Agar / Colonias Gram y Morfología Observaciones / Posible

Grupo Identificación
(Macro) (Micro) Identidad
1. Enterobacteriaceae E1, M5 Colonias rosadas/rojas, Gram - Bacilos cortos / Sugieren E. coli o Klebsiella
fermentadoras en convexas, algunas bacilos alargados (fermentadoras de lactosa)
MacConkey mucoides
2. Enterobacteriaceae E2 Colonias crema Gram - Bacilos cortos Posible Enterobacter, Proteus
no fermentadoras / brillantes, convexas (cuando no hay pigmentación
crema en MacConkey rosa)
3. Bacilos Gram M1, M2, M3 Colonias con brillo Bacilos cortos, E. coli (M1 por brillo metálico
negativos en Levine metálico (M1) o diplobacilos, filamentos típico en EMB/Levine),
violáceas mucoides Klebsiella/Enterobacter (M2, M3
(M2, M3) por aspecto mucoide)
4. Bacilos Gram E3, E4, E5, E6, Colonias crema o Pleomorfismo: bacilos Probables Pseudomonas,
negativos en nutritivo M8, P6.2, P8.2, mucoides, convexas cortos, largos, filamentos, Acinetobacter, o Enterobacter
con pleomorfismo P11.1, P11.2 cocobacilos spp.
5. Bacilos Gram E8, P8.2 Colonias crema Cocobacilos encapsulados Posibles Klebsiella spp.
negativos mucoides, convexas
encapsulados /
mucoides
6. Bacilos Gram M9, M10 Colonias sin detalle de Bacilos cortos Pseudomonas u otras
negativos en sangre color enterobacterias
7. Bacilos Gram E7, P14 Colonias pequeñas Bacilos en letras chinas Característico de
positivos 'letras chinas' puntiformes o Corynebacterium spp.
irregulares
8. Cocos Gram P12, P15 Colonias Cocos en cadenas / Posibles Ente0072ococcus spp.
positivos en cadenas crema/translúcidas diplococos
9. Bacilos Gram P5, P6.1, P8.1, Colonias pequeñas a Bacilos / cocobacilos Sugieren Pseudomonas o
negativos P11.1, P11.2 medianas, convexas, Acinetobacter, dependiendo de
oxidasa/catalasa + crema o tornasol oxidasa
Géneros Gram negativos pleomórficos

1. Haemophilus spp.

o Cocobacilos pequeños, pleomórficos.

o Pueden observarse como bacilos cortos, filamentos o formas más redondeadas.

o Ejemplo: Haemophilus influenzae.

2. Bordetella spp.

o Cocobacilos gramnegativos pequeños.

o Ejemplo: Bordetella pertussis.

3. Pasteurella spp.

o Cocobacilos cortos, algunas veces ovalados o filamentosos.

o Ejemplo: Pasteurella multocida.

4. Brucella spp.

o Cocobacilos muy pequeños, pueden parecer granulares o filamentos cortos.

o Ejemplo: Brucella abortus.

5. Acinetobacter spp.

o Aunque algunas cepas son gram variables, se consideran gram negativas.

o Morfología: cocobacilos pleomórficos.

6. Legionella spp.

o Bacilos delgados y pleomórficos.

o Ejemplo: Legionella pneumophila.

7. Bacteroides spp.

o Bacilos gram negativos anaerobios pleomórficos.

o Ejemplo: Bacteroides fragilis.

8. Gardnerella vaginalis

o Se clasifica como gram variable, pero muchos la ubican cercana a gram negativos.

o Pleomórfica: puede verse como cocobacilo, bacilo o incluso filamento corto.

Cocobacilos gram negativos de importancia clínica y alimentaria

1. Brucella spp.
  Morfología: Cocobacilos muy pequeños, pleomórficos.

 Relevancia clínica: Brucelosis (zoonosis grave).

 Reservorio: Animales de granja (bovinos, caprinos, ovinos).

 Transmisión: Leche cruda, queso fresco sin pasteurizar.

2. Haemophilus spp.

 Morfología: Cocobacilos pleomórficos, pequeños.

 Ejemplo: Haemophilus influenzae.

 Relevancia clínica: Infecciones respiratorias, meningitis.

 En alimentos: Contaminación ocasional, más marcador de higiene.

3. Bordetella spp.

 Morfología: Cocobacilos gram negativos, muy pequeños.

 Ejemplo: Bordetella pertussis (tos ferina).

 Alimentos: No es habitual en leche o queso, pero es clásico ejemplo de cocobacilo gram negativo.

4. Pasteurella spp.

 Morfología: Cocobacilos pleomórficos.

 Relevancia clínica: Infecciones en animales y zoonosis.

 En leche/queso: Posible si procede de animales infectados.

5. Acinetobacter spp.

 Morfología: Cocobacilos gram negativos, a veces gram variables.

 Relevancia: Oportunista hospitalario.

 En leche/queso: Bacteria psicrotrófica → causa alteración en refrigeración.

6. Moraxella spp.

 Morfología: Cocobacilos cortos o diplococos.

 Relevancia clínica: Infecciones respiratorias y oculares.

 En alimentos: Puede encontrarse como contaminante.

🔹 Aspecto de Lactobacillus en la tinción de Gram

 Coloración:
Se observan de color violeta/morado porque retienen el cristal violeta gracias a su pared celular
gruesa de peptidoglicano (típico de Gram positivos).
  Morfología:

o Bacilos alargados, rectos o ligeramente curvos.

o Pueden disponerse en cadenas cortas o largas, a veces en parejas.

o Su tamaño es variable según la especie y condiciones de cultivo.

 Distribución:
Suelen verse agrupados, formando cadenas parecidas a las de Streptococcus, pero en forma bacilar.

SEGUNDA TABLA

Grupo / Posible Códigos Macroscópicas (agar, Microscópicas Observaciones

similitud colonia) (Gram,
morfología)

Lactosa E1, M5 Colonias rosadas en Gram negativas, Posibles

fermentadoras MacConkey, convexas bacilos / bacilos Enterobacteriaceae
(MacConkey alargados fermentadoras de lactosa
rosadas) (Ej: E. coli)

No fermentadoras E2 Crema brillante, convexa Gram negativa, Podría corresponder a

en MacConkey bacilos cortos Enterobacteriaceae no
(colonias crema) fermentadoras de lactosa o
Pseudomonadaceae

Bacilos cortos E3, E5, Colonias Gram negativos, Varias cepas

Gram negativos en E6, P6.2, pequeñas/medianas bacilos cortos ± morfológicamente
agar nutritivo P8.2, M9, crema o blancas, filamentos parecidas, posibles
M10 convexas Pseudomonas /
Enterobacteriaceae

Pleomorfismo E4, E8, Colonias crema Gram negativos Probablemente

bacteriano P11.1, mucoides o medianas, pleomórficos Klebsiella /
P11.2 convexas (bacilos, Acinetobacter
cocobacilos,
diplobacilos)

Enterobacterias en M1, M2, Colonias pequeñas a Gram negativas, Posibles E. coli (M1) y
Levine (colonias M3 medianas, convexas, bacilos cortos o otras enterobacterias
negras o violáceas) metálicas o violáceas diplobacilos fermentadoras en EMB

Cocobacilos Gram M8, P6.1, Colonias medianas a Gram negativas, Compatibles con
negativos P8.1 pequeñas, convexas, cocobacilos Acinetobacter /
mucoides Haemophilus
Gram positivas E7, P14 Colonias pequeñas, Gram positivas, Sugieren
bacilos en letras crema, convexas bacilos en letras Corynebacterium
chinas chinas

Gram positivos P12, P15 Colonias pequeñas, Gram positivas, Posibles Streptococcus
cocos en cadenas convexas/translúcidas cocos en cadenas o
diplococos

Gram positivo — P12 además muestra — Podría representar mezcla

irregular cocos en cadenas y o variabilidad fenotípica
bacilos diploides

Pruebas bioquímicas recomendadas

1. Enterobacterias fermentadoras de lactosa (E1, M5, M1 → E. coli)

 TSI (Triple Sugar Iron): ácido/ácido con producción de gas, a veces H₂S negativo.

 Prueba de indol: positiva (E. coli).

 Rojo de metilo (MR): positiva.

 Voges-Proskauer (VP): negativa.

 Citrato de Simmons: negativa.

👉 Perfil clásico: IMViC (++--).

2. Enterobacterias mucoides (M2, M3, E4, E8, P11 → Klebsiella / Enterobacter)

 TSI: ácido/ácido, gas, sin H₂S.

 Indol: negativo (Klebsiella pneumoniae), positivo (K. oxytoca).

 Citrato de Simmons: positivo.

 VP: positivo.

 Ureasa: positiva en Klebsiella.

👉 Diferenciación: Enterobacter es móvil y Klebsiella no.

3. Bacilos cortos Gram negativos (E3, E5, E6, P6.2, P8.2, M9, M10 → Pseudomonas o enterobacterias no
fermentadoras)

 Oxidasa: positiva (Pseudomonas), negativa en Enterobacteriaceae.

 TSI: alcalino/alcalino (no fermentador).

 Producción de pigmento: P. aeruginosa produce piocianina (verde-azulada).

 Citrato: positivo en Pseudomonas.

 Motilidad: positiva.
4. Cocobacilos Gram negativos (M8, P6.1, P8.1 → Acinetobacter o Haemophilus)

 Oxidasa: negativa en Acinetobacter, positiva en Haemophilus.

 Catalasa: positiva en ambos.

 Prueba de crecimiento en MacConkey: Acinetobacter crece, Haemophilus no.

 Requerimiento de factores X (hemina) y V (NAD): positivo en Haemophilus.

5. Bacilos Gram positivos en letras chinas (E7, P14 → Corynebacterium)

 Catalasa: positiva.

 Prueba de ureasa: positiva en algunas especies (C. urealyticum).

 Reducción de nitrato: positiva en la mayoría.

 Fermentación de glucosa: positiva.

👉 Diferenciación con Listeria o Bacillus por movilidad (Corynebacterium inmóvil).

6. Cocos Gram positivos en cadenas (P12, P15 → Streptococcus)

 Catalasa: negativa (diferencia de Staphylococcus).

 Prueba de hemólisis en agar sangre:

o β-hemólisis: S. pyogenes.

o α-hemólisis: S. pneumoniae.

o γ-hemólisis: enterococos.

 Prueba de sensibilidad a bacitracina: positiva en S. pyogenes.

 Prueba de optoquina y solubilidad en bilis: positiva en S. pneumoniae.