UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA

FACULTAD DE AGRONOMÍA

“Por un Desarrollo Trabajo de Tesis

Agrario
Integral y Sostenible”
Micropropagación de Teca (Tectona grandis
Linn F.) en Biorreactores Económicos de
Inmersión Temporal, 2021- 2022

Autores
Br. Alexander Josué Cajina Silva
Br. César Ramón Mendoza Blandón

Asesores
MSc. Marbell Aguilar Maradiaga
MSc. Roxana Yadira Cruz Cardona

Managua, Nicaragua
Marzo, 2023
 UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA
FACULTAD DE AGRONOMÍA

“Por un Desarrollo
Trabajo de Tesis
Agrario
Integral y Sostenible” Micropropagación de Teca (Tectona grandis
Linn F.) en Biorreactores Económicos de
Inmersión Temporal, 2021- 2022

Autores
Br. Alexander Josué Cajina Silva
Br. César Ramón Mendoza Blandón

Asesores
MSc. Marbell Aguilar Maradiaga
MSc. Roxana Yadira Cruz Cardona

Presentado a la consideración del honorable Comité

Evaluador como requisito final para optar al grado de
Ingeniero Agrónomo

Managua, Nicaragua
Marzo, 2023
 Hoja de aprobación del Comité Evaluador

Este trabajo de graduación fue evaluado y aprobado por el Honorable Comité

Evaluador designado por el Decanato de la Facultad de Agronomía como
requisito final para optar al título profesional de:

Ingeniero Agrónomo

Miembros del Comité Evaluador

Presidente (MSc. Martha Gutiérrez Secretario (MSc. Isidro Salinas

Castillo) Marcenaro)

Vocal (MSc. Helen Ramírez Velásquez)

Lugar y Fecha: Sala Magna, FAGRO, 11 de noviembre del 2022

 DEDICATORIA
Este trabajo investigativo está dedicado a:

Primeramente, a Dios, por haberme dado la vida y ser acompañante en el transcurso de esta
etapa universitaria, brindándome siempre salud, paciencia, sabiduría y fuerza para la
culminación con éxito de cada meta planificada.

A mis padres, Fabricio Octavio Cajina Loaisiga y Fátima de los Ángeles Silva Castrillo,
quienes, con amor, sacrificio y esfuerzo, me han apoyado incondicionalmente en cada etapa
de mi vida.

Finalmente, a mi abuela, Luisa Amanda Castrillo González y a mis tíos, Blanca Silva
Castrillo, Ángela Silva Castrillo y Edwin Solórzano Morales, quienes, me han respaldado
económicamente, e igualmente brindado consejos y palabras de aliento desde que tengo
conocimiento alguno.

Br. Alexander Josué Cajina Silva

i
 DEDICATORIA

Primeramente, a mis padres, quienes con mucho amor, paciencia, sabiduría y esfuerzo, me
han apoyado para llegar a cumplir mi sueño de ser ingeniero agrónomo, inculcándome a no
temer a las adversidades y problemas porque Dios está y estará conmigo siempre.

Segundo, a mis hermanos y sobrinos, por todo su cariño y apoyo incondicional, durante
esta etapa. A toda mi familia materna, porque con consejos y palabras de aliento y sabiduría
lograron convertirme en una mejor persona.

De igual manera, quiero agradecer a mi compañero de tesis Alex Cajina, mis asesores MSc.
Marbell Aguilar, MSc. Roxana Cruz y los profesores Johnston y Rene, quienes me
acompañaron en cada paso durante este proceso de trabajo de tesis.

Finalmente quiero dedicar esta tesis a todos mis amigos, por darme todo su apoyo cuando
más lo necesite, extendiendo sus mano en momentos duros.

Br. César Ramón Mendoza Blandón

ii
 AGRADECIMIENTOS

Primeramente, agradezco a mi padre celestial, por ser mi refugio y fortaleza en todo

momento de mi vida.

A mis asesores, MSc. Marbell Danilo Aguilar Maradiaga y MSc. Roxana Yadira Cruz
Cardona, por concederme el honor y privilegio de trabajar y aprender junto con ellos, así
como, por todo el apoyo, confianza, conocimiento y acompañamiento brindado en cada
instante de este tema de investigación.

A los ingenieros encargados de las actividades del laboratorio, Ing. Johnston Zeledón y Ing.
René Vado, por todo su apoyo, sugerencias y comentarios proporcionados al momento de la
ejecución de cada uno de los métodos correspondiente al tema de investigación.

A mi Alma Máter, la Universidad Nacional Agraria (UNA), especialmente a los docentes

de la Facultad de Agronomía (FAGRO), por haberme facilitado las herramientas y los
medios necesarios para alcanzar mi formación profesional durante estos 5 años.

A la Dirección de Investigación Extensión y Posgrado (DIEP) de la Universidad Nacional

Agraria, por interesarse en este estudio y con ello, financiarnos y brindarnos la oportunidad
de realizar este tema de discusión.

Finalmente, a mis amistades de las carreras de ingeniería agronómica y agrícola,

especialmente al Br. Cruz Hernández, Br. Jastin López, Br. Arleth Zeledón, Br. Alma
Espino, Br. Emely Muñoz, Br. Rachell Gaitán, Br. Cesar Mendoza, Br. Jahoska
Cuadra, Br. Mauricio Bofill y Br. Maycol Ayerdis, por su amistad y apoyo incondicional,
ya que juntos nos ayudamos y acompañamos en el transcurso de esta etapa universitaria.

Br. Alexander Josué Cajina Silva

iii
 AGRADECIMIENTOS

Quiero expresar mi gratitud a Dios, creador de los cielos y la tierra, quien me protege y
bendice todos los días de mi vida a mí y toda mi familia.

Mi profundo agradecimiento a todos los docentes, autoridades, personal que conforman la

Universidad Nacional Agraria de Nicaragua, porque cada uno abrió sus puertas y me permitió
formarme como ingeniero agrónomo.

De igual manera mis agradecimientos a toda la Facultad de Agronomía, a mis profesores

queridos, en especial a quienes durante el transcurso de la carrera transmitieron con mucha
paciencia y dedicación todos sus valiosos consejos y conocimientos, logrando así mi
crecimiento profesional y personal.

Finalmente, quiero expresar mi más agradecimiento a mi compañero de tesis, Br. Alexander

Cajina, por toda su confianza y colaboración, que dieron como resultado el desarrollo de
este trabajo de tesis.

Br. César Ramón Mendoza Blandón

iv
 INDICE DE CONTENIDO

SECCIÓN PÁGINA

DEDICATORIA i

AGRADECIMIENTOS iii

INDICE DE CUADROS vii

INDICE DE FIGURAS viii

INDICE DE ANEXOS x

RESUMEN xi

ABSTRACT xii

I. INTRODUCCIÓN 1

II. OBJETIVOS 3

2.1. Objetivo general 3

2.2. Objetivos específicos 3

III. MARCO DE REFERENCIA 4

3.1. Origen de la teca en Centro América 4

3.2. Propagación sexual y asexual de la teca 5

3.3. Biorreactores económicos de inmersión temporal 6

3.4 Efectos de las hormonas en los tejidos 7

IV. MATERIALES Y MÉTODOS 10

4.1. Ubicación del área de Estudio 10

4.2. Esterilización de materiales y equipos 10

4.3. Selección del material y establecimiento 10

4.4. Fase de multiplicación 10

4.4.1. Experimento 1. Repuesta morfogénica de segmentos de tallos 11

4.4.2. Experimento 2. Respuesta morfogénica a la densidad de siembra 15

v
 4.5. Fase de enraizamiento 16

4.5.1. Experimento 3. Respuesta rizogénica de segmentos de tallos 16

V. RESULTADOS Y DISCUSIÓN 19

5.1. Experimento 1. Respuesta morfogénica de segmentos de tallo 19

5.1.1. Tipos de segmentos de tallos 19

5.2. Experimento 2. Respuesta morfogénica a la densidad de siembra 25

5.3. Experimento 3. Respuesta rizogénica de los segmentos de tallo 28

5.3.1. Segmentos de tallo de dos entrenudos con yema apical 28

5.3.2. Segmentos de tallo de dos entrenudos sin yema apical 32

VI. CONCLUSIONES 36

VII. RECOMENDACIONES 37

VIII. LITERATURA CITADA 38

IX. ANEXOS 42

vi
 INDICE DE CUADROS
CUADRO PÁGINA
1. Cuatro variantes de medios de cultivo empleados en la fase de multiplicación de
segmentos de tallo de teca 14
2. Cinco variantes de medios de cultivo empleados en la fase de enraizamiento de
segmentos de tallo de teca 16
3. Resultados de número de hojas producidas en tres fuentes de yemas individuales
establecidas en cuatro variantes de medios de cultivo a las cuatro semanas en fase de
multiplicación 20
4. Resultados de número de hojas producidas en tres fuentes de segmentos de tallo con
yemas apicales establecidas en cuatro variantes de medios de cultivo a las cuatro
semanas en fase de multiplicación 22
5. Resultados de número de hojas producidas en tres fuentes de segmentos de tallo con
yemas axilares establecidas en cuatro variantes de medios de cultivo a las cuatro
semanas en fase de multiplicación 23
6. Resultados de longitud de planta y número de hojas producidas en segmentos de tallo
con dos entrenudos en yemas axilares y apicales inoculadas en BEIT de tres litros a
las cuatro semanas en fase de multiplicación 26

vii
 INDICE DE FIGURAS
FIGURA PÁGINA
1. Segmentos de tallo individuales de teca. a) primer par de hojas. b) segundo par de
hojas. c) tercer par de hojas. 11
2. Extracción de yemas individuales. a) segmento de tallo con el primer entrenudo. b)
segmento de tallo con el segundo con entrenudo. c) segmento de tallo con el tercer
entrenudo. 11
3. Segmentos de tallo individuales de teca con yema apical. a) yema apical con un
entrenudo b) yema apical con dos entrenudos. c) yema apical con tres entrenudos. 12
4. Extracción de segmentos de tallo con yemas apicales. a) segmento de tallo con yema
apical y un entrenudo. b) segmento de tallo con yema apical y dos entrenudos. c)
segmento de tallo con yema apical y tres entrenudos. 12
5. Segmentos de tallo individuales de teca sin yema apical. a) sin yema apical con un
entrenudo b) sin yema apical con dos entrenudos. c) sin yema apical con tres
entrenudos. 13
6. Extracción de segmentos de tallos sin yemas apicales. a) segmento de tallo sin yema
apical y un entrenudo. b) segmento de tallo sin yema apical y dos entrenudos. c)
segmento de tallo sin yema apical y tres entrenudos. 13
7. Vigor de plántulas y hojas de teca del segundo entrenudo en la fase de enraizamiento.
a) Bajo vigor, b) Vigor mediano c) Buen vigor. 18
8. Plantas de teca en BEIT de 1 litro formadas en la fase de multiplicación a las cuatro
semanas. 21
9. Plantas de teca formadas en la fase de multiplicación. Izquierda, a partir de yemas
apicales y un par de hojas. Centro, a partir yemas apicales y dos pares de hojas.
Derecha, a partir yemas apicales y tres pares de hojas. 22
10. Plantas de teca formadas en la fase de multiplicación. Izquierda, a partir de yemas
axilares con un entrenudo. Centro, a partir yemas axilares con dos entrenudos.
Derecha, a partir yemas axilares con tres entrenudos. 24
11. Plantas formadas a las cuatro semanas en fase de multiplicación a partir segmentos
de tallo con dos entrenudos inoculados a una densidad de 60 yemas en BEIT de tres
litros. Izquierda yemas axilares. Derecha yemas apicales. 27
12. Efecto en la longitud del tallo de teca por la adición de concentraciones de 0, 0.25,
0.50, 0.75 y 1.00 mg L-1 de AIA. Las plantas se formaron a partir de yemas apicales.
Letras desiguales difieren para p <= 0.05. 28
13. Número de hojas producidas en plantas de teca por la adición de concentraciones de
0, 0.25, 0.50, 0.75 y 1.00 mg L-1 de AIA. Las plantas se formaron a partir de yemas
apicales. Letras desiguales difieren para p <= 0.05. 29
14. Efecto en el enraizamiento de teca por la adición de concentraciones de 0, 0.25, 0.50,
0.75 y 1.00 mg L-1 de AIA. Las plantas se formaron a partir de yemas apicales. Letras
desiguales difieren para p <= 0.05. 30
15. Plantas formadas en BEIT de tres litros a partir segmentos de tallo con dos entrenudos
con yema apical a las cuatro semanas en fase de enraizamiento. 31
16. Vigor de plantas in vitro de teca (Buen vigor, mediano y bajo vigor) obtenidas de
segmentos de tallo con su yema apical por la adición de concentraciones de 0, 0.25,
0.50, 0.75 y 1.00 mg L-1 de AIA. Valores en porcentajes. 32

viii
17. Efecto en la longitud del tallo de teca por la adición de concentraciones de 0, 0.25,
0.50, 0.75 y 1.00 mg L-1 de AIA. Las plantas se formaron a partir de yemas axilares.
Letras desiguales difieren para p <= 0.05. 32
18. Efecto en el número de hojas producidas en plantas de teca por la adición de
concentraciones de 0, 0.25, 0.50, 0.75 y 1.00 mg L-1 de AIA. Las plantas se formaron
a partir de yemas axilares. Letras desiguales difieren para p <= 0.05. 33
19. Efecto en número de raíces producidas en plantas de teca por la adición de
concentraciones de 0, 0.25, 0.50, 0.75 y 1.00 mg L-1 de AIA. Las plantas se formaron
a partir de yemas axilares. Letras desiguales difieren para p <= 0.05. 34
20. Plantas formadas en BEIT de tres litros a partir segmentos de tallo con dos entrenudos
sin yema apical a las cuatro semanas en fase de enraizamiento. 34
21. Vigor de plantas in vitro de teca (Buen vigor, mediano y bajo vigor) obtenidas de
segmentos de tallo con yema axilares por la adición de concentraciones de 0, 0.25,
0.50, 0.75 y 1 mg L-1 de AIA. 35

ix
 INDICE DE ANEXOS
ANEXO PÁGINA
1. Medio basal Murashige y Skoog (1962) 42

x
 RESUMEN

La micropropagación de teca (Tectona grandis Linn F.) es una herramienta que permite
multiplicar plantas elites de forma asexual en ambientes controlados. El estudio tuvo como
objetivo evaluar el efecto de hormonas vegetales en yemas apicales y axilares en
Biorreactores Económicos de Inmersión Temporal (BEIT) en fase de multiplicación y
enraizamiento. Este se desarrolló en el laboratorio de cultivo de tejidos de la Universidad
Nacional Agraria (UNA), en el período comprendido de febrero 2021 a agosto 2022. En
la fase de multiplicación se evaluó el efecto de dos concentraciones de 6-BAP y de GA3
en nueve tipos de tejidos (primer, segundo y tercer par de hojas, yema apical con un, dos
y tres entrenudos y sin yema apical con un, dos y tres entrenudos) empleando Biorreactores
Económicos de Inmersión Temporal; además se estudió el efecto de densidades de siembra
con 30, 40, 50 y 60 tejidos. En fase de multiplicación empleando solo yemas apicales el
número de hojas fue superior en los tratamientos con dosis de 0.50 mg L-1 de 6-BAP y 0.05
mg L-1 de GA3 y la combinación de dosis de 1 mg L-1 6-BAP con 0.05 o 0.10 mg L-1 GA3;
con yemas axilares del segundo entrenudo esa variable fue superior en los tratamientos con
0.50 mg L-1 de 6-BAP adicionado con 0.05 o 0.10 mg L-1 de GA3. Con yemas axilares del
tercer entrenudo y con yemas apicales con un entrenudo la media de número de hojas fue
similar en todos los tratamientos antes citados; mientras que con segmentos de yemas
apicales con dos entrenudos esa variable resultó superior en el medio con 0.50 mg L-1 de 6-
BAP combinado con 0.05 o 0.10 mg L-1 de GA3. Con yemas apicales y tres entrenudos el
número de hojas fue superior en el medio con 0.50 o 1.00 mg L-1 de 6-BAP combinados
con 0.05 mg L-1 de GA3. En biorreactores de 3 litros con densidades de 30, 40, 50 y 60
yemas apicales o axilares ambas con dos entrenudos presentaron igual comportamiento
estadístico en longitud de planta. El número de hojas producidas por segmentos con yemas
apicales resultó superior con densidades de 30 y con 40 en los dos tipos de segmentos. En la
fase de enraizamiento, las yemas apicales y axilares de dos entrenudos resultaron
superiores en longitud de planta, número de hojas, número de raíces y vigor con
porcentajes entre 60 y 70 % en 0.25, 0.50 y 0.75 mg L-1 de AIA. Plantas formadas de
yemas axilares en todos los tratamientos presentaron vigor con porcentajes entre el 60 y el
70 %.

Palabras clave: Teca, yemas apicales, yemas axilares, BEIT, BAP, GA3.

xi
 ABSTRACT

Teak micropropagation (Tectona grandis Linn F.) is a tool that allows elite plants to multiply
asexually in controlled environments. The objective of the study was to evaluate the effect
of plant hormones on apical and axillary buds in Economic Temporary Immersion
Bioreactors (BEIT) in the multiplication and rooting phase. This was developed in the tissue
culture laboratory of the National Agrarian University (UNA), in the period from February
2021 to August 2022. In the multiplication phase, the effect of two concentrations of 6-BAP
and GA3 was evaluated on nine types of tissues (first, second and third pair of leaves, apical
bud with one, two and three internodes and without apical bud with one, two and three
internodes) using Economic Temporary Immersion Bioreactors; In addition, the effect of
planting densities with 30, 40, 50 and 60 tissues was studied. In the multiplication phase
using only apical buds, the number of leaves was higher in the treatments with doses of 0.50
mg L-1 of 6-BAP and 0.05 mg L-1 of GA3 and the combination of doses of 1 mg L-1 6- BAP
with 0.05 or 0.10 mg L-1 GA3; with axillary buds from the second internode, this variable
was higher in the treatments with 0.50 mg L-1 of 6-BAP added with 0.05 or 0.10 mg L-1 of
GA3. With axillary buds from the third internode and with apical buds with one internode,
the mean number of leaves was similar in all the aforementioned treatments; while with
segments of apical buds with two internodes, this variable was higher in the middle with 0.50
mg L-1 of 6-BAP combined with 0.05 or 0.10 mg L-1 of GA3. With apical buds and three
internodes, the number of leaves was higher in the middle with 0.50 or 1.00 mg L-1 of 6-
BAP combined with 0.05 mg L-1 of GA3. In 3-liter bioreactors with densities of 30, 40, 50,
and 60 apical or axillary buds, both with two internodes presented the same statistical
behavior in plant length. The number of leaves produced by segments with apical buds was
higher with densities of 30 and with 40 in the two types of segments. In the rooting phase,
the apical and axillary buds of two internodes were superior in plant length, number of leaves,
number of roots and vigor with percentages between 60 and 70 % in 0.25, 0.50 and 0.75 mg
L-1 of AIA. Plants formed from axillary buds in all treatments presented vigor with
percentages between 60 and 70 %.

Keyword: Teak, apical buds, axillary buds, BEIT, BAP, GA3.

xii
 I. INTRODUCCIÓN
En Nicaragua, la producción de madera cuenta con 36 mil hectáreas de especies forestales, sin
embargo, el país presenta un potencial de suelos de 500 mil hectáreas que permitiría incrementar
hasta 14 veces esas áreas óptimas, para plantaciones forestales y beneficiar a 80 mil trabajadores
representando el 0.8 por ciento de la fuerza laboral formal (MLR, 2021, párr.1).

De acuerdo con el diagnóstico del sector forestal de Nicaragua, las plantaciones forestales tienen
un gran potencial económico en el país, actualmente se estima que las plantaciones existentes
ofertan un volumen anual de 840 mil metros cúbicos de madera, generando 242 millones de
dólares por año (Camino, 2018, p. 8). Así mismo, el plan nacional de producción consumo y
comercio ciclo 2018-2019, reporta que la teca produjo 20.6 miles de metros cúbicos de madera
(Banco Central de Nicaragua, 2019, p. 37).

La teca es una madera de gran calidad, utilizada de gran manera para obras estructurales y
decorativas por su color y durabilidad, sin embargo, su uso es muy limitado, debido a sus altos
precios (Vallejo y Zapata, 2018, párr. 45). Además, “es una especie que destaca por sus magníficas
características de durabilidad natural, poseer una buena estabilidad dimensional y una resina
antiséptica que la hace resistente al ataque de diversos organismos, como termitas y diversos
hongos” (Maderea, 2017, párr. 3).

Leandro et al., (2003) menciona que “a pesar de que la diversidad genética de la teca en la región
América Latina no es muy amplia, el germoplasma introducido ha dado resultados satisfactorios
en términos de productividad, especialmente en tasas de crecimiento, rectitud y calidad del fuste,
e incluso en propiedades de la madera” (Murillo et al., 2013, p. 94).

La producción de material vegetativo a partir de propagación sexual (semillas) produce mucha

variabilidad genética en características como el crecimiento, mientras que, con el uso de plántulas
obtenidas por micropropagación, se obtiene un material uniforme y de calidad, permitiendo ser
transportadas de un país a otro sin ningún tipo de mortalidad, realizándose las plantaciones
forestales con mayor rapidez y garantizando un crecimiento adecuado y vigoroso posterior a la
siembra (Fonseca, 2004, p. 30).

1
Murillo et al., (2003) destaca que “las nuevas tecnologías de producción masiva de clones
permiten la producción constante de material de plantación en cualquier época del año y
prácticamente sin limitación en la cantidad de individuos” (p. 36).

De acuerdo con Santos et al., (2013) una alternativa para la reproducción vegetativa de teca es la
propagación de plantas a través de la micropropagación, que se fundamenta mediante la clonación
de material vegetal élite, presentando altas tasas de multiplicación y buenas características
genotípicas y fenotípicas como altura, rectitud de fuste, copa y alto rendimiento de madera (p. 85).
Así mismo, Santos et al., (2013) afirman que la micropropagación “permite propagar árboles
seleccionados por sus características fenotípicas y alto rendimiento de la madera, incrementando
la tasa de multiplicación y manteniendo un alto nivel de sanidad y estabilidad genética” (p. 83).

De acuerdo con Castillo et al., (2013), para emplear la micropropagación de teca como actividad
comercial, es necesario disponer de tecnologías como los biorreactores de inmersión temporal,
donde se utiliza medios líquidos. Los medios líquidos presentan la ventaja que los explantes tienen
mayor facilidad de absorción de los nutrientes, debido a la formación de una película acuosa que
cubre el tejido vegetal. En el caso del medio sólido, la difusión de los nutrientes es a través del
agar, en un solo punto de contacto entre el explante y el medio de cultivo (p. 88 – 89).

Los Biorreactores Económicos de Inmersión Temporal (BEIT) desarrollados en la Universidad

Nacional Agraria funcionan en un solo recipiente de vidrio, donde se inyecta aire comprimido
suministrado por una bomba de vacío, permitiendo que el medio de cultivo líquido cubra todo el
material de poliuretano donde están establecidos los segmentos de tallos, garantizando de esta
manera, que se oxigenen los tejidos durante el tiempo de inmersión. Además, para evitar la
contaminación de microrganismos dentro de los biorreactores, sobre la tapa de este se colocan dos
filtros de acetato de celulosa (Cruz, 2020, p. 15).

Con la utilización de los biorreactores en la micropropagación de teca y el empleo de diferentes

tipos de tejidos es posible mejorar el proceso de producción masiva en la micropropagación de
teca. Se planteó este estudio con el objetivo de evaluar la respuesta morfogénica de segmentos de
teca en dos fases de micropropagación con Biorreactores Económicos de Inmersión Temporal
(BEIT).

2
 II. OBJETIVOS
2.1.Objetivo general
Evaluar la respuesta morfogénica de segmentos de teca en dos fases de micropropagación con
Biorreactores Económicos de Inmersión Temporal (BEIT).

2.2.Objetivos específicos
Analizar en la fase de multiplicación la respuesta morfogénica de los segmentos de yemas apicales
e axilares en diferentes combinaciones de 6-bencil amino purina (6-BAP) y ácido giberélico
(GA3).

Identificar la óptima densidad de siembra de segmentos de teca con yemas apicales y yemas
axilares en la fase de multiplicación.

Determinar en la fase de enraizamiento la mejor concentración de ácido indolacético (AIA) en

segmentos de tallo con yemas apicales e axilares.

3
 III. MARCO DE REFERENCIA
3.1.Origen de la teca en Centro América
La teca (Tectona grandis Linn F.) es un árbol latifoliado de fuste recto, con corteza áspera y
fisurada, que crece muy rápido en sus etapas juveniles, alcanzando de 8 a 10 metros de altura en
2 años, sin embargo, su crecimiento se torna lento en los años posteriores. La teca es originaria
del sudeste de Asia, en donde logra alcanzar hasta 45 m de altura ha sido introducida en la mayoría
de los países con clima tropical y en América, fue introducida primeramente en Trinidad y Tobago
en 1913 y en 1916 (Fonseca, 2004, p. 2).

La teca es la especie de árbol comercial más destacada y reconocida en el mundo, así mismo ocupa
el tercer puesto en las especies forestales más plantadas en América Latina, superada por el pino
y eucalipto. (Martínez, 2015, p. 4). Esta se introdujo en Nicaragua en el año 1990 y logró
naturalizarse y adaptarse satisfactoriamente al clima y por su calidad de madera, existe aumento
constante en las áreas de producción (Espinoza et al., 2015, p. 5).

Se estima que Nicaragua existen 2.5 millones de hectáreas aptas para plantaciones forestales,
siendo el 49% de éstas de alta productividad para teca, ubicadas principalmente en los
departamentos de León, Chinandega, Masaya, Rivas, Granada, Boaco, Chontales, Río San Juan,
Región Autónoma Atlántico Norte y Región Autónoma Atlántico Sur. (Rivas, 2004, p. 2)

La teca es una especie forestal que presenta un sin número de características como la durabilidad
natural, excelente estabilidad dimensional y una resina antiséptica que la hace resistente al ataque
de diversas plagas. Además, la teca es de importancia económica y ecológica por su rápido
crecimiento y rendimiento, buen acabado de la madera, excelentes precios internacionales y su
alta aportación de biomasa al suelo (Maderea, 2017, párr. 3).

Al respecto, Berrocal y Agüero (2006) afirman que:

Estas excelentes características han hecho que la teca sea considerada una de las especies
más valiosas del mundo, siendo ampliamente codiciadas en el mercado, tanto en el ámbito
nacional como internacional; influenciado por la gran variedad de usos que tiene (muebles,
construcción pesada, pisos, yates, artesanías, vigas laminadas, compuestos de madera etc.).
(p.1)

4
Actualmente en Nicaragua, los daños que se han obtenido a causa de la deforestación impulsan a
desarrollar estrategias para una reproducción y crecimiento rápido de especies vegetales forestales,
que ayuden a evitar las tensiones a las que están sometidas los ecosistemas en el país (MARENA,
2019, p. 1)

3.2. Propagación sexual y asexual de la teca

La teca es una especie introducida, eventualmente naturalizada, que ha ganado mucha popularidad
en Nicaragua por su rápido crecimiento y calidad de madera. Sin embargo, a pesar de garantizar
un crecimiento vegetativo óptimo de brotes y yemas, que la hace viable para estudios de
propagación y multiplicación vegetativa, aún no ha sido estudiada intensamente en el campo de
propagación vegetal asexual en nuestro país.

La propagación por semilla de teca presenta algunos inconvenientes como baja disponibilidad de
semillas de alta calidad en el mercado, las tasas de germinación en condiciones normales son muy
variables e impredecibles, alta variabilidad entre individuos y entre más largo sea el fuste limpio,
por ende, su valor comercial, más tarde se presentará su fructificación (Martínez, 2015, p. 9).

Abdelnour y Muñoz (2012) afirman que:

La demanda de madera teca a nivel mundial es mayor que los recursos disponibles, muchos
países se inclinaron por introducir esta especie en los programas de reforestación. La
propagación de teca se realiza tradicionalmente por semilla y la siembra a gran escala se
mantiene por esta vía, muchas veces sin conocer las características o procedencia del
material a plantar, lo que ha resultado en muchos casos, en plantaciones de baja calidad.
(p. 2)

Hoy en día, los proyectos de gran demanda y experiencia ejecutan programas de selección de
material vegetativo, donde se selecciona cuidadosamente las estacas de árboles, siguiendo estrictos
protocolos de selección según la demanda de la empresa, para luego ser almacenadas en huertos
clónales (Montenegro et al., 2013, p. 50).

Una solución para evitar la variabilidad genética que se genera con la reproducción por semilla
sexual es la micropropagación que es un sistema de propagación asexual, donde se obtiene como
resultado la propagación masiva de plantas genéticamente idénticas. Además, con esta tecnología

5
se obtienen plantas de forma exponencial, por la obtención de explantes menores a 1 cm de
longitud (Salgado, 2019, párr. 6).

La micropropagación vegetativa que consiste en producir plantas a partir de porciones pequeñas

de ellas, manteniendo las características genéticas de la planta madre, resultando ser una excelente
opción para multiplicar especies forestales como la teca, sin embargo, requiere un control de las
condiciones asépticas del ambiente y de los medios nutritivos para mantener los cultivos libres de
contaminación microbiana (Ruscitti, 2021, p. 5).

En el caso de la teca, para realizar la micropropagación se seleccionan plantas madre que cumplen
con condiciones de calidad, donde se aplican condiciones de asepsia controladas a fin de evitar la
reproducción de enfermedades (Cruzat., 2009, p. 6). De acuerdo con Olmos et al., (2010), la
“correcta elección y preparación del explante incide directamente sobre la calidad de este y su
respuesta frente a los dos principales problemas que afectan al establecimiento del cultivo, que
son la contaminación con microorganismos y la oxidación del explante” (p. 353).

3.3. Biorreactores económicos de inmersión temporal

“Las principales limitantes de los protocolos de micropropagación convencional son los bajos
coeficientes o tasas de multiplicación, el alto costo de la mano de obra y una escasa posibilidad de
automatización” (Frometa et al., 2016, párr. 6). “Para resolver estas limitantes, se han adaptado
varios tipos de biorreactores para la micropropagación de plantas” (Etienne y Berthouly, 2002, p.
1).

Al respecto, Pérez et al. (1998), menciona que “las ventajas de los sistemas de inmersión en medio
líquido sobre la micropropagación tradicional parecen ser el resultado de las condiciones físicas
creadas en el recipiente de cultivo como son: aporte más eficiente de los elementos nutritivos,
mínima interrupción del intercambio de gases entre el explante o embrión y la atmósfera, no hay
acumulación excesiva de gases nocivos para los tejidos y la dispersión de los tejidos por efecto
del flujo de aire en recipiente” (Paiz, 2006, p. 7).

De acuerdo con Albarrán et al., (2014):

Entre los tipos de biorreactores, los de inmersión temporal se diseñaron basándose en el

uso de medios de cultivo líquido y la automatización del proceso de micropropagación con

6
 la finalidad de aumentar las tasas de multiplicación de especies vegetales de interés
agrícola, forestal y medicinal; de esta manera se obtiene un mayor número de plantas por
recipiente, el reemplazo del medio de cultivo es sencillo y demanda poca mano de obra.
(p. 1)

Los Biorreactores de Inmersión Temporal (BIT) constituyen una herramienta eficaz para la
propagación de plantas in vitro, donde se aumenta el coeficiente de multiplicación y la calidad de
plántulas. Además, en los biorreactores las plantas son sometidas a una inmersión en medio de
cultivo líquido y los cambios fisiológicos que se producen durante esta etapa son los responsables
de la calidad de las plantas (Aragón, 2004, párr. 1).

El empleo del modelo de Biorreactores Económicos de Inmersión Temporal (BEIT) desarrollado

en la Universidad Nacional Agraria (UNA) en el laboratorio de cultivo de tejidos resulta ser
práctico, considerablemente más económico y sencillo de construir; gracias a que los accesorios
que conforman su diseño se localizan fácilmente en el país, además se puede reutilizar
innumerables veces y al ser de polipropileno el riesgo de quebrarse es mínimo. Es por eso por lo
que los biorreactores BEIT pueden ser adaptados fácilmente por los laboratorios de cultivo de
tejidos tanto dentro como fuera del país (Navarro, 2019, p. 2).

De acuerdo con Aguilar y Cruz (2014):

El BEIT tiene las ventajas de evitar la inmersión continua del material vegetal en el medio
del cultivo, proveen adecuada transferencia de oxígeno, bajos costos de adquisición y se
pueden armar fácilmente, reduce el tiempo y el costo de producción, favoreciendo la
mejora de la calidad genética y fitosanitaria de cultivos como plátano, caña de azúcar, piña,
etc. (p. 19).

3.4 Efectos de las hormonas en los tejidos

Una fitohormona u hormona vegetal se define como una sustancia orgánica, distinta de los
nutrientes, activa a bajas concentraciones y se encuentran de forma natural en los tejidos de las
plantas, realizando un papel regulador más que nutricional en el crecimiento y desarrollo (Fichet,
2017, párr. 1).

7
Cada hormona vegetal, cumple varias funciones, algunas muy específicas, y en algunos casos
deben actuar dos o más hormonas para regular un evento fisiológico de la planta. La presencia
hormonal es crítica para que un evento fisiológico se presente. Por el contrario, si está ausente o
en poca cantidad, el evento fisiológico no se presentará o se manifestará muy pobremente (Díaz,
2017, párr. 3). Así mismo, se reconocen comúnmente como hormonas vegetales cinco tipos de
compuestos: auxinas, citocininas, giberelinas, etileno y ácido abscísico, donde cada hormona tiene
efectos fisiológicos propios en la planta (Carbonell et al., 2016, p. 1).

Las auxinas, siendo las más comúnmente usadas en laboratorio in vitro, el ácido indolbutírico
(AIB), ácido indolacético (AIA) y ácido naftalenacético (ANA), participan en todos los procesos
de desarrollo de las plantas e intervienen en los procesos de división, elongación y diferenciación
celular (Garay et al., 2014, p. 2).

En cambio, las citocininas se sintetizan principalmente en la raíz hormonas, estas activan el

crecimiento de las yemas laterales, estimulan el crecimiento de frutos, retardan la senescencia en
hojas y estimulan la movilización de nutrimentos. La zeatina, benciladenina y kinetina son las más
importantes (Díaz, 2017, párr. 7).

Las giberelinas estimulan el crecimiento principalmente vía división y alargamiento celular,

siendo las protagónicas en este último. Además, regulan al proceso de germinación y intervienen
en procesos de inhibición de senescencia e inhibición floral y radical. Existen más de 130
giberelinas en las plantas, pero muy pocas tienen actividad biológica, las más destacadas son la
GA₁, GA₃ y GA₄ (Díaz, 2017, párr. 6).

Rojas y Abdelnour (2012), evaluaron el efecto de 6-bencilaminopurina (6-BAP) y ácido

indolacético (AIA) en la brotación de yemas dormantes y formación de callos en teca, dando como
resultado que la concentración de 0.005 mg L-1 de AIA, fue el mejor tratamiento para incrementar
la brotación de las yemas y para disminuir la formación de callo.

Un estudio por parte de Quiala (2014), demostró que el empleo de BIT, durante la fase de
multiplicación de tejido y ausencia de la hormona 6-Bencilaminopurina (6-BAP) o con una
concentración de 0.5 mg L-1, permite obtener plantas sin desórdenes fisiológicos y con alta
supervivencia durante la fase de aclimatación.

8
Daquinta et al., (2021), ejecutaron un proyecto de investigación con el que se pretendía establecer
un protocolo para la propagación in vitro de teca (Tectona grandis Linn F.), se evaluaron diferentes
concentraciones de 6-BAP en la multiplicación de brotes y la inducción del enraizamiento con
polvos enraizadores. Se obtuvo un 100% de brotación de los ápices de brotes epicórmicos en el
medio suplementado con 0.5 mg L-1 de 6-BAP. En cuanto a la inducción del enraizamiento se
obtuvo que los explantes tratados con el polvo enraizador a 1000 mg L-1 de ANA y 1000 mg L-1
AIB, fueron los que presentaron mayor porcentaje de enraizamiento (92.5%).

Castro et al., (2012), desarrollaron una metodología para la propagación in vitro de teca a partir
de árboles élite. Como fuente de explantes se emplearon ápices procedentes de brotes epicórmicos,
los cuales se sembraron en un medio de cultivo gelificado que contenía 6-BAP, donde se evaluaron
diferentes concentraciones (0, 0.1, 0.5 y 1.0 mg L-1). Los resultados obtenidos muestran que el
mayor coeficiente de multiplicación y mejor calidad de los brotes se logró con 0.5 mg L-1de 6-
BAP.

9
 IV. MATERIALES Y MÉTODOS
4.1. Ubicación del área de Estudio
El estudio se realizó desde febrero 2021 a agosto 2022 en el laboratorio de cultivo de tejido de la
Facultad de Agronomía de la Universidad Nacional Agraria, ubicado en el Km. 12 ½ carretera
norte en el departamento de Managua, situado en las coordenadas 12° 08´ 58.3´´ latitud norte y
-86° 09´ 37.0´´ longitud oeste.

4.2. Esterilización de materiales y equipos

La cristalería se sumergió durante 24 horas en un recipiente plástico con capacidad de 30 litros
conteniendo hipoclorito de sodio (NaClO3) al 1%; después se lavó con agua y detergente para
eliminar los residuos de hipoclorito y posteriormente se procedió a escurrir durante 2 horas. Previo
a la siembra de los tejidos in vitro, los medios de cultivo se esterilizaron en autoclave a 120 ºC
durante 1 hora. Placas, pinzas y bisturís se esterilizaron en el horno a temperaturas de 180 ºC
durante 1 hora. La cámara de flujo laminar se desinfectó con alcohol 70% y posteriormente, se
expuso a luz ultravioleta durante 30 minutos.

4.3. Selección del material y establecimiento

El 8 de febrero del 2021, se extrajeron brotes de los árboles de teca establecidos en el vivero del
laboratorio de cultivo de tejido de la Universidad Nacional Agraria (UNA). Una vez extraídos los
brotes, se sumergieron en una solución jabonosa preparada con detergente comercial para luego
ser trasladados al laboratorio, donde, se realizaron 3 lavados sucesivos con detergente y con ayuda
de cepillos, se extrajo los residuos de polvo y suciedad.

En la cámara de flujo laminar, los tejidos se redujeron a un tamaño aproximado de 0.5 cm con
ayuda de escalpelos previamente esterilizados y se establecieron en un medio de cultivo con las
sales de Murashige y Skoog (MS) con 30 g/l de sacarosa (Anexo 1).

4.4. Fase de multiplicación

Esta fase se realizó cada 21 días, donde se realizó el corte de segmentos de tallo para obtener las
nuevas plántulas que se utilizaron para establecer los dos experimentos de multiplicación y uno de
enraizamiento.

10
 4.4.1. Experimento 1. Repuesta morfogénica de segmentos de tallos
En el experimento 1, se emplearon 9 tipos de segmentos de tallos de teca, los cuales se presentan
a continuación:

Tres fuentes de segmentos de tallo con yemas individuales

 Yema apical individual (primer par de hojas)

 Segundo par de hojas
 Tercer par de hojas

Los tipos de segmentos de tallo con yemas individuales, se observa en la figura 1 y su forma de
obtención, se observa el corte en la figura 2

Figura 1. Segmentos de tallo individuales de teca. a) primer par de hojas. b) segundo par de hojas.
c) tercer par de hojas.

Figura 2. Extracción de yemas individuales. a) segmento de tallo con el primer entrenudo. b)

segmento de tallo con el segundo con entrenudo. c) segmento de tallo con el tercer entrenudo.

11
Tres fuentes de segmentos de tallo con yema apical

 Yema apical con un entrenudo

 Yema apical con dos entrenudos
 Yema apical con tres entrenudos

En la figura 3, se presentan las tres variantes de segmentos de tallo cada uno con su yema apical y
en la figura 4, se observa el corte para su obtención.

Figura 3. Segmentos de tallo individuales de teca con yema apical. a) yema apical con un
entrenudo b) yema apical con dos entrenudos. c) yema apical con tres entrenudos.

Figura 4. Extracción de segmentos de tallo con yemas apicales. a) segmento de tallo con yema
apical y un entrenudo. b) segmento de tallo con yema apical y dos entrenudos. c) segmento de
tallo con yema apical y tres entrenudos.

12
Tres fuentes de segmentos de tallo sin yema apical

 Sin yema apical con un entrenudo

 Sin yema apical con dos entrenudos
 Sin yema apical con tres entrenudos

En la figura 5, se observan las tres variantes de segmentos de tallo cada uno sin yema apical y en
la figura 6, se observa el corte para su obtención.

Figura 5. Segmentos de tallo individuales de teca sin yema apical. a) sin yema apical con un
entrenudo b) sin yema apical con dos entrenudos. c) sin yema apical con tres entrenudos.

Figura 6. Extracción de segmentos de tallos sin yemas apicales. a) segmento de tallo sin yema
apical y un entrenudo. b) segmento de tallo sin yema apical y dos entrenudos. c) segmento de tallo
sin yema apical y tres entrenudos.
Medio de cultivo
Cada tipo de segmento de tallo fue establecido en BEIT de vidrio con capacidad de un litro, a los
que se les agregaron 200 ml de medio de cultivo constituido por las sales básicas de Muraschige

13
y Skoog (MS), con 30 g/l de sacarosa y con las variantes de concentraciones de hormonas vegetales
correspondientes a cada tratamiento (Cuadro 1). El pH se ajustó a 5.8, con ácido clorhídrico (HCl)
a 0.5 N e hidróxido de potasio (KOH) a 0.5 N.

Por cada tipo de segmento de teca (tres fuentes de segmentos de tallo con yemas individuales, tres
fuentes de segmentos de tallo con yema apical y tres fuentes de segmentos de tallo sin yema
apical), se sembraron 20 tejidos en BEIT de un litro (9 recipientes/ tratamiento) con cada uno de
los cuatro tratamientos obtenidos de la combinación de las hormonas 6-BAP y GA3. En total, se
establecieron 36 BEIT en el Experimento 1.

Al finalizar la siembra de los segmentos de tallo se procedió a sellar con cinta plástica transparente
la base inferior de la tapa de rosca de los BEIT para evitar la posible contaminación causada por
microorganismos que se encuentran en el ambiente.

Cuadro 1. Cuatro variantes de medios de cultivo empleados en la fase de multiplicación de

segmentos de tallo de teca

Reguladores de crecimiento
Tratamientos *6-BAP **GA3
(mg L-1) (mg L-1)
T1 0.5 0.05
T2 0.5 0.1
T3 1 0.05
T4 1 0.1
* 6-Bencil amino purina, **Ácido giberélico

Posteriormente los BEIT se trasladaron al cuarto de crecimiento donde se garantizó una intensidad
de luz de 2000 lux y 12 horas luz natural. Además, diariamente se realizó inmersión a los tejidos
por 2 minutos en los 28 días que estuvieron establecidos.

Variable evaluada
A los 28 días después de haberse realizado la siembra de segmentos de tallo, se evaluó la variable
número de hojas a 15 segmentos de tallo por cada BEIT establecido según el tipo de segmentos.

14
Número de hojas: Se contabilizó de forma visual el número de hojas nuevas producidas por los
segmentos de tallo. En plantas como la teca, la producción de hojas por planta es muy importante,
porque en la base del pecíolo, se encuentra una yema axilar que brotará cuando se separe de la
planta y en el caso de los segmentos de tallo que tienen su yema apical, al entrar en contacto con
los constituyentes del medio de cultivo líquido o semisólido continuaran con su crecimiento.

Diseño estadístico
En el experimento 1, se estableció un Diseño Completo al Azar (DCA) con una sola replica al que
se le realizó un análisis de varianza (ANDEVA) y para determinar las diferencias estadísticas entre
los tratamientos, se realizó la prueba de rangos múltiples de Duncan α = 0.05. Los datos se
procesaron y analizaron en el paquete estadístico INFOSTAT versión 2020.

4.4.2. Experimento 2. Respuesta morfogénica a la densidad de siembra

Se estudió la respuesta en el crecimiento de segmentos de tallo por efecto de la densidad de siembra
de 30, 40, 50 y 60 segmentos por BEIT de tres litros de capacidad. Se sembraron 30, 40, 50 y 60
segmentos de yemas apicales y 30, 40, 50 y 60 segmentos de yemas axilares. Cada uno
conteniendo dos pares de hojas. En este experimento, se empleó el medio de cultivo que resultó
mejor para la emisión de hojas en las plantas formadas en el experimento 1, el medio de cultivo
del tratamiento que contenía 1.00 mg L-1 de 6-BAP y 0.10 mg L-1 de GA3

Variables evaluadas
A los 28 días después de haberse establecido el experimento 2, se evaluaron las siguientes
variables:

Número de hojas: Se contabilizó de forma visual el número de hojas producidas por los
segmentos de tallo.

Longitud del tallo: Se midió con una regla milimétrica en cm, una vez extraídas las plantas bajo
condiciones de asepsia en la cámara de flujo laminar; considerando la longitud de la base de la
planta hasta la yema apical. En el caso de los segmentos de tallos que para efectos de estudio se
les eliminó la yema apical, se midió la longitud del brote principal axilar.

15
 Diseño estadístico
Para evaluar el efecto de los tratamientos, se utilizó un DCA con un arreglo bifactorial 4 x 2 (4
tipos de densidad de siembra y 2 tipos de yemas) para un total de 8 tratamientos, requiriéndose en
las 4 densidades de siembra un número de 180 tejidos y en los dos tipos de yemas 360 tejidos.
Como unidad experimental se consideró un biorreactor BEIT con capacidad de 3000 ml y después,
de 28 días, se evaluaron 15 tejidos por cada tratamiento.

A los datos obtenidos se les realizó un análisis de varianza (ANDEVA) y para determinar las
mejores medias de los tratamientos, se empleó la prueba de rangos múltiples de Duncan α = 0.05.
Los datos se procesaron y analizaron en el paquete estadístico INFOSTAT versión 2020.

4.5. Fase de enraizamiento

En esta fase, se indujo al desarrollo de un sistema radicular adecuado que permita el buen
crecimiento de los tejidos micropropagados en BEIT.

4.5.1. Experimento 3. Respuesta rizogénica de segmentos de tallos

Medio de cultivo
En este experimento, se requirió 350 segmentos de tallo apicales y 350 de tallo axilares, de los
cuales fueron extraídos de cada BEIT proveniente del experimento pasado, dentro de la cámara de
flujo. Se establecieron 5 variantes de medios de cultivo de las cuales cuatro contienen diferentes
concentraciones de la fitohormona AIA y un testigo (Cuadro 2).

Cuadro 2. Cinco variantes de medios de cultivo empleados en la fase de enraizamiento de

segmentos de tallo de teca

Tratamientos Niveles
Variantes de Concentración de
Medios de cultivo AIA (mg L-1)
1 0
2 0.25
3 0.5
4 0.75
5 1
* Ácido indol acético

16
 Variables evaluadas
A las cuatro semanas, se evaluaron las siguientes variables:

Número de hojas: Se contabilizó de forma visual el número de hojas producidas por los
segmentos de tallo.

Longitud del tallo: Se realizó las medidas con una regla milimétrica una vez extraídas las plantas
bajo condiciones de asepsia en la cámara de flujo laminar, considerando la longitud de la base de
la planta hasta la yema apical. En el caso de los segmentos de tallos que para efectos de estudio se
les eliminó la yema apical, se midió la longitud del brote principal axilar en cm.

Número de raíces: Se contabilizó de forma visual el número de raíces producidas por los
segmentos de tallo.

Vigor de las plantas: Se definieron tres escalas de vigor que fueron elaboradas en el laboratorio
de cultivo de tejidos de la Universidad Nacional Agraria (UNA), según las expresiones
morfológicas de la planta in vitro de teca:

 Vigor bajo: Hojas del segundo entrenudo con ancho de < 0.50 cm y largo < de 1 cm y
longitud de tallo < de 8 cm.
 Vigor mediano: Hojas del segundo entrenudo con ancho entre 0.50 y 1 y largo entre 1 y
2 cm, con longitud de tallo entre 8 y 10 cm.
 Vigor bueno: Hojas del segundo entrenudo con ancho > de 1cm y largo > de 2 cm, con
longitud de tallo > de 10 cm.

En la figura 7, se observan plántulas y hojas del segundo entrenudo de acuerdo con la categoría de
vigor antes mencionada.

17
Figura 7. Vigor de plántulas y hojas de teca del segundo entrenudo en la fase de enraizamiento.
a) Bajo vigor, b) Vigor mediano c) Buen vigor.
Diseño estadístico
El diseño estadístico y el análisis de varianza utilizado para determinar la diferencia entre medias,
así como el programa estadístico, fue similar al utilizado en la fase de multiplicación. Por cada
tratamiento se sembraron 70 segmentos de tallo y el análisis estadístico se realizó por tipo de yema
(con yema apical o sin yema apical) en BEIT con capacidad de 3000 ml, empleándose 350
segmentos de tallo con yema apical en los cinco tratamientos y un número similar para la siembra
de los segmentos de tallo sin yema apical. En total se sembraron 700 segmentos de tallo en 10
BEIT y después de cuatro semanas se evaluaron 30 plantas por cada tratamiento.

18
 V. RESULTADOS Y DISCUSIÓN
5.1. Experimento 1. Respuesta morfogénica de segmentos de tallo
En la fase de multiplicación se estudió la respuesta de tres tipos de segmentos de tallo (segmentos
individuales, segmentos que contenían la yema apical y segmentos con yemas axilares) cada uno
de ellos constituido con variantes de uno, dos o tres micronudos.

Los tipos de segmentos de tallo se extrajeron de plantas formadas en medio semisólido contenido
en frascos de vidrio con volumen de 200 ml. Cada fuente de micronudo se inoculó en biorreactores
modelo BEIT descrito por Castro y Maradiaga (2015) que contenían cuatro variantes de medio
de cultivo constituido por las sales básicas de Murashige y Skoog (1962) y las adiciones 0.50 y
1.0 mg L-1 de 6-BAP combinadas respectivamente con 0.05 y 0.10 mg L-1 de GA3.

5.1.1. Tipos de segmentos de tallos

Tres fuentes de segmentos de tallos con yemas individuales

La yema apical individual tuvo la menor respuesta en número de hojas en el tratamiento que se le
adicionaron 0.50 mg L-1 de 6-BAP y 0.10 mg L-1 de GA3 con una media de 1.87 hojas producidas,
aunque resultó igual estadísticamente a los tratamientos que contenían 0.50 mg L-1 de 6-BAP más
0.05 mg L-1 de GA3 y la combinación de 1.00 mg L-1 de 6-BAP con 0.05 mg L-1 de GA3 con medias
respectivas de 2.47 y 2.53 hojas.

En las yemas axilares individuales del segundo entrenudo los brotes principales lograron una
media de producción de hojas de 3.27 en la variante de medio de cultivo que contenía 0.50 mg L-
1
de 6-BAP con 0.05 mg L-1 de GA3 superando estadísticamente a las obtenidas en las variantes
de medios de cultivo que se le adicionaron 1.00 mg L-1 de 6-BAP combinado con 0.05 o 0.10 mg
L-1 de GA3 con medias respectivas de 2.40 y 2.60 hojas.

Las yemas individuales que se obtuvieron del tercer entrenudo presentaron similar
comportamiento estadístico en las medias de número de hojas de los brotes principales en los
cuatro tratamientos, como se presentan en los resultados del cuadro 3.

19
Cuadro 3. Resultados de número de hojas producidas en tres fuentes de yemas individuales
establecidas en cuatro variantes de medios de cultivo a las cuatro semanas en fase de
multiplicación

Yemas individuales
Reguladores de
crecimiento
Tratamientos Segundo Tercer
Yema apical
6-BAP GA3 entrenudo entrenudo
(mg L-1) (mg L-1)
T1 0.50 0.05 2.47 ab 3.27 a 2.67 a
T2 0.50 0.10 1.87 b 2.80 ab 2.33 a
T3 1.00 0.05 2.53 ab 2.40 b 2.00 a
T4 1.00 0.10 2.87 a 2.60 b 3.40 a
CV 20.27 12.87 25.70
Letras desiguales difieren para p <= 0.05.

Las respuestas en número de hojas de las yemas apicales presentaron menor media en la variante
de medio de cultivo que contenía la menor concentración de 6-BAP y la mayor concentración de
GA3, mientras que cuando se emplearon yemas individuales del segundo entrenudo se obtuvo el
mayor promedio de hojas en la variante de medio de cultivo que contenía las menores
concentraciones de 6-BAP y GA3.

En el caso de yemas individuales del tercer entrenudo, no se registraron diferencias estadísticas

por efecto de los tratamientos. Sin embargo, la media del tratamiento 4 fue superior en
comparación a los demás tratamientos, reflejando que con mayores concentraciones de 6-BAP y
de GA3 los brotes producen mayor número de hojas.

De los resultados anteriores, se ha comprobado que al emplear solo la yema apical para la
multiplicación de teca es menor la producción de hojas, por tanto, es menor el coeficiente de
multiplicación. La variable número de hojas es importante para evaluar el comportamiento de las
yemas debido a que en el pecíolo se encuentran yemas axilares que al inducirlas a brotar formarán
una nueva planta.

En la figura 8, se observan las plantas formadas en la fase de multiplicación de teca a las cuatro
semanas.

20
Figura 8. Plantas de teca en BEIT de 1 litro formadas en la fase de multiplicación a las cuatro
semanas.

Tres fuentes de segmentos de tallo con yema apical

Los segmentos de tallos conformados por la yema apical y un par de hojas presentaron igual
comportamiento estadístico en los cuatro tratamientos, obteniéndose medias en número de hojas
entre 3.07 y 3.60. Segmentos de tallo que contenían la yema apical y dos pares de hojas lograron
mayor media de número de hojas de 4.00 en el tratamiento que contenía 0.50 mg L -1 de 6-BAP
más 0.05 mg L-1 de GA3 y las menores medias en los tratamientos con 1.00 mg L-1 de 6-BAP más
0.05mg L-1 de GA3 y 1.00 mg L-1 de 6-BAP más 0.10 mg L-1 de GA3 con medias respectivas de
2.40 y 2.00.

La yema apical con tres pares de hojas en los tratamientos que contenían 0.50 mg L-1 de 6-BAP
más 0.05 mg L-1 de GA3 y 1.00 mg L-1 de 6-BAP más 0.05 mg L-1 de GA3 con medias respectivas
de 5.60 y 5.07 superaron a las medias de emisión de hojas obtenidas en los tratamientos 0.50 mg
L-1 de 6-BAP más 0.10 mg L-1 de GA3 y 1.00 mg L-1 de 6-BAP más 0.10 mg L-1 de GA3 que
lograron medias respectivas de 4.33 y 3.67. Los resultados del comportamiento estadístico de las
tres fuentes de segmentos de tallo que contenían yema apical se presentan en el cuadro 4.

21
Cuadro 4. Resultados de número de hojas producidas en tres fuentes de segmentos de tallo con
yemas apicales establecidas en cuatro variantes de medios de cultivo a las cuatro semanas en fase
de multiplicación

Yemas apicales
Reguladores de
crecimiento
Tratamientos Yema apical Yema apical Yema apical
con un con dos con tres
6-BAP GA3 entrenudo entrenudos entrenudos
(mg L-1) (mg L-1)
T1 0.50 0.05 3.07 ab 4.00 a 5.60 a
T2 0.50 0.10 3.60 a 3.40 ab 4.33 b
T3 1.00 0.05 3.53 a 2.40 bc 5.07 a
T4 1.00 0.10 3.27 a 2.00 c 3.67 b
CV 11.19 18.25 5.35
Letras desiguales difieren para p <= 0.05.

Los resultados obtenidos en número de hojas en los tres tipos de segmentos de tallos con yema
apical fueron superiores al número de hojas logradas con segmentos de tallo con yemas
individuales, esta respuesta pudo atribuirse a que las yemas individuales tienen menor reserva
nutritivas contenidas en los tejidos cuyo efecto persiste después de las cuatro semanas.

En la figura 9, se presenta el modelo de biorreactores BEIT conteniendo los tres tipos de

entrenudos cada uno con su yema apical.

Figura 9. Plantas de teca formadas en la fase de multiplicación. Izquierda, a partir de yemas

apicales y un par de hojas. Centro, a partir yemas apicales y dos pares de hojas. Derecha, a partir
yemas apicales y tres pares de hojas.

22
Tres fuentes de segmentos de tallo con yemas axilares

El número de hojas producidas por los brotes axilares principales que se formaron en los
segmentos de tallo con un par de hojas se obtuvo una media de 2.35 hojas en el tratamiento que
se le adicionaron 0.50 mg L-1 de 6-BAP más 0.05 mg L-1 de GA3, tratamiento que resultó
significativamente inferior únicamente a la media de número de hojas de 3.35 que presentó el
brote principal en el tratamiento con 1.00 mg L-1 de 6-BAP más 0.10 mg L-1 de GA3.

En la variable número de hojas del brote principal las fuentes de segmentos de tallo que tenían
dos o tres entrenudos no presentaron diferencias estadísticas en los cuatro tratamientos. En los
segmentos de tallo que contenían dos entrenudos, los brotes principales que se formaron
registraron un rango de medias entre 3.20 y 3.60 hojas, resultó inferior respecto a los segmentos
de tallos con tres entrenudos con medias entre 3.60 y 4.30 hojas.

Tomando en cuenta el comportamiento estadístico de los diferentes segmentos de tallo en los

cuatro tratamientos, consideramos que en la fase de multiplicación de teca se debe experimentar
con otras variantes de medios de cultivo tanto en la adición sola o combinada de diferentes
reguladores de crecimiento y las concentraciones en que se deben de agregar. En el cuadro 5, se
presentan los resultados del comportamiento estadístico de las tres fuentes de segmentos de tallo.

Cuadro 5. Resultados de número de hojas producidas en tres fuentes de segmentos de tallo con
yemas axilares establecidas en cuatro variantes de medios de cultivo a las cuatro semanas en fase
de multiplicación

Yemas axilares
Reguladores de
crecimiento
Tratamientos Con un Con dos Con tres
6-BAP GA3 entrenudo entrenudos entrenudos
(mg L-1) (mg L-1)
T1 0.50 0.05 2.35 b 3.20 a 3.60 a
T2 0.50 0.10 2.70 ab 3.50 a 3.90 a
T3 1.00 0.05 3.00 ab 3.50 a 4.30 a
T4 1.00 0.10 3.35 a 3.60 a 4.20 a
CV 10.96 4.90 12.50
Letras desiguales difieren para p <= 0.05.

23
En la Figura 10, se observan las plantas formadas en la fase de multiplicación de teca a partir de
tres fuentes de yemas axilares.

Figura 10. Plantas de teca formadas en la fase de multiplicación. Izquierda, a partir de yemas
axilares con un entrenudo. Centro, a partir yemas axilares con dos entrenudos. Derecha, a partir
yemas axilares con tres entrenudos.
Un comportamiento generalizado de los diferentes segmentos de tallo empleados en el estudio de
multiplicación en BEIT de un litro a las cuatro semanas, es que se presentó brotación axilar de
una sola yema que fue la que logró formar una sola planta de teca y no presentaron síntomas de
hiperhidricidad, contario a lo reportado por Aguilar et al., (2019) con el empleo de
concentraciones de 0.50 mg L-1 de BAP y la hormona Kinetina obtuvieron una brotación axilar de
2.6 con 60 tejidos y 3.5 con 30 tejidos y porcentajes de hiperhidricidad respectivos de 42 y 75%,
esta respuesta la obtuvieron empleando biorreactores modelo RITA® aplicando dos frecuencias
de inmersión cada 24 horas cada una con duración de un minuto y permanencia de los tejidos por
45 días.

Un estudio por parte de Quiala et al (2012) demostró que el empleo de BIET, durante la fase de
multiplicación de teca en ausencia de la hormona 6-Bencilaminopurina (6-BAP) o con una
concentración de 0.5 mg L-1, permite obtener plantas sin desórdenes fisiológicos y con alta
supervivencia durante la fase de aclimatación.

Un factor fisiológico que posiblemente limitó la brotación de todos los tipos de yema que crecieron
en los BEIT puede estar determinado por la composición y concentraciones de reguladores del
crecimiento que se emplearon en nuestro estudio como las citoquininas (6-BAP) y el ácido

24
giberélico (GA3), debido a que el uso posterior de AIA en el experimento 3 generó una mejor
brotación de hojas.

En el primer experimento de multiplicación solo se evaluó la producción de hojas de las plantas

formadas de cada tipo de tejido, para conocer si las variantes de medios de cultivo tenían un efecto
determinante en la eliminación de la dominancia tanto en los segmentos de tallo que no se les
eliminó la yema apical (yemas individuales, con dos o tres entrenudos) como en el caso de los
segmentos a las que se les eliminó la yema apical (yemas individuales o las conformadas por dos
o tres entrenudos).

Debido a los resultados obtenidos en el experimento 1, la respuesta de los diferentes tipos de

tejidos con los que se experimentó en los biorreactores BEIT demostró que la teca tiene la
capacidad de activar morfológicamente los brotes de yemas contenidos en segmentos de tallos ya
sea de forma individual, con dos o tres entrenudos.

5.2. Experimento 2. Respuesta morfogénica a la densidad de siembra

En el experimento anterior, la respuesta en número de hojas de los segmentos con yemas
individuales, segmentos de tallo con yema apical y segmentos de tallo con yemas axilares, se
obtuvo un buen comportamiento estadístico en el tratamiento que contenía 1.00 mg L-1 de 6- BAP
más 0.10 mg L-1 de GA3, se seleccionó como variante de medio de cultivo para definir la mejor
densidad de siembra de segmentos axilares y apicales cada uno conteniendo dos pares de hojas y
sembradas de forma individual en BEIT con capacidad de 3 litros.

En la evaluación del experimento de densidad de siembra, se incorporó la variable longitud de

tejido, en el caso de las yemas axilares, se evalúa en base a la brotación del tallo principal y los
tejidos que contenía yemas apicales la longitud se mide teniendo como base los nuevos entrenudos
producidos por los segmentos de tallo.

En la variable longitud de planta no se presentaron diferencias estadísticas entre las densidades de

siembra de 30, 40, 50 y 60 tanto en segmentos de tallo de yemas axilares como de apicales. En
número de hojas las yemas apicales con densidades de siembra de 30 y 40 segmentos de tallo
(medias de 5.80 y 5.53) y las yemas axilares con 40 segmentos de tallos (media de 5.07), superaron
significativamente a los segmentos de yemas axilares con densidades de siembra de 30 y 50 con

25
número de hojas respectivo de 3.53 y 3.73. Las densidades de siembra en número de 50 y 60
segmentos de tallo con yemas apicales y la densidad de 60 segmentos con yemas axilares el rango
de las medias de número de hojas fue entre 4.40 y 4.47. Los resultados de densidad de siembra se
presentan en el cuadro 6.

Cuadro 6. Resultados de longitud de planta y número de hojas producidas en segmentos de tallo

con dos entrenudos en yemas axilares y apicales inoculadas en BEIT de tres litros a las cuatro
semanas en fase de multiplicación

Longitud de Número de
Tratamientos Densidad Tipo por Yema
planta hojas

T1 30 Yema axilar 3.63 a 3.53 c

T2 30 Yema apical 3.60 a 5.80 a
T3 40 Yema axilar 3.37 a 5.07 ab
T4 40 Yema apical 3.28 a 5.53 ab
T5 50 Yema axilar 2.40 a 3.73 c
T6 50 Yema apical 2.70 a 4.53 bc
T7 60 Yema axilar 3.30 a 4.40 bc
T8 60 Yema apical 3.00 a 4.47 bc
CV 19.88 12.95
Letras desiguales difieren para p <= 0.05.

Los resultados obtenidos demuestran que es posible mejorar la eficiencia de la micropropagación

de teca cuando se emplean biorreactores con capacidad de tres litros, estableciendo 60 yemas
axilares o apicales con dos entrenudos, porque significa un ahorro en cantidad de biorreactores
como de sus accesorios y además se reduce la cantidad de medios de cultivo y el espacio requerido
en los estantes donde se instala el sistema de inmersión.

Castro y Maradiaga (2015) en plátano CEMSA ¾ determinaron que el número de brotes axilares
no se registraron diferencias significativas por efecto de las densidades de siembra de 30, 40, 45
y 50 brotes por BEIT, pero observaron que con la siembra de 50 brotes axilares la media de número
de hojas fue menor y mayor el alargamiento del pseudotallo como respuesta a la competencia de
las plantas por la luz dentro del BEIT.

26
La teca tiene entre la base del pecíolo y el tallo yemas axilares en estado de dormancia que se
activarán si se separan en entrenudos, mecanismo que será de respuesta rápida o lenta en
dependencia de las condiciones ambientales dentro de los recipientes de propagación in vitro, de
las concentraciones y del tipo de reguladores de crecimiento. Esta respuesta morfológica nos
indica que es importante inducir a la planta a producir hojas en cantidad suficiente que garantice
obtener un buen coeficiente de multiplicación considerando que la conformación pecíolo y
segmento de tallo es la fuente de producción de nuevas plantas.

En la figura 11, se observan plantas formadas a las cuatro semanas en BEIT de tres litros obtenidas
a partir segmentos de tallo con dos entrenudos en yemas axilares y yemas apicales sembrados a
una densidad de 60 segmentos BEIT de tres litros.

Figura 11. Plantas formadas a las cuatro semanas en fase de multiplicación a partir segmentos de
tallo con dos entrenudos inoculados a una densidad de 60 yemas en BEIT de tres litros. Izquierda
yemas axilares. Derecha yemas apicales.
En el presente estudio en los dos experimentos de multiplicación en los que se emplearon medios
de cultivo de consistencia líquida y la adición de citoquinina (6-BAP) y giberelina, no se observó
la formación de plantas con alteraciones fisiológicas como las reportadas por Aguilar et al., (2019)
quienes afirman que las condiciones de cultivo que promueven un crecimiento rápido a menudo
dan como resultado plantas estructural y fisiológicamente anormales.

27
 5.3.Experimento 3. Respuesta rizogénica de los segmentos de tallo
5.3.1. Segmentos de tallo de dos entrenudos con yema apical
En longitud de tallo no se presentaron diferencias estadísticas entre las medias obtenidas en el
tratamiento testigo que no contenía AIA y los tratamientos que se le adicionaron 0.25, 0.50 y 1.00
mg L-1 de AIA con medias respectivas de 10.94, 11.45, 11.58 y 11.15 cm. El tratamiento testigo
únicamente fue superado por la media 12.15 cm que se obtuvo en el tratamiento con 0.75 mg L-1
de AIA. Los resultados se presentan en la figura 12.

Figura 12. Efecto en la longitud del tallo de teca por la adición de concentraciones de 0, 0.25,
0.50, 0.75 y 1.00 mg L-1 de AIA. Las plantas se formaron a partir de yemas apicales. Letras
desiguales difieren para p <= 0.05.
En la variable número de hojas se presentaron diferencias estadísticas entre la media de 7.80 hojas
producidas en el tratamiento con 0.75 mg L-1 de AIA y las medias de 6.20 y 6.10 hojas que se
obtuvieron en los tratamientos con 1.00 mg L-1 de AIA y el tratamiento testigo respectivamente,
aunque los dos últimos tratamientos descritos resultaron con similar respuesta estadística a los
tratamientos que contenían 0.25 y 0.50 mg L-1 de AIA con medias respectivas de 6.80 y 7.20
respectivamente. En la figura 13, se presentan los resultados.

28
Figura 13. Número de hojas producidas en plantas de teca por la adición de concentraciones de
0, 0.25, 0.50, 0.75 y 1.00 mg L-1 de AIA. Las plantas se formaron a partir de yemas apicales. Letras
desiguales difieren para p <= 0.05.
En la variable número de raíces no se presentaron diferencias estadísticas entre las medias de los
diferentes tratamientos con valores de las medias entre 1.45 y 185 raíces. De acuerdo con estos
resultados, consideramos que el AIA agregado en las concentraciones descritas y su efecto como
hormona vegetal no posee el efecto adecuado para el enraizamiento de plantas in vitro de teca.

En relación con la producción de raíces obtenidas en las plantas se considera que fue mínima,
debido a que, en la teca, el AIA por sí sola no induce lo suficientemente la rizogénesis y porque
el genotipo de la teca tiene una tendencia morfogenética que limita el enraizamiento en
condiciones in vitro.

Autores como Daquinta et al., (2021) reportan que el enraizamiento de las plantas in vitro de teca,
la realizaron en condiciones in vitro tratadas con 1000 mg L-1 de ANA y 1000 mg L-1 de AIB que
presentaron la mayor cantidad de raíces (2) y mayor longitud de estas (3.80 cm).

Mendoza et al., (2007) observaron que después de 4 semanas de cultivo in vitro de teca, el
enraizamiento tuvo lugar sólo en presencia de auxina o putrescina. La auxina IBA solo indujo 30
- 50% de enraizamiento, produciendo raíces hinchadas y quebradizas. La adición de solo
putrescina (160 mg L-1) promovió alrededor del 70% del enraizamiento. El enraizamiento alcanzó
el 100% cuando se combinó putrescina con 0.5 mg L-1 IBA.

29
Una alternativa para estudios posteriores es experimentar con combinaciones de otros tipos de
auxinas o realizar la fase de enraizamiento en condiciones ex vitro, como lo sugieren Aguilar et
al., (2019) porque la micropropagación de la teca se puede simplificar en dos fases in vitro, el
establecimiento y la multiplicación; seguido de enraizamiento ex vitro y la aclimatación. Esto
implicaría una reducción de los costes de producción, ya que la mayor parte de la multiplicación
se realizaría en biorreactores RITA®.

Aldelnour y Muñoz (2005), empleando brotes apicales con 2 o 3 nudos producidos durante la fase
de multiplicación transferidos a medios de enraizamiento con la concentración completa de las
sales MS o reducida a la mitad y en ausencia de reguladores de crecimiento, observaron que
únicamente el 8% y el 18% respectivamente, desarrollaron raíces. Además, Castro et al., (2002)
señalan que en teca los porcentajes de enraizamiento in vitro son muy bajos, particularmente si se
requiere propagar masivamente esta especie forestal.

En la figura 14, se presentan los resultados de enraizamiento en plantas in vitro de teca y en la

figura 15, se observan plantas regeneradas a partir de yemas apicales.

Figura 14. Efecto en el enraizamiento de teca por la adición de concentraciones de 0, 0.25, 0.50,
0.75 y 1.00 mg L-1 de AIA. Las plantas se formaron a partir de yemas apicales. Letras desiguales
difieren para p <= 0.05.

30
Figura 15. Plantas formadas en BEIT de tres litros a partir segmentos de tallo con dos entrenudos
con yema apical a las cuatro semanas en fase de enraizamiento.
Por la respuesta favorable de los segmentos de tallo de teca en la fase de enraizamiento, fue posible
diferenciar el crecimiento de las plantas en tres categorías de vigor: a) con bajo vigor, plantas con
longitud de tallo entre 3 y 6 cm. b) mediano vigor, plantas con longitud de tallo entre 7 y 9 cm. c)
buen vigor superior a los 10 cm.

En los tratamientos que contenían AIA las plantas presentaron un buen vigor en porcentajes
comprendidos entre el 60 y 70%. En los tratamientos que se les adicionaron 0.25, 0.50 y 0.75 mg
L-1 de AIA las plantas evaluadas no presentaron la categoría de crecimiento de bajo vigor. Solo
en los tratamientos testigo y con 1 mg L-1 de AIA se observaron las tres categorías de vigor.

En la figura 16, se presentan los porcentajes de las tres categorías de vigor de las plantas in vitro
de teca.

31
Figura 16. Vigor de plantas in vitro de teca (Buen vigor, mediano y bajo vigor) obtenidas de
segmentos de tallo con su yema apical por la adición de concentraciones de 0, 0.25, 0.50, 0.75 y
1.00 mg L-1 de AIA. Valores en porcentajes.
5.3.2. Segmentos de tallo de dos entrenudos sin yema apical
Los tratamientos que se le adicionaron dosis de 0.50 y 0.75 mg L-1 de AIA con medias respectivas
en longitud de planta de 12.35 y 12.37 cm superaron significativamente a las medias logradas en
los tratamientos sin adición de AIA y con 1 mg L-1 de AIA. El tratamiento con 0.25 mg L-1 de
AIA solo superó estadísticamente al tratamiento testigo (10.96) con medias respectivas de 11.96
y 11.40 cm. Los resultados se presentan en la figura 17.

Figura 17. Efecto en la longitud del tallo de teca por la adición de concentraciones de 0, 0.25, 0.50, 0.75
y 1.00 mg L-1 de AIA. Las plantas se formaron a partir de yemas axilares. Letras desiguales difieren para
p <= 0.05.

32
En la variable número de hojas se presentaron diferencias estadísticas que favorecieron a los
tratamientos que contenían 0.50 y 0.75 mg L-1 de AIA con medias respectivas de 7.40 y 7.50 en
comparación a la media de 6.65 que se obtuvo en el tratamiento con 1 mg L-1 de AIA, pero la
media del tratamiento que contenía mayor concentración de AIA resultó similar en respuesta
estadística a las medias de 7.15 y 7.30 hojas que presentaron respectivamente los tratamientos
testigo y con 0.25 mg L-1 de AIA. En la figura 18, se presentan los resultados estadísticos de la
variable número de hojas.

Figura 18. Efecto en el número de hojas producidas en plantas de teca por la adición de
concentraciones de 0, 0.25, 0.50, 0.75 y 1.00 mg L-1 de AIA. Las plantas se formaron a partir de
yemas axilares. Letras desiguales difieren para p <= 0.05.
En la evaluación de la variable número de raíces por planta no se presentaron diferencias
estadísticas entre los tratamientos. Los valores de las medias oscilaron entre 1.20 y 1.60 raíces.
Los resultados se observan en la figura 19.

33
Figura 19. Efecto en número de raíces producidas en plantas de teca por la adición de
concentraciones de 0, 0.25, 0.50, 0.75 y 1.00 mg L-1 de AIA. Las plantas se formaron a partir de
yemas axilares. Letras desiguales difieren para p <= 0.05.
En la figura 20, se observan plantas regeneradas a partir de segmentos de tallos sin yemas apical.

Figura 20. Plantas formadas en BEIT de tres litros a partir segmentos de tallo con dos entrenudos
sin yema apical a las cuatro semanas en fase de enraizamiento.
El porcentaje plantas que presentaron buen vigor se presentó entre los porcentajes del 50 al 70%
en los tratamientos sin adición de AIA y a los que contenías 0.25, 0.50 y 0.75 mg L-1 de AIA.

En estos mismos tratamientos el porcentaje de plantas con bajo vigor fue del 5%. Mientras que en
el tratamiento con 1 mg L-1 de AIA el porcentaje de plantas con buen vigor y bajo vigor fue de 35

34
y 30% respectivamente. Se obtuvieron plantas con mediano vigor en porcentajes que oscilaron los
entre el 25 y 45%.

En la figura 21, se presentan los porcentajes de las tres categorías de vigor de las plantas de teca
en fase de enraizamiento en los cinco tratamientos.

Figura 21. Vigor de plantas in vitro de teca (Buen vigor, mediano y bajo vigor) obtenidas de
segmentos de tallo con yema axilares por la adición de concentraciones de 0, 0.25, 0.50, 0.75 y 1
mg L-1 de AIA.
Las plántulas obtenidas en la fase de enrizamiento fueron mejores a las obtenidas en los
experimentos de multiplicación, indicando que la teca responde mejor a las adiciones de AIA que
a las combinaciones de 6-BAP con GA3.

35
 VI. CONCLUSIONES
En la fase de multiplicación, la siembra de yemas apicales individuales en BEIT de un litro fue
mejor la respuesta en producción de hojas con concentraciones hormonal de 0.50 mg L-1 de 6-
BAP con 0.05 y 0.10 mg L-1 de GA3 o las concentraciones de 1.00 mg L-1 de 6-BAP y 0.10 mg L-
1
de GA3. Las yemas axilares del segundo entrenudo emitieron mayor número de hojas en los
medios de cultivo que se les agregaron 0.50 mg L-1 de 6-BAP combinados con 0.05 o 0.10 mg L-
1
de GA3. Yemas axilares del tercer entrenudo mostraron similar respuesta estadística en los 4
tratamientos.

La respuesta estadística en número de hojas con la siembra de segmentos de tallo que contenían
yemas apicales con un entrenudo fue similar en todas las combinaciones de 6-BAP y de GA3. Los
segmentos de tallo conteniendo yemas apicales con dos entrenudos produjeron mayor cantidad de
hojas 0.50 mg L-1 de 6-BAP agregado con 0.05 o 0.10 mg L-1 de GA3. Segmentos de tallo con
yemas apicales de dos entrenudos fue mejor la producción de hojas en los medios de cultivo que
contenían 0.50 o 1.00 mg L-1 de 6-BAP ambos adicionados con 0.05 mg L-1 de GA3.

La siembra individual de yemas apicales o yemas axilares con dos entrenudos a densidades de 30,
40, 50 y 60 tejidos por BEIT de tres litros presentaron igual comportamiento estadístico en la
variable longitud de planta. En la variable número de hojas producidas fue mejor estadísticamente
con densidades de 30 tejidos de yemas apicales y con densidad de 40 tejidos con yemas apicales
y yemas axilares.

En la fase de enraizamiento, la siembra de tejidos de yemas apicales y yemas axilares con dos
entrenudos en BEIT de tres litros, resultaron favorables las adiciones de 0.25, 0.50 y 0.75 mg L-1
de AIA en las variables longitud de plantas, número de hojas y número de raíces.

En tejidos de yemas apicales con dos entrenudos en los tratamientos de 0.25, 0.50 y 0.75 mg L-1
de AIA, las plantas presentaron la categoría de buen vigor con porcentajes entre 60 y 70%. En
tejidos con yemas axilares y dos entrenudos en los tratamientos 0.25, 0.50 y 0.75 que se les agregó
AIA, se obtuvo buen vigor con porcentajes de plantas entre el 60 y el 70%.

36
 VII. RECOMENDACIONES
Experimentar en la fase de multiplicación, el efecto del AIA en la morfogénesis de yemas apicales
y axilares, debido a que, con el uso de esta hormona en la fase de enraizamiento, se logró observar
una excelente brotación de hojas.

Extender la fase de enraizamiento de cuatro a seis semanas de permanencia en los BEIT, porque
en las últimas 2 semanas, se observó una gran respuesta en los sistemas radiculares de los tejidos.

Estudiar la respuesta en la producción de raíces, longitud y número de hojas de las plantas in vitro
en fase de aclimatación, ya que en este estudio no se disponían de las condiciones requeridas para
la supervivencia de las plántulas de teca en vivero.

Para efectos de propagación comercial consideramos que empleo de segmentos de tallo con o sin
yema apical ambas con dos o tres entrenudos presentaron buena respuesta en solo cuatro semanas.

37
 VIII. LITERATURA CITADA
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41
 IX. ANEXO
Anexo 1. Medio basal Murashige y Skoog (1962)
Macronutrientes
NH4NO3 1.65 g/l
KNO3 1.9 g/l
MgSO4.7H2O 0.37 g/l
CaCl2.aq 0.33 g/l
KH2PO4 0.17 g/l
Micronutrientes
KI 0.83 mg/l
H3BO3 6.2 mg/l
MnSO4.4H2O 22.3 mg/l
ZnSO4.7H2O 8.6 mg/l
Na2MoO4.2H2O 0.25 mg/l
CoCl2.6H2O 0.025 mg/l
CuSO4.5H2O 0.025 mg/l
Na2.EDTA 37.3 mg/l
FeSO4.7H2O 27.8 mg

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