Especialistas en medios de cultivo

Agar TCBS
USO
Agar TCBS es utilizado como medio de cultivo selectivo para el aislamiento y cultivo de Vibrio cholerae,
Vibrio parahaemolyticus y otras especies de Vibrio a partir de alimentos contaminados, heces y agua.

EXPLICACIÓN
Agar TCBS es también conocido como Agar Tiosulfato-Citrato-Bilis-Sacarosa o como agar selectivo para Vibrios. Es
un medio altamente selectivo y diferencial diseñado para el aislamiento de Vibrio cholerae y otros Vibrios
enteropatógenos, el medio es preparado de acuerdo con la fórmula de Kobayashi y colaboradores.

Agar TCBS es altamente selectivo para las especies de Vibrio debido a sus componentes nutricionales y a la alta
concentración de sales y es ampliamente utilizado en placa para el primo-aislamiento. Este medio junto en el
Agua Peptonada Alcalina es utilizado para el aislamiento de V. cholerae y otras especies a partir de muestras
fecales. En este medio el extracto de levadura y las peptonas proporcionan la fuente de nitrógeno, vitaminas y
aminoácidos. El citrato de sodio, tiosulfato de sodio y la bilis actúan como agentes inhibidores de microorganismos
Gram positivos y coliformes dando alcalinidad al medio. La sacarosa es el carbohidrato fermentable. El cloruro
de sodio promueve el crecimiento. El tiosulfato de sodio es la fuente de sulfuro y con el citrato de hierro un
indicador para detectar la producción de H2S. El azul de timol y de bromotimol actúa como indicadores de pH. El
agar bacteriológico es agregado como agente solidificante.

FÓRMULA POR LITRO

Sacarosa 20.0 g Cloruro de sodio 10.0 g

Peptona de carne 5.0 g Citrato de sodio 10.0 g
Extracto de levadura 5.0 g Citrato de hierro 1.0 g
Bilis disecada 5.0 g Azul de timol 0.04 g
Azul de bromotimol 0.04 g Peptona de caseína 5.0 g
Agar bacteriológico 14.0 g Colato de sodio 3.0 g
Tiosulfato de sodio 10.0 g

pH 8.6 ± 0.2 a 25°C

PREPARACIÓN
Método
Suspender 88 g del medio en un litro de agua purificada. Disolver por calentamiento agitando frecuentemente
hasta el punto de ebullición durante 1 minuto para su completa disolución. No esterilizar en autoclave. Dejar enfriar
a una temperatura entre 45-50°C y vaciar en placas Petri estériles.
Procedimiento Especialistas en medios de cultivo

1. Sembrar las muestras de acuerdo a los procedimientos internos de laboratorio o normas aplicables.
Muestras como hisopos rectales, heces, pescado y otros alimentos pueden ser depositadas directamente
en el medio.
2. Incubar en condiciones aeróbicas las placas a 35 + 2°C durante 24 a 48 horas y observar el
desarrollo.
Si las muestras tienen que ser transportadas al laboratorio, se recomienda utilizar el medio de Cary Blair como
medio de transporte. Las muestras no deben ser c o n g e l a d a s .

CARACTERÍSTICAS
El crecimiento, color de la colonia y recuperación se describe en la siguiente tabla:

COLOR DE LA % DE
MICROORGANISMOS ATCC CRECIMIENTO
COLONIA RECUPERACIÓN
Vibrio parahaemolyticus 17802 Bueno Verde azulado ≥ 50%
Vibrio furnissii NCTC
Bueno Amarillas ≥ 50%
11218
Escherichia coli 25922 Inhibido - -
Enterococcus faecalis 29212 Inhibido - -
Pseudomonas aeruginosa 27853 Inhibido - -

PRESENTACIÓN Y ALMACENAMIENTO

CAT. No PRESENTACIÓN ALMACENAMIENTO

7211 Medio deshidratado Frasco con 450g 2-30°C
7212 Medio deshidratado Frasco con 500g 2-30°C
7213 Medio deshidratado Sobres 2-30°C
7213C Medio deshidratado Sobres (Caja/20 sobres) 2-30°C
7217 Medio deshidratado Cubeta con 5Kg 2-30°C
7217A Medio deshidratado Cubeta con 10Kg 2-30°C
7217D Medio deshidratado Cuñete con 25 Kg 2-30°C
7217B Medio deshidratado Cuñete con 50Kg 2-30°C
7214 Medio preparado en Placa (Pqte/10 Placas) 2-8°C
BIBLIOGRAFÍA Especialistas en medios de cultivo

1. Kobayashi, T.,S. Enomoto R. Sakasaki , and S. Kuwahara. 1963. A new selective medium for phatogenic vibrios. TCBS (modified Nakanishi´s agar). Jpn. J.
Bacterial. 18:387.
2. Nakanishi. Y. 1936. Vibrio, p. 465-476. In P.R. Murria, E.J. Baron. M.A. Pfaller., F.C. Tenover, and R.H. Yolken (ed). Manual of clinical microbiology, 6th ed.
American Society for Microbiology, Wshington, D.C.
3. Association of Official Analytical Chemists. 1995. Bacteriological analytical manual. 8th ed. AOAC. Internacional. Gaitersburg, MD.
4. MacFadding,J.D. 1985. Media for isolatio- cultivation- identification-maintenance of medical bacteria, vol. 1. p. 763-767. Williams & Wilkins, Baltimore
MD.
5. Rodriguez C. E. 2005 Bacteriología General: Principios y Prácticas de Laboratorio. Ed. Universidad de Costa Rica. Págs. 475.