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FICHA TÉCNICA
CALDO CE
DETECCIÓN Y ENUMERACIÓN DE ESCHERICHIA COLI PRESUNTIVA
1 USO PREVISTO
El caldo EC (abreviatura de Escherichia coli) es un medio selectivo utilizado para la confirmación de E. coli en agua, leche y otros productos
alimenticios, así como en mariscos vivos.
La composición típica del caldo responde a la definida en el método normalizado de enumeración presuntiva de Escherichia coli , técnica MPN (NF
ISO 7251).
2 HISTORIA
En 1943, Hajna, Perry y Darby desarrollaron el medio para la detección de coliformes, y más específicamente, de E. coli en productos alimenticios.
Estos autores analizaron los resultados de 11 laboratorios que analizaron una amplia variedad de muestras de agua, leche y mariscos. Los
resultados obtenidos demostraron una alta especificidad del medio para los coliformes. En 1964, Fishbein y Surkiewicz utilizaron el caldo EC para
la confirmación de Escherichia coli en productos congelados y frutos secos. Descubrieron que la prueba era óptima cuando la incubación se limitaba
a una duración de 24 horas a 45,5 °C.
3 PRINCIPIOS
El medio corresponde al caldo lactosado tamponado, con sales biliares adicionadas, cuyo objetivo es inhibir el desarrollo de esporulados y
enterococos, promoviendo al mismo tiempo el crecimiento de Escherichia coli .
El desarrollo de coliformes y especialmente de E. coli se demuestra a través de la aparición de turbidez asociada con la producción de gas en un
tubo Durham después de la fermentación de lactosa.
4 COMPOSICIÓN TÍPICA
La composición se puede ajustar para obtener un rendimiento óptimo.
Para 1 litro de medio:
Triptona .................................................................................................................. 20,00 g
Lactosa.......................................................................................................................... 5,00 g
Sales biliares n°3 ............................................................................................................. 1,50 g
Fosfato dipotásico.................................................................................................. 4,00 g
Fosfato monopotásico............................................................................................. 1,50 g
Cloruro de sodio ....................................................................................................... 5,00 g
pH del medio listo para usar a 25 °C: 6,8 ± 0,2.
5 PREPARACIÓN
• Disolver 37,0 g de medio rehidratado (BK162) en agua destilada o desmineralizada. Reconstitución:
• Mezclar lentamente hasta su completa disolución. 37,0 g/L
• Dispensar en tubos de 10 mL, cada uno conteniendo un tubo Durham.
• Esterilizar en autoclave a 121 °C durante 15 minutos. Esterilización:
• Después de enfriarse, los tubos de Durham no deben contener aire atrapado. 15 minutos a 121 °C
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6 INSTRUCCIONES DE USO
• De un tubo de medio de enriquecimiento selectivo, (Laurilsulfato BK010) que presente opacidad, Inoculación:
turbidez o producción de gas, inocular un tubo de caldo EC con asa. Un asa de inóculo
• Incubar en un baño de agua con temperatura controlada durante 24 horas a 44 ± 1 °C. En el
Incubación:
ausencia de producción de gas, prolongar la incubación hasta 48 horas.
24 h a 48 h a 44 °C
7 RESULTADOS
Observe la producción de gas en los tubos de Durham.
Si el caldo CE presenta producción de gas, confirmar la cepa mediante la prueba de indol en Agua Peptona (BK084).
Se consideran positivos para Escherichia coli todos los tubos que presenten desarrollo de gas en caldo EC además de ser indol positivos.
8 CONTROL DE CALIDAD
Medio deshidratado : polvo blanco, fluido y homogéneo.
Medio preparado : solución ámbar clara y límpida.
Respuesta típica del cultivo después de 24 y 48 horas de incubación a 44 °C, método cualitativo (NF EN ISO 11133):
Microorganismos Crecimiento
Escherichia coli WDCM 00012 Bueno, puntuación 2
Escherichia coli WDCM 00013 Bueno, puntuación 2
Pseudomonas aeruginosa WDCM 00025 Inhibido
9 ALMACENAMIENTO / VIDA ÚTIL
Medio deshidratado: 230 °C.
La fecha de caducidad está indicada en la etiqueta.
Medio preparado en tubos (*) : 180 días a 225 °C.
(*) Valor de referencia determinado en condiciones de preparación estándar, siguiendo las instrucciones del fabricante.
10 EMBALAJE
Medios deshidratados:
Botella de 500 g .............................................................................................................................................................BK162HA
11 BIBLIOGRAFÍA
Hajna, AA, y Perry, CA 1943. Estudio comparativo de medios presuntivos y confirmatorios para bacterias del grupo coliforme y para
estreptococos fecales. Am. J. Public Health, 33: 550556.
Fishbein, MA y Surkiewicz, BF. 1964. Comparación de la recuperación de Escherichia coli de alimentos congelados y frutos secos
mediante incubación confirmatoria en medio EC a 44,5 y 45,5 °C. Appl. Microb., 12: 127131.
NF ISO 7251. Julio de 2005. Microbiología de alimentos. Método horizontal para la detección y enumeración de Escherichia coli
presunta . Técnica del número más probable.
12 INFORMACIÓN ADICIONAL
La información proporcionada en las etiquetas prevalece sobre las formulaciones o instrucciones descritas en este documento y son
susceptibles de modificación en cualquier momento, sin previo aviso.
Código del documento: EC BROTH_ENv9
Fecha de creación: 092000
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Actualizado Origen de la revisión: Corrección de fórmula típica e instrucciones de uso.
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