Ciclo de Krebs
❖ NAD/NADH y FAD/FADH2
❖ Tienen algunas diferencias que permiten que tengan distintas funciones.
➢ FAD puede aceptar electrones Consecutivamente, mientras que NAD lo hace
Simultáneamente.
➢ El FAD se encuentra unido a las Enzimas, como en el caso de la Succinato
Deshidrogenasa, mientras que NAD se encuentra libremente en solución, lo que le
permite ser un Regulador de la Función Celular.
❖ Coenzima A
❖ Es un Nucleótido que se compone de β-Mercaptoetilamina, Acido Pantoténico y un
Nucleótido de Adenina.
❖ Observar que tiene un Grupo Tiol en el extremo de la β-Mercaptoetilamina que se
encuentra Reducido y participa en muchas Reacciones de Transferencia de Grupos
Acilo en los que la Coenzima A participa como Dador o Aceptor de la Función Acilo.
Respiración Celular
Observamos que la Respiración Celular tiene 3 Fases:
1. Una primera Fase donde los Combustibles se
Oxidan, tanto AA, AGs o Glúcidos hasta obtener
Acetil CoA.
2. Una Segunda Fase donde este Acetil CoA, un
Compuesto de Alta Energía será Oxidado en el
Ciclo de Krebs, originando Coenzimas Reducidas,
NADH, y FADH2.
3. NADH y FADH2 transportarán Electrones hacia el
Oxígeno en la Cadena de Transporte de
Electrones, generando ATP por Fosforilación
Oxidativa, la cual se encuentra Acoplada a la
Cadena Respiratoria.
Fuentes y Destinos del Piruvato
En este caso, estudiaremos la reacción de Piruvato a Acetil-CoA a través de la Piruvato
Deshidrogenasa en Aerobiosis.
Piruvato Deshidrogenasa
Los compuestos que se encuentran entre paréntesis son los Cofactores que utilizan.
❖ En esta Reacción vemos la Decarboxilación Oxidativa del Piruvato, con Reducción de
un NAD a NADH, para obtener así Acetil-CoA.
➢ Esto ocurre gracias al Complejo Piruvato Deshidrogenasa, con la actividad de las 3
Enzimas que la forman, E1, E2 y E3.
➢ Vemos que el ΔG°’ de esta Reacción, tanto Estándar como en Condiciones Reales es
muy negativo, lo que hace que sea una Reacción Irreversible, y por lo tanto no se
puedan obtener Glúcidos a partir de Acetil CoA. [Recordar que Piruvato puede
continuar hacia Gluconeogénesis]
❖ 1° Paso
“TPP” = Pirofosfato de Tiamina
❖ 2° y 3° Paso
❖ 4° y 5° Paso
En este esquema se pueden ver las Reacciones encadenadas.
Regulación de la Actividad del Complejo Piruvato Deshidrogenasa
❖ Regulación Alostérica Positiva
➢ NADH
➢ Acetil-CoA
➢ ATP
➢ Ácidos Grasos de Cadena Larga
❖ Regulación Alostérica Positiva
➢ NAD+
➢ CoA-SH
➢ AMP
❖ Regulación Covalente
➢ PDH Desfosforilada → Activa
➢ PDH Fosforilada → Inactiva
➢ La Piruvato Deshidrogenasa Kinasa, dependiente de Magnesio, Fosforila al Complejo
▪ Es Inhibida por ADP, Piruvato, CoA-SH, y NAD+
▪ Es Estimulada por Acetil-CoA y NADH
➢ La PDH Fosfatasa, dependiente de Magnesio y Calcio, Desfosforila al Complejo.
❖ La Formación de Acetil CoA está coordinada con la Velocidad de utilización del ATP.
❖ La PDH Kinasa se inhibe por ADP, el cual aumenta por el consumo de ATP, manteniendo
la PDH Desfosforilada, es decir, activa.
❖ Por otro lado, el NADH y Acetil CoA estimulan a la PDH Kinasa, provocando que se
Fosforile la PDH y se inactive.
❖ Además, aquellas vías como la Oxidación de AGs que producen alta relación
NADH/NAD disminuyen la Actividad de la PDH al activar la PDH Kinasa.
❖ El Piruvato, sustrato de la Reacción, inhibe a la PDHKinasa y manteniendo activa la
Reacción.
Ciclo de Krebs
❖ Es un Ciclo de 8 Reacciones que ocurre en las Mitocondrias de Células Eucariotas,
donde se Oxida el Acetil CoA a Dióxido de Carbono.
❖ Comienza con la Condensación del Oxalacetato [4 Carbonos] con el Acetil-CoA [2
Carbonos] para formar Citrato, a través de la Enzima Citrato Sintasa.
❖ Es un Ciclo Anfibólico porque involucra Reacciones Catabólicas y Anabólicas
❖ Punto de Fuga: Son aquellas reacciones en las cuales salen intermediarios del Ciclo.
❖ Reacciones Anapleróticas: Son aquellas reacciones donde ingresan intermediarios al
Ciclo.
Fuentes de Acetil-CoA
Destinos del Acetil-CoA Generado en Mitocondrias
El Enlace Tioéster de alta energía es entre el Acetato y la Coenzima A.
❖ Oxidación en el Ciclo de Krebs para formar Energía
❖ Forma parte de la Conversión a Cuerpos Cetónicos en Ayuno.
❖ Puede formar parte de la Síntesis de Moléculas Complejas como AGs de Cadena Larga
y de Esteroles en Saciedad.
❖ Pero NUNCA puede ser parte de la Formación de Glúcidos.
➢ Esto por la Reacción de la Piruvato Deshidrogenasa, irreversible. Es decir, no se puede
obtener Piruvato a partir de Acetil-CoA.
❖ Reacciones del Ciclo de Krebs
❖ 1° Reacción: Formación de Citrato
➢ Se Condensa el Oxalacetato [4 Carbonos] con el Acetil-CoA [2 Carbonos] para
formar Citrato, a través de la Enzima Citrato Sintasa.
ΔG°’ -.
❖ 2° Reacción: Formación de Isocitrato
➢ Catalizado por la Enzima Aconitasa.
➢ Primero, se Deshidrata el Citrato, formando cis-Aconitato. Luego, este se Hidrata
formando Isocitrato. Ambas por la Aconitasa.
➢ ΔG°’ +, pero recordar que el ΔG’ Real depende de las Concentraciones.
❖ 3° Reacción: Formación de α-Cetoglutarato
➢ Catalizado por la Isocitrato Deshidrogenasa
▪ Requiere Magnesio o Manganeso
▪ La Inhiben el ATP y el NADH
▪ La Estimulan el ADP y en el caso del Musculo el Calcio.
➢ Se Decarboxila el Isocitrato con liberación de CO2. Luego, se Oxida el Isocitrato
reduciendo un NAD a NADH, dando así α-Cetoglutarato.
➢ ΔG°’ -.
❖ 4° Reacción: Formación de Succinil-CoA
➢ Catalizado el Complejo α-Cetoglutarato Deshidrogenasa
▪ Utiliza como Cofactores el Pirofosfato de Tiamina, CoA-SH, NAD+, y Acido Lipoico.
▪ Es Inhibida por ATP y GTP, NADH y Succinil-CoA
▪ Es Estimulada por ADP y Calcio en su isoforma muscular.
➢ Se da por Decarboxilación Oxidativa, Se obtiene CO2 y Succinil-CoA, y se Reduce un
NAD a NADH.
▪ El Succinil-CoA es un intermediario de alta energía.
➢ ΔG°’ -
❖ 5° Reacción: Formación de Succinato
➢ Catalizado por la Succinil-CoA Sintetasa
➢ Durante esta reacción se produce la Fosforilación de GDP a nivel de Sustrato.
▪ Fosforilación a Nivel de Sustrato: Formación de ATP o GTP a partir de un compuesto
de Alta Energía.
➢ ΔG°’ -
➢ Fosforilación a nivel de Sustrato:
Dato choice;
¿Cuál es el producto de IQ único reacción del
❖ 6° Reacción: Formación de Fumarato ciclo de Krebs catolizado por uno
enzimo de membrana?
el fumarato
➢ Catalizado por la Succinato Deshidrogenasa
▪ Se Inhibe por Malonato, un compuesto con estructura parecida al Succinato.
➢ El Succinato se Oxida a Fumarato, mientras que el FAD se Reduce a FADH2
❖ 7° Reacción: Formación de L-Malato
➢ Catalizado por la Fumarasa.
➢ Se da mediante la Hidratación del Fumarato.
❖ 8° Reacción: Formación de Oxalacetato
➢ Catalizado por la Malato Deshidrogenasa.
➢ Es una Reacción Reversible, que en situación Estándar se encuentra muy desplazada
a la formación de Malato, pero en Condiciones Reales, esta reacción ocurre hacia la
Oxidación del Malato a Oxalacetato con la Reducción de un NAD a NADH.
❖ Recordar que estos son valores de ΔG°’ [Estándar] y en condiciones fisiológicas este es
modificado por las Concentraciones de Sustratos y Productos, y la Temperatura.
❖ Las Reacciones se encuentran Acopladas, es decir, el Producto de una Reacción es el
Sustrato de la siguiente.
❖ Se observa que hay 3 Reacciones con un ΔG°’ muy Negativo, la Reacción de la Citrato
Sintasa, la de la Isocitrato Deshidrogenasa, y la de la a-Cetoglutarato Deshidrogenasa.
➢ En Condiciones Fisiológicas son Reacciones Irreversibles, y por su ΔG°’ tan negativo
permiten que el Ciclo ocurra en la dirección del Consumo de Acetil-CoA, con
generación de NADH, FADH2, CO2 y GTP.
Balance Energético del Ciclo de Krebs
❖ Las Deshidrogenasas del Ciclo son dependientes del aporte de NAD+ y FAD
➢ Sus Actividades están estrictamente controladas por la Cadena Respiratoria, donde
se da la Reoxidación del NADH y el FADH2, acoplado a la generación de ATP.
➢ A su vez, la Cadena Respiratoria esta afectada por el aporte de ADP, Pi y O2.
➢ El NADH formado por una Deshidrogenasa puede inhibir a otra DH si no es Reoxidado
en la Cadena de Transporte de Electrones.
Regulación de las Enzimas del CdK
❖ Citrato Sintasa
➢ No se regula Alostéricamente, pero Acetil-CoA y Oxalacetato aumentan la
Velocidad de la Enzima. [Sus Sustratos]
❖ Isocitrato Deshidrogenasa
➢ Se activa Alostéricamente por ADP
➢ Se inhibe Alostéricamente por ATP y NADH, y también por aumento del Calcio.
▪ Es decir, se inhibe en condiciones de alta disponibilidad de Energía, mientras que
esta se estimula en condiciones de baja Energía.
❖ a-Cetoglutarato Deshidrogenasa
➢ Es Activada por aumentos de la Concentración de Calcio.
▪ Recordar que los aumentos de Calcio deben ser dentro de la Mitocondria.
➢ Es Inhibida por ATP, GTP, NADH y Succinil-CoA [Su producto]
❖ Entonces, se puede decir que la Velocidad del Ciclo de Krebs se puede modificar por 2
Factores: Disponibilidad de Sustratos y el Nivel Energético.
➢ El Nivel Energético se evalúa mediante 2 Relaciones:
▪ Relación ATP/ADP
▪ Relación NADH/NAD
➢ Altos niveles de ATP van a frenar a la Isocitrato Deshidrogenasa, haciendo que
aumente el Isocitrato, y por lo tanto, aumente el Citrato.
▪ A su vez, el Citrato es regulador de la Glucolisis, inhibiéndola en Citoplasma
➢ También el aumento de ATP disminuye el Grado de Regeneración del GDP, frenando
la Succinil-CoA Sintasa, y aumentando los niveles de Succinil-CoA.
▪ El Succinil-CoA va a inhibir competitivamente a la Citrato Sintasa
➢ Por otro lado, si la Relación NADH/NAD se encuentra elevada [Mucho NADH], se va a
frenar la Isocitrato Deshidrogenasa, a la a-Cetoglutarato Deshidrogenasa y a la
Malato Deshidrogenasa. [Es decir, a todas las DH que requieran NAD Oxidado]
