Tema 2, 3, 4

Membrana plasmática.

La membrana plasmática es una estructura laminar delgada y flexible. Envoltura continua que rodea a la
célula, formando una estructura asimétrica entre los medios intracelular y extracelular. Barrera
semipermeable que permite intercambio selectivo de sustancias con su entorno.

En todas las células existe una fina envoltura laminar que recubre su contenido y define sus límites. Los
espacios extra- e intracelulares pueden tener una composición y actividad diferentes. La membrana
actúa como medio de comunicación y limita con el exterior, alberga los orgánulos y el núcleo y actúa
como medio de transporte.

1. ESTRUCTURA DE LA MEMBRANA. TÉCNICA CRIOFRACTURA - RÉPLICA.

La criofractura de una membrana celular separa la bicapa en dos hojas. Cada hoja posee una superficie y
una cara. La superficie de cada hoja se enfrenta a la superficie extracelular (SE) o la intracelular o
protoplasmática (SP).

Las caras extracelular y protoplasmática (CE y CP) se producen de manera artificial al separar la bicapa
de la membrana a lo largo de su eje hidrófobo. Tras la separación de la membrana, las proteínas de
membrana siguen estando asociadas a la membrana protoplasmática y se ven en forma de partículas en
la réplica de la CP. La región ocupada anteriormente por dichas proteínas aparece como una fosa
complementaria en la réplica de la CE.

Resultado: dos hemimembranas.

- Una externa o exoplasmática (E) orientada hacia el medio extracelular.

- Una interna o protoplasmática (P), en contacto con el citosol.

Esto conlleva una posible observación mediante microscopía electrónica.

2. ORGANIZACIÓN GENERAL: CONCEPTO DE ULTRAESTRUCTURA.

Concepto de “unidad de membrana” de Robertson. Tras tinción con

osmio se observa como una estructura trilaminar (dos capas osmiofilas
obscuras y una central osmiofoba clara) de 10nm de espesor.

Cada estructura trilaminar es una unidad de membrana a nivel

ultraestructural.

3. FUNCIONES DE LA MEMBRANA.

• Controla la entrada de nutrientes y la eliminación de desechos. La célula, como producto de su —-

–metabolismo, produce elementos y nutrientes que necesita.

• Permeabilidad selectiva, según el momento celular en el que se encuentra la célula.

• Responsable de la homeostasis celular: Mantiene la diferencia de concentración iónica entre los

-..medios extracelular e intracelular.

• Percibe las modificaciones del entorno celular (pH, concentración, ...).

• Permite la comunicación intercelular (a través de las membranas) y los fenómenos de reconocimiento

-.entre células y con el entorno, para realizar una comunicación celular (p.e. los linfocitos tienen una
-.comunicación continua con el macrófago.

-.Cuando el linfocito reconoce que va a ser atacado hace una señalización a través de la membrana y
-.llega a la membrana del macrófago que es el que fagocita ese virus o esa partícula extraña).

• Anclaje del citoesqueleto (important para la membrana interna). Es importante para los pseudópodos,
–es decir, para el movimiento; y para mantener su forma y estructura (no deformarse).
4. COMPOSICIÓN DE LA MEMBRANA.

-​ Una bicapa lipídica fluida que alberga proteínas intramembranosas (intrínsecas o integrales) (de
diferentes morfologías, sobretodo transportadoras) y proteínas extramembranosas (periféricas).

-​ Lípidos y proteínas son variables según los tipos celulares y región celular especializada que
limita la membrana.

-​ Fracción glucídica: pequeñas cadenas de oligosacáridos unidos a lípidos y proteínas. Se

encuentra dirigida hacia el exterior, ya que realizan una función de comunicación.

-​ El colesterol es un componente destacado de la membrana, si bien no forma parte de la misma.

Modula la fluidez de la membrana al regular el movimiento de las cadenas de los ácidos grasos
de los fosfolípidos de manera dependiente de la temperatura.

La hoja externa está formada por fosfatidilcolina,

esfingomielina y fosfatidiletanolamina. Los
glucolípidos aparecen exclusivamente en la hoja
externa y su porción glucídica queda expuesta al
espacio celular.

La hoja interna está formada por fosfatidilserina,

fosfatidilinositol y fosfatidiletanolamina. Las cabezas
de fosfatidilserina y fosfatidilinositol presentan carga
negativa, por lo que la cara citosólica de la membrana
plasmática tiene una carga neta negativa. El
fosftidilinositol desempeña funciones destacadas en
la transmisión de señales celulares.

La composición en cuanto a lípidos y proteínas es variable según el tipo celular, su especialización y la

función que desempeñe, aunque los elementos básicos son los mismos.

- Tipo y cantidad de fosfolípidos.

- Tipo de proteínas.

Dentro de una sola célula hay diferencias en la membrana (entre la extracelular y protoplasmática) en
cuanto a los lípidos que las forman, por ello se dice que la membrana es asimétrica.

-​ La hoja interna presenta carga negativa, por lo que la cara citosólica de la membrana plasmática
tiene una carga neta negativa.

-​ En la exomembrana el colesterol va a influir en la fluidez y la temperatura en la composición

lipídica. Ambas membranas tienen características diferentes para sus funciones diferentes, por
lo que tienen proporción de ácidos grasos y proteínas distinta. La externa tiene más lípidos.
Su composición afecta a la función de la membrana. Cuando la composición de la membrana se afecta,
las partes apolares están juntas y las polares en los extremos, nunca están juntas.

Algo que es bastante importante para el funcionamiento de la célula y que condiciona que el
funcionamiento sea normal, es decir, que desarrolle su fisiología en estado de homeostasis, y viene
determinado por varios conceptos, sobre todo por el concepto de la fluidez de membrana.

La cantidad de colesterol que tengan las membranas es determinante porque puede pasar de ser
necesario para mantener una fluidez normal que permita la fisiología correcta de la célula a una
acumulación en las membranas de colesterol puede desarrollar fenómenos patológicos.

CONCEPTO DE FLUIDEZ: CONCEPTO DE MOSAICO FLUIDO SINGER Y NICOLSON.

Las bicapas lipídicas forman estructuras fluidas que hacen que los lípidos y proteínas se desplacen en la
misma membrana o entre las dos, aunque el movimiento de proteínas está más limitado, ya que si hay
un canal o poro por el cual va a realizarse un transporte, es decir, la proteína va a ser el transportador de
sustancias, no pude estar intercambiando el transportador continuamente mientras que la cadena de
fosfolípidos si, ya que lo realiza para ajustar la alteración que ha podido tener la membrana en cuanto a
polaridad.

Hay unos fosfolípidos con cargas mas negativas. Cuando una cara de la membrana tiene mayor carga
negativa que la otra, se intercambia un fosfolipido por otro para equilibrar esa carga, lo que le da más
dinamismo.

Una estructura como una proteína integral que atraviesa las dos hemimembranas es más complejo para
la célula y ademas perdería esa zona de transporte o de poro. Por tanto, el movimiento de proteínas esta
limitado. Dicha permisión del movimiento de lípidos y proteínas es necesaria para favorecer la
comunicación y señalización celular.

No siempre es necesaria la señalización celular constante, al igual que por ejemplo tampoco lo es la
segregación de hormonas. La señalización celular, por tanto, se va modificando en relación al estado y a
las necesidades de la célula, ya que hay momentos de actividad y de reposo celular.

Objetivo: mantener fluidez, la cual depende de:

1.​ Temperatura.
2.​ Colesterol - en un intervalo fisiológico.
3.​ Fosfolípidos

Las proteínas que se encuentran en la cara interna para los citoesqueletos (mantiene la estructura
propia de la célula) no pasa jamás a la cara superior, ya que es necesaria en la interna y no en la externa.

Las proteínas que se encuentran en la cara externa jamás van a pasar a la cara inferior. Solo existe esa
fluidez en las cadenas de fosfolípidos, ya que su intercambio de posición es normalmente necesario,
para un equilibrio de cargas por ejemplo.
LÍPIDOS DE LA MEMBRANA.

Los lípidos de membrana son sustancias anfipáticas (parte polar e hidrófila y parte apolar e hidrófoba
que son insolubles en disolventes polares).

Las partes hidrófobas se ven forzadas a formar agregados: bicapa y micelas (mono o bi, muestras que
las vesículas siempre son bi.). Si se autoensamblan se forman vesículas con contenido en su interior. Se
minimiza la repulsión entre el agua y los lípidos de la bicapa. Dicho inconveniente de repulsión entre el
agua y la bicapa se resuelve si la bicapa se pliega sobre sí misma (compartimento sellado vesícula).

En el interior las vesículas se pueden transportar fármacos totalmente protegidos, nada va a alterarlo. Al
ser membrana la vesícula, las proteínas llevan una señalización que reconoce los receptores de las
células tumorales, y estas se fusionan. La vesícula es digerida por los lisosomas y se libera el fármaco
exclusivamente en la célula tumoral.

Se está estableciendo un tratamiento específico que elimine solo células tumorales y no dañe las
células efectivas y sanas. El método clásico de tratamiento clásico viene oral o sanguíneo y no
discrimina entre célula tumoral y sana, de esta forma necesitamos menor concentración de fármaco, y
es un tratamiento específico. Por ello, especificidad y no efectos secundarios.

Al ser una membrana del organismo, el cuerpo no lo va a tratar como extraño y se le pueden añadir
receptores y señalizaciones específicas de células tumorales, en cuanto al cáncer p.e.

AUTOSELLADO Y AUTOENSAMBLAJE.

La bicapa presenta 2 propiedades relacionadas con minimizar las fuerzas repulsivas:

-​ Autosellado.

Es un mecanismo de defensa, lo utiliza para asegurar la integridad de la membrana, arreglando

cualquier error o rotura existente. La bicapa repara espontáneamente. así se asegura la integridad de la
membrana y la viabilidad celular. (El sistema inmune, a través de las proteínas del complemento y los
linfocitos citotóxicos destruye a patógenos construyendo en sus membranas poros imposibles de
reparar).

-​ Autoensamblaje .

La bicapa se pliega sobre sí misma formando un compartimento sellado denominado vesícula. Si se

produce in vitro (cuando la célula se encuentra fuera del organismo del que forma parte), las vesículas
se llaman liposomas, Este es un sistema artificial de membranas que se utiliza para administrar
fármacos hacia su diana terapéutica, en procesos infecciosos.
TIPOS DE LÍPIDOS EN LA MEMBRANA.

Dentro de la membrana encontramos tres tipos de lípidos: glicerofosfolípidos, esfingolípidos, esteroles

(colesterol).

-​ Ácidos grasos. Los más comunes poseen 16 y 18 átomos de carbono para asegurar la
estabilidad de la membrana. Es característica la presencia de dobles enlaces o insaturaciones. A
nivel de la insaturación hace que la cadena sufra torsión de 120o, factor decisivo para mantener
la fluidez.

-​ Glicerofosfolípidos: Fosfatidilcolina, fosfatidilserina, fosfatidiletanolamina y fosfatidilinositol.

-​ Glucolípidos. Participan en procesos de señalización celular, puntos de reconocimiento para

moléculas extracelulares o células adyacentes.

-​ Esteroles. El más común y relevante es el colesterol.

MOVIMIENTOS DE LOS LÍPIDOS EN LA MEMBRANA.

Podemos distinguir 4 tipos de movimientos de los lípidos de membrana:

-​ Flexión de las cadenas hidrocarbonadas.

-​ Rotación de los fosfolípidos alrededor de su eje mayor.
-​ Difusión lateral.
-​ Difusión trans bicapa o flip-flop.

En la difusión lateral y transbicapa se produce intercambio de posición al azar entre 2 moléculas de

lípidos, para ajustar una estabilidad de la estructura van a ir modificando su posición. En la lateral las
moléculas están dentro de la misma hemimembrana. En flip-flop se produce el traspaso de una
monocapa a otra.

La hemimembrana interna o protoplasmática tiene que tener una carga negativa, porque si hay un
variación en esta puede realizar una difusión transbicapa para estabilizarla. Este movimiento no es al
azar.
MOVIMIENTOS DE LOS LÍPIDOS EN LA MEMBRANA.

-​ TEMPERATURA

La fluidez disminuye a bajas temperaturas y se eleva con la transmisión de energía térmica. Punto de
temperatura de fusión (Tm) . Para que una membrana desempeñe su función normal tiene que hallarse
en estado fluido (superior a su Tm), pero sin excederlos límites fisiológicos. No altera la composición,
solo altera la fluidez (rígidas y estátitcas o muy fluidas).

-​ COMPOSICIÓN LIPÍDICA

Tipos de ácidos grasos (longitud de cadena hidrocarbonada y grado insaturación son muy importantes
para la fluidez) Los ácidos grasos ideales son los de 16 y 18 átomos.

Esteroles. La presencia de colesterol afecta a la fluidez asociada a temperaturas elevadas. Además, los
esteroles disminuyen la permeabilidad ya que dificultan el paso de los solutos polares y agua. p.e. la
membrana de las células epiteliales de la porción distal de la nefrona tienen tal cantidad de colesterol
que le hace impermeable al agua para el correcto funcionamiento del riñón.

MOVIMIENTOS DE LOS LÍPIDOS EN LA MEMBRANA.

La fluidez está sometida a sistemas de regulación. Son capaces de contrarrestar los efectos de cambios
abruptos de temperatura mediante la variación de la composición lipídica.

Una célula si hay cambios de temperatura repentinos, responde cambiando la composición lipídica y
puede contrarrestar así algo que ella no controla:

-​ Alteración en longitud y grado de insaturación de los ácidos grasos.

-​ Incorporación de colesterol.

Existe una larga lista de enfermedades con alteraciones de la fluidez como la obesidad, el alcoholismo,
la hipertensión arterial, la diabetes, el alzheimer y la esquizofrenia. La alteración de la fluidez en el
eritrocito conlleva cambios en su estructura y función. La acantocitosis eritrocitos con proyecciones
espinosas (acantocitos). Dificulta su paso por los capilares y favorece su destrucción.

ASIMETRÍA.

Las dos hemimembranas poseen una composición

distinta. En la E la mayoría de fosfolípidos que tiene
colina y la mayoría de glucolípidos.

La P moléculas lipídicas que contienen cefalina y

fosfatidilserina. Distribución asimétrica de los
lípidos de la membrana . El símbolo (-) representa
la carga negativa de la fosfatidilserina.
BALSAS LIPÍDICAS.

Lugar donde se produce una acumulación de determinados lípidos de membrana que retienen en su
interior proteínas implicadas en la señalización celular. Existen en las dos hemimembranas,
mayormente en la exterior. Se garantiza que la célula se comunique de forma eficaz con su medio o con
otra célula.

En Hemimembrana E se caracteriza por predominio de esfingolípidos y colesterol. Las balsas son los
puntos donde hay receptores, señales de comunicación entre células o con el medio externo, … No se
dan al azar, es en zonas específicas y determinadas de lípidos característicos (balsas lipídicas). Estos
puntos donde se encuentran las proteínas y lípidos de membrana determinados, donde se establece la
comunicación, son marcados por la membrana.

5. PROTEÍNAS.

Suponen un 50% de la masa de la membranas. Cantidad y tipos de proteínas son muy variables,
depende del tipo celular. Grado solubilidad muy variable depende de las cadenas de aminoácidos
(naturaleza polar o apolar de las cadenas laterales aa).

Responsables de la mayoría de las funciones de las membranas:

1.​ Mecanismo de transporte a través de la membrana plasmatica. Siempre se realizan por las
proteínas o la zona donde se encuentran las mismas.

2.​ Recepción de información.

3.​ Mecanismos de reconocimiento celular (balsas lipídicas).

4.​ Adherencia entre células o sobre un soporte. Las células para dividirse necesitan estar unidas
unas a otras. Esa unión (a otra célula o al medio) la realizan por las proteínas de membranas
(sistema de anclaje).

5.​ Actividades enzimáticas diversas. 7. Uniones estructurales.

6.​ Uniones a sustancias farmacológicas, de virus, de toxinas, u otras células.

La proteína naranja se encuentra en una balsa lipídica, y además es de comunicación y señalización ya
que tiene unidos glúcidos. Las proteínas varían según la membrana, algunas atraviesan y se anclan al
citoesqueleto (está en la cara externa e interna), otras se encuentran en la parte inferior de la membrana
anclados en el esqueleto, y otras son de poros o canales para el transporte.

Las proteínas son muy diferentes dependiendo de la función que desarrollen en la membrana
plasmática.

TIPOS DE PROTEÍNAS.

1. Proteína integral de paso único con un segmento transmembrana en hélice.

2. Proteína integral paso múltiple con varios segmentos transmembrana en hélice.
3. Proteína integral de paso múltiples con varias hebras enrolladas (Cilindro).
4. Proteína integral monotópica.
5. Proteína anclada a lípido unida por enlace covalente a un ácido graso de la bicapa.
6. Proteína anclada a lípido unido por oligosacárido a una molécula de glucolípido de hemimembrana E.
7. Proteína periférica de membrana unida fuerzas débiles a una proteína integral localizada en hemimembrana P.
Las proteínas de membrana se clasifican según procedimiento de aislamiento y el estado de integridad
en el que quedan (reflejo de cómo se asocia a la membrana e interacciona con lípidos): Las proteínas
son menos numerosas que los lípidos (salvo excepciones).

a.​ Integrales. Están completamente integradas en la membrana. Cuando atraviesan

completamente la membrana se habla de proteínas transmembrana. Íntimamente unidas a la
bicapa. Difíciles de aislar con detergentes desnaturalizantes y disolventes (daño en la
membrana) (para un estudio bioquímico se aíslan lípidos, proteínas y glucoproteínas sin
problema, para biología celular se daña la membrana por tanto se altera la funcionalidad).
Íntimamente unidas a la bicapa.

Anfipáticas (porción hidrófoba en el interior y asociadas con colas fosfolípidos. Regiones

hidrófilas en la interfaz agua-lípido). Son mayoría transmembrana, cruzan toda la bicapa.
Pueden ser de paso único o múltiple (según las veces que atraviesen la membrana).
Monotópicas atraviesan la membrana de forma parcial (incrustadas en la monocapa interna o
externa).

En el plegamiento de la proteína delimitan las dos zonas tienen función de poro o canal (en
barril) en Porinas abundantes en mitocondrias y algunas bacterias (antibacterianos atraviesan
por los huecos no selectivos y grandes de las porinas).

b.​ Periféricas. Se pueden extraer con facilidad sin comprometer la estructura de la membrana.
Débilmente asociadas a la bicapa lipídica. No están embebidas en la membrana, por tanto están
adheridas a sus caras externa o interna mediante uniones no covalentes. Se localizan sobre todo
en la superficie de hemimembrana P (enzimas o proteínas de anclaje citoesqueleto).

c.​ Ancladas a lípidos. Unidas covalentemente a lípidos de la bicapa. Para extraerlas hay que
romper el enlace covalente. El grado interacción con lípido es más débil que la integrales y
queda a una sola hemimembrana.

Las localizadas en la hemimembrana P se ancla a la bicapa mediante cadenas hidrocarbonadas

de ácidos grasos saturados (la proteína se traduce en el citosol y se une al ácido graso incluido
en la bicapa) o isoprenoles (se le añade un grupo isoprenoide como modificación
postraduccional previo a la inserción en la bicapa ). Muchas actúan como enzimas, proteína Ras
cuya mutación está implicada en transformación tumoral.

Las proteínas ancladas a lípidos son escasas en la hemimembrana E. Se fijan a la bicapa a través
de derivados glucosilado de fosfatidilinositol (GPI). Son traducidas en el RER. Son frecuentes en
zonas de membrana implicadas en tráfico de sustancias como las balsas lipídicas.

Si existe un déficit en proteínas ancladas a GPI (mutación gen implicado en síntesis) se bloquea el
autosellado de la membrana y aparecen poros que deriva en anemia, trombosis, infecciones y
neoplasias.
EJEMPLO MODELO PARA EXPLICAR LOS GRUPOS DE PROTEÍNAS DE MEMBRANA.

Glucoforina integral de paso único.

-​ Segmento externo muy glucosilado.

-​ Abundantes residuos de ácido siálico le confieren a la superficie celular una gran carga negativa
(eritrocitos se repelen y se reduce la viscosidad de la sangre).

-​ Proteína banda 3, integral de paso múltiple. Lleva a cabo el contratransporte de los iones cloruro
y bicarbonato y junto a la anhidrasa carbónica permite maximizar la cantidad de CO2 que la
sangre transporta hacia pulmones.

-​ Proteínas periféricas: espectrina, anquirina y banda 4 responsables de la estabilidad y

propiedades viscoelásticas.

Esferocitosis hereditaria.

-​ Déficit o alteración de anquirina, espectrina seguido de proteínas de banda 3 y 4 que resulta en

fallo en el anclaje del citoesqueleto a membrana Eritrocito.

-​ Aparecen “esferocitos” que son frágiles y

-​ Pueden quedar retenidos en la microcirculación del Bazo y acaban sufriendo lisis o fagocitosis
por los Macrófagos.

-​ Hemólisis y anemia.
El dióxido de carbono El bicarbonato sale del eritrocito
producido por el catabolismo (entra el ión cloruro).
difunde hacia el eritrocito.

El dióxido de carbono El bicarbonato entra en el

difunde fuera del eritrocito (sale el ión cloruro).
eritrocito y es eliminado.

• Algunas proteínas realizan movimientos de rotación y difunden lateralmente a velocidad muy inferior a
–la de los lípidos.

• No experimentan movimientos flip-flop.

• Orientación asimétrica. Las integrales monotópicas, todas las extrínsecas y las ancladas a lípidos están
–en una solo hemimembrana (en la que ejercen su función).

• Desplazamiento lateral limitado a áreas específicas donde realiza la función, es el dominio de

—.membrana y dan lugar a polarización celular (tipos celulares especializados como neurona.
6. GLÚCIDOS DE LA MEMBRANA: GLUCOCÁLIX.

El glucocálix es un recubrimiento fibrilar que constituye la parte más externa de la membrana.

Constituido:

-​ Glucoproteínas: proyecciones de oligosacaridos y polisacaridos, unidos covalentemente a

proteínas de membrana

-​ Glucolípidos: Cadenas de oligosacáridos unidas covalentemente a lípidos.

FUNCIONES

1.​ Función de protección de agresiones químicas y mecánicas.

2.​ Recubrimiento celular y fijación de las moléculas libres en el medio extracelular.
3.​ Adhesión específica entre 2 células y de células con la matriz (microvellosidades, fecundación
en la zona pelúcida).

El colesterol no es un componente estructural.