INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL
ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS
INGENIERÍA EN SISTEMAS AMBIENTALES
Laboratorio de Bioquímica
4AV2
Práctica 8: Reacciones de carbohidratos
Integrantes:
de la Cruz Padilla Ernesto
Moreno Roman Hayde
Quintana Cid Lizeth
Profesora: Rocío del Carmen Guzmán Ibarra
Fecha de realización: 09/06/2025
Fecha de entrega: 20/06/25
INTRODUCCIÓN
Los carbohidratos son biomoléculas esenciales compuestas principalmente por
carbono, hidrógeno y oxígeno. Desempeñan múltiples funciones biológicas, entre
las que destacan la provisión de energía inmediata, el almacenamiento energético y
la participación en estructuras celulares. Se clasifican, según su complejidad, en
monosacáridos, disacáridos, oligosacáridos y polisacáridos. Su estudio requiere el
uso de diversas pruebas cualitativas que permiten identificar su presencia,
estructura funcional y tipo de enlace.
Una de las pruebas más generales es la reacción de Molish, utilizada para detectar
carbohidratos en general. Esta prueba se basa en la deshidratación de los azúcares
en medio ácido, formando derivados furfúricos que reaccionan con α-naftol para
generar un anillo violeta característico en la interfase.
La prueba de Tollens permite identificar azúcares reductores mediante la reducción
del ion plata (Ag+ a plata metálica (Ag0), formando un depósito brillante en las
paredes del tubo de ensayo. Por su parte, la prueba de Fehling también identifica
azúcares reductores, pero lo hace mediante la reducción de iones cúpricos (Cu2+) a
óxido cúprico (Cu2O), un precipitado rojo ladrillo que indica la presencia de grupos
aldehído libres.
La prueba de Seliwanoff permite diferenciar aldosas de cetosas, aprovechando que
estas últimas reaccionan más rápidamente con el resorcinol en medio ácido,
generando un color rojo intenso. Esta prueba es especialmente útil para identificar
estructuras cetónicas como la fructosa.
La prueba de solubilidad se utiliza para observar el comportamiento de los
carbohidratos en distintos solventes polares o apolares, y permite inferir
propiedades estructurales como el tamaño y la ramificación molecular.
Finalmente, la prueba con yodo permite detectar polisacáridos, especialmente
almidón, mediante la formación de un complejo de color azul oscuro. Esta reacción
ocurre por la interacción del yodo con la estructura helicoidal del almidón, lo que da
lugar a un cambio visible de color.
En conjunto, estas pruebas cualitativas ofrecen una aproximación eficaz para la
identificación y caracterización de distintos tipos de carbohidratos, con aplicaciones
en química orgánica, bioquímica y análisis de alimentos.
OBJETIVO
● Analizar las propiedades características de los carbohidratos, derivadas de su
estructura, realizando reacciones generales de identificación.
RESULTADOS
Reacciones
Molish Tollens Seliwanoff Fehling Solubilidad Yodo
Glucosa + - + + + -
Arabinosa * + * * * *
Maltosa * * * + * -
Sacarosa + * + - + *
Fructosa + + + + * *
Glucógeno * * * * * +
Almidón + - + - + +
Dextrina * * * + * +
Tabla 1. Resultados positivos (+) y negativos (-) de las pruebas realizadas y no realizadas
(*) para carbohidratos.
DISCUSIÓN
❖ Molish-Udransky
La reacción de Molisch es una prueba cualitativa general para la detección de
carbohidratos. Fue desarrollada por el químico Hans Molisch y se basa en la
capacidad de los azúcares para formar compuestos de furfural cuando se someten a
condiciones ácidas fuertes, como las que proporciona el ácido sulfúrico
concentrado. Es una de las pruebas más utilizadas en bioquímica y química
orgánica para confirmar la presencia de azúcares en una muestra (Lehninger,
Nelson, & Cox, 2006).
Cuando se lleva a cabo el ensayo, los polisacáridos y disacáridos presentes en la
muestra primero se hidrolizan bajo acción del ácido sulfúrico a sus unidades
monosacáridas. Posteriormente, estos monosacáridos sufren una deshidratación
que los transforma en furfural (en el caso de pentosas) o en 5-hidroximetilfurfural (en
el caso de hexosas). Estas sustancias, altamente reactivas, se condensan con el
reactivo de Molisch, que consiste en una solución de α-naftol en etanol, dando lugar
a un compuesto púrpura-violeta visible en la interfase entre las dos soluciones (Voet
& Voet, 2011).
Este anillo de color violeta constituye un resultado positivo y confirma la presencia
de carbohidratos en la muestra analizada. El ensayo de Molish es altamente
sensible, no es específico, ya que no distingue entre diferentes tipos de azúcares.
Por lo tanto, su utilidad se centra en la detección cualitativa general, siendo
necesario emplear pruebas adicionales para identificar el tipo exacto de
carbohidrato presente.
Figura 1. Reacción de Molish-Udransky. Reacción entre carbohidratos y alfa naftol para
formar el compuesto furfural.
La figura 1 representa la reacción de Molish, detallando el mecanismo químico entre
el 5-hidroximetilfurfural (producto de la deshidratación de azúcares) y el α-naftol, en
presencia de un medio fuertemente ácido.
Figura 2. Resultados positivos de la reacción de Molish para fructosa, glucosa, sacarosa y
almidón, respectivamente.
❖ Tollens
En esta reacción, una pentosa (como la arabinosa) reacciona con floroglucinol
(1,3,5-trihidroxibenceno) bajo condiciones ácidas, produciendo un compuesto de
color rojo característico. Esta prueba se utiliza para la identificación cualitativa de
pentosas.
Implica una reacción de condensación entre una pentosa y el floroglucinol
(1,3,5-trihidroxibenceno). Bajo condiciones ácidas, las pentosas sufren una reacción
de deshidratación, formando furfural como intermediario. Este compuesto, que
contiene un grupo aldehído reactivo, se condensa posteriormente con dos
moléculas de floroglucinol, dando lugar a un producto altamente conjugado que se
manifiesta por la aparición de un color rojo intenso, característico de esta reacción.
Para los reactivos analizados, da positivo con un color entre rojo y naranja para la
arabinosa y la fructosa, la arabinosa es el único reactivo que solo tiene 5 carbonos
en su estructura (pentosa) por lo tanto produce furfural, la glucosa al tener 6
carbonos y la sacarosa y almidón contienen más al ser un disacárido y un
polisacárido respectivamente, no reaccionan.
En medio ácido, la fructosa sí puede reaccionar mediante un mecanismo diferente:
la deshidratación ácida. Este proceso implica la eliminación de tres moléculas de
agua de la fructosa, lo cual da lugar a la formación de un compuesto intermedio
altamente reactivo denominado 5-hidroximetilfurfural (HMF).
Una vez formado, el 5-hidroximetilfurfural puede reaccionar con compuestos
fenólicos como el floroglucinol a través de reacciones de condensación, formando
productos con estructuras aromáticas extendidas que presentan coloración visible.
Aunque el color obtenido con fructosa es menos intenso y de tonalidad marrón o
naranja.
Figura 3. Resultados positivos de la reacción de Tollens para arabinosa, fructosa y almidón,
respectivamente, además se observa el tubo testigo.
❖ Seliwanoff
La reacción de Seliwanoff se utiliza para diferenciar aldosas de cetosas, ya que
estas últimas se deshidratan más rápidamente en medio ácido, formando derivados
de furfural que reaccionan con resorcinol para producir un color rojo intenso
(Seliwanoff, 1887; Nelson & Cox, 2005).
La fructosa, que es una cetosa, responde así, generando un color rojo fuerte debido
a su rápida deshidratación (Brown et al., 2012). Por otro lado, la glucosa, una
aldosa, se deshidrata más lentamente, produciendo un color naranja débil al
reaccionar con el reactivo (Voet & Voet, 2011).
La sacarosa, aunque es un disacárido no reductor, bajo condiciones ácidas se
hidroliza en glucosa y fructosa; la fructosa se deshidrata rápido y la glucosa más
lento, por lo que el color resultante es un naranja rojizo, mezcla de ambos tonos
(Fennema, 1996).
Finalmente, el almidón, un polisacárido formado por unidades de glucosa, se
hidroliza parcialmente en medio ácido, liberando glucosa en menor cantidad y con
más lentitud, lo que produce un color amarillo paja menos intenso (Whistler &
BeMiller, 1997). Por tanto, los colores observados y la rapidez con que aparecen
están relacionados con la estructura química del azúcar y si es aldosa o cetosa.
Figura 4. Resultados positivos de la reacción de Seliwanoff para almidón, glucosa, fructosa
y sacarosa, respectivamente.
❖ Fehling
En la prueba de Fehling, se identifican azúcares reductores, es decir, aquellos con
un grupo aldehído o cetona libre capaz de reducir el ion cúprico (Cu2+) a óxido de
cobre (I) (Cu2O), el cual precipita con un color rojo ladrillo o café rojizo (Brown et al.,
2012).
Azúcar reductor + 2 Cu2+ + 5 OH- → Ácido correspondiente + Cu2O↓ (precipitado
rojo) + 3 H2O
La glucosa y la fructosa dieron positivo porque son monosacáridos con grupos
funcionales libres (aldosa y cetosa, respectivamente) que pueden reducir el reactivo
de Fehling (Nelson & Cox, 2005). La maltosa, un disacárido reductor, también posee
un extremo con grupo hemiacetal libre, por lo que reacciona de forma similar
(Fennema, 1996). La dextrina, un polisacárido parcialmente hidrolizado, presenta
extremos reductores libres, lo que explica su color café rojizo.
En cambio, la sacarosa dio negativo porque es un disacárido no reductor: sus dos
monosacáridos (glucosa y fructosa) están unidos a través de sus grupos
anoméricos, bloqueando la función reductora (Voet & Voet, 2011). El almidón, un
polisacárido, también dio negativo porque su estructura tiene muy pocos extremos
reductores y estos no son suficientes para provocar un cambio visible en la prueba,
por lo que el reactivo mantiene su color azul rey (Whistler & BeMiller, 1997).
Figura 5. Resultados de la reacción de Fehling positivos para glucosa, fructosa, maltosa y
dextrina, y negativos para sacarosa y almidón, respectivamente. Además del tubo testigo.
❖ Solubilidad
Los resultados obtenidos muestran que tanto la glucosa como la sacarosa son
solubles en agua fría y caliente, observándose en ambos casos una solución
completamente transparente. Esto se debe a su estructura química: ambas son
azúcares simples con grupos hidroxilo (-OH) que forman enlaces de hidrógeno con
las moléculas de agua, facilitando así su disolución sin necesidad de calor.
En cambio, el almidón, un polisacárido de cadena larga, fue poco soluble en frío,
generando una solución opaca, ya que sus moléculas son grandes y no interactúan
fácilmente con el agua a bajas temperaturas. Sin embargo, al aplicar calor, el
almidón se volvió soluble, resultando en una solución transparente. Esto ocurre
porque el calor rompe parcialmente las interacciones intramoleculares del almidón,
permitiendo que el agua penetre y se disperse mejor.
Figura 6. Resultados positivos de la prueba de solubilidad para glucosa, sacarosa y
almidón, respectivamente.
CARBOHIDRATOS SOLUBILIDAD EN FRÍO SOLUBILIDAD EN
CALIENTE
Soluble Soluble
Glucosa Se observó una solución Se observó una solución
transparente transparente
Soluble Soluble
Sacarosa Se observó una solución Se observó una solución
transparente transparente
Poco soluble Soluble
Almidón Se observó una solución Se observó una solución
opaca transparente transparente
Tabla 2. Solubilidad de los carbohidratos.
❖ Yodo
Para esta última reacción se identifican los carbohidratos que son ramificados, se
coloran de un azul obscuro si son ramificados, por el contrario si son lineales no
presentan coloración. (por que los clatratos están atrapando al Yodo porque es
ramificado, si es lineal no se colora oscuro es porque los cloros están escapando
por todos los lados.)
En la prueba del yodo, se observó que el glucógeno, el almidón y la dextrina dieron
resultados positivos, mientras que la glucosa, la maltosa y el blanco (agua destilada)
dieron resultados negativos.
Los carbohidratos que dieron positivo fueron aquellos con estructuras
polisacarídicas complejas que permiten la formación de hélices. Estas hélices
pueden atrapar moléculas de yodo, generando un cambio visible de color.
El almidón, al estar compuesto principalmente por amilosa (estructura lineal), forma
hélices largas donde el yodo se acomoda fácilmente, generando una coloración azul
oscuro intensa, típica de una reacción positiva.
El glucógeno, aunque también es un polisacárido, presenta una estructura
altamente ramificada, lo que produce una reacción positiva más débil, con un color
púrpura o rojo oscuro, debido a hélices más cortas.
La dextrina, que es un producto parcial de la degradación del almidón, conserva
segmentos helicoidales, por lo que también reacciona con el yodo, aunque con un
color más tenue o distinto, como marrón rojizo o violeta claro, indicando una
reacción positiva débil.
Por otro lado, los carbohidratos que dieron resultado negativo fueron aquellos que
no forman estructuras helicoidales.
La glucosa, al ser un monosacárido, y la maltosa, un disacárido, carecen de la
estructura necesaria para que el yodo se adhiera, por lo que no producen ningún
cambio de color, conservando el color marrón claro del yodo en solución.
Figura 7. Resultados de la reacción de yodo positivos para glucógeno, almidón y dextrina
(cloración y precipitados morados), y negativos para glucosa y almidón (coloración
amarillenta), respectivamente. Además del tubo testigo.
CONCLUSIONES
Las pruebas realizadas permitieron identificar la presencia, estructura y tipo de
carbohidratos en las muestras analizadas. La reacción de Molish confirmó la
presencia de carbohidratos al dar positivo en todos los casos. Las pruebas de
Tollens y Fehling permitieron detectar la presencia de azúcares reductores, es decir,
aquellos con grupos aldehído o extremos hemiacetálicos libres, como en las
aldosas, disacáridos reductores (ej. maltosa) y polisacáridos con extremos
reductores (ej. dextrina).
La reacción de Seliwanoff permitió diferenciar entre aldosas (como la glucosa, que
reaccionó lentamente) y cetosas (como la fructosa, que reaccionó rápidamente con
formación de color rojo). La prueba del yodo permitió identificar polisacáridos como
el almidón, por la formación de un complejo azul característico, mientras que en
dextrina se observó una coloración más débil por su menor grado de polimerización.
Finalmente, la solubilidad en agua ayudó a relacionar la polaridad y tamaño de los
carbohidratos, siendo los monosacáridos y disacáridos más solubles que los
polisacáridos. En conjunto, estas reacciones permitieron clasificar los carbohidratos
como aldosas o cetosas, reductores o no reductores, y como mono-, di- o
polisacáridos, según su comportamiento químico.
Los azúcares simples son solubles en agua fría y caliente, mientras que los
polisacáridos como el almidón requieren calor para disolverse. Solo los
carbohidratos con estructuras helicoidales reaccionan con yodo, cambiando de
color; los simples no presentan reacción.
CUESTIONARIO
1. De los siguientes disacáridos: maltosa, trehalosa, sacarosa, celobiosa,
lactosa y gentiobiosa. Mencione cuales son reductores y serán
positivos a la reacción de Fehling.
Disacáridos reductores (positivos a Fehling):
1. Maltosa.
2. Celobiosa.
3. Lactosa.
4. Gentiobiosa.
Estos disacáridos tienen un grupo hemiacetal libre en una de sus unidades de
glucosa o galactosa, lo que les permite actuar como agentes reductores.
Disacáridos no reductores (negativos a Fehling):
1. Trehalosa.
2. Sacarosa.
Estos disacáridos están formados por la unión de los carbonos anoméricos de
ambos monosacáridos (enlace 1,1 en trehalosa y 1,2 en sacarosa), por lo que no
tienen grupo hemiacetal libre y no pueden reducir el reactivo de Fehling.
2. ¿Cuál es el monosacárido más abundante en los seres vivos?
La glucosa es el monosacárido más abundante en los seres vivos. Es un
componente clave en la mayoría de los procesos metabólicos y esencial para la
producción de energía en las células a través de la respiración celular. Además, es
el principal combustible para el cerebro y el sistema nervioso en muchos
organismos.
3. ¿Cuál es el polisacárido que sirve de almacén de energía en vegetales?
El almidón, que está formado por largas cadenas de glucosa y se encuentra
principalmente en estructuras de reserva como las semillas, los tubérculos, las
raíces y los frutos. Es la principal forma en la que las plantas almacenan la energía
que obtienen a través de la fotosíntesis.
4. ¿Cuál es el polisacárido que sirve de almacén de energía en los
animales?
El glucógeno, este compuesto está formado por unidades de glucosa unidas en una
estructura altamente ramificada, lo que permite su rápida degradación cuando el
organismo necesita energía.
5. ¿Cuál es el disacárido presente en la leche?
La lactosa (compuesta glucosa y galactosa) es el principal azúcar de la leche y
representa una importante fuente de energía, especialmente en la alimentación de
los recién nacidos.
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