ÁCIDOS NUCLEICOS
CURSO 2023-2024
PROF: Montserrat Montero
‘La transferencia de información de ácido nucleico a ácido nucleico, o de ácido nucleico a
proteína, puede ser posible, pero la transferencia de proteína a proteína, o de proteína a
ácido nucleico, es imposible’. Francis Crick
INTRODUCCIÓN
El ADN es el material genético de todos los organismos vivos.
ADN (ácido desoxirribonucleico) →Es un polímero que contiene tus genes
(un código que determinará todas las características de los SSVV)
El ADN es un tipo de macromolécula biológica llamada ácido nucleico, pero
no es la única, también está el ARN (ácido ribonucleico), encargado de la
traducción (proceso por el cual la información codificada en el ARN
mensajero (ARNm) dirige la adición de aminoácidos en los ribosomas para
la síntesis de proteínas).
En 1869, Friedrich Miescher realizó experimentos con glóbulos blancos que
condujeron a la extracción y descubrimiento del ADN.
COMPONENTES DE UN NUCLEÓTIDO
Las estructuras básicas del ADN y el ARN son muy similares ya que ambos
están formados por monómeros de nucleótidos. Los nucleótidos de ADN y
ARN tienen tres componentes:
● Un azúcar pentosa: un azúcar simple formado por cinco átomos de
carbono.
● una base nitrogenada: una molécula que contiene nitrógeno y actúa
como base
● un grupo fosfato: grupo funcional formado por fósforo y oxígeno.
COMPONENTES DE UN NUCLEÓTIDO
El nucleótido se puede representar de forma más sencilla utilizando un
círculo para el grupo fosfato, un pentágono para el azúcar pentosa y un
rectángulo para la base nitrogenada. Es útil conocer las ubicaciones de los
átomos de carbono 3' (o 3 primos) y 5' (o 5 primos) en el azúcar pentosa
para comprender el enlace entre los nucleótidos, pero no es necesario
memorizar las posiciones de estos.
ENLACE AZÚCAR-FOSFATO
Las unidades de nucleótidos se unen mediante un enlace covalente para
formar una sola cadena de ADN y ARN. El enlace se forma entre el grupo
fosfato unido al 5′ C de un azúcar pentosa y el grupo hidroxilo (–OH) unido
al 3′ C de otro azúcar, liberando una molécula de agua con el uso de
energía.
La unión de nucleótidos crea una cadena continua de átomos unidos
covalentemente en cada cadena de nucleótidos de ADN y ARN, que forma
una fuerte columna vertebral de azúcar-fosfato en el polímero de ADN y
ARN.
La unión de nucleótidos también crea dos extremos, a saber, el extremo 5',
que es el fosfato, y el extremo 3', que es el grupo –OH en el azúcar.
ENLACE AZÚCAR-FOSFATO
La adición de nucleótidos a la cadena en
crecimiento se realiza en la dirección 5′-3′. El
extremo 3' se refiere al grupo –OH de un azúcar; el
extremo 5' se refiere al grupo fosfato de otro
azúcar.
TIPOS DE BASES EN LOS ÁCIDOS NUCLEICOS
Hay cinco tipos diferentes de bases nitrogenadas: guanina (G), adenina
(A), timina (T), citosina (C) y uracilo (U).
Las bases se clasifican en dos tipos principales:
● Purinas: dos anillos en su estructura (A, G)
● Pirimidinas:un anillo en su estructura (T, C, U)
En una cadena de un ácido nucleico (ADN o ARN), la secuencia de
bases nitrogenadas constituye la base del código genético.
Los nucleótidos de ADN están compuestos de adenina, guanina,
citosina y timina, mientras que los nucleótidos de ARN están
compuestos de adenina, guanina, citosina y uracilo.
TIPOS DE BASES EN LOS ÁCIDOS NUCLEICOS
POLÍMEROS DE ADN Y ARN
Existe una teoría fascinante llamada hipótesis del mundo de ARN que sugiere
que la vida en la Tierra puede haber evolucionado inicialmente mediante el
uso de ARN en lugar de ADN como material genético.
ADN ARN
Cadena Doble (hélice) Monocatenaria
Pentosa Desoxirribosa Ribosa
Bases nitrogenadas A,T,C.G A,U,C,G
Enlace entre nt Covalente Covalente
Los enlaces entre el grupo fosfato unido al 5′ C de un azúcar
(ribosa/desoxirribosa) y el grupo –OH unido al 3′ C de otro azúcar, libera una
molécula de agua con el uso de energía.
POLÍMEROS DE ADN Y ARN
La molécula de ADN es bicatenaria, es decir, tiene dos hebras y tiene
forma helicoidal.
Las dos hebras están unidas entre sí mediante un apareamiento de bases
complementarias entre bases nitrogenadas→A-T y G-C mediante enlaces
de hidrógeno.
El emparejamiento de bases es importante para estabilizar la estructura
de doble hélice del ADN.
Las dos hebras corren en direcciones opuestas: son "antiparalelas", una
hebra va de la dirección 5 ′ a 3 ′ y la hebra opuesta va de 3 ′ a 5 ′.
POLÍMEROS DE ADN Y ARN
DIFERENCIAS ENTRE ADN Y ARN
DIFERENCIAS ENTRE ADN Y ARN
COMPLEMENTARIEDAD ENTRE LAS BASES
Hay alrededor de 30 billones de células en tu cuerpo;
¿Todas tus células tienen el mismo ADN?
Con muy pocas excepciones (por ejemplo, gametos y glóbulos rojos),
todas las células del cuerpo humano tienen el mismo ADN.
Sin embargo, los diferentes tipos de células exhiben apariencias y
funciones distintas. Por ejemplo, las neuronas, glóbulos blancos, células
musculares y células de la piel. Estas células comparten el mismo ADN
pero difieren en la composición de proteínas y características
estructurales, lo que les permite realizar tareas especializadas.
¿Cómo es posible que células que se ven diferentes y tienen funciones
diferentes tengan el mismo ADN?
COMPLEMENTARIEDAD ENTRE LAS BASES
El emparejamiento de bases complementarias en el ADN es importante
para estabilizar la estructura de doble hélice pero TAMBIÉN para las
funciones de las células.
Durante la división celular, el ADN se replica, que es la copia del ADN
para duplicar su cantidad y preparar la célula para la división.
La precisión de la replicación del ADN es fundamental para la célula, ya
que la secuencia de bases debe ser la misma durante la división celular. El
emparejamiento de bases complementarias juega un papel en el
mantenimiento de la secuencia de bases durante la copia, ya que la
adenina siempre se empareja con timina y la guanina siempre se
empareja con citosina.
La replicación utiliza una de las cadenas de ADN como plantilla para
crear una nueva, por lo tanto, la secuencia de ADN permanece igual
durante las divisiones celulares.
COMPLEMENTARIEDAD ENTRE LAS BASES
Una de las principales funciones del ADN es codificar proteínas.
La complementariedad también es importante en la expresión genética,
el proceso mediante el cual el código genético del ADN se traduce en
una proteína.
El gen puede expresarse (activarse) o no expresarse (desactivarse). La
complementariedad asegura que se produzca la misma proteína cada
vez que se expresa el gen; los mismos pares de bases complementarias
significan el mismo código, por lo tanto se produce la misma proteína y
esto es importante porque mantiene las características de la célula y del
organismo.
ALMACENA INFORMACIÓN: ¿Cuántas combinaciones posibles podrías
formar a partir de las cuatro bases nitrogenadas A, T, C, G para una
longitud de ADN de 10 pares de bases?
CONSERVACIÓN DEL CÓDIGO GENÉTICO
El código genético se refiere a las instrucciones de un gen en forma de
secuencias de bases que se traducen en una proteína funcional.
Todos los organismos vivos utilizan el mismo código genético. Por tanto,
la información almacenada en el ADN se traducirá en la misma proteína
ya sea que la lea una bacteria, un ser humano, un hongo o incluso un
virus.
El código genético se conserva en todas las formas de vida y esto sirve
como evidencia de que todos los organismos vivos provienen de un
ancestro común.
CONSERVACIÓN DEL CÓDIGO GENÉTICO
El código genético se refiere a las instrucciones de un gen en forma de
secuencias de bases que se traducen en una proteína funcional.
Todos los organismos vivos utilizan el mismo código genético. Por tanto,
la información almacenada en el ADN se traducirá en la misma proteína
ya sea que la lea una bacteria, un ser humano, un hongo o incluso un
virus.
El código genético se conserva en todas las formas de vida y esto sirve
como evidencia de que todos los organismos vivos provienen de un
ancestro común.
**IMPORTANTE: RELACIONAR CON LOS TRIPLETES (CODONES) EN LA
TRADUCCIÓN→ ÚLTIMO PASO EN LA EXPRESIÓN GÉNICA
**CRONOLOGÍA**
1869: Friedrich Miescher descubre el ADN mientras estudiaba la
composición química de los glóbulos blancos. Lo llamó "nucleína".
1952: Alfred Hershey y Martha Chase demostraron que el material
genético de los virus es el ADN, no las proteínas.
Principios de la década 1950: Erwin Chargaff observó las reglas de
emparejamiento de bases→la cantidad de (A) = (T) y la cantidad de (C) =
(G) en el ADN.
Principios de la década de 1950: Rosalind Franklin utilizó la
cristalografía de rayos X para capturar imágenes de fibras de ADN,
proporcionando datos críticos sobre la estructura y dimensiones de la
molécula de ADN.
1953: James Watson y Francis Crick propusieron la estructura de doble
hélice del ADN, basándose en el trabajo de otros.
1962: Watson, Crick y Maurice Wilkins reciben el Premio Nobel de
Fisiología o Medicina por su descubrimiento de la estructura del ADN.
LA DIRECCIONALIDAD DEL ARN Y ADN
El emparejamiento de bases complementarias es la base subyacente de
los procesos de replicación, transcripción y traducción:
● Replicación: copia del ADN para crear una nueva molécula de ADN.
● Transcripción: proceso en el cual el ADN se utiliza como plantilla
para producir ARN.
● Traducción: proceso en el cual los ribosomas traducen el ARN
transcrito para producir proteínas.
Estos tres procesos ocurren en una dirección de 5′ a 3′. El carbono 5'
tiene un grupo fosfato unido y el carbono 3' tiene un –OH unido.
La dirección de lectura debe ser coherente para garantizar la
conservación de la secuencia de bases del ADN durante la copia del ADN
y para garantizar que se produzca la misma proteína cada vez que se
transcribe el gen.
PAPEL DEL EMPAREJAMIENTO DE PURINAS Y
PIRIMIDINAS PARA ESTABILIZAR LA DOBLE HÉLICE
Una pirimidina siempre se combina con una purina:
La timina (T) se empareja con la adenina (A) →dos puentes H
La citosina (C) se empareja con la guanina (G) → tres puentes H
Si A-G, la longitud del par será demasiado larga, y si la T-C, la longitud del
par, demasiado corta.
Este par de bases complementarias de A-T y C-G estabiliza el ADN ya que
la longitud de los pares de bases es constante en toda la doble hélice
del ADN.
Los enlaces entre la A-T crean una forma similar a la de la G-C para
adaptarse al diámetro (aproximadamente 2 nm), que es el paso de la
hélice. Las purinas no pueden combinarse con otras purinas debido a
estructuras de doble anillo.
Cuanto mayor sea la especificidad del vínculo, mayor será la estabilidad y
más fuerte el vínculo.
PAPEL DEL EMPAREJAMIENTO DE PURINAS Y
PIRIMIDINAS PARA ESTABILIZAR LA DOBLE HÉLICE
Si se produce una falta de coincidencia durante
la replicación del ADN, se debe detectar el
punto de falta de coincidencia debido a la
longitud incorrecta del par de bases y corregirlo
para evitar errores en la replicación del ADN.
Sin embargo, en algunos casos el desajuste
persiste, lo que puede provocar una
inestabilidad estructural en la doble hélice del
ADN en el punto del desajuste, lo que
posiblemente provoque la terminación de la
división celular, la muerte celular o cánceres.
NUCLEOSOMAS
Piensa en un par de gemelos idénticos. ¡Se parecen e incluso comparten el mismo
ADN! ¿Pero se comportan igual? No, todos nos comportamos como individuos.
¿Hasta qué punto tus características están influenciadas por tu entorno versus tu
ADN?
Según los principios de la bioquímica, la longitud del ADN en las células humanas es de
unos 2 metros.
¿Cómo caben 2 metros de ADN en el núcleo? Piensa en lo que sucede cuando giras
una banda elástica repetidamente: eventualmente se formará un patrón adicional de
espirales.
El ADN eucariota, encerrado en el núcleo, siempre asociado con proteínas (histonas)
Esto contrasta con el ADN procariótico, que se encuentra en el citoplasma y carece de
histonas y, por lo tanto, a menudo se lo denomina ADN "desnudo".
Un nucleosoma consta de una longitud de ADN de aproximadamente 150 pares de
bases, envuelto alrededor de un núcleo de ocho histonas (que en realidad son cuatro
pares de cuatro histonas diferentes) y una histona especial llamada H1.
NUCLEOSOMAS
Los nucleosomas están unidos, y la cadena de ADN de un nucleosoma fluye
directamente hacia el siguiente nucleosoma.
Esta sección de ADN se llama conector de ADN (linker DNA). La apariencia
general del ADN en esta forma se ha comparado con un “collar de cuentas”.
NUCLEOSOMAS
NUCLEOSOMAS
Algunos eucariotas tienen genomas grandes, por lo que se requiere una
cierta cantidad de empaquetamiento (plegado, enrollado y
desenrollado) para encajar el material genético en el núcleo.
Los nucleosomas ayudan a superenrollar el ADN y al mismo tiempo
garantizan un acceso adecuado al mismo. El acceso al ADN se produce
cuando las hebras se desenrollan, son separadas por las histonas para
que el ADN pueda copiarse o transcribirse.
Podemos considerar los nucleosomas como unidades repetidas de la
cromatina eucariota, que se enrolla aún más para formar cromosomas.
ACTIVIDAD PRÁCTICA
Visualización para estudiar la asociación entre las proteínas y el ADN con un
nucleosoma y luego responde a las preguntas
https://www.rcsb.org/3d-view/jsmol/1AOI/1
https://earth.callutheran.edu/Academic_Programs/Departments/BioDev/omm/jsmo
l/nucleosome/nucleosome.html#intro
https://proteopedia.org/wiki/index.php/Histone
1. Gire el modelo 3D y describa cómo se asocian las histonas con el ADN
dentro del nucleosoma.
2. Enumere los tipos de proteínas histonas que se encuentran en el núcleo
del nucleosoma.
3. Indique cuántos pares de bases de ADN de doble hélice están envueltos
en la histona.
4. Resuma por qué al nucleosoma a menudo se le llama octámero de
histonas.
5. Dibuja un diagrama simple para mostrar la asociación entre las proteínas
histonas y el ADN.
LOS DATOS DE HERSEY, CHASE Y CHARGAFF
El experimento de Hershey-Chase y el experimento de Erwin Chargaff fueron
importantes en la línea de tiempo del ADN, ya que ambos ayudaron a
comprender su estructura y función.
Durante mucho tiempo, los científicos deliberaron sobre si el material genético
era proteína o ADN. La mayoría de los biólogos eran conscientes del papel que
desempeñan los cromosomas en la herencia, pero la composición de los
mismos (ADN y proteínas) era un misterio.
En un interesante experimento, Alfred Hershey y Martha Chase demostraron
que era el ADN, y no las proteínas, lo que constituía el material genético.
Utilizaron un bacteriófago T2, que es un virus que infecta las células
bacterianas. Este virus inyecta su ADN en la célula bacteriana mientras su
cubierta proteica permanece en el exterior.
LOS DATOS DE HERSEY Y CHASE
Hershey y Chase utilizaron fósforo y azufre radiactivos para marcar el ADN y las
proteínas de los virus.
El P se encuentra en el ADN pero no en las proteínas, y el S en las proteínas
pero no en el ADN.
Esta fue una forma elegante y sencilla de determinar qué parte del virus ingresó
a la bacteria.
LOS DATOS DE HERSEY Y CHASE
A través de su experimento, Hershey y Chase descubrieron que:
Cuando se permitió que los bacteriófagos que contenían fósforo radiactivo
(32P) infectaran bacterias no radiactivas, todas las células infectadas se
volvieron radiactivas.
Además, la siguiente generación de bacteriófagos, producidos a partir de
bacterias infectadas, eran todos radiactivos.
Sin embargo, cuando las bacterias se infectaron con bacteriófagos marcados
con azufre radiactivo (35S) y se quitaron las capas del virus (agitándolas en una
batidora eléctrica), casi no se pudo detectar radioactividad en las células
infectadas.
Estos hallazgos sugieren que el componente de ADN de los bacteriófagos se
inyecta en la célula bacteriana, mientras que el componente proteico
permanece en el exterior.
Cuando el ADN entra en la bacteria y provoca la formación de bacteriófagos
radiactivos, queda patente su papel como material genético.
ACTIVIDAD PRÁCTICA
Siga los pasos de la simulación para replicar el experimento de Hershey-Chase:
http://genecube.org/HersheyChase/HersheyChase.html
Nota: Los gránulos contienen las bacterias infectadas y los sobrenadantes
contienen el virus.
1. Explique por qué se detectó el material genético en el sedimento y no en el
sobrenadante.
2. Explique la evidencia de los datos de que el material genético es ADN, no
proteína.
3. Evaluar el procedimiento realizado por Hershey y Chase para determinar la
naturaleza del material genético.
ACTIVIDAD PRÁCTICA
Utilice los datos de la Tabla 1 para dibujar un gráfico que muestre la diferencia
en porcentajes de isótopos radiactivos.
Sugerencia: El eje x indica el tiempo de licuado; el eje y indica el porcentaje de
isótopos en el sobrenadante (extracelular) después de la infección con un
bacteriófago radiactivo.
LOS DATOS DE CHARGAFF
Antes del trabajo de Erwin Chargaff se pensaba que el ADN era monocatenario y
estaba organizado en unidades repetidas de tetranucleótidos → lo que implica
que el ADN estaba formado por cantidades iguales de A, T, C y G
LOS DATOS DE CHARGAFF
Erwin Chargaff analizó diferentes muestras de ADN mediante una técnica
llamada cromatografía en papel para separar los componentes del ADN y medir
las concentraciones relativas de las bases adenina, timina, guanina y citosina.
Su conclusión, utilizando muestras de diferentes organismos, fue que la
cantidad de adenina es igual a la cantidad de timina y la cantidad de citosina
es igual a la cantidad de guanina.
Estos hallazgos respaldaron el modelo de doble hélice y dieron pistas sobre el
emparejamiento de bases complementarias.
***El problema de la inducción radica en si un resultado obtenido mediante
inducción está justificado epistemológicamente, es decir, si la inducción produce
conocimiento; además toda proposición científica válida debe ser susceptible de
ser falsada o refutada
En este caso, los datos de Chargaff demostraron falsa la hipótesis del
tetranucleótido de que había una secuencia repetida de las cuatro bases en el
ADN.
DIRECCIONALIDAD DEL ADN
La direccionalidad del ADN y ARN afecta diferentes procesos realizados por
enzimas y ribozimas:
● la replicaciónen donde la ADN polimerasas y otras enzimas hacen copias del
ADN
● la transcripción donde la ARN polimerasa hace una copia de ARN a partir de
una secuencia de bases del ADN
● la traducción en ribosomas con una secuencia de ARN que determina la
secuencia de aa de un polipéptido.
Debido a esta direccionalidad, las cadenas de ADN y ARN deben estar orientadas
correctamente para la correcta ubicación de los sitios activos de las enzimas y las
ribozimas. Por ello, todos los procesos ocurren siempre en la misma dirección.
Replicación y transcripción→ se añaden nt al 3’
DUPLICACIÓN DEL ADN
La duplicación o replicación del ADN es el proceso mediante el que se
sintetiza, a partir de una molécula de ADN, dos nuevas moléculas de ADN
hijas con la misma secuencia de nucleótidos que la del ADN original.
La replicación tiene lugar en la fase S de la interfase del ciclo celular y se
realiza en el núcleo celular, las mitocondrias y los cloroplastos.
Inicialmente, se plantearon tres hipótesis alternativas:
Hipótesis conservativa.
Hipótesis dispersiva.
Hipótesis semiconservativa: Las cadenas de ADN se separan, sirviendo
cada una como molde para otra nueva cadena. Cada molécula hija tendría
una cadena antigua y otra moderna, formada por la unión de nucleótidos
con las bases nitrogenadas complementarias. Fue propuesta por Watson y
Crick.
La hipótesis que se confirmó fue la hipótesis semiconservativa, gracias al
experimento de Meselson y Stahl en 1958
DUPLICACIÓN DEL ADN
DUPLICACIÓN/REPLICACIÓN DEL ADN
La duplicación del ADN es necesaria para dos procesos biológicos:
● Reproducción: ADN de los progenitores
● Crecimiento y reparación de tejidos: división celular previa
https://www.youtube.com/watch?v=uEwyWgSvLc0
ENZIMAS IMPLICADAS EN LA DUPLICACIÓN DEL ADN
Intervienen un grupo de enzimas y proteínas, a cuyo conjunto se denomina
replisoma.
Etapa de pre-iniciación
● TOPOISOMERASA
● HELICASA
● RPA
● PRIMASA
● POLIMERASA (S)
● LIGASA
ENZIMAS IMPLICADAS EN LA DUPLICACIÓN DEL ADN
Etapa de pre-iniciación
TOPOISOMERASA: Alivian tensión entre las cadenas. Se ubican en medio
del puente H, que es un tipo de enlace débil.
HELICASA: Rompen los puentes de H, permite que se abra la horquilla de
replicación.
RPA: Proteínas A de Replicación: una vez que la helicasa rompe los puentes
de H, se sitúan fuera de la cadena de ADN así mantienen abierta la horquilla
de replicación
https://www.youtube.com/watch?v=9Y2NjVMA0wk
ENZIMAS IMPLICADAS EN LA DUPLICACIÓN DEL ADN
Etapa de iniciación
PRIMASA: ARN polimerasa dependiente de ADN: Ensambla una cadena de
aproximadamente 10 nt de ARN en la cadena de ADN molde (cebador),
para proporcionar un sitio donde la ADN polimerasa III puede unirse y
comenzar a agregar nt al extremo 3' de una cadena de ADN. En la cadena
principal, solo se necesita un cebador de ARN una vez, pero los cebadores
se insertan cada 100-200 nucleótidos a lo largo de la cadena retrasada.
¿Por qué es necesario el cebador? ¿Por qué no se puede sintetizar ADN a
partir de ADN directamente)
La mayoría de las ADN polimerasas no pueden empezar a sintetizar una
nueva cadena de ADN de la nada, SÓLO pueden añadir nucléotidos a una
hebra preexistente
ENZIMAS IMPLICADAS EN LA DUPLICACIÓN DEL ADN
Hay varias ADN polimerasas; POLIMERASA I y POLIMERASA III
POLIMERASA I: Es exonucleasa ya que puede romper enlaces entre nt y
una polimerasa, ya que puede unir nt.
En la hebra retrasada (discontinua), la polimerasa I se une a la unión entre
el 3’ de un fragmento de Okazaki y el 5' del cebador. Se mueve a lo largo
del cebador eliminando nt de ARN y reemplazándolos con nt de ADN. Se
suelta al encontrar otro fragmento.
Como las ADN polimerasas no pueden formar enlaces de 3' a 5' entre nt,
deja un espacio en la cadena de nt de la nueva cadena de ADN donde falta
un enlace azúcar-fosfato entre dos nt.
Las ligasas son las encargadas de unir los fragmentos de Okaaki entre sí,
mediante enlaces fosfo-diéster entre el últmo nt de un fragmento y el
primero del otro.
ENZIMAS IMPLICADAS EN LA DUPLICACIÓN DEL ADN
POLIMERASA III: Principal polimerasa en la replicación del ADN. Se une
a la hebra molde en el extremo 3' de un cebador de ARN y ensambla
una cadena de nt de ADN con bases complementarias a las del molde.
Los nt se añaden en dirección 5' a 3', continuando hasta llegar al final
de la cadena molde u otro cebador de ARN. La ADN polimerasa
también revisa y corrige cada nt después de que se ha agregado a la
cadena→ La polimerasa replica el ADN con gran fidelidad, y cuando se
producen errores, son corregidos, evitando mutaciones. Existen
https://www.youtube.com/watch? múltiples métodos, el primero (‘proofreading’) y ocurre durante la
v=sX6LncNjTFU
replicación inmediatamente después de que se ha agregado un nt con
una base no coincidente.
ADN Ligasa: Conecta el espacio en la cadena de nt dejado por la ADN
Polimerasa I formando un enlace azúcar-fosfato entre dos nt
adyacentes.
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DUPLICACIÓN DEL ADN
Kornberg, discípulo del bioquímico Severo Ochoa, estudió en 1956 cómo se
sintetizaba una nueva cadena complementaria de ADN a partir de otra cadena, y
qué enzima regulaba la replicación.
Aisló la enzima ADN-polimerasa a partir de la bacteria Escherichia coli, y
comprobó que es capaz de sintetizar ADN in vitro.
La ADN-polimerasa necesita desoxirribonucleótidos-5-trifosfatos de A, T, C, G,
iones magnesio Mg2+, que una de las cadenas de la molécula de ADN haga de
“patrón”, y que un extremo actúe como “cebador”.
La ADN-polimerasa no puede comenzar la síntesis de una cadena, únicamente
añadir nucleótidos al extremo de una cadena preexistente, el ADN cebador. Sólo
añade los nucleótidos en el extremo 3’
DUPLICACIÓN DEL ADN
I) CADENA CONTINUA: La cadena que comienza con el ADN cebador, sólo crece
en el sentido 5'→3'.
Así, el nt que tiene su carbono 5' libre, es el primer nt de la cadena de ADN y el nt
que tiene libre el carbono 3', es el último nt añadido a la cadena, y al que se
puede añadir otro.
La nueva cadena sintetizada es antiparalela y complementaria.
Si una cadena crecía en dirección 5'→3', la otra lo tendría que hacerlo en
dirección 3'→5', lo que es imposible de explicar, ya que ninguna ADN-polimerasa
añade nucleótidos en esa dirección, ¿cómo?
DUPLICACIÓN DEL ADN
II) CADENA DISCONTINUA:La respuesta: Okazaki en 1968. Descubrió que
había unos fragmentos formados por unos 50 nucleótidos de ARN y unos
1000 ó 2000 nucleótidos de ADN (fragmentos de Okazaki).
Sintetizados por la ARN-polimerasa (???), que no necesita ningún
cebador para comenzar, y luego por la ADN-polimerasa (???), que
añadía los nucleótidos en dirección 5'→3' sobre la hebra patrón.
Después se pierde el trozo de ARN y se fusionan el resto de fragmentos,
dando la sensación de que hebra crece en dirección 3'→5'.
Los fragmentos de Okazaki son pequeñas cadenas de ADN recién
sintetizadas en la replicación del ADN en la hebra retrasada, que se
sintetiza de forma discontinua, en dirección opuesta al movimiento de la
horquilla de replicación.
DIFERENCIAS EN LA REPLICACIÓN DE LA HEBRA
CONTINUA Y DISCONTINUA ADN
La ADN polimerasa sólo puede ensamblar nuevas hebras en la dirección 5' a 3'.
Las dos hebras que se forman cuando la helicasa separa el ADN son
antiparalelas: sus direcciones 5' a 3' son opuestas.
La ADN polimerasa que utiliza estas hebras como moldes para ensamblar nuevas
hebras se mueve en direcciones opuestas, siempre de 5' a 3'.
● En una cadena, la ADN polimerasa agrega nt que se mueven hacia la
bifurcación de la horquilla de replicación. la replicación es continua en esta
hebra por lo que se completa más rápidamente → hebra principal
● En la otra hebra, la ADN polimerasa agrega nt alejándose de la horquilla de
replicación. Deben añadirse a cadenas cortas (Cebadores) a medida que la
horquilla de replicación expone más cadena molde. Estos tramos cortos de
nueva cadena de ADN se denominan fragmentos de Okazaki. Tener que
reiniciar repetidamente la replicación mediante la ADN polimerasa hace que
el proceso sea relativamente lento → hebra retardada.
DIFERENCIAS EN LA REPLICACIÓN DE LA HEBRA
CONTINUA Y DISCONTINUA ADN
https://www.youtube.com/watch?v=9
kp9wiYMQUU
http://genmed.yolasite.com/fundamentals-of-genetics.php
TÉCNICAS PARA LA AMPLIFICACIÓN Y SEPARACIÓN
DE ADN: REACCIÓN EN CADENA DE LA POLIMERASA
(PCR) Y GELES DE ELECTROFORESIS
● Técnica de laboratorio que permite la producción (amplificación) rápida de
millones a miles de millones de un segmento específico de ADN, que así se
podrá estudiar en mayor detalle. La PCR implica el uso de fragmentos cortos
de ADN sintético, denominados cebadores, para seleccionar un segmento del
genoma que se amplificará, y luego múltiples sesiones de síntesis de ADN
(ciclos) para amplificar ese segmento.
1) DESNATURALIZACIÓN
(¿¿??)
1) HIBRIDACIÓN O
ALINEAMIENTO (¿¿??)
1) ELONGACIÓN (¿?¿?)
TÉCNICAS PARA LA AMPLIFICACIÓN DE ADN:
REACCIÓN EN CADENA DE LA POLIMERASA (PCR)
TÉCNICAS PARA LA SEPARACIÓN DE ADN: GELES DE
ELECTROFORESIS
A veces es necesario separar las moléculas de ADN de acuerdo a su
longitud→ esto se puede hacer utilizando gel de electroforesis.
La separación se realiza en una lámina de gel de unos 3-4 mm de
espesor.
En el gel, cerca de un extremo hay agujeros rectangulares llamados
pocillos/’pozos’.
El gel se coloca en un tanque poco profundo con electrodos en
ambos extremos. Se vierte una solución de electrolitos sobre el gel
para cubrirlo.
Finalmente, se pipetea una muestra de ADN en cada pocillo.
TÉCNICAS PARA LA SEPARACIÓN DE ADN: GELES DE
ELECTROFORESIS
Se aplica un voltaje a través de los electrodos para crear un campo
eléctrico
Así, las moléculas cargadas se muevan a través del gel.
El ADN tiene cargas negativas debido a los fosfatos en las cadenas
de azúcar-fosfato, por lo que se mueve hacia el ánodo + → el gel se
orienta en el tanque con los pocillos cerca del cátodo -
https://www.youtube.com/watch? El gel consiste en una malla de filamentos (agarosa) que resiste el
v=mpRy8CSAISs
movimiento de las moléculas. Las moléculas pequeñas se mueven
más rápido que las más grandes, por lo que se mueven más lejos en
un tiempo determinado.
Por lo tanto, la electroforesis en gel se puede utilizar para separar
fragmentos de ADN según su longitud→ y cuantificar si usas una
‘escalera ‘ (ladder) y tiñes con bromuro de etidio (u otro).
TÉCNICAS PARA LA AMPLIFICACIÓN Y SEPARACIÓN
DE ADN: PCR Y GELES DE ELECTROFORESIS
ACTIVIDAD: Buscar información sobre la aplicabilidad de ambas
técnicas para el test para COVID19 y la prueba de paternidad.
Buscar los pasos de ambos procesos, requerimientos y materiales,
ventajas e inconvenientes, posibles problemas éticos (si procede)
podrían surgir… Piensa por tu cuenta, pregúntate e investiga.
ACTIVIDAD: Tenemos dos muestras de ADN en un gel de
agarosa al 1,5 %. Observa la imagen e intenta explicar los
patrones de bandeado en los pocillos 1 y 2.
● ¿Qué crees que contiene el pocillo M?
● ¿Sería posible estimar la longitud de los fragmentos?
● Si las tres bandas más ‘luminosas’ del carril 2 se
hubiesen desplazado por ejemplo a 58, 150 y 200 mm,
¿podrías representarlas en un gráfico usando una
escala logrítmica?
TRANSCRIPCIÓN DEL ADN
Síntesis de ARN usando una de las hebras de ADN como molde.
Funciones de la ARN polimerasa:
● unión a un sitio del ADN al inicio del gen que se está transcribiendo
● desenrollar la doble hélice del ADN y separarla en dos hebras simples
(molde y hebra codificante)
● moverse a lo largo de la hebra de la plantilla
● colocar nt de ARN en la cadena molde con bases complementarias
● unir nt de ARN mediante enlaces covalentes entre el azúcar-fosfato
para formar una hebra continua de ARN
● separar el ARN ensamblado de la cadena molde y permitir que la doble
hélice del ADN se vuelva a formar
La transcripción para cuando una secuencia determinada se alcanza e indica
que es el final del gen, entonces la hebra de ARN se separa
TRANSCRIPCIÓN DEL ADN
La transcripción se usa para copiar la información de una hebra de ADN y
existe complementariedad entre las bases debido a los puentes de H:
A-U // C-G
La cadena de ADN con la secuencia de bases que se va a copiar en ARN se
llama cadena sentido (o cadena codificante)
La otra cadena que tiene una secuencia de bases complementaria a la
cadena sentido se llama cadena molde (o cadena antisentido). La
transcripción de esta cadena da como resultado una cadena de ARN con la
misma secuencia de bases que la cadena sentido de ADN.
TRANSCRIPCIÓN DEL ADN
La estabilidad del ADN de la hebra molde es esencial ya que puede ser
copiada múltiples veces durante la vida de la célula.
Las dos hebras sólo se separan durante un breve período de tiempo a
medida que la ARN polimerasa se mueve a lo largo del gen, por lo que las
bases sólo son brevemente vulnerables a los cambios químicos que
causarían una mutación.
Si las mutaciones fueran comunes, las secuencias molde utilizadas con
frecuencia acumularían mutaciones y las copias de ARN contendrían cada
vez más errores.
Las proteínas traducidas a partir de estas copias tendrían un número cada
vez mayor de sustituciones de aminoácidos, lo que probablemente haría
que funcionaran peor.
EXPRESIÓN GÉNICA
La expresión genética es el proceso mediante el cual la información
transportada por un gen tiene efectos observables en un organismo.
La secuencia de las bases en un gen no determina las características
observables en un organismo.
La función de la mayoría de los genes es especificar la secuencia de aa en
un polipéptido particular. Son las proteínas producidas las que determinan
directa o indirectamente las características observables de un individuo.
Se necesitan dos procesos para producir un polipéptido específico
utilizando la secuencia de un gen: transcripción y traducción
EXPRESIÓN GÉNICA
La transcripción es la primera etapa en la expresión genética y la etapa
clave en la que se puede activar o desactivar.
Es posible que algunos genes nunca se activen durante la vida de una célula.
Pej: el gen de la insulina sólo se expresa en células pancreáticas, mientras
que otros genes, los constitutivos (housekeeping), se expresan siempre ya
las proteínas que codifican siempre se necesitan, como aquellos implicados
en la respiración celular.
Transcriptoma: toda la gama de tipos de ARN producidos en una célula. En
un individuo, las diferentes células o tejidos tienen diferentes
transcriptomas. A lo largo del tiempo, el transcriptoma según cambia la
actividad de la célula.
TRADUCCIÓN: SÍNTESIS DE POLIPÉPTIDOS A
PARTIR DE mRNA
Para la obtención de un polipéptido, es necesaria la correcta adición de aa un
orden determinado.
Un polipéptido es una cadena de cientos de aa (hay 20 aa posibles)
La información necesaria para la obtención de un polipéptido está contenida en
la secuencia de una molécula de ARN, obtenida por transcripción.
El ARN contiene la información en forma de código genético. Para formar una
secuencia de aa a partir de una secuencia de bases, este código debe ser
traducido→ así, el proceso de síntesis de polipéptidos se llama traducción.
TRADUCCIÓN: SÍNTESIS DE POLIPÉPTIDOS A
PARTIR DE mRNA
La traducción ocurre en el citoplasma.
En eucariotas, el ARN se produce en el núcleo y pasa al citoplasma a través de
los poros nucleares.
En procariotas la distancia es más corta, no hay núcleo, pero la transcripción y
traducción ocurren en lugares de la célula distintos (ARN mensajero).
Hay tres componentes que trabajan de manera coordinada en la traducción:
● ARN mensajero
● ARN transferente
● Ribosomas
TRADUCCIÓN: PAPEL DEL ARNm, RIBOSOMAS Y
ARNt
1) El ARNm tiene un sitio al que se puede unir un ribosoma y una secuencia de
codones que especifica la secuencia de aa del polipéptido, con un codón de
inicio y un codón de parada para indicar dónde debe comenzar y terminar la
traducción. Una molécula de ARNm se puede traducir muchas veces, pero
se descompone si se daña o si no se necesitan más copias del polipéptido
que codifica.
2) El ARNt traduce la secuencia de bases del ARNm en la secuencia de aa de
un polipéptido. Las moléculas de ARNt tienen un anticodón en un extremo
que consta de tres bases y en el otro extremo un punto de unión para el aa
correspondiente al anticodón. Cada tipo de molécula de ARNt tiene una
forma distintiva que es reconocida por una enzima activadora dedicada, que
une el aa correcto al ARNt.
3) Los ribosomas son estructuras complejas que constan de una subunidad
pequeña y una grande. La pequeña tiene un sitio de unión para el ARNm y
la grande tiene tres sitios de unión para el ARNt. La subunidad grande
también tiene un sitio catalítico que forma enlaces peptídicos entre aa,
para ensamblar el polipéptido.
TRADUCCIÓN: PAPEL DEL ARNm, RIBOSOMAS Y
ARNt
https://www.mun.ca/biolo
gy/scarr/iGen3_06-14.html
COMPLEMENTARIEDAD DE BASES ENTRE EL
ARNm Y EL ARNt
La fidelidad de la traducción depende del emparejamiento de bases
complementarias.
Las tres bases de un anticodón en un ARNt deben ser complementarias a las
tres bases del siguiente codón en un ARNm para que el ARNt pueda unirse al
ribosoma y liberar su aa→ A/U y C/G
https://www.oligotherapeutics.org/could-a-single-oligonucleotide-medicati
on-treat-multiple-different-diseases/
COMPLEMENTARIEDAD DE BASES ENTRE EL
ARNm Y EL ARNt
http://hyperphysics.phy-astr.gsu.edu/hbase/
Organic/trna.html
PASOS EN LA TRADUCCIÓN
1. Una enzima activadora con un sitio activo que se adapta al ARNt se une a él y une
el aa específico correspondiente al anticodón del ARNt
1. El ARNt que porta un único aa se une al sitio A del ribosoma, con su anticodón
unido mediante un emparejamiento de bases complementarias al siguiente
codón del ARNm.
1. El aa del ARNt está unido al extremo del polipéptido en crecimiento mediante la
formación de un enlace peptídico. El ARNt ahora contiene todo el polipéptido en
crecimiento.
1. El ARNt se mueve del sitio A al sitio P a medida que el ribosoma se mueve a lo
largo del ARNm (un codón). El anticodón todavía está emparejado con el codón
del ARNm.
1. El polipéptido retenido por el ARNt se transfiere a otro ARNt que ha llegado al
sitio A.
1. El ARNt se mueve de P a E (salida) a medida que el ribosoma se mueve a lo largo
del ARNm → el anticodón del ARNt se separa del codón del ARNm y el ARNt se
separa del ribosoma.
CARACTERÍSTICAS DEL CÓDIGO GENÉTICO
Hay 4 bases y 2 aa, por lo que ninguna base no puede codificar un aa.
Hay 16 combinaciones de dos bases, lo cual es todavía muy poco para codificar
todas las aa.
Por lo tanto, los organismos vivos utilizan un código triple (triplete), con grupos
de tres bases que codifican un aa. Hay 64 combinaciones de tres bases.
¿Pór qué? ¿Cómo?
Codón: secuencia de 3 bases en el ARNm→Todos menos tres codones hacen
que se agregue un aa específico a un polipéptido.
Codón de inicio: AUG: metionina
Codones de parada: UAA, UAG, UGA
CARACTERÍSTICAS DEL CÓDIGO GENÉTICO
IMPORTANTE:
El código genético es DEGENERADO porque varios codones pueden codificar
para el mismo aa; y UNIVERSAL porque todos los SSVV y los virus lo emplean.
CARACTERÍSTICAS DEL CÓDIGO GENÉTICO
IMPORTANTE:
El código genético es DEGENERADO porque varios codones pueden codificar
para el mismo aa; y UNIVERSAL porque todos los SSVV y los virus lo emplean.
CARACTERÍSTICAS DEL CÓDIGO GENÉTICO
ACTIVIDAD:
1. Usando el código genético deduce los codones para:
a. tirosina, arginina, glicina, ácido aspártico, cisteina
1. Dada la siguiente secuencia de ARN: CUCAUCGAAUAACCC
a. Deduce la secuencia de aa que correspondiente
b. Deduce la secuencia de bases de la cadena molde (antisentido)
transcrita para producir el ARNm.
MUTACIONES QUE CAMBIAN LA ESTRUCTURA DE
UNA PROTEÍNA
Una mutación génica es un cambio en la secuencia de un bases de un gen.
EL cambio de una única base por otra (sustitución) puede no suponer nada
(código degenerado) o dar lugar a un aa completamente diferente (sobre todo si
cambia la 1ª o 2ª base de un triplete) → cambio de un aa por otro en el
polipéptido→ puede no afectar nada a la estructura de la proteína o suponer un
cambio radical.
Pej: La anemia de células falciformes, la enfermedad hereditaria más común en
el mundo, es un ejemplo de cambio radical debido a una sustitución de una sola
base.
BUSCA INFORMACIÓN Y EXPLÍCALO:
Key words: Hb, HbA, HbS, GAG, GTG, valina, ácido glutámico, ¿puede ser
hereditaria? ¿cuándo?
DIRECCIONALIDAD DE LA TRANSCRIPCIÓN Y
TRADUCCIÓN
● Transcripción: cada nt de ARN se añade a la hebra en crecimiento en
dirección 5’ → 3’
● Traducción: el ribosoma se mueve a lo largo del ARNm hacia su extremo 3’,
por lo que ocurre también en dirección 5’ → 3’
INICIO DE LA TRANSCRIPCIÓN EN EL PROMOTOR
Un promotor es una sección del ADN que inicia la transcripción génica.
Suele tener entre 100 y 1000 pb de largo y está ubicado adyacente a los genes
en los cromosomas (no siempre).
La secuencia de bases de un promotor permite que la ARN polimerasa se una a
otras proteínas que actúan como factores de transcripción.
Las secuencias represoras dentro del promotor permiten que los TFs se unan, lo
que previene la unión de la ARN polimerasa → impidiendo la transcripción de un
gen.
Las secuencias activadoras dentro del promotor permiten que los TFs se unan
→ estimulando la unión de la ARN polimerasa → favorece la transcripción.
Las células pueden cambiar su patrón de expresión genética dependiendo de
qué TF se produzcan para unirse al promotor.
INICIO DE LA TRANSCRIPCIÓN EN EL PROMOTOR
Algunos grupos de genes tienen promotores similares, por lo que todos se
expresan juntos incluso si están ubicados en cromosomas diferentes.
Algunos TF solo se unen al promotor después de combinarse con otra molécula
https://youtu.be/GegbbWmGBp0
https://www.youtube.com/watch?v=cRux0Ed8uTc&t=3s
SECUENCIAS NO CODIFICANTES
Muchos genes tienen la secuencia codificante necesaria para sintetizar un
polipéptido. También hay secuencias de bases en los genomas que no codifican
un polipéptido, pero que tienen otra función, por ejemplo:
● Secuencias de bases que se pueden transcribir para producir ARNt.
● Secuencias de bases que se pueden transcribir para producir ARNr.
● Secuencias de bases utilizadas en la regulación de la expresión génica, como
promotores (los sitios de unión de la ARN polimerasa), potenciadores y
silenciadores.
● Telómeros: las estructuras que forman los extremos de los cromosomas en
eucariotas.
● Intrones: secuencia de bases que se escinden/editan a partir del ARNm
durante la modificación postranscripcional
MODIFICACIÓN POST-TRANSCRIPCIONAL EN
CÉLULAS EUCARIOTAS
En los procariotas, el ARN se puede traducir tan pronto como se haya transcrito.
En los eucariotas, el ARN recién producido se transforma en ARNm maduro
antes de la transcripción.
Estos cambios ocurren antes de que el ARN abandone el núcleo. Esta
modificación explica la necesidad de un núcleo en los eucariotas pero no en los
procariotas: la modificación del ARN debe completarse antes de que el ARNm
encuentre ribosomas en el citoplasma.
La separación de la transcripción y la traducción en compartimentos separados
en las células eucariotas permite que se produzca una modificación
postranscripcional significativa antes de que el ARNm maduro salga del núcleo.
MODIFICACIÓN POST-TRANSCRIPCIONAL EN
CÉLULAS EUCARIOTAS
El ARN se modifica añadiéndoles nt extra a los extremos del ARN, por lo que el
ARNm presenta una estructura específica:
● Caperuza en el extremo 5’: un nt modificado se añade al extremo 5’.
Presenta 3 grupos fosfato (parecido al ATP) + G + un grupo metilo extra
● Colas de Poly A: se añaden entre 100 y 200 nt A al 3’. La traducción finaliza
antes de que el ribosoma alcance la cola poli A
Ambas estructuras estabilizan los extremos del ARNm protegiéndolo frente a la
digestińn de nucleasas. Además favorecen modificaciones posteriores del
transcrito original.
MODIFICACIÓN POST-TRANSCRIPCIONAL EN
CÉLULAS EUCARIOTAS
REPASO:
EXONES: Secuencias codificantes que se expresan en secuencias de aa por
traducción
INTRONES: Secuencias que no se expresan. 20-200 nt. La media de intrones por
gen es de 7.8 en humanos, y la media del número de exones 8.8
El ARN transcrito de genes codificantes contiene exones e intrones de forma
alterna.
Los intrones son escindido y digeridos -para obtener nt individuales.
Los exones se unen para producir un secuencia de bases ininterrumpida que
pueda traducirse.
En ese punto, el ARNm es ‘maduro’ y puede exportarse del núcleo al citoplasma.
MODIFICACIÓN POST-TRANSCRIPCIONAL EN
EUCARIOTAS
El empalme alternativo es un tipo de cambio que permite producir varias
variantes de un polipéptido a partir de un gen.
El transcrito primario es el mismo en cada caso, pero existen diferencias en la
modificación postranscripcional.
El cambio más frecuente es la omisión de exón (Salto), donde una secuencia de
bases en el ARNm se elimina para producir algunas variantes del polipéptido
pero permanece en el ARNm para producir otras variantes.
IMPORTANTE: Unir exones de diferentes maneras permite que se produzcan
polipéptidos con cambios en su forma y función sin tener que duplicar un gen en
el genoma. El gen de la tropomiosina expresado en el músculo cardíaco es un
ejemplo de empalme alternativo
MODIFICACIÓN POST-TRANSCRIPCIONAL EN
EUCARIOTAS
En los mamíferos, la proteína tropomiosina está codificada por un gen que
tiene 11 exones.
El pre-ARN presenta una secuencia de exones diferente en los diferentes
tejidos, lo que da como resultado 5 formas diferentes de la proteína. Por
ejemplo, en el músculo esquelético, falta el exón 2 del ARNm; en el músculo liso,
faltan los exones 3 y 10.
En las moscas de la fruta, la proteína Dscam participa en guiar las células
nerviosas en crecimiento hacia sus ‘targets’.
Las investigaciones han demostrado que existen potencialmente 38.000 ARNm
diferentes posibles en función del número de intrones diferentes en el gen que
podrían fusionarse alternativamente.
De manera más general, el empalme alternativo aumenta la diversidad del
proteoma (todas las proteínas expresadas en un organismo).
MODIFICACIÓN POST-TRANSCRIPCIONAL EN
EUCARIOTAS
https://www.duchenne-spain.org/distrofina/salto-del-exon-exon-skipping/
REPASO: INICIO DE LA TRADUCCIÓN: PASOS
1. Una enzima activadora fija el aa metionina a un ARNt iniciador que
tiene el anticodón UAC
2. El ARNt se une a la subunidad pequeña del ribosoma formando un
complejo ternario (una estructura de tres partes que en este caso son la
subunidad pequeña, el ARNt iniciador y el aa)
3. El complejo ternario se une al extremo 5’ y se desplaza a lo largo del
mRNA, buscando el codón AUG (complementario al anticodón UAC)
4. La subunidad pequeña para cuando el anticodón UAC se une al codón
AUG por enlaces de H
5. La subunidad grande del ribosoma se une a la pequeña, con el codón
de iniciación en el sitio P.
6. Un ARNt con un anticodón complementario al siguiente codón en el
mRNA se une al sitio A, con el codón unido al anticodón por enlaces H
7. Se forma un enlace peptídico entre el aa del ARNt iniciador en el sitio P
y el ARNt del sitio A. El ARNt del sitio A mantiene el dipéptido formado
8. El ribosom se mueve de 5’ → 3’ a lo largo del mRNA una posición (un
codón = 3nt) causando que el ARNt se mueva al sitio E y salga del
ribosoma
MODIFICACIONES DEL POLIPÉPTIDO
Las modificaciones post-traduccionales de los polipéptidos los convierten en
proteínas funcionales:
● Eliminación del aa MET del extremo 5’ del polipéptido.
● Cambios en las cadenas laterales de aa en el polipéptido. Por ejemplo, la
fosforilación o adición de moléculas glucídicas puede producir más de 100 aa
químicamente diferentes en las proteínas.
● El plegamiento del polipéptido y la creación de interacciones
intramoleculares para estabilizar la estructura terciaria. Por ejemplo, se
forman enlaces disulfuro entre cisteínas que se acercan debido al
plegamiento.
● Conversión de propéptidos en péptidos maduros mediante la eliminación de
parte de la cadena polipeptídica
● Combinar de dos o más polipéptidos en las proteínas de estructura
cuaternaria.
● Combinar componentes no polipeptídicos en la estructura cuaternaria de
proteínas conjugadas
MODIFICACIONES:DESDE PRE-INSULINA → INSULINA
El gen de la insulina (INS) en el cromosoma 11 se transcribe en las células beta
pancreáticas para producir copias de ARN
● El ARNm es traducido por ribosomas en el RER. El polipéptido producido es
preproinsulina y tiene 110 aa.
● La preproinsulina pasa a la luz del RER. Aquí una secuencia de 24 aa (llamada
péptido señal) se elimina del N-terminal mediante una enzima proteasa que
reconoce tres alaninas adyacentes en la secuencia de aa.
● Queda una cadena de 86 aa que se llama proinsulina→ la cual se pliega con
tres enlaces disulfuro que estabilizan la estructura terciaria.
● Los enlaces peptídicos se rompen en las dos posiciones de la proinsulina
mediante proteasas que reconocen pares de aa cargados positivamente (Lys y
Arg).
● Esto hace que se escinda una secuencia de 33 aa y deja dos cadenas
separadas: la cadena A (21 aa) y la cadena B (inicialmente con 32 aa). Estas
dos cadenas se mantienen unidas por los enlaces disulfuro anteriores.
● Una proteasa elimina un par de aa del extremo C-terminal de la cadena B,
para producir insulina madura con un total de 51 aa.
INSULINA HUMANA
PROTEOSOMA: RECICLAJE DE AA
La mayoría de proteínas tienen un ciclo de vida
relativamente corto debido a:
● Las actividades celulares y metabólicas
varían, y la proteína ya no se necesita. La
célula cambia la etapa de su ciclo celular.
● La estructura proteica puede variar
fácilmente debido a la presencia de
químicos o radicales libres. Si esto ocurre,
puede alterar su funcionamiento.
● La proteína puede desnaturalizarse o
plegarse de otras maneras. https://biomodel.uah.es/biomodel-mis
c/anim/HMS/proteasoma.htm
Aquellas proteínas que no son funcionales son descompuestas por el
proteosoma: complejo proteico que tiene como función principal la
degradación de proteínas dañadas o innecesarias, mediante una
proteólisis o reacción química que rompe los enlaces peptídicos
PROTEOSOMA: RECICLAJE DE AA
Las proteínas identificadas para su degradación están marcadas con una cadena
de pequeñas proteínas llamada ubiquitina. Esto actúa como una señal para los
proteosomas de que estas proteínas deben ser digeridas.
Las proteínas ubiquitinadas son reconocidas por las subunidades reguladoras en
cada extremo del proteosoma.
Luego se desdoblan y se introducen en la cámara central mediante una subunidad
que utiliza ATP como fuente de energía.
Los sitios activos de múltiples proteasas, hacia la cámara central, descomponen
las proteínas en cadenas cortas de aa que salen del proteosoma.
Una mayor digestión de los oligopéptidos en el citoplasma produce aa, que
pueden usarse para la síntesis de nuevas proteínas. El proteosoma elimina
proteínas dañadas y sin función de la célula, pero también las recicla aa
¿Alguna pregunta?