3. Antecedentes 3.
1 Los hongos en la biorremediación La presencia de contaminantes disueltos en
agua como fármacos y productos de cuidado personal, actualmente es un problema que llama la
atención (Marco et al., 2009, Caracciolo et al., 2014). La demanda de estos fármacos está en
aumento debido a la creciente población humana y a su consumo relacionado con la calidad de vida
y el buen vivir (Olicón et al., 2017). El consumo de sustancias farmacológicamente activas y su
secreción a las fuentes de agua, causa que se encuentren estos contaminantes en ríos, lagos y
fuentes de agua potable, la naturaleza recalcitrante de los fármacos impide su remoción con las
tecnologías convencionales de las plantas de tratamiento, la calidad del ambiente acuático, con
efectos potencialmente adversos sobre la salud humana y efectos tóxicos sobre la flora y fauna
(Jureczko & Przystaś, 9 2018). Varios fármacos son constantemente agregados al ecosistema, y
aunque su concentración es muy baja, estudios experimentales demuestran que estas
concentraciones pueden alterar el sistema endocrino, inducir la resistencia de patógenos y tener
efectos negativos sobre las comunidades bacterianas naturales y sus funciones (Caracciolo et al.,
2014). Los métodos tradicionales de remoción de compuestos contaminantes en aguas de desecho
como la coagulación, adsorción y oxidación con ozono son costosos y usualmente requieren la
adición de compuestos químicos que son peligrosos para el medio ambiente (Faisal et al., 2009). La
biorremediación se refiere al uso de organismos para eliminar sustancias exógenas en un ambiente
mediante procesos metabólicos o cometabólicos (Chávez et al., 2010), los cuales permiten
transformar los contaminantes en compuestos más simples que son menos tóxicos (Ruíz et al.,
2016). La mayoría de estudios enfocados en la degradación de estos fármacos persistentes, se han
enfocado en bacterias o en consorcios en los que las oxigenasas bacterianas juegan un rol clave en la
degradación de fármacos bajo condiciones aeróbicas, destacando que actualmente hay un creciente
interés en el estudio de actividades enzimáticas de oxidorreductasas de hongos de pudrición blanca,
tales como lignina peroxidasa, manganeso peroxidasa y lacasa, ya que tienen el potencial de oxidar
contaminantes ambientales recalcitrantes (Tran et al., 2010). El sistema enzimático versátil de los
hongos que comprende enzimas intracelulares y extracelulares, les permite transformar los
compuestos farmacéuticamente activos hacia compuestos más biodegradables e incluso su
completa mineralización, así, un proceso con hongos puede remover varios fármacos sin necesidad
de un tratamiento distinto para cada uno de ellos (Mir et al., 2019). 3.2 Los hongos y la degradación
de fármacos 10 CAPACIDAD DE HONGOS PARA REMOVER FÁRMACOS PRESENTES EN AGUAS PARA
RIEGO EN LA SABANA OCCIDENTAL DE BOGOTÁ (COLOMBIA) Los hongos son un grupo de
organismos que juegan un papel importante en la descomposición de materia orgánica como se
observa en la figura 1-1 (Olicón et al., 2017) y adicionalmente, tienen la habilidad de descomponer o
mineralizar compuestos contaminantes mediante oxidasas extracelulares o por enzimas
intracelulares (Syed et al., 2011). Figura 2-1: Esquema de las diferentes rutas de degradación que
pueden utilizar los hongos para descomponer el diclofenaco tanto a nivel intracelular como
extracelular. Tomada de: Olicón et al., (2017).
A continuación, se especifican los mecanismos que usan los hongos para degradar las diversas
sustancias de acuerdo con Olicón y colaboradores (2017): - Adsorción a la pared celular (la adsorción
a la pared celular puede inmovilizar los compuestos del entorno aunque no necesariamente los
degrada). 11 - Producción de biosurfantactes (diversos compuestos anfifílicos superficiales con
porciones hidrofílicas e hidrofóbicas interactúan entre fases de diversa polaridad por lo que se
reduce la interacción interfacial y aumenta la interacción entre moléculas, los biosurfactantes que se
han encontrado en hongos son glicoproteínas, soforolípidos, complejos proteína- lípido, complejos
proteína- polisacárido y glicolípidos). - Producción de enzimas extracelulares (enzimas como
peroxigenasas liberadas al medio para descomponer sustancias, son capaces de oxidar
inespecíficamente un amplio rango de sustratos transfiriendo electrones desde sustratos orgánicos
hacia lacasas, con oxígeno molecular; aunque también pueden mediar reacciones de
oxidaciónreducción con H2O2 como un sustrato aceptor de electrones, y otras reacciones como
epoxidación, peroxigenación aromática y sulfoxidación). - Sistema enzimático intracelular (la familia
del citocromo P450 media las reacciones de desintoxicación de las células e incluye la coordinación
de epoxidasas y transferasas, enzimas, principalmente monooxigenasas, que se relacionan con
reacciones tales como hidroxilación, hetero oxigenación, dealquilación, epoxidación de enlaces
dobles carbono- carbono, reducción y deshalogenación). - Almacenamiento en organelos (la
inmovilización de estos compuestos en el interior de las células también es una forma de remoción
de los fármacos del medio).
El hongo T. versicolor es de carácter ligninolítico, es decir que sus enzimas le otorgan la capacidad
para degradar la lignina de la madera, el proceso de degradación se da mediante un metabolismo
secundario del hongo, proceso en el que no se libera enegría a favor del hongo, y ocurre en un
proceso aerobio; la producción de estas enzimas se favorece en condicioneas de estrés como un pH
bajo y la disminución de nutrientes (Vargas, 2020). Según Vargas (2020) los distintos tipos de
enzimas se caracterizan por: 12 CAPACIDAD DE HONGOS PARA REMOVER FÁRMACOS PRESENTES EN
AGUAS PARA RIEGO EN LA SABANA OCCIDENTAL DE BOGOTÁ (COLOMBIA) Las lacasas que son
producidas por la mayoría de basidiomicetos, son capaces de catalizar la oxidación de donantes de
hidrógeno, que causan la reducción del oxígeno al agua, además son capaces de descarboxilar y
desmetilar. Las ligninas peroxidasas que catalizan la oxidación de lignina aromática previamente
descompuesta, catalizan reacciones de oxidación de las cadenas laterales, estas moléculas
descomponen lignina que haya tenido actividad de la enzima manganeso peroxidasa, Estas enzimas
poseen baja especificidad, por lo que pueden degradar diversos compuestos orgánicos con
estructura similar a los de la lignina, como los hidrocarburos piliciclicos aromáticos. 3.3 Ejemplos del
uso de hongos en la degradación de sustancias A continuación se hace mención de algunas
investigaciones de interés relacionadas con el tema tratado en el presente estudio: Uso de Trametes
versicolor, Irpex lacteus, Ganoderma lucidum y Phanerochaete chrysosporiumen en la degradación
de: Ibuprofeno, ácido clofíbrico y carbamazepina (Marco et al., 2009) En este trabajo, los
aislamientos fúngicos (T. versicolor, P. chrysosporium, G. lucidum e I. lacteus) se mantuvieron en
agar malta 2% en inclinación (pH 4.5) y cada 30 días se realizaban repiques. Los fármacos evaluados
se prepararon en una solución con etanol en una concentración de 10 mg L-1 , se oxigenaron por 1
minuto y se sellaron. Los ensayos se efectuaron en botellas de 125 mL selladas con un tapón de
caucho (Wheaton) y se realizaron en oscuridad para evitar los daños por luz en los compuestos
inestables. El control libre de inóculo se realizó con esterilización en autoclave y se sometió a las
mismas condiciones de los demás tratamientos. 13 La inoculación del medio se realizó agregando un
10% de V/V de la suspensión micelial a una solución de 10 mL del medio correspondiente y se
cultivaron por 7 días en un agitador (135 rpm) a 25ºC. Luego de la incubación las muestras se
filtraron con miliporo de 22 µm y posteriormente se analizaron, como se observa a continuación en
la tabla 2-4. Tabla 2- 4: Degradación de fármacos (ibuprofeno, ácido clofíbrico y carbamazepina) a
escala de laboratorio por medio de tres hongos distintos en un tratamiento en medio líquido (Marco
et al., 2009).
Se encontró que el hongo con el mayor desempeño fue T. versicolor y es una candidato para el uso
en la limpieza de aguas contaminadas con fármacos, además su actividad enzimática comenzó
rápidamente (a tres horas de su inoculación) para degradar el ibuprofeno. De otro lado, se
encuentra la presente investigación: Tratamiento de aguas residuales no estériles de hospitales con
Trametes versicolor (Mir et al., 2019) En éste estudio los aislamientos fúngicos se obtuvieron
previamente (Borràs et al., 2008) y se inocularon en el medio con 20 mL-1 de la solución micelial en
2 litros del medio. El medio de pH 4.5 contenía: 7gL-1 glucosa, 100 mL macronutrientes, 10 mL de
micronutrientes, 2.1 g NH4Cl y 10 mg de tiamina. 14 CAPACIDAD DE HONGOS PARA REMOVER
FÁRMACOS PRESENTES EN AGUAS PARA RIEGO EN LA SABANA OCCIDENTAL DE BOGOTÁ
(COLOMBIA) La temperatura se mantuvo a 25ªC y se usó un biorreactor con flujo de aire estéril. El
agua residual fue pre tratada con un proceso de coagulación- floculación (38 m gL-1 de coagulante y
3.3 mg L-1 de floculante). Del total de fármacos presentes inicialmente en el agua de desecho, un
total del 70% de sus contaminantes farmacéuticos fue removido, los compuestos con mayor
presencia fueron los analgésicos y los antiinflamatorios, seguidos de drogas psiquiátricas y
compuestos que controlan la hipertensión. 3.4 Efectos de hongos sobre bacterias patógenas Para
hongos como Pleurotus. ostreatus (orellana) además de ser utilizados como alimento y en
biorremediación, también se ha reportado la capacidad antimicrobiana de sus extractos, por
ejemplo, en el estudio realizado por Iwalokun et al. (2007), se evaluó su capacidad para inhibir el
crecimiento de bacterias patógenas y levaduras como Pseudomonas sp, Klebsiella sp, Salmonella sp,
E. coli, Bacillus subtilis, Saccharomyces cerevisae, y esta actividad inhibidora también se ha evaluado
con extractos de hongos (Irpex lacteus, Agrocybe sp., L. edodes). Adicionalmente, se ha reportado
(Beltrán et al., 1997) que Pleurotus ostreatus produce diversos compuestos que han sido extraídos
con el uso de tetracloruro de carbono (CCl4), tales como: 3-octanona, 3-octanol, 1-octen-3-ol,
benzaldehído, 1-octanol, ácido benzoico y una traza de un compuesto no identificado; los cuáles
demostraron una fuerte actividad antibacteriana sobre diversas cepas bacterianas. 3.5 Hongos que
no han sido evaluados - Prospectos La investigación del uso de hongos en biorremediación se ha
centrado principalmente en el hongo Trametes versicolor, encontrando que son pocos los hongos
micromicetos reportados para dicho proceso como se observa en la figura 2-2.
Figura 2-2: Hongos utilizados en estudios de remoción de contaminantes. (Marco et al., 2009; Tran
et al., 2010; Hosseinabadi et al., 2014; Caracciolo et al., 2015; Lucas et al., 2015; Olicón et al., 2017;
Jureczko & Przystas, 2018; Lakhouit 2019; Mir et al., 2019) - Construcción propia (Vargas, 2022). Se
puede observar que los casos de estudio en degradación de fármacos con hongos especialmente
micromicetos es escasa y en particular para hongos como Aspergillus sp., Trichoderma viridae y
Mucor ramannianus son reducidos, por lo cual es importante tener en cuenta estos hongos para
futuras investigaciones. Uno de los hongos más estudiados para biorremediación es Phanerochaete
chrysosporium ya que por su capacidad linginolítica, es capaz de degradar varias sustancias (Ruíz et
al., 2017)
