendo ésta la más destacada similitud.

En el presente capítulo, abordaremos el

origen de las Buenas Prácticas de
Laboratorio, sus objetivos y principios,
además de complementarla con los
requisitos indicados en la norma ISO
17025 y su relación, todo lo

BV_C2_Internal
anteriormente mencionado, basado en información vigente en relación a los
organismos OCDE e ISO respectivamente.

1.1 Calidad y Normas de Calidad en el Laboratorio

Calidad, según norma ISO 9001:2015 “es el grado en que un conjunto de

características inherentes cumple con los requisitos” (en este sentido, es el cliente
quien tiene la necesidad o tiene una expectativa implícita u obligatoria, de algún
organismo regulador).

De este marco regulatorio, surgen organizaciones que se encargan de coordinar y

armonizar políticas y trabajar para responder a problemas internacionales
relacionados con el comercio, la salud y la seguridad ambiental, la educación, la
investigación, etc. En este contexto, es que se enmarca la OCDE (Organización para la
Cooperación y el Desarrollo Económicos), y la ISO (International Organization for
Standarization).

LA OCDE define las Buenas Prácticas de Laboratorio como “un conjunto de reglas, de
procedimientos operacionales y prácticas establecidas y promulgadas por
determinados organismos que se consideran de obligado cumplimiento para asegurar
la calidad e integridad de los datos producidos en determinados tipos de
investigaciones o estudios”.

La organización ISO, tiene una norma internacional ISO 17025:2017 en la que se

establecen los requisitos que deben cumplir los laboratorios de ensayo y calibración.
Su principal objetivo es la acreditación de la competencia de las entidades de Ensayo
y calibración, por las entidades regionales correspondientes.
Esta norma es aplicada por los laboratorios de ensayo y calibración con el objetivo de
demostrar que son técnicamente competentes y de que son capaces de producir
resultados técnicamente válidos.

Las BPL están más diseñadas para registros con fines reglamentarios, por esta
razón sus características dependen más de la regulación de cada país.
BV_C2_Internal
La implementación de la norma ISO17025 es voluntaria, la norma BPL es obligatoria.

BV_C2_Internal
 EMISOR OCD ISO 17025:2017
E
Campo Laboratorios que realizan Laboratorios de
de pruebas de seguridad no ensayo/calibración
aplicació clínicas practicadas en los de cualquier naturaleza
n elementos contenidos en los
productos farmacéuticos, los
pesticidas, cosméticos,
medicamentos veterinarios, aditivos
para la alimentación humana y
animal, así como productos
industriales.
Ente valuador Agencias nacionales de regulación Organismos
nacionales de
acreditación
Metodología Inspección Auditoría (evaluación
de documental in
evaluación situ)
Alcance de La instalación de pruebas Métodos de
la ensayos/calibraciones
evaluació específicos.
n
Obligatorieda Según la legislación nacional Voluntaria en la mayoría de los
d casos
Denominació Principio Requisitos
n de los
requerimient
os
Objetivo El reconocimiento de estudios de Competencia técnica
toxicidad y estabilidad de drogas
Funcione El Patrocinador/Dirección de la Alta Dirección/Responsable
s instalación de pruebas/Dirección de técnico/ Responsable de la
relevant la planta de pruebas/ Dirección del calidad/ Personal del
es estudio/ Responsable principal de laboratorio.
las pruebas/ Personal encargado
del aseguramiento de la calidad.
Documentos El plan de estudio El Manual de Calidad
de base
Resultados Certificado de registro Acreditación
de la
evaluación

1.2 Origen y Definición de Buenas Prácticas de Laboratorio BPL

Las Buenas Prácticas de Laboratorio, se originaron para elaborar un sistema de

garantía de calidad, para laboratorios y otras organizaciones que garanticen la
coherencia, la integridad y la reproducibilidad en laboratorios de ensayos no clínicos.

¿Qué son las Buenas Prácticas de Laboratorio BPL-OCDE?

BV_C2_Internal
Sistema de Calidad que busca asegurar: Proceso organizacional y condiciones en que
se planifican estudios orientados a análisis no clínicos de: Ensayos físico-químicos,
Toxicidad, Mutagenicidad y Ecotoxicidad.

Las BPL tienen entre sus objetivos, registrar productos a nivel nacional e
internacional, que aspiran a ser certificados para salir al mercado.

BV_C2_Internal
 DATO ÚTIL Laboratorios de Ensayo y Calibración
(Requisitos Relativos a
¿A qué productos aplica?

• Farmacéuticos
• Plaguicidas
• Cosméticos
• Productos veterinarios
• Aditivos
• Organismos genéticamente
modificados

1.3 Objetivos y Principios de

BPL

Las Buenas Prácticas de Laboratorio

tienen objetivos implícitamente y son
independientes de las técnicas usadas,
estos pueden ser:

A continuación, se señalan algunos

principios:

Estos principios y la práctica son

importantes, tanto para las operaciones
de muestreo como en las del
procedimiento analítico, porque es una
manera de asegurar que la muestra está
en condiciones para el análisis.

1.4 Requisitos Normativos de

Norma ISO 17025:2017 para
BV_C2_Internal
Operación de un Laboratorio de capítulo, nos enfocaremos
Ensayo) principalmente en el requisito N°7 de la
norma.
La norma ISO17025:2017 ha sido
publicada por la ISO en noviembre
de 2017. En Chile, ha sido publicada
y aprobada por el Consejo del
Instituto Nacional de Normalización
el 28 de diciembre de 2017.

Una organización orientada a la

calidad promueve una cultura que
tiene como resultado
comportamientos, actitudes,
actividades y procesos para lograr el
cumplimiento de los requerimientos
de los clientes y las partes
interesadas, tal como es para un
laboratorio los resultados de un
ensayo o una calibración.

Debemos comprender que un

laboratorio debe desarrollar
actividades que aseguren la calidad
de sus resultados, por lo que debe
contener un sistema de validación
de los métodos empleados, asegurar
la trazabilidad metrológica de sus
equipos de medición y ensayos,
establecer e implementar sistemas
de control de calidad de ensayos y
mediciones.

Para implementar la norma, los

laboratorios crean un sistema de
gestión de de la calidad. La adopción
de un sistema de gestión de la
calidad corresponde a una decisión
que permite obtener resultados
positivos en el desempeño del
laboratorio. Cabe destacar que esto
corresponde a un proceso de
carácter voluntario, aunque en
algunos casos deriva de una
obligación, ya sea por
requerimientos de clientes o bien
legales que establecen como
obligatorio la implantación de
sistemas de calidad basados en
normas ISO.

Actualmente, la norma ISO17025 se

encuentra dividida en ocho
capítulos, dos anexos y una sección
de bibliografía. En el presente BV_C2_Internal
 PUNT REQUISITO
O NORMATIVO
0 Introducción
1 Objeto y Campo de Aplicación
2 Referencias Normativas
3 Términos y Definiciones
4 Requisitos Generales
5 Requisitos Relativos a la Estructura
6 Requisitos Relativos a los Recursos
7 Requisitos de Procesos
8 Requisitos del Sistema de Gestión
Anexo A Requisitos del Sistema de Gestión
Anexo B Opciones de Sistema de Gestión
Bibliografía

A continuación, revisaremos un ejemplo de procesos, considerando la operación

estratégica de un laboratorio:

1.5 Selección,Preparación, Tratamiento deMuestras y

Preservación de Contramuestras de una Sustancia, Material
o Producto Según Norma ISO 17025:2017

Muestreo y Selección de muestras: (7.3 requisito norma ISO 17025:2017)

BV_C2_Internal
El laboratorio debe tener un plan y un método de muestreo cuando realiza el
muestreo de sustancias, materiales o productos para el subsiguiente ensayo. El
método de muestreo debe considerar los factores a controlar, para asegurar la validez
de los resultados del subsiguiente ensayo. Siempre que sea razonable, los planes de
muestreo deben basarse en métodos estadísticos apropiados.

El método de muestreo debe describir:

MUESTRAS SÓLIDAS MUESTRAS LÍQUIDAS

PRECAUCIONES EN SU MANEJO PRECAUCIONES EN SU MANEJO
• Verificar el correcto • Verificar la correcta identificación,
etiquetado de identificación. que esté clara y completa.
• Verificar el buen estado del • Se debe usar guantes de látex
envase para asegurar que no esté (del tipo quirúrgicos)
contaminada. • Se debe usar lentes de cristales claros
• Previo al pesaje de ellas se • Asegurar su homogenización al
deben homogenizar. momento de
• Una vez pesada la muestra se la toma de alícuotas o porciones de
tiene que almacenar cuidando que análisis.
el sobre quede bien cerrado.
• Verificar correcta preparación: mover
sobre no debe tener sonido.

Según requisito 7.4.1 de norma ISO 17025:2017. El laboratorio debe contar con un
procedimiento para el transporte, recepción, manipulación, protección,
almacenamiento, conservación y disposición o devolución de los ítems/muestras de
ensayo.

Se deben tomar precauciones para evitar el deterioro, la contaminación, la pérdida o

el daño del ítem durante la manipulación, el transporte, el almacenamiento/espera, y
la preparación para el ensayo. Se deben seguir las instrucciones de manipulación
suministradas con el ítem.
BV_C2_Internal
 La fuerza impulsora para que el líquido
atraviese el filtro es la gravedad. Es el
método más sencillo y tradicional.

Según requisito [Link] norma ISO

17025:2017. El laboratorio debe contar
con un sistema para identificar sin
ambigüedades los ítems/muestras de
ensayo. La identificación se debe
conservar mientras el ítem esté bajo la
responsabilidad del laboratorio. El
sistema debe asegurar que los ítems no
se confundan físicamente o cuando se
haga referencia a ellos en registros o en
otros documentos. El sistema debe, si es
apropiado, permitir la subdivisión de un
ítem o grupos de ítems y la transferencia
de ítems.

1.6 Principales Técnicas de

Preparación de Muestras
(filtración, extracción,
precipitación y lixiviación)

1.6.1 Filtración

La separación de las dos fases, sólido y

líquido, de una mezcla heterogénea,
requiere la utilización de un filtro, para
filtrar impurezas insolubles y permitir el
paso a la solución a través de sus poros.
También se utiliza para la exhibición de
muestras, las cuales se ponen sobre el
papel.

Existen dos tipos de filtración:

BV_C2_Internal
Permite separar un sólido de un
líquido cuando lo que se quiere
recuperar es el líquido
principalmente.

Ofrece la máxima superficie de

filtración de manera que ésta es más
rápida.

La fuerza impulsora para que el

líquido atraviese el filtro es la que
ejerce el vacío, por medio de una
bomba de vacío.

Es un método rápido que permite la

filtración de aquellas suspensiones
en las que la fuerza de gravedad no
es suficiente para el proceso.

Ofrece una menor superficie de

filtración para recoger mejor el
sólido. Al aplicar la succión con vacío
permite acelerar la velocidad de
filtración y disminuir los tiempos de
filtración.

Para la filtración al vacío se utiliza

el papel filtro extendido y del mismo
diámetro que el del embudo de
porcelana a usar.

Primero se pone el papel filtro con la

porosidad adecuada en el embudo
de porcelana, se humedece con agua
y posteriormente se aplica el vacío
mediante la bomba de vacío o la
línea de

BV_C2_Internal
vacío del Laboratorio. Ejemplo: Filtros de Microfibra de vidrio
tienen

Una vez obtenido el precipitado lo

más importante es llegar a masa
constante cuyo objetivo es: eliminar
excesos de disolvente y eliminar
sustancias volátiles usadas en el lavado.

En algunos ensayos analíticos, el sólido

es requerido y transformado a un
compuesto estable, en esos casos, se
someten a un proceso de calcinación del
precipitado hasta llegar a temperatura
ambiente a masa constante.

Son circulares, generalmente de papel u

otro material poroso como pasta de
amiento, algodón, pasta de celulosa y
fibras de vidrio natural o sinterizado. Se
clasifican por el tamaño de sus poros,
mientras menor el tamaño de sus poros,
más poder de retención tienen. Su
porosidad es variable, pero debe ser lo
más homogénea posible, los papeles
filtro tienen una numeración específica
de la marca comercial del papel filtro.

Siempre su numeración aumenta, al

disminuir el tamaño de los cristales del
sólido que se va a separar.
BV_C2_Internal
desde 0,7 um hasta 2,7 um.

1.6.2 Extracción:

La extracción es la técnica utilizada

para separar un producto orgánico
de una mezcla de reacción o para
aislarlo de sus fuentes naturales.
Puede definirse como la separación
de un componente de una mezcla
por medio de un disolvente. En
esta técnica se aprovechan las
diferentes solubilidades de los
componentes de la mezcla.

En la práctica se utiliza ampliamente

para separar los compuestos
orgánicos de las soluciones acuosas
o suspensiones en las que se
encuentran. El procedimiento
consiste en agitarlos con un
disolvente orgánico inmiscible con
agua y dejar que ambas capas se
separen. Los diferentes solutos
presentes se distribuyen entre las
fases acuosa y orgánica, según sus
solubilidades relativas.

Así, las sales inorgánicas,

prácticamente insolubles en los
disolventes orgánicos más comunes,
permanecerán en la fase acuosa,
mientras que los compuestos
orgánicos que no forman puentes de
hidrógeno, insolubles en agua, se
encontrarán en la fase orgánica.

Los métodos de extracción pueden

ser de dos tipos:

BV_C2_Internal
También llamada extracción líquida –
líquida, consiste en la transferencia de
una sustancia de una fase a otra, que
tiene lugar entre dos líquidos no
miscibles. Las dos fases líquidas de
una extracción son la fase acuosa y la
fase orgánica.

En este caso, el componente se

disuelve en el disolvente A
(generalmente agua) y para extraerlo se
utiliza un disolvente B (un disolvente
orgánico como el éter etílico, el benceno,
etc.) que son inmiscibles entre sí. Los
disolventes A y B se agitan en un
embudo de separación y se dejan 1.6.3 Precipitación:
reposar hasta que se separan las dos
fases o capas, permitiendo que el
En química, para precipitar se necesita
compuesto presente se distribuya en las
formar un compuesto insoluble, por
capas de acuerdo con sus solubilidades
medio de una reacción de dos sales o
relativas.
cambiando la temperatura para afectar
la solubilidad del compuesto.

La precipitación puede indicar que se ha

producido una reacción química, pero
También llamada extracción sólido- también se puede dar, si la
líquido, consiste en la separación de uno concentración de soluto es superior a su
o más componentes de una mezcla solubilidad. La precipitación es precedida
sólida por medio de un solvente líquido. por un evento llamado nucleación, que
Tiene lugar en dos etapas; hay un es cuando las pequeñas partículas
contacto del solvente con el sólido que insolubles se agregan entre sí o bien
transfiere el componente soluble (soluto) forman una interfaz con una superficie,
al solvente. Este proceso puede tal como la pared de un contenedor o un
realizarse a temperatura ambiente o en cristal de siembra.
caliente, en este caso para evitar la
El sólido que se forma a través de una
pérdida de disolventes, la ebullición se
suele realizar con reflujo. Algunos reacción
ejemplos: de precipitación se llama el precipitado.

Las reacciones de precipitación cumplen

funciones importantes. Se utilizan para la
purificación, la eliminación o
recuperación de sales, para la
fabricación de pigmentos, y para
identificar las sustancias en el análisis
cualitativo.

BV_C2_Internal
 Los precipitados se pueden utilizar para
identificar el catión o anión en una sal,
como parte de análisis cualitativo. Los
metales de transición, en particular, son
conocidos para formar diferentes colores
de precipitados en función de su
identidad elemental y estado de
oxidación. Las reacciones de
precipitación se utilizan para eliminar las
sales a partir de agua, para aislar los
productos, y para preparar pigmentos.
En condiciones controladas, una reacción
de precipitación produce cristales puros
de precipitado. En la metalurgia, la
precipitación se utiliza para fortalecer
aleaciones.

La formación de un sólido a partir de una

solución se llama precipitación. Un
producto químico que causa un sólido
para formar en una solución líquida se
llama un Precipitante.

El sólido se llama el Precipitado, Si el

tamaño de partícula del compuesto
insoluble es muy pequeño o no hay
suficiente gravedad para dibujar el sólido
a la parte inferior del recipiente, el
precipitado puede ser distribuido
uniformemente a través del líquido,
formando una suspensión. Consejos para el éxito: La predicción de
un
La Sedimentación se refiere a cualquier precipitado
procedimiento que separa el precipitado
a partir de la porción líquida de la De acuerdo a Zumdahl, (2005), la clave
solución, que se llama el Sobrenadante. para predecir un precipitado es aprender
las reglas de solubilidad. Prestar especial
Ejemplo: atención a compuestos enumerados
como “poco soluble” y recordar que la
Mezcla de nitrato de plata y cloruro de temperatura afecta a la solubilidad.
sodio en agua hará que el cloruro de
plata para precipitar fuera de la solución Por ejemplo, una solución de cloruro de
como un sólido. En este ejemplo, el calcio se considera típicamente soluble
precipitado es cloruro de plata. en agua, aún si el agua está
suficientemente fría, la sal no se
Al escribir una reacción química, la disuelve fácilmente. Compuestos de
presencia de un precipitado puede ser metales de transición pueden formar un
indicado por siguiente la fórmula química precipitado en condiciones de frío, sin
con una flecha hacia abajo: embargo, disolver cuando es más cálido.
Además, considerar la presencia de otros
iones en una solución.

Esto puede afectar a la solubilidad de

BV_C2_Internal
manera inesperada, causando a veces
que se forme un precipitado cuando no se lo espera.

BV_C2_Internal
 Algunas variables que se consideran en
la
lixiviación:

Ejemplo:

1.6.4 Lixiviación:

La lixiviación, o extracción sólido-líquido,

es un proceso que consiste en la
separación de una o varias sustancias
(solutos), mediante el uso de disolventes
líquidos, contenidas en una matriz sólida
(previamente pulverizada, conocida
además como material de extracción).

De acuerdo a JoVE Science Education

Database, (2020) y la Universidad de
Granada, si la sustancia de interés es
aquella que se disuelve en el solvente, el
proceso se llama extracción; si lo que se
pretende disolver son las impurezas y la
sustancia de interés es el sólido, el
proceso se denomina lavado.

Para que la lixiviación sea efectiva, el

soluto debe ser más afín a la fase líquida
que a la fase sólida en la que se
encontraba en su origen. Al ser un
equilibrio entre fases, la lixiviación, al
igual que la extracción líquido-líquido,
pueden ser cuantitativas (>99.9%), la
fase solida siempre contendrá una
porción del soluto.

Para considerar y planificar el proceso, se

puede
decir que tiene al menos cuatro etapas:

BV_C2_Internal
BV_C2_Internal
1.7 Requisitos para los Informes de Ensayo Según ISO 17025:2017

Informes de Resultados (7.8.1 al 7.8.3 requisitos generales y específicos para

laboratorios de ensayo, según norma ISO 17025:2017)

• Los resultados se deben autorizar y revisar antes de su liberación

• Los resultados se deben suministrar de manera exacta, clara, inequívoca y
objetiva, usualmente en un informe y debe incluir toda la información acordada
con el cliente y la necesaria para la interpretación de los resultados y toda la
información exigida en el método utilizado. Todos los informes emitidos se deben
conservar como registros técnicos.

Cada informe debe incluir, al menos, la siguiente información, a menos que el

laboratorio tenga razones válidas para no hacerlo, minimizando así cualquier
posibilidad de interpretaciones equivocadas o de uso incorrecto:

BV_C2_Internal
BV_C2_Internal
 Deben incluir lo siguiente, cuando sea
.
necesario para la interpretación de los
resultados del ensayo:

En el caso, que el laboratorio sea el responsable

de realizar el muestreo, deberá cumplir con lo
siguiente:

BV_C2_Internal