TOMA DE MUESTRAS DEL TRACTO RESPIRATORIO INFERIOR Y

SUPERIOR

1. Nasal
Tipo de muestra: Secreción de fosa nasal
1.1 Objetivo:
Determinar e identificar la presencia de microorganismos patógenos.
1.2 Alcance:
- Personal de la unidad de microbiología
- Personal técnico de enfermería
- Licenciados en enfermería
- Personal médico
1.3 Materiales:
- Guantes de nitrilo
- Láminas
- Hisopo de dracón estéril
- Frasco con medio de transporte.

1.4 Condiciones pre analíticas

- Evitar las gotas y los baños nasales antes de tomar la muestra.
- Sólo se recomienda tomar cultivo de fosas nasales anteriores para la
detección de portadores de Staphylococcus aureus o en lesiones nasales.

1.5 Criterios de rechazo

- Cuando no se mantienen las condiciones de colección y transporte.,
temperaturas inadecuadas, recipientes rotos o con fugas o deficiente
calidad de la muestra.
- Muestras sin identificar o mal identificadas, o que no coincidan con la
orden médica.
- Muestras repetidas: en un mismo día y especímenes diferentes a tejido o
sangre, requieren confirmación de la orden por parte del médico.

1.6 Procedimiento
- Colocar al paciente bajo una buena fuente de luz.
 - Levantar la cabeza del paciente y con la otra mano introducir el hisopo 1
cm en el interior de las fosas nasales, rotarlo y luego retirarlo e
identificar de qué fosa nasal se tomó la muestra.
- Tomar dos hisopos de dacrón, hacer con uno extendido en lámina de
vidrio; colocar el otro en el medio de transporte.

1.7 Transporte
- Se recomienda entregar al área de microbiología inmediatamente o en los
primeros 15 minutos de la recolección.

2. NASOFARINGE
Tipo de muestra: Secreción en área nasofaringea
2.1 Objetivos
Determinar e identificar la presencia de microorganismos patógenos.

2.2 Alcance
- Personal de la unidad de microbiología
- Personal técnico de enfermería
- Licenciados en enfermería
- Personal médico

2.3 Materiales
- Mascarilla y protección ocular.
- Guantes de nitrilo
- Hisopo de dracón estéril
- Tubo estéril con medio de cultivo
- Lámina de vidrio.

2.4 Consideraciones pre analíticas

- No hacer gárgaras ni limpieza con ninguna solución bucofaríngea
- Tomar la muestra preferiblemente en ayunas.
- No se recomienda el cultivo rutinario de nasofaringe.
2.5 Criterios de rechazo
 - Cuando no se mantienen las condiciones de colección y transporte,
temperaturas inadecuadas, recipientes rotos o deficiente calidad de la
muestra.
- Muestras sin identificar o mal identificadas, o que no coincidan con la orden
médica.
- Muestras repetidas: en un mismo día y especímenes diferentes a tejido o
sangre, requieren confirmación de la orden por parte del médico

2.6 Procedimiento
- Colocar al paciente bajo una buena fuente de luz.
- Levantar la cabeza del paciente y con la otra mano introducir el hisopo 6 a 8
cm en el interior de las fosas nasales, rotarlo 5 veces en sentido horario y
antihorario, luego retirarlo e identificar de qué fosa nasal se tomó la muestra.
- Ingresar el hisopo entre 8 y 10 cm, rotar 5 veces sentido horario y
antihorario.
- Ingresar en el medio de transporte o frasco estéril.

2.7 Transporte
- La muestra debe ser enviada de inmediato al laboratorio de microbiología.
Mantener refrigerado.
3. FARINGEA
Tipo de muestra: secreción faríngea
3.1 Objetivos
Determinar e identificar la presencia de microorganismos patógenos.

3.2 Alcance
- Personal de la unidad de microbiología
- Personal técnico de enfermería
- Licenciados en enfermería
- Personal médico

3.3 Materiales
- Guantes de nitrilo
- hisopos estériles con alginato de calcio.
- Bajalengua estéril
- Lámina de vidrio y tubo con medio de transporte.

3.4 Consideraciones pre analíticas

- No contaminar el hisopo con secreción de cavidad oral o dientes
- El hisopado de garganta está contraindicado en pacientes con diagnóstico de
epiglotitis.
- No hacer gárgaras ni limpieza con ninguna solución bucofaríngea.
3.5 Criterios de rechazo
- Cuando no se mantienen las condiciones de colección y transporte.
Cantidades insuficientes, temperaturas inadecuadas, recipientes rotos o con
fugas o deficiente calidad de la muestra.
- Muestras sin identificar o mal identificadas, o que no coincidan con la
orden médica.
- Muestras repetidas: en un mismo día y especímenes diferentes a tejido o
sangre, requieren confirmación de la orden por parte del médico.
3.6 Procedimiento
- Colocar al paciente bajo una buena fuente de luz.
- Con un bajalenguas, presionar la lengua hacia abajo para visualizar los
pilares de la faringe, localizar el área de inflamación y exudado.
- Rotar el hisopo de alginato de calcio sobre el área.
- Tomar dos hisopados, hacer con uno extendido en lámina de vidrio y colocar
el otro en el medio de transporte.
3.7 Transporte
- Se recomienda en los primeros 15 minutos de la recolección, no exceder de
dos horas. Mantener refrigerado.

5. ESPUTO
Tipo de muestra: expectoración de secreción respiratoria
5.1 Objetivo
Determinar e identificar la presencia de microorganismos patógenos.
5.2 Alcance
- Personal de la unidad de microbiología
- Personal técnico de enfermería
- Licenciados en enfermería
- Personal médico

5.3 Materiales
- Frasco estéril de boca ancha de 5 cm de diámetro con tapa rosca capacidad
de 30 a 50 ml.
5.4 Consideraciones pre analíticas
- Recolectar la muestra en la mañana, preferible mente en ayunas.
- Instruir al paciente para realizar cepillado de dientes y lavado de la lengua
sólo con agua para remover el exceso de flora oral y retirar prótesis dental
en pacientes de edad.
- Para pacientes pediátricos incapaces de producir un esputo, la terapeuta
respiratoria debe obtener la muestra a través de succión.
- Para el estudio de mycobacterias se deben colectar tres muestras seriadas
en días consecutivos.
- En pacientes ambulatorios sintomáticos respiratorios con sospecha de
tuberculosis, la primera muestra se toma el día de la consulta médica y las
otras dos al día siguiente
5.5 Criterios de rechazo
- Cuando no se mantienen las condiciones de colección y transporte.
Cantidades insuficientes, temperaturas inadecuadas, recipientes rotos o con
fugas o deficiente calidad de la muestra.
- Muestras sin identificar o mal identificadas, o que no coincidan con la
orden médica.
5.6 Procedimiento
- Instruir al paciente para que tosa con fuerza y profundamente, con el fin de
obtener una muestra que provenga del tracto respiratorio inferior, libre de
saliva contenida en la cavidad oral, la cual debe expectorar directamente en
un recipiente estéril de boca ancha de tapa rosca

Transporte
- Se recomienda en los primeros 15 minutos de la recolección, no exceder de
dos horas a temperatura ambiente. Caso contrario la muestra debe ser
conservada a 4ºC.
6 SECRECION TRAQUEAL
Tipo de muestra: aspirado traqueal
6.1 Objetivo
Determinar e identificar la presencia de microorganismos patógenos.
6.2 Alcance
- Personal de la unidad de microbiología
- Personal técnico de enfermería
- Licenciados en enfermería
- Personal médico

6.3 Materiales
- Guantes estériles.
- Sonda de nelaton.
- Hoja de bisturí.
- Solución salina normal
- Gasas estériles
- Frasco de boca ancha estéril o trampa recolectora.

6.4 Consideraciones pre analíticas

- Realice el procedimiento con técnica aséptica.
- De acuerdo con las características de las secreciones, irrigar con solución
salina normal previo a realizar el procedimiento.
6.5 Criterios de rechazo
- Cuando no se mantienen las condiciones de colección y transporte.
Cantidades insuficientes (menor a 2 ml), temperaturas inadecuadas,
recipientes rotos o con fugas o deficiente calidad de la muestra.
- Muestras sin identificar o mal identificadas, o que no coincidan con la
orden médica.

6.6 Procedimiento
 - Introducir la sonda sin hacer succión a través del tubo endotraqueal o
cánula de traquestomía, hasta ubicarla en el espacio traqueal.
- Ocluya el orificio distal de la sonda y comience a succionar, retire la sonda
lentamente mientras la va limpiando externamente con una gasa estéril.
- Tenga precaución de suspender la succión, retirando la oclusión de la sonda
para que se conserve la muestra obtenida en el trayecto de la misma.
- Coloque la muestra obtenida en frasco estéril cortando el segmento distal
de la sonda, si no es posible el depósito de la muestra sola, para lo cual
retira la presión en el orificio de la sonda lo que permitirá la expulsión de la
muestra en el recipiente.
6.7 Transporte
Se recomienda en los primeros 15 minutos de la recolección, no exceder de
dos horas a temperatura ambiente. Caso contrario la muestra debe ser
conservada a 4ºC
7. LAVADO BRONCO ALVEOLAR (BAL)

Tipo de muestra: lavado bronco alveolar

7.1 Objetivo
Determinar e identificar la presencia de microorganismos patógenos.
Determinar la cantidad celular
7.2 Alcance
- Personal de la unidad de microbiología
- Personal técnico de enfermería
- Licenciados en enfermería
- Personal médico
7.3 Materiales
- Equipos de fibrobroncoscopía.
- Sistema de succión
- Recipiente de boca ancha estéril de tapa rosca.
- Lámina de vidrio

7.4 Consideraciones pre analíticas

- - Realice el procedimiento con técnica aséptica.
 - - El paciente debe estar en ayunas para realizar el procedimiento, ya que se
requiere de sedación.
- - Tener en cuenta que los anestésicos locales pueden inhibir el crecimiento
bacteriano.

- Si el paciente esta entubado, antes de realizar el LBA es conveniente

aspirar las secreciones traqueales del paciente.
- Realizado por personal médico capacitado
7.5 Criterios de rechazo
- Cuando no se mantienen las condiciones de colección y transporte.
Cantidades insuficientes (menor a 50 ml), recipientes rotos o con fugas o
deficiente calidad de la muestra.
- Muestras sin identificar o mal identificadas, o que no coincidan con la
orden médica (BIEN IDENTIFICADO EL FRASCO 1 Y FRASCO 2).
- No ha sido coordinado con el área de microbiología el procesamiento de
dicha muestra y es enviada fuera de horario de recepción.
7.6 Procedimiento

- Conecte una trampa de Lukens al fibrobroncoscopio.

- La muestra recogida a partir de los bronquiolos distales y alveolos. En el
primer caso. El broncoscopio es anclado en el lumen de la vía aérea distal
en uno o amas segmentos pulmonares, dependiendo de la extensión de la
infección y desde allí se introduce suero fisiológico estéril para luego
aspirarlo (aspirado bronquial, frasco N° 1).
- En el segundo caso (LBA a ciegas) se utiliza los mismos principios de los
lavados a través de fibrobroncoscopio, pero se realiza sin este. Se utiliza
una sonda de aspiración que se introduce por vía aérea a ciegas (BAL
frasco N° 2).
- Es una maniobra que realiza medico fibro-broncoscopista o intensivista
entrenado.
- Durante la maniobra evitar succionar por el canal de trabajo antes de
realizar la toma de muestra para evitar contaminación de especímenes
- En adultos, el líquido para lavado se instila en alícuotas de 20 a 50 ml con
una jeringa
 - El líquido recuperado debe ser alrededor de un 40 – 50 % de volumen
instilado.
- Suele ser traslucido u opalescente dependiendo de la cantidad de material
celular u no celular en suspensión.
- En los casos de hemorragia alveolar difusa, es típico el aspecto sonrosado o
marrón, más intenso en las últimas alícuotas recuperadas.
- Es importante desechar la primera porción del líquido aspirado
(contaminada con secreciones del tracto respiratorio superior) y no se debe
enviar para estudio microbiológico.
- Si se recibe muestra purulenta rotulada como BAL, se deberá consultar
como se realizó la toma de muestra.
- Colocar el lavado en un frasco estéril, para el análisis cuantitativo de la
muestra obtenida y transportar inmediatamente al laboratorio.
- Irrigar con 10 cc de solución salina no bacteriostática (Lactato de Ringer) a
través del canal abierto.
- Succione para obtener la muestra en dos frascos estériles de boca ancha; de
uno de estos se realiza extendido en lámina de vidrio.
7.7 Transporte
- Obtenida la muestra debe ser enviado inmediatamente al laboratorio de
microbiología.
8. Referencias bibliográficas
8. TOMA DE MUESTRA DE SECRECIONES VAGINALES,
ENDOCERVICALES Y ENDOMETRIALES

8.1 Objetivos
Obtener una muestra adecuada que brinde un resultado fiable, en especial cuando
se necesita evaluar la presencia de infección en la zona vaginal, cervical y
endometrial
8.2 Alcance
- Personal de la unidad de microbiología
- Personal técnico de enfermería
- Licenciados en enfermería
- Personal médico

8.3 Materiales:
- Espéculo
- Laminas portaobjetos
- Bata para paciente
- Solución salina fisiológica estéril al 9 %
- Hisopos estériles de dacrón o algodón
- Medio de transporte tipo Stuart-Amies
- Guantes estériles
- Tubos de vidrio de 13 x 100
- Plumón marcador
8.4 Condición Pre analítica:
- No estar tomando antibióticos por lo menos 3 días antes del examen
- No haberse colocado óvulos, ni duchas vaginales.
- No tener relaciones sexuales 3 días antes de la toma de muestra.
 - No estar menstruando.
8.5 Criterio de Rechazo
8.6 Procedimiento
1. Se explica a la paciente el procedimiento de la toma de muestra. Se pide se
coloque la bata con la abertura hacia atrás. La paciente debe estar relajada y
acostada en posición ginecológica,
2. Colocar el especulo estéril en el canal vaginal (si es necesario lubricarlo con
agua destilada estéril, nunca con otro tipo de lubricantes o crema que pueden ser
letales para los microorganismos existentes, especialmente para el gonococo)
3. Para Secreciones vaginales: Obtener la muestra bajo visión directa del fondo
del saco vaginal posterior rotando suavemente
4. Retirar el hisopo y colocarlo directamente en un tubo que contenga 0.5 de
solución salina al 9% el cual deberá estar a temperatura corporal (37°c).
5. Para Secreciones Endocervicales: Se limpiará el exocérvix de secreciones
vaginales, con una torunda seca. Bajo visión directa se comprimirá
cuidadosamente el cérvix con las palas del espéculo y se introduce una torunda
en el canal endocervical con un suave movimiento de rotación
6. Para Secreción Endometrial: Esta muestra se toma Introduciendo una cánula a
través del cuello del útero hasta llegar a la cavidad endometrial. De esta forma
se tomara una muestra representativa de la zona
7. En los tres casos se hará una segunda toma de muestra de secreción y se
extenderá sobre una lámina de portaobjeto limpia y desgrasada, para realizar la
tinción de Gram, rotando suavemente el hisopo.
8. Rotular la lámina y dejar secar a medio ambiente.

TRANSPORTE
 El envío de la muestra debe ser inmediato siempre que sea posible, debe
procesarse antes de 15 minutos, de lo contrario deberán emplearse torundas con
medio de transporte tipo Stuart-Amies, el cual mantendrán la muestra a
temperatura ambiente, o preferentemente, en estufa 35-37ºC hasta su
procesamiento, que deberá ser antes de 3-6 horas.
 TOMA DE MUESTRA DE SECRECIONES URETRALES

OBJETIVOS

Obtener una muestra adecuada que brinde un resultado fiable, en especial cuando se
necesita evaluar la presencia de infección en uretral para el aislamiento de Neisseria
gonorrhoeae y Chlamydia trachomatis

CONDICION PREANALITICA:

 No estar tomando antibióticos por lo menos 3 días antes del examen

 La muestra ha de recogerse preferentemente antes de la primera micción de la
mañana, si no es posible, se deberá esperar al menos una hora tras la última
micción para recogerla.

MATERIALES

 Torundas uretrales finas, con varilla de alambre no excesivamente flexible, de

alginato cálcico o Dacron
 Medio de transporte tipo Stuart-Amies.
 Gasas estériles.
 Guantes estériles
 Laminas portaobjetos
 Plumon marcador

PROCEDIMIENTO
1. Limpiar cuidadosamente la mucosa circundante con gasas estériles.
2. Introducir la torunda suavemente con un movimiento de rotación hasta penetrar
unos 2 cm dentro de la uretra (3-5 cm para la investigación de Chlamydia
trachomatis).
 3. La secreción purulenta obtenida, deberá ser colocada en medio de transporte
Stuart-Amies.
4. En pacientes asintomáticos, la muestra debe recogerse mediante masaje
prostático o con un pequeño hisopo insertado unos centímetros en la uretra.
5. Realizar extendido de la secreción en lamina portaobjetos para realizar
coloración Gram.
6. Enviar la muestra inmediatamente al laboratorio

TRANSPORTE
 Debe ser inmediato. Cuando no puedan procesarse las muestras antes de 15
minutos, se utilizarán torundas con un medio de transporte Stuart-Amies que se
mantendrán a temperatura ambiente o, preferentemente, en estufa a 35-37ºC. Las
muestras se procesarán siempre que se pueda antes de 3 horas, y como máximo
en un plazo de 6-12 horas.
TOMA DE MUESTRA DE SECRECIONES DE HERIDA, ABCESO Y TEJIDOS
BLANDOS

OBJETIVOS:
 Obtener muestras de calidad para el aislamiento de agentes patógenos causantes
de la infección

CONDICION PREANALITICA
 Preferentemente colectar la muestra antes del inicio de la terapia antibiótica.

MATERIALES
• Guantes estériles.
• Gasa estéril.
• Solución salina estéril.
• Jabón estéril.
• Hisopos estériles de Dacron.
• Medio de Transporte; Stuart ó Amies con carbón.
• Láminas portaobjeto.
• Frascos estériles.

PROCEDIMIENTO

1. Lavarse las manos con agua y jabón, secarse colocarse guantes de látex
estériles.
2. Realizar una buena asepsia de los bordes de la herida, con agua y jabón. La
limpieza debe realizarse de adentro hacia fuera en forma concéntrica.
3. Retirar el exudado de la superficie enjuagando y limpiando con S.S.F. estéril.
4. Separar suavemente los bordes de la herida con el pulgar e índice de una mano.
 5. Se recomienda preferentemente aspirar la secreción con el empleo de una
jeringa, de lo contrario Introducir la punta del hisopo en la profundidad de la
herida. Obtener la muestra rotando el hisopo y avanzando hacia fuera sin tocar el
borde de la herida. En casos de abscesos en algunas ocasiones es necesario hacer
un pequeño corte en la piel para llegar al pus que se encuentra en el interior Este
método se denomina "incisión y drenaje"
6. Obtener dos muestras: Una muestra para el cultivo la cual se introduce en el
medio Stuart o Amies con carbón. La segunda muestra se realiza un frotis para
una coloración Gram.

TRANSPORTE
 En caso de enviar la muestra en jeringa con aguja protegida por el capuchón, el
transporte debe ser inmediato para garantizar el crecimiento de gérmenes
anaerobios.
 Si se envía la muestra en tubo estéril con tapa, se recomienda hacerlo en los
primeros 15 minutos de la recolección a temperatura ambiente
 Si la muestra está en medio de transporte, esta puede mantenerla por 24 horas a
temperatura ambiente

I. PROCEDIMIENTO
 Toma de muestra y transporte de hemocultivos
I.1. Objetivo: Garantizar resultados de calidad, donde la obtención de muestras y
transportes de sangre para hemocultivos.
I.2. Muestra: Sangre
I.3. Materiales:
 Frascos DL BAC/ALERT aeróbica, Tapa amarilla (Pediátrico), volumen del
medio 25ml
 Frascos DL BAC/ALERT aeróbicas, Tapa verde (Adulto), volumen del
medio 30 ml.
 Frascos DL BAC/ALERT anaeróbicos, Tapa anaranjada, volumen del medio
40 ml.
 Ligadura
 Jeringas de 0.5 – 10 ml
 Alcohol al 70%, clorhexidina al 2% y tintura de yodo en forma de hisopo
aplicador
 Algodón
 Plumón marcador de vidrio
 Adaptador de colección sanguínea
 Gasas estériles
 Guantes estériles
 Torunda de algodón
I.4. Obtención de la muestra:
 El procedimiento de la extracción de sangre para la realización de
hemocultivos, se debe realizar, cumpliendo las máximas mediadas de
bioseguridad y precauciones de asepsia.
 Las recomendaciones nacionales e internacionales para tener una
adecuada toma de muestra para hemocultivos son a través de la
extracción periférica directa, venopunción (Anexo N.01 y N.02)
 Por lo que el Área de Patología Clinica la sugiere y la practica a
través de su personal.
 También refieren que se deben realizar de 2 sitios anatómicos como
mínimo (2 sets o conjunto de hemocultivos).
 Un set de hemocultivos; es la combinación de 2 frascos de
hemocultivo (uno aeróbico y otro anaeróbico) en los que se inocula
una sola recolección de sangre.
Para niños pequeños y bebes, el volumen de sangre recogido no debe
exceder del % del volumen total de sangre del paciente.
 Debido a circunstancias clínicas particulares de los pacientes algunas
veces no es posible la extracción periférica directa mediante
venopunción, por lo que a continuación se presentan otras
alternativas de toma de muestra (Anexo N.03 y N.04). La toma de
muestras de estos procedimientos. No se realizará por el personal del
Área de Patología Clinica que involucra manejo de catéteres y el
mayor volumen de sangre (para la eliminación y cultivo), siendo
responsabilidad de esta practica los profesionales de la unidad directo
del paciente. Los resultados microbiológicos de estos procedimientos
alternativos deben ser valorados estrictamente en el contexto clínico
del del paciente por el medico tratante, especialmente si son catéteres
centrales o periféricos ya insertados anteriormente que pueden verse
afectados por los líquidos infundidos, el mantenimiento del catéter, la
colonización con la flora de la piel, etc.
 Los hemocultivos tomados de vías centrales tienen menores valores
predictivos positivos y aumento de falsos positivos por
contaminación de colonizantes, y con ello aumentan la posibilidad
hospitalaria, terapia antibiótica y resistencia microbiana. Por lo que
no se recomienda de su uso si se dispone de realización de
venopunción periféricas.
 Se sugiere que solo se realicen extracciones a través de catéter en
vías que se deseen conservar y solo si se pretende diagnosticar una
infección del torrente sanguíneo relacionado con el catéter, por lo que
esta debe ir acompañada de extracciones de sangre por venopunción.
Recolectar que este diagnostico suele ser de exclusión.
 Los siguientes son las cartillas con los pasos de toma de muestras,
según circunstancias que se presente frente al paciente.
 Anexo N.01 Cartilla de pasos de toma de muestra de hemocultivos
por venopunción (extracción periférica directa)
 Anexo N. 02 Cartilla de pasos de toma de muestra de hemocultivos
de venopunción (extracción periférica mediante jeringas)
 Anexo N. 03 Cartilla de pasos de toma de muestra de hemocultivos
(extracción de a través de catéter periférico)
 Anexo N. 04 Cartilla de pasos de toma de muestra de hemocultivos
(extracción a través de catéter central).
 Realizada la toma de muestra de los hemocultivos, el transporte de
las botellas inoculadas y la solicitud de los hemocultivos completas,
se procede a colocarse las muestras en un cool con todas las medidas
de bioseguridad los más rápido posible, preferiblemente dentro de las
dos horas por CLSI.
Anexo N° 01: Cartilla de pasos de Toma de Muestra de Hemocultivos por Venopunción

(Extracción Periférica Directa)

1. Identificación del paciente con la orden de laboratorio

2. Lavarse las manos y colocarse los guantes
3. Palpar la vena a puncionar
4. Realizar antisepsia con alcohol 70% en una zona de piel de unos 10cm de
diámetro alrededor del sitio de punción con técnica en rejilla-fricción con 2
gasas (arriba abajo y lado a lado)
5. Repetir el procedimiento utilizando Gluconato de Clohexidina 2%
6. Dejar actuar de 1-2 minutos, esto es: hasta que se seque el antiséptico sobre la
piel
7. Mientras actúa el Gluconato de Clohexidina 2%, desinfectar el tapón de goma
del frasco de hemocultivo con alcohol 70%
8. Colocarse los guantes estériles para procedimiento
9. Introducir la aguja al adaptador de colección y punción en la vena designada
10. Extraer la sangre sin tocar en ningún momento el campo desinfectado. Si fuera
necesario palpar nuevamente la vena se cambiará los guantes estériles y se
realizara nueva antisepsia de piel.
11. Tomar la muestra con aguja al vacío específica para hemocultivo, según
volumen calculado
12. Eliminar el material punzocortante
13. Presiona el sitio de punción con algodón
14. Mover los frascos para que la sangre y el medio de cultivo se mezclen
15. Se coloca el nombre del paciente, zona anatómica de punción, hora de un sitio
anatómico diferente, regresando al paso 1
16. Envió de los frascos de manera inmediata
Anexo N°. 02: Cartilla de pasos de Toma de Muestra de Hemocultivos por Venopunción

(Extracción Periférica Mediante Jeringas)

1. Identificación del paciente con la orden de laboratorio

2. Lavarse las manos y colocarse los guantes
3. Palpar la vena a puncionar
4. Realizar antisepsia con alcohol 70% en una zona de piel de unos 10cm de
diámetro alrededor del sitio de punción con técnica en rejilla-fricción con 2
gasas (arriba abajo y lado a lado)
5. Repetir el procedimiento utilizando Gluconato de Clohexidina 2%
6. Dejar actuar de 1-2 minutos, esto es: hasta que se seque el antiséptico sobre la
piel
7. Mientras actúa el Gluconato de Clohexidina 2%, desinfectar el tapón de goma
del frasco de hemocultivo con alcohol 70%
8. Colocarse los guantes estériles para procedimiento
9. Realizar la punción de la jeringa en la vena designada
10. Extraer la sangre sin tocar en ningún momento el campo desinfectado. Si fuera
necesario palpar nuevamente la vena se cambiará los guantes estériles y se
realizara nueva antisepsia de piel.
11. Tomar la muestra, según volumen calculado
12. Presiona el sitio de punción con algodón
13. Realizar el traspaso de la muestra recolectada en la jeringa hacia las botellas de
hemocultivo, introduciendo la aguja a través del tapón de caucho del frasco. No
cambiar la aguja
14. Eliminar los materiales punzocortantes
15. Mover los frascos para que la sangre y el medio de cultivo se mezclen
16. Se coloca el nombre del paciente, zona anatómica de punción, hora de
extracción en la botella
17. Si tiene orden de un segundo set de hemocultivos tomarlo de un sitio anatómico
diferente, regresando al paso 1
18. Envió de los frascos de manera inmediata
 Anexo N°. 03: Cartilla de pasos de Toma de Muestra de Hemocultivos

(Extracción a través de Catéter Periférico)

Consideraciones:

Se sugiere NO utilizar catéteres periféricos insertados anteriormente para obtener

hemocultivos, EXCEPTO si se toman en el momento de la inserción

Se sugiere que la extracción de catéteres periféricos recién insertados SOLO se realice

si NO hay alternativa para obtención de sangre mediante venopunción

La toma de muestra debe ser realizada por personal profesional propio de cada servicio,
cumpliendo estrictamente su manual de procedimiento, la técnica aséptica y normas de
bioseguridad de su Departamento

1. Identificación del paciente con la orden de laboratorio

2. Lavarse las manos y colocarse los guantes estériles
3. Realizar la inserción del catéter venoso periférico según su Protocolo de su
Departamento cumpliendo estrictamente la técnica aséptica y normas de
bioseguridad. Se recomienda utilizar antisepsia con clohexidina al 2% y
desinfección con alcohol al 70% para sus procedimientos y previo a la toma de
muestra
4. Desinfectar el tapón de goma del frasco de hemocultivo con alcohol 70%
5. Obtener la extracción de ml iniciales (o extrayendo una cantidad de sangre igual al
espacio muerto del catéter y del sistema) de sangre a través de jeringa estéril.
Eliminarlo
6. Conectar una segunda jeringa estéril, para extracción de la sangre a cultivar, según
volumen calculado
7. Colocar la aguja estéril N° 21, a la jeringa
8. Realizar el traspaso de la muestra recolectada en la jeringa hacia las botellas de
hemocultivo, introduciendo la aguja a través del tapón de caucho del frasco. No
cambiar la aguja
9. Eliminar los materiales punzocortantes
10. Mover los frascos para que la sangre y el medio de cultivo se mezclen
11. Lavar el catéter con suero fisiológico 0.9% y proceder a su mantenimiento según
su Protocolo del Servicio
12. Se coloca el nombre del paciente, zona anatómica de extracción, hora de
extracción en la botella y colocar “TOMADO DE CATÉTER PERIFÉRICO”.
Evitar pegar etiquetas adhesivas
13. Si tiene orden de un segundo set de hemocultivos tomarlo de un sitio anatómico
diferente, regresando al paso 1
14. Envió de los frascos de manera inmediata.

Anexo N°. 04: Cartilla de pasos de Toma de Muestra de Hemocultivos

(Extracción a través de Catéter Central)

Consideraciones:

 Esta indicada cuando hay sospecha que el origen de la Bacteriemia ES el catéter

y no sea fácil recambiarlo
 Si no fuera el caso del punto anterior, se sugiere que la extracción de catéteres
centrales insertados SOLO se realice si NO hay alternativa para obtención de
sangre mediante venopunción. De preferencia utilizar alguna vía del catéter
central no usada hasta el momento o de sus diferentes lúmenes por cada frasco
 La toma de muestra debe ser realizado por personal profesional propio de cada
servicio, cumpliendo estrictamente su manual de procedimiento, la técnica
aséptica y normas de bioseguridad de su Departamento.
1. Identificación del paciente con la orden del laboratorio
2. Lavarse las manos y colocarse los guantes estériles
3. Cerrar todas las infusiones durante un minuto antes de extraer muestras de
sangre
4. Realizar el mantenimiento del catéter venoso central según su Protocolo de su
Departamento, cumpliendo estrictamente la técnica aséptica y normas de
bioseguridad. Se recomienda utilizar antisepsia con clohexidina al 2% y
desinfección con alcohol al 70% para sus procedimientos y previo a la toma de
muestra
5. Desinfectar el tapón de goma del frasco de hemocultivo con alcohol 70%
6. Obtener la extracción de 3-5 ml iniciales de sangre a través de jeringa estéril y
eliminarlo
7. Conectar una segunda jeringa estéril, para extracción de la sangre a cultivar,
según volumen calculado
 8. Colocar la aguja estéril N° 21, a la jeringa
9. Realizar el traspaso de la muestra recolectada en la jeringa hacia las botellas de
hemocultivo, introduciendo la aguja a través del tapón de caucho del frasco. No
cambiar la aguja
10. Eliminar los materiales punzocortantes
11. Mover los frascos para que la sangre y el medio de cultivo se mezclen
12. Lavar el catéter con suero fisiológico 0.9% y proceder a su mantenimiento según
su Protocolo del Servicio
13. Se coloca el nombre del paciente, zona anatómica de extracción, hora de
extracción en la botella y colocar “TOMADO DE CATÉTER CENTRAL”.
Evitar pegar etiquetas adhesivas
14. Si tiene orden de un segundo set de hemocultivos tomarlo de un sitio anatómico
diferente, regresando al paso
15. Envió de los frascos de manera inmediata.

3. OBTENCIÓN DE MUESTRA DE ORINA PARA UROCULTIVO

3.1 OBJETIVO: Describir el procedimiento de obtención de muestras de orina para

Urocultivo, obtenida del chorro medio, por aspiración de catéter vesical permanente y
por aspiración suprapúbica y utilizando bolsas recolectoras estériles.

3.2 MATERIAL NECESARIO:

- Guantes de látex estériles

- Gasa estéril
- Pinzas
- Jabón
- Agua estéril
- Frascos estériles de boca ancha
- Bolsas recolectoras esteriles.
- Jeringas descartables de 5- 10ml estéril.
- Isodine.

3.2.1 OBTENCION DE MUESTRAS DE ORINA DEL CHORRO MEDIO EN

PACIENTES MUJERES:
PROCEDIMIENTO:
 a) Mantener la privacidad de la paciente.
b) Rotular el frasco con el nombre de la paciente, fecha de obtención de la muestra,
hora y el procedimiento usado para la obtención de la muestra.
c) Lavarse las manos con jabón y abundante agua.
d) Preparar una pieza de gasa para la limpieza de los genitales externos
humedeciéndola con agua y una pequeña cantidad de jabón. Preparar dos piezas
más de gasa para el enjuague con agua tibia.
e) Separar los labios mayores con dos dedos de una mano y limpiar el área
expuesta pasando la gasa de adelante hacia atrás.
f) Descartar la gasa.
g) Con otra gasa humedecida enjuagar el área de adelante hacia atrás. Repetir el
procedimiento con otra gasa.
h) Finalmente secar el área de adelante hacia atrás con un trozo de gasa seca.
i) Mantener separados los labios mayores mientras la paciente empieza a orinar.
Luego del chorro inicial, colocar el frasco estéril para colectar el chorro medio.
j) Al terminar la recolección, tapar el frasco inmediatamente y limpiarle la
superficie.
k) Transportar el frasco con la muestra de orina inmediatamente al laboratorio para
ser procesada dentro de las 2 horas después de obtenida la muestra o debe
refrigerarse a 4° C hasta 24 horas.

3.2.2 OBTENCIÓN DE MUESTRA DE ORINA EN PACIENTES VARONES:

PROCEDIMIENTO:
a) Mantener la privacidad del paciente.
b) Rotular el frasco con el nombre del paciente, fecha de obtención de la muestra,
hora y el procedimiento usado para la obtención de la muestra.
c) Lavarse las manos con jabón y abundante agua.
d) Preparar una pieza de gasa con agua y una pequeña cantidad de jabón. Preparar
dos piezas más de gasa para el enjuague con agua tibia.
e) Realizar la higiene de los genitales. Retraer el prepucio antes de lavar el glande
con la gasa humedecida con jabón. Descartar la gasa.
f) Enjuagar el glande, usando una gasa húmeda. Repetir el procedimiento con otra
gasa.
 g) Secar la zona, usando uno o más piezas de gasa seca.
h) Indicar al paciente que mantenga el prepucio retirado e inicie la micción
directamente en un recipiente (orina para descartar).
i) Después del chorro inicial, colocar el frasco estéril para colectar la muestra del
chorro medio
j) Obtenida la muestra, tapar el frasco inmediatamente y limpiarle la superficie.
k) Transportar el frasco con la muestra de orina inmediatamente al laboratorio para
ser procesada dentro de las 2 horas después de obtenida la muestra o debe
refrigerarse a 4° C hasta 24 horas.

3.2.3 OBTENCIÓN DE MUESTRA DE ORINA POR ASPIRACIÓN DE

CATÉTER VESICAL PERMANENTE:
PROCEDIMIENTO:
a) Rotular el frasco con el nombre de la paciente, fecha de obtención de la muestra,
hora y el procedimiento por usar para la obtención de la muestra.
b) Desinfectar el extremo proximal del catéter (lo más cerca al punto de inserción),
donde se realizará la punción, con alcohol al 70%.
c) Realizar una punción en el área desinfectada y con la jeringa obtener la muestra:
idealmente 5 mL a 10 mL de orina.
d) Vaciar la orina en un recipiente estéril Tapar o cerrar herméticamente el frasco.
e) Transportar el frasco con la muestra de orina inmediatamente al laboratorio para
ser procesada dentro de las 2 horas después de obtenida la muestra o debe
refrigerarse a 4° C hasta 24 horas.

3.2.4 OBTENCIÓN DE MUESTRA DE ORINA POR ASPIRACIÓN

SUPRAPÚBICA:
Ocasionalmente puede ser necesaria la aspiración suprapúbica de la orina de la vejiga,
por lo general cuando se trata de niños pequeños. El procedimiento es efectuado por el
médico especialista asegurando que el paciente esté con la vejiga llena y realizando una
punción directa de la vejiga a través de la pared abdominal con aguja y jeringa. La
obtención de la muestra debe realizarla el médico especialista siguiendo los
procedimientos normativos de su institución.

PROCEDIMIENTO:
 a) Rotular el frasco con el nombre del paciente, fecha de obtención de la muestra,
hora y el procedimiento usado para la obtención de la muestra.
b) Colocar en el frasco estéril la orina obtenida por aspiración.
c) Tapar el recipiente.
d) Llevar la muestra inmediatamente al laboratorio para su procesamiento. Para ser
procesada en un tiempo no mayor de 2 horas. Nota: En niños, para obtener la
muestra del chorro medio es mejor estar pendiente del momento en que el niño
tenga deseos de miccionar.

3.2.5 OBTENCION DE MUESTRAS DE ORINA UTILIZANDO BOLSA

RECOLECTORA: PACIENTES PEDIATRICOS.

PROCEDIMIENTO:

a). lavarse las manos con abundante agua y jabón, secar.

b). Colocarse guantes estériles.
c). Realizar la limpieza de los genitales con una gasa estéril con Isodine
d). Colocar la bolsa recolectora adherente, controlar que la micción se realice en un
tiempo no mayor de 20 minutos, pasado este tiempo, repetir el aseo y volver a colocar
nueva bolsa recolectora.
e). Estar atento cuando el niño miccione, para retirar pronto la bolsa recolectora y evitar
derramamiento o contaminación de la muestra. Son suficientes de 5 – 10 CC de orina.
f). Se recomienda que se transporte a laboratorio en los primeros 15 minutos de la
recolección, no exceder de dos horas y a temperatura ambiente.

4. OBTENCIÓN DE MUESTRA DE HECES PARA COPROCULTIVOS

4.1 OBJETIVO: Es el de mantener la viabilidad de las bacterias que se encuentran en la
muestra y de procurar el buen manejo de la misma.

4.2 MATERIAL NECESARIO:

- Guantes
- Frasco plástico estériles, de boca ancha.
- Medio de transporte de Cary Blair
PROCEDIMIENTO:

1. Asegurarse de que la persona defeque en un recipiente aparte (bacinilla) cuidando que

la muestra no se mezcle con orina.

2. Tomar una parte de la muestra en un recipiente estéril de boca ancha y tapa rosca.

3.-Recolectar en lo posible mas de 2cc o gramos de materia fecal.

4. Rotular el frasco colocando el nombre del paciente, edad y fecha de recolección.

5. Introducir la(s) muestra(s) en una funda plástica y cerrarla evitando que se derrame y
se mezcle con otras muestras.

6. Transportar las muestras rápidamente, antes de que transcurran 2 horas de su

recolección.

7. Se pueden enviar a laboratorio en medio de transporte, en caso de que la muestra

tarde más de 2 horas en llegar al laboratorio. Puede usarse para hisopados fecales
(introduciendo el hisopo directamente en la muestra tomando una parte de ella) o para
hisopados rectales (toma de la muestra introduciendo el hisopo a través del ano del
paciente).

PROCEDIMIENTO UTILIZANDO MEDIOS DE TRANSPORTECARY BLAIR

1.-Tomar con un hisopo estéril parte de la muestra.

2. Introducir el hisopo en el medio de transporte Cary Blair, cuidando de que el algodón

quede 2 cm por debajo de la superficie y sin perforar el fondo del medio de transporte

3. Romper la parte del mango que tocó nuestros dedos para evitar fuentes de
contaminación externa.

4. Cerrar bien el tubo y rotularlo con el nombre del paciente.

5.- No es necesario refrigerar las muestras. Enviarlas lo antes posible al laboratorio.