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TESIS
Loja – Ecuador
2019
CERTIFICACIÓN DEL DIRECTOR DE TESIS
ii
CERTIFICACIÓN DEL TRIBUNAL DE GRADO
iii
AUTORÍA
iv
CARTA DE AUTORIZACIÓN
v
AGRADECIMIENTO
Gracias a mis padres Roberto y Silvia por ser los principales promotores de mis sueños,
por siempre desear y anhelar lo mejor para mi vida. A mi hermana Yuri por ser mi ayuda
y compañía cuando más lo necesité, a mi pequeño Mateo quien ha sido mi motor y alegría
desde que llegó a mi vida.
A mis mejores amigos Gustavo y Verónica quienes han sido mi ayuda y apoyo
incondicional durante mi vida universitaria.
vi
DEDICATORIA
Con el corazón lleno de alegría y emoción, dedico este trabajo de tesis primeramente a
Dios por ser quien ha estado a mi lado en todo momento dándome las fuerzas para
continuar luchando día tras día y seguir adelante rompiendo todas las barreras que se me
presenten. A mis queridos padres, Roberto y Silvia, quienes con su amor, paciencia y
esfuerzo me han permitido llegar a cumplir hoy un sueño más, gracias por inculcar en mí
el ejemplo de esfuerzo y valentía, y sobre todo por el sin número de consejos brindados
que me han permitido ser una mejor persona.
vii
INDICE GENERAL
PORTADA …………………………….……………………………………………….i
CERTIFICACIÓN DEL DIRECTOR DE TESIS……………………………………...ii
APROBACIÓN DEL TRIBUNAL DE GRADO……………………………………...iii
AUTORÍA……………………………………………………………………………...iv
CARTA DE AUTORIZACIÓN………………………………………………………...v
AGRADECMEINTO…………………………………………………………………..vi
DEDICATORIA………………………………………………………………………vii
INDICE GENERAL.………………………………………………………………....viii
INDICE DE CUADROS……………………………………………………………...xii
ÍNDICE DE FIGURAS………………………………………………………………xiii
INDICE DE ANEXOS…………………….…………………………………………xiv
RESUMEN...…………………….…………………………………………………....xv
ABSTRACT….……………….………………………………………………………xvi
1. INTRODUCCIÓN…………………………………………………………………...1
2. REVISIÓN DE LITERATURA………………………………………………….….3
2.1 El cultivo de café………………………………………………………………........3
2.1.1. Características botánicas ….....…………...……………………………………...3
2.1.2. Distribución geográfica ….……………………………………….…………..….3
2.1.3. Importancia económica .…………….………...…………………….……….…..4
2.2. Generalidades nemátodos fitoparásitos asociados al cultivo de café…….………...5
2.2.1. Ciclo biológico …………………………………………………………………..5
2.2.2 Sintomatología……………………………………………………………………5
2.2.3. Tipos de alimentación ...…………………………………………………………6
2.2.3.1. Nemátodos ectoparásitos ….……………………………………………….......6
2.2.3.2. Nemátodos Semiendoparásitos……………………………………………...…6
2.2.3.3. Nemátodos Endoparásitos migratorios……….…………………………...…...6
2.2.3.4. Nemátodos Endoparásitos sedentarios……….…………………………...……6
2.2.4. Mecanismos infecciosos …………………………………………………….......7
viii
2.2.5. Rango de hospederos …………………………………………………………….7
2.3. Principales nemátodos fitoparásitos asociados al cultivo de café ……...……….....8
2.3.1 Meloidogyne sp.…………………………………………………………………..8
2.3.1.1 Taxonomía y especies ……………………………………………………….....8
2.3.1.2 Importancia económica…………………………...………………………….....8
2.3.1.3 Morfometría ……......……………………………………………………….....8
2.3.1.4 Condiciones predisponentes …………..……………………………………....10
2.3.2 Pratylenchus spp………………………………………………………………...10
2.3.2.1 Taxonomía y especies ………………………………………………………...10
2.3.2.2 Importancia económica…………………………...…………………………...10
2.3.2.3 Morfometría ……......………………………………………………………...10
2.3.2.4 Condiciones predisponentes …………..………………………………….…...11
2.3.3. Helicotylenchus spp………………………………………………………....….11
2.3.3.1 Taxonomía y especies ………………………………………………………...11
2.3.3.2 Importancia económica…………………………...…………………………...12
2.3.3.3 Morfometría ……......………………………………………………………...12
2.3.3.4 Condiciones predisponentes …………..……………………………………...12
2.3.4. Tylenchus spp………...……………………………………………………..….12
2.3.4.1 Taxonomía y especies ………………………………………………………...12
2.3.4.2 Importancia económica…………………………...…………………………...13
2.3.4.3 Morfometría ……......………………………………………………………...13
2.3.4.4 Condiciones predisponentes …………..……………………………………...13
2.3.5 Xiphinema sp……………………………………………………………………13
2.3.5.1 Taxonomía y especies ………………………………………………………...13
2.3.5.2 Importancia económica…………………………...…………………………...14
2.3.5.3 Morfometría ……......………………………………………………………...14
2.3.5.4 Condiciones predisponentes …………..……………………………………...14
2.3.6 Criconemoides sp…………………..……………………………………………14
2.3.6.1 Taxonomía y especies ………………………………………………………...14
ix
2.3.6.2 Importancia económica…………………………...…………………………...15
2.3.6.3 Morfometría ……......………………………………………………………...15
2.3.6.4 Condiciones predisponentes …………..……………………………………...15
2.3.7 Tylenchulus sp…..………………………………………………………………15
2.3.7.1 Taxonomía y especies ………………………………………………………...15
2.3.7.2 Importancia económica…………………………...…………………………...15
2.3.7.3 Morfometría ……......………………………………………………………...16
2.3.7.4 Condiciones predisponentes …………..……………………………………...16
2.3.8 Aphelenchoides sp……………...………………………………………………16
2.3.8.1 Taxonomía y especies ………………………………………………………...16
2.3.8.2 Importancia económica…………………………...…………………………...16
2.3.8.3 Morfometría ……......………………………………………………………...17
2.3.8.4 Condiciones predisponentes …………..……………………………………...17
2.4. Antecedentes a la investigación ………………………………………………….17
3. MATERIALES Y MÉTODOS ..…………………………………………….……..19
3.1 Zona de muestreo …………………………………………………………………19
3.2 Materiales ……………….………………………………………………………...20
3.2.1. Materiales de campo ………..………………………………………………….20
3.2.2. Materiales y equipos de laboratorio ……………………………………………20
3.3. MÉTODOS ……………………….……………………………………………...20
3.3.1 Metodologia para el primer objetivo………………...………………………….20
3.3.2 Metodología para el segundo objetivo…………………………………………..20
3.3.2.1. Fase de campo………….…………………………….……………………….21
3.3.2.2. Fase de laboratorio……………………………..……………………………..21
3.3.3. Metodología para el tercer objetivo………………………………………….....23
3.3.3.1 Análisis de suelos……………………………………………………………...24
3.3.3.2 Análisis estadístico …………………………………………………………....24
3.3.3.3 Elaboración de mapas de zonificación……………………………...…………25
4. RESULTADOS…………………………………………………………………….26
x
4.1. Determinación de niveles de daño en relación con poblaciones de nematodos
asociados al cultivo de café en la provincia de Loja ……………………….…….26
4.1.1. Incidencia y severidad …………………………………………………………26
4.1.2. Poblaciones de nemátodos fitoparásitos………………………………………..26
4.1.3 Frecuencia poblacional de nematodos fitoparásitos en suelo y raíces ………….29
xi
ÍNDICE DE CUADROS
Cuadro 1. Rango de hospederos de los géneros de nemátodos fitoparásitos………...…7
Cuadro 2. Características geográficas y climáticas de las zonas de estudio……….….19
Cuadro 3. Correlación entre las poblaciones totales de nematodos cuantificadas en suelo
y raíces y las variables edáficas…………………………………………….25
Cuadro 4. Incidencia y severidad de nemátodos fitoparásitos en el cantón Loja……..26
Cuadro 5. Poblaciones de nemátodos fitoparásitos cuantificadas en las zonas cafetaleras
de la provincia de Loja…...………………………………………………...28
Cuadro 6. Frecuencia poblacional de nemátodos fitoparásitos en 100 cc de suelo…...29
Cuadro 7. Frecuencia poblacional de nemátodos fitoparásitos en 10 g de raíces……..30
Cuadro 8. Caracterización morfológica y taxonómica de los nematodos asociados al
cultivo de café en cinco zonas de la provincia de Loja………………...…..31
Cuadro 9. Análisis de correlación entre parámetros edáficos y población total de
nematodos por 100 cc de suelo……………………………………………..36
Cuadro 10. Análisis de correlación entre parámetros edáficos y población total de
nematodos por 10 g de raíces…………...………………………………….36
xii
ÍNDICE DE FIGURAS
Figura 1. Ubicación de las zonas de estudio en la provincia de Loja…………………19
xiii
ÍNDICE DE ANEXOS
Anexo 1. Consolidado de poblaciones de nemátodos fitoparásitos encontrados en suelo
y raíces ……………………………………………………………………..57
Anexo 2. Resultados de análisis de suelos…………………………………………….58
Anexo 3. Mapas de distribución poblacional de nemátodos fitoparásitos de los cantones
en estudio…………………………………………………………………...60
Anexo 4. Muestreo de nemátodos fitoparásitos en zonas cafetaleras de la provincia de
Loja……………………………………………………………………........62
Anexo 5. Plantas muestreadas con aparente sintomatología de nemátodos
fitoparásitos…...……………………………………………………………63
Anexo 6. Evaluación de incidencia y severidad en raíces de cafeto…………………..64
Anexo 7. Procesamiento de muestras en laboratorio………………………………….65
xiv
RESUMEN
xv
ABSTRACT
Parasitic nematoda cause up to 12% loss in the agricultural production worldwide. The
unnoticeable presence and attack of nematoda, together with other factors, considerably
reduce the coffee farming degree of success, affecting the money income of families. This
is the reason why this research was set out with the objective to assess the rate of impact
and severity on roots, identify, characterize, and quantify the main genres of parasitic
nematoda which affect the coffee production in Chaguarpamba, Quilanga, Olmedo, Loja,
and Puyango cantons, that belong to Loja province at three different altitudinal grounds:
high, medium, and low. In order to evaluate incidence and severity Taylor and Sasser
scale was applied to all kind of nematoda. With relation to the identification and
characterization, taxonomic keys were used. Finally, the extraction of nematoda was done
through the Baerman tunnel method on floor, and the Stemerding method on roots. The
samples were processed at the Loja Nematology Laboratory of the District Direction of
Agroquality.
The highest rates of impact and severity were observed at Olmedo canton, specifically on
the low altitudinal ground, with a 66 % average in the case of incidence, and 66.4 % of
severity. In relation with the identification of floor samples, ten genres of parasitic
nematoda were found: Aphelenchus sp., Xiphynema sp., Helicotylenchus sp., Tylenchus
sp., Pratylenchus sp., Tylenchulus sp., Psilenchus sp., Meloidogyne sp., Aphelenchoides
sp., and Criconemoides sp; whose representative populations are: Helicotylenchus sp.
(360 individals/100 cc of groud), Pratylenchus sp. (203 individuals/100 cc of ground),
and Xiphynema sp. (156 individuals/100 cc of gound). On the other hand, only four
genres were found in roots: Xiphynema pp., Helicotylenchus sp., Tylenchus sp., and
Pratylenchus sp.; from these the last one has more population (127 individuals/100 g of
roots). Finally, after establishing the correlation of each edaphic factor with the
population of nematoda on ground, a relationship was found only between the sand and
the nematoda population.
xvi
1. INTRODUCCIÓN
El café es uno de los principales productos de exportación en el ámbito mundial; más del
80 % de su producción se destina al comercio internacional. En efecto, es uno de los
pilares fundamentales de los países tropicales de América Latina, debido a que su
producción y comercio constituyen la base económica de la mayoría de los países
subdesarrollados, principalmente en términos de empleo e ingresos por exportación
(Quintero y Rosales, 2014).
Dentro de las plagas y enfermedades que afectan a este cultivo (Broca y Roya), los
nematodos fitoparásitos constituyen también un factor muy importante a considerar, ya
que son causa de importantes pérdidas para la caficultura, debido que provocan una
disminución del 10 % de la producción (Heredia et al., 2015). Su presencia junto a otros
factores reducen considerablemente los rendimientos del cultivo, afectando los ingresos
económicos de las familias (Quispe et al., 2017).
1
Según Agrios (2011) los nematodos producen síntomas tanto en las raíces como en los
órganos aéreos; los síntomas en la raíz aparecen en forma de nudos, agallas o lesiones,
ramificación excesiva, puntas dañadas de raicillas y pudriciones cuando las infecciones
por nematodos van acompañadas por bacterias, hongos saprófitos y fitopatógenos.
Uno de los principales géneros de nematodos fitoparásitos asociados al cultivo de café es,
Meloidogyne sp. representado principalmente por M. exigua en cuyos estadios juveniles
penetra principalmente por el tejido meristemático provocando hipertrofia e hiperplasia,
induciendo la formación de agallas. Por otra parte, el género Pratylenchus, cuyo principal
representante es P. coffeae, se caracteriza por provocar en la raíz lesiones pardas que
eventualmente causan pudrición de estas (Chaves, 2014).
GENERAL
Realizar estudios de identificación taxonómica, cuantificación de poblaciones y
niveles de daño asociados a nematodos fitoparásitos del cultivo de café en
diferentes zonas productoras de la provincia de Loja.
ESPECIFICOS
Determinar niveles de daño en relación con poblaciones de nematodos
fitoparásitos asociados al cultivo de café en la provincia de Loja.
Identificar nematodos fitoparásitos asociados a las condiciones edafoclimáticas
en zonas productoras de la provincia de Loja.
Relacionar los géneros de nematodos fitoparásitos de mayor porcentaje
poblacional y frecuencia, con las condiciones edafoclimáticas (altitud, textura de
suelo, porcentaje de materia orgánica y pH), de las zonas productoras de café de
la provincia de Loja.
2
2. REVISIÓN DE LITERATURA
Comprende desde arbustos hasta árboles de 5 a 10 metros de altura, todos leñosos. Sus
hojas son elípticas, acabadas en punta y aparecen por pares. Presentan peciolos cortos y
pequeñas estipulas. Las hojas pueden ser también de distintos colores: verde lima, verde
oscuro, bronce o con matices purpúreos. Los frutos son tipo drupa, con epicarpio carnoso
y doble semilla. Las flores aparecen en inflorescencias (ICO, 2014; Waller et al., 2007)
citado por Rojo (2014).
El sistema radicular se caracteriza por ser de tipo pivotante la raíz principal, penetra
verticalmente en el suelo, pudiendo alcanzar una profundidad en una planta adulta de 50
a 60 cm de longitud. A partir de la raíz pivotante se producen raíces laterales de tipo
grueso que sirven de soporte a las raíces delgadas o absorbentes denominadas “raicillas”.
Generalmente alrededor del 80 % de las raicillas se localizan en los primeros 30cm de
profundidad (INIAP, 1993).
2.1.2. Distribución geográfica
El café se cultiva principalmente en los países tropicales ubicados en América Latina,
Asia y África. Los dos tipos de café producidos con fines comerciales son arábica y
robusta (CEDRSSA, 2014). El análisis de las estadísticas cafetaleras reportadas por la
Organización Internacional del Café (ICO) permitieron identificar tendencias crecientes
en los principales países productores, como Brasil, Vietnam e Indonesia y en algunos
países hispanoamericanos, como Honduras, Nicaragua y Perú (Ocampo et al., 2017).
La lista de los veinte principales países productores de café a nivel mundial encabeza
Brasil, con un 30,16 % de la producción total en el mundo, seguido de Vietnam (19,18 %),
Colombia (9,42 %) e Indonesia (7,67 %) (ICO, 2015). Las exportaciones mundiales de
café pertenecientes al mes de abril del año 2018 fueron de 10,18 millones de sacos, cifra
impulsada por un aumento del 14,1 % en las exportaciones de la variedad Robusta y del
6,8 % en la variedad Suaves Colombianos, esto en comparación con 9,50 millones de
sacos producidos en abril de 2017 (ICO, 2018).
A nivel nacional, el café se produce en 20 de las 22 provincias del país lo cual denota la
gran importancia socioeconómica del sector. La Asociación Nacional de Exportadores de
Café, ANECAFE, estima que en la región costa se siembra 112,000 hectáreas (ha), en la
3
sierra 62 000 ha, en la región amazónica 55.000 ha y en Galápagos 1.000 ha de cafetales.
Esta amplia distribución se presenta porque el Ecuador es uno de los 14 países, entre cerca
de 70, que tiene producción mixta es decir, cultiva las especies comerciales arábiga
(Coffea arábica) y robusta (Coffea canephora) (González, 2016).
Loja es la segunda provincia con mayor superficie de café en el país, atrás de Manabí. El
café se cultiva en 20 de los 21 cantones de la provincia (la excepción es Zapotillo). Se
cultivan 21.018 hectáreas de café, las cuales aportan con un 16% a la producción
cafetalera del país. Además, el café representa el segundo cultivo más importante de la
provincia: el 44, 03% del área sembrada le corresponde al cultivo de maíz duro, seguido
por el 12,75% dedicado al café, cuya producción para el año 2018 fue de 4,42 t.
Finalmente, un último dato de relevancia, señala que el 75% de los cafetales están en los
cantones Loja, Olmedo, Sozoranga, Quilanga y Chaguarpamba (PDOTPL, 2005; MAG,
2018).
4
2.2. Generalidades de los nematodos fitoparásitos del café
2.2.1. Ciclo Biológico
El ciclo de vida de la mayoría de los nematodos fitopatógenos es, por lo general, bastante
semejante. Los huevecillos se incuban y se desarrollan en larvas, cuya apariencia y
estructura es comúnmente similar a la de los nematodos adultos. Las larvas aumentan de
tamaño y cada etapa larvaria concluye mediante una muda. Todos los nematodos tienen
cuatro etapas larvarias y la primera muda a menudo se produce en el huevecillo. Después
de la última muda, los nematodos se diferencian en hembras y machos adultos. La hembra
puede entonces producir huevecillos fértiles una vez que se ha apareado con un macho o,
en ausencia de machos, partenogenéticamente, o bien produce esperma por sí misma
(hermafroditismo) (Talavera, 2003).
El ciclo de vida comprendido desde la etapa de huevecillo a otra igual puede concluir al
cabo de tres o cuatro semanas bajo condiciones ambientales óptimas, en especial la
temperatura, pero tardará más tiempo en concluir en temperaturas frías. En algunas
especies de nematodos la primera o segunda etapa larvaria no puede infectar a las plantas
y sus funciones metabólicas se realizan a expensas de la energía almacenada en el
huevecillo (Agrios, 2005).
2.2.2. Sintomatología y tipos de daños ocasionados por nematodos fitoparásitos
Los nematodos que infectan a las plantas producen síntomas tanto en las raíces cómo en
los órganos aéreos de las plantas. Los síntomas de la raíz aparecen en forma de nudos,
agallas o lesiones, ramificación excesiva de la raíz, puntas dañadas de esta última y
pudriciones de la raíz cuando las infecciones por nematodos van acompañadas por
bacterias y hongos saprofitos o fitopatógenos. Estos síntomas con frecuencia van
acompañados por síntomas no característicos en los órganos aéreos de las plantas y que
aparecen principalmente en forma de un menor crecimiento, síntomas de deficiencias en
nutrientes como el amarillamiento del follaje el marchitamiento excesivo en tiempo
cálido o seco, una menor producción de las plantas y una baja calidad de sus productos
(Agrios, 2005).
Según Guzmán et al, (2010), manifiesta que los síntomas secundarios en la parte aérea de
las plantas son ocasionados por nematodos que atacan el sistema radical. Los daños
ocasionados por las especies de nematodos fitopatógenos que infectan semillas, tallos,
troncos y hojas son más específicos, ya que cada una de las enfermedades en la parte
aérea es causada solamente por una especie de nematodo fitopatógeno, por lo tanto,
solamente una especie de nematodo se concentra en las partes afectadas.
5
Otros síntomas son causados por alargamiento anormal de la célula (hipertrofia), por
supresión de la división celular, o por la estimulación de proceso de división celular de
una manera controlada y que resulta en la formación de agallas (hiperplasia) o de un gran
número de raíces laterales en o cerca de los sitios de infección (Peña y Páez, 2014).
2.2.3. Tipos de alimentación en nematodos fitopatógenos
Aunque los nematodos fitoparásitos pueden atacar raíces, tallos, troncos, yemas, hojas,
flores y semillas, el tejido atacado varía de acuerdo con la especie de fitonematodo y
el hospedante (Sasser, 1989). Generalmente se clasifican en dos grandes grupos con
relación a su ubicación en el tejido vegetal, o sea, al tipo de relación biotrófica establecida
con la planta hospedera (Bello et al., 1994).
2.2.3.1. Nematodos ectoparásitos: Son los nematodos que se alimentan sin penetrar a
las raíces. En general, los ectoparásitos son de mayor tamaño y con estiletes más largos
que los endoparásitos con el fin de penetrar el tejido de las raíces (Guzmán et al., 2011).
Algunos de estos nematodos inducen la planta para formar una célula o células ampliadas
que el nematodo se alimenta durante un período prolongado de tiempo. Como ejemplos
representativos de ectoparásitos con estilete corto están: Tylenchorinchus, Trichodorus,
Paratrichodorus y algunas especies de Helicotylenchus; mientras que como
representantes de este grupo que presentan estilete largo son: Belonolaimus,
Criconemoides, Hemicycliophora, Longidorus, Paratylenchus y Xiphinema (Peña y Páez, 2014).
2.2.3.2. Nematodos Semi-endoparásitos: En este caso, solamente la parte anterior del
nematodo penetra las raíces y la parte posterior permanece en contacto con el suelo
(Guzmán et al., 2011). Por lo general, la cabeza del nematodo penetra en la raíz y le
permite formar una célula de alimentación permanente. Estos nematodos se hinchan y no
se mueven una vez que han entrado en la fase de endoparásitos de su ciclo de vida. Ejemplos
representativos son: Tylenchulus, Rotylenchus y Sphaeronema (Peña y Páez, 2014).
2.2.3.2. Nematodos Endoparásitos migratorios: retienen su movilidad y no están fijos
en un sitio de alimentación dentro de los tejidos de la planta. Se alojan y migran través
de los tejidos, no forman células modificadas de alimentación, ni saco de huevos, y
todos sus estados de desarrollo son parasíticos (Guzmán et al., 2011). Existen
endoparásitos migratorios de partes aéreas y migratorios de partes subterráneas; ejemplos
representativos de este grupo son: Hirschmanniella, Radopholus y Pratylenchus (Gómez
y Montes, 2003).
2.2.3.2. Nematodos Endoparásitos sedentarios: se caracterizan por tener un estilete
pequeño y delicado; las hembras inmaduras y juveniles entran al tejido de la planta
6
donde desarrollan un sitio de alimentación fijo e inducen la formación de un sofisticado
sistema trófico de células de abrigo (cuidar, criar) llamado sincitia (células gigantes),
se tornan inmóviles, adquieren una forma abultada para formar y depositar los huevos
(Guzmán et al., 2011). Los juveniles se alimentan, agrandan y mudan tres veces hasta la
etapa adulta. Las células grandes o de alimentación formadas por estos nematodos en el
tejido vascular de la planta la hacen susceptible al estrés hídrico. Como ejemplos
representativos de este grupo están: Globodera, Meloidogyne, Heterodera, Nacobbus,
Punctodera y Cactodera (Peña y Páez, 2014).
2.2.4. Mecanismos infecciosos
Los nematodos dañan a las plantas sólo ligeramente mediante los daños mecánicos
directos que producen en ellas en el momento de alimentarse. Parece ser que la mayoría
de los daños son ocasionados por una secreción de saliva que el nematodo inyecta en la
planta mientras se alimenta de ella. Algunas especies de nematodos se alimentan con gran
rapidez; perforan la pared celular, inyectan saliva en la célula, succionan parte de los
contenidos de esta última y se mueven en el interior de ella al cabo de unos cuantos
segundos: Sin embargo, otras especies se alimentan con menos rapidez y pueden
permanecer en el mismo punto de entrada a la célula durante varias horas o días. Estos
nematodos así como las hembras de las especies que se establecen permanentemente en
o sobre las raíces, inyectan saliva en forma intermitente mientras se están alimentando
(Agrios, 2005).
El proceso de alimentación puede realizarse desde fuera de la planta (ectoparásitos) o
desde dentro de la planta (endoparásitos). Dentro de los endoparásitos, hay géneros
móviles en los que juveniles y adultos pueden migrar a través de las raíces y salir y
entrar de ellas y sedentarios en los que los J2 se fijan a un sitio a la raíz y ahí se
desarrollan hasta completar su ciclo de vida (Talavera et al., 2014).
2.2.5. Rango de hospederos de los géneros fitoparásitos asociados a cultivos
hortícolas.
Cuadro 1. Rango de hospederos de los géneros de nematodos fitoparásitos
Género Rango de hospedero Autor
Tiene cerca de 2.000 hospederos,
entre ellos: hortalizas, frutales, (Talavera, 2003; INIA,
Meloidogyne sp.
ornamentales, forestales y 2017)
cereales.
7
Azúcar, arroz, maíz, piña,
plátano cebolla, banano, cítricos,
(Sandoval, 2015; Crozzoli,
Pratylenchus sp. guanábana, ñame, papa, algodón,
2014)
camote, cacao, fresa, tomate, uva
y varias malezas
Banano, plátano, arroz, sorgo, (Zem et al., 1981; Moens
cacao, papa, caña de azúcar, piña, et al., 2006; Goodey et al.,
Helicotylenchus sp.
maíz, té, maní, olivo, pitahaya 1965; Guzmán-
amarilla y especies forestales. Piedrabitha, 2010)
Tylenchus sp. Cítricos, vides, piña, olivo y kaki (Aballay y Navarro, 2005)
Rosáceas, solanáceas,
(Cepeda, 1996; Merrifield,
Xiphynema sp. cucurbitáceas, poáceas, vitáceas,
2003; INIA, 2017)
tales como vid, higueras y rosas.
Cultivos perennes, ciclo corto,
Criconemoides sp. (Crozzoli, 2014)
plantas leñosas y el césped.
Tylenchulus sp. Cítricos y vid. (Talavera, 2003)
Crisantemo, fresa, lirios y otras
Aphelenchoides sp. (Sernaque, 2018)
plantas ornamentales.
Filo: Nematoda
Clase: Secernentea
Orden: Tylenchida
Familia: Heteroderidae
Género: Meloidogyne
Especies: 133 especies (Hunt y Handoo 2009) citado por Solano (2014).
Hunt y Handoo (2009) relacionaron más de 130 especies del género Meloidogyne,
distribuidas en todo el mundo. De ellas, 10 son importantes por los daños económicos
8
que provocan, pero sobresalen cuatro especies por su amplia distribución y daños. Estas
especies son: M. incognita, Meloidogyne javanica (Treub) Chitwood,Meloidogyne
arenaria (Neal) Chitwood y Meloidogyne hapla Chitwood,las dos primeras son comunes
en climas tropicales, M. arenaria es frecuente en climas subtropicales y M. hapla en
regiones templadas, aunque también puede encontrarse en las regiones tropicales altas
(Sikora y Fernández, 2005; Gandarilla, 2005; Karssen y Moens, 2006).
En los últimos años, varios estudios han advertido que la especie Meloidogyne enterolobii
Yang y Eisenback (syn. Meloidogyne mayaguensis Rammah y Hirschman) ha tenido una
dispersión relativamente rápida, de gran importancia económica por los daños que
ocasiona debido a la habilidad para vencer la resistencia de los cultivos, entre ellos las
hortalizas y frutales que llevan el gen Mi-1 que confiere resistencia a M. javanivca, M.
arenaria y M. incognita (Tigano et al., 2010; Karssen et al., 2012; Arévalo, 2012) citados
por Solano (2014).
2.3.1.2. Importancia económica de los nematodos agalladores Meloidogyne spp
Las pérdidas de cultivo estimadas mundialmente, debidas a Meloidogyne y a otros
nematodos, es de más o menos 5 %. Esta cifra no significaría mucho si estuviese
distribuida equitativamente. Pero no es así, la mayor parte de la pérdida afecta a quienes
menos pueden soportarla, es decir, a los pequeños agricultores de los países en desarrollo.
Sus pérdidas pueden ser de 25 % a 50 % sobre grandes áreas de tierras de cultivo (Taylor
y Sasser, 1983).
Las pérdidas en rendimientos en el cultivo de café por causa de Meloidogyne spp. son en
promedio 10 – 15%; pero, en determinadas condiciones, principalmente climáticas y
edáficas, puede ser hasta de 100% (Souza y Bressan, 2008).
9
2.3.1.4. Condiciones predisponentes para nematodos agalladores Meloidogyne spp
En regiones tropicales, donde la temperatura no varía grandemente entre estaciones,
Meloidogyne spp., puede reproducirse constantemente en la presencia de un hospedero y
humedad favorable en el suelo. Con suficiente aireación en el suelo y una adecuada
humedad necesarios para el movimiento y la infección, suelos arenosos o bien
estructurados y drenados, combinados con un régimen apropiado de irrigación o
suficiente lluvia, favorece la reproducción del nematodo. Meloidogyne spp., es
encontrado en suelos arenosos o franco arenosos (Taylor y Sasser, 1983).
2.3.2. Pratylenchus spp.
2.3.2.1 Taxonomía y especies
Reino: Animalia
Filo: Nematoda
Clase: Chromadorea
Orden: Tylenchida
Familia: Hoplolaimidae
Género: Pratylenchus
Los estadios juveniles de Pratylenchus normalmente poseen los mismos caracteres que
los adultos, pero no cuentan con órganos reproductivos desarrollados. Según Crozzoli
(2014) las hembras y machos presentan la siguiente anatomía:
10
Hembra: región cefálica ligeramente contrastada, redondeada y conformada por dos
anillos. Estilete robusto con protuberancias basales anchas y redondas (17-22 µ). Margen
externo de la estructura cefálica ligeramente esclerotizado extendiéndose lateralmente en
el cuerpo por el alto de un anillo. Campos laterales marcados por cuatro líneas
longitudinales. Fasmidios ubicados cerca de la mitad de la cola, la cual se va estrechando
hacia el extremo, terminando de forma redondeada y lisa. La longitud total del cuerpo es
aproximadamente de 390-750 mm (Guerrero, 2017).
Según Chávez et al (2014) en trabajos desarrollados en Costa Rica, encontró que la mayor
densidad poblacional de Pratylenchus está asociada con mayor cantidad de lluvia (1248
mm), mayor altitud (1175 msnm), mayor porcentaje de arena (40 a 52 %) y menor
porcentaje arcilla (10 – 26.6 %).
2.3.3. Helicotylenchus spp.
2.3.3.1 Taxonomía y especies
Según Fortuner et al., (1987) y Siddiqi (2000) este género de nematodos tienen la
siguiente clasificación taxonómica:
Reino: Animalia
Filo: Nematoda
Clase: Secernentea
Orden: Tylenchida
Familia: Hoplolaimidae
Género: Helicotylenchus
Especie: H. dihysteray H. multicinctus, son las que revisten la mayor importancia desde
el punto de vista agrícola, y la especie que frecuenta el cultivo de café principalmente es
H. erythrinae (Crozzoli, 2002).
11
2.3.3.2 Importancia económica de los nematodos Helicotylenchus spp
El género Helicotylenchus contiene más de 160 especies, siendo uno de los más
abundantes del orden Tylenchida, al cual pertenece la mayoría de nematodos fitoparásitos
(Guzmán-Piedrahita, 2010).
De acuerdo con las frecuencias y densidades poblacionales, durante el año y en las zonas
productoras de musáceas en cada país, R. similis es la especie fitoparásita más abundante,
constituyendo entre el 82 y 97% de la población de nematodos en raíces y cormos; sin
embargo, ésta puede cambiar según el cultivo, variedad y las condiciones agroecológicas
(Araya y Moens, 2003).
2.3.3.3 Morfometría de los nematodos Helicotylenchus spp
Las longitud del cuerpo de las hembras es de 0,47-0,53mm (promedio de 0,50 mm), es
arqueado con forma de C cuando está relajado; posee anulaciones distintivas, cerca de
1,5µm de ancho en la mitad del cuerpo, campos laterales no areolados, con 4 incisuras,
aproximadamente una cuarta parte del ancho del cuerpo. Una región labial hemisférica,
ligeramente compensada, con 3-5 (usualmente 4) anulaciones y una depresión oral
prominente terminal, marco cefálico fuertemente esclerotizado, con conspicuas márgenes
exteriores extendiéndose posteriormente a través de 3 a 4 anulaciones del cuerpo, las
cuales son mucho más estrechas en esa región que en las otras.
El cuerpo de los machos tiene una longitud de 0,43-0,55mm, similar a la hembra, excepto
el dimorfismo sexual, son abundantes. Poseen un solo testículo, extendido anteriormente,
espermatozoides pequeños y redondeados, espermateca pequeña redondeada (Siddiqi,
1973).
2.3.3.4 Condiciones predisponentes de los nematodos Helicotylenchus spp
Según Ferris (1960) y Willmontt et al. (1975), H. dihystera puede sobrevivir 6 meses en
suelo almacenado en sacos de plástico a temperaturas tan altas como 18-24°C en bodegas
y tan bajas como 1.1-1.4°C en refrigeradores, pero a una temperatura del suelo de 24 a
35ºC no sobrevive 80 días. H. multicinctus puede sobrevivir en suelo sin plantas
hospedantes por 4 meses en ambiente de laboratorio. Ésta capacidad le permiten al
nematodo parasitar e incrementar sus poblaciones en las raíces secundarias ramificadas y
superficiales de diferentes especies de plantas (Siddiqi, 1972).
2.3.4. Tylenchus spp.
2.3.4.1. Taxonomía
Reino: Animalia
12
Filo: Nematoda
Clase: Chromadorea
Orden: Tylenchida
Familia: Tylenchulidae
Género: Tylenchus
Las pérdidas de cultivos inducidas por este tipo de nematodos en los campos de Florida
oscilan entre el 10-20%, mientras que en condiciones áridas y de alta salinidad presentes
en los estados occidentales pueden alcanzar el 50% (Duncan 2005).
2.3.4.3. Morfología de los nematodos Tylenchus spp
Tiene presencia de campos laterales, estilete pequeño con nódulos básales, vulva en la
mitad del cuerpo en las hembras. Los machos presentan bursa conspicua y cola filiforme
(Espinosa et al., 2004).
2.3.4.4. Condiciones predisponentes de los nematodos Tylenchus spp
En general este nematodo se adapta a una amplia gama de condiciones de suelo y
humedad desarrollándose también en suelos de texturas arcillosas. En la medida que las
plantas se desarrollan en condiciones de algún tipo de deficiencia hídrica o fluctuaciones
marcadas, baja fertilidad, o de temperaturas extremas, dichos síntomas aparecen en menor
tiempo y son más notorios (Timmer et al., 2003).
2.3.5. Xiphinema spp.
2.3.5.1. Taxonomía y especies
Reino: Animalia
Filo: Nematoda
Clase: Enoplea
Orden: Dorylaimina
Familia: Longidoridae
13
Género: Xiphynema
Reino: Animalia
Filo: Nematoda
Clase: Secernentea
Orden: Tylenchida
Familia: Criconematidae
Género: Criconemoides
14
2.3.6.2. Importancia económica de los nematodos Criconemoides spp.
Algunas especies son responsables de daños restringidos a determinados cultivos en
algunos países o continentes, como C. ornata en (EE.UU., África) y C. onoensis en arroz
(India, EE.UU., África), pero C. xenoplax es la única que se considera realmente como
un problema fitosanitario en Estados Unidos y Brasil, desempeñando un papel importante
en la aparición de una enfermedad compleja de la cultura referida como "muerte temprana
del melocotón" (Barbosa y Finlay, 2016).
2.3.6.3. Morfometría de los nematodos Criconemoides spp.
Las hembras poseen una cutícula fuertemente estriada, a veces con ornamentaciones,
raramente con doble cutícula. La región cefálica es sustituida por un plato labial y, en
algunos casos, lóbulos submedianos y/o pseudolabios. Las protuberancias basales del
estilete tienen forma de ancla. El largo total del cuerpo es de (63-82 µm) y la longitud del
estilete es de 63-82 µm (Crozzoli, 2014)
Reino: Animalia
Filo: Nematoda
Clase: Secernentea
Orden: Tylenchida
Familia: Tylenchulidae
Género: Tylenchulus
15
La disminución del rendimiento está directamente relacionada con las poblaciones de este
nematodo en el suelo, representan un efecto económico con un nivel de umbral alrededor
de 1000 juveniles / 100 cm3 de suelo (Bridge y Starr, 2007).
2.3.7.3. Morfometría de los nematodos Tylenchulus spp
Hembra: Cuerpo irregularmente engrosado (349-406 µ) posteriormente a la base de la
faringe, ligeramente curvado ventralmente y de forma digitada después de la vulva. Vulva
ubicada en la parte posterior del cuerpo, presencia de un ovario enrollado, espermateca
con espermatozoides. Recto y ano no visibles. Poro excretor apenas anterior a la vulva.
Estilete de 12-15 µ.
Reino: Animalia
Filo: Nematoda
Clase: Rhabditida
Orden: Aphelenchida
Familia: Aphelenchoididae
Género: Aphelenchoides
Especie: 141 especies validas, las principales especies de interés fitopatológico son: A.
ritzemabosi, A. fragariae, A. besseyi, A. arachidis, A. composticola, A. blastophthorus
(Shahina, 1996) citado por Escuer y Bello (2000).
16
2.3.8.3. Morfometría de los nematodos Aphelenchoides spp
Hembra: Cuerpo delgado, recto y ligeramente arqueado ventralmente cuando está
relajado. Región cefálica redondeada, no estriado, ligeramente desplazado y más ancho
que el cuerpo en la base del labio. Poro excretor generalmente cerca del borde anterior
del anillo nervioso. Al final de la cola presenta mucro de forma diversa, con tres a cuatro
puntas. La longitud total del cuerpo va de 0,77-1,20 mm y la longitud del estilete de 12 µ
(Allen, 1952) citado por Guerrero (2017).
Masculino: Extremo posterior del cuerpo curvado alrededor de 180 grados, cola de forma
conoide, con mucro terminal con procesos de dos a cuatro puntas. Las espículas de las
extremidades dorsales miden 18–21 µ (media 19.2 µ) (IPPC, 2016).
2.4. Antecedentes de la investigación
Esquivel (1996) realizó estudios acerca de la influencia del suelo sobre las poblaciones
de nematodos; menciona que la textura y la estructura del suelo tienen un efecto
importante sobre los nematodos fitoparásitos y aparentemente el tamaño de poro afecta
la facilidad con la que los nematodos pueden desplazarse a través del suelo.
Según Stirling (1991) mencionado por Esquivel (1996) indica que el movimiento de los
nematodos en el suelo está relacionado con el diámetro de los poros, el diámetro del
nematodo y la cantidad de agua en el espacio poroso. Un nematodo no puede moverse
entre las partículas de suelo cuando el diámetro de los poros es menor que en el ancho del
cuerpo de nematodo.
18
3. MATERIALES Y MÉTODOS
Olmedo 3° 55´55.45´´ S
1200 - 2000 16 - 22 700 - 1200
79° 38´47.44´´ O
3º 52´ 23´´ S
Chaguarpamba 440 - 1910 16 – 28,9 700 - 1200
79° 38´ 27´´ O
4° 00´ 53,05´´ S
Puyango 400 - 2400 15 – 24 700 – 1500
80° 01´07,99´´ O
19
4° 17´ 49,44´´ S
Quilanga 1160 - 3560 12 - 21 251.2
79° 24´ 02,73´´ O
Loja- 4º 15’ 39” S
1700 11 - 22 500 - 1500
Vilcabamba 79º 13’ 21’’ O
Fuente: (PDOTPL, 2005)
3.2. MATERIALES
GPS, cooler, barreta, palas planas, barreno, bolsas de plástico con capacidad para 1 o 2
kg, etiquetas, tijeras de podar, libreta de campo, marcadores de tinta indeleble, lupa.
Materiales y reactivos: Cajas de Petri, tubos Falcon de 50ml, alcohol potable, porta y
cubre objetos, licuadora, vaso de precipitación de 280 ml, lunas de reloj, embudo, soporte
universal, mallas circulares de metal, micropipeta 1-5ml contadores, puntas para
micropipeta, bandejas de plástico, bisturí, rotuladores, lactofenol, manguera de hule,
pinzas de plástico, pizeta de plástico; estereoscopio, microscopio, balanza granataria,
cámara digital.
3.3 MÉTODOS
3.3.1 Metodología para el primer objetivo
Determinar niveles de daño en relación con poblaciones de nematodos fitoparásitos
asociados al cultivo de café en la provincia de Loja.
Para determinar los niveles de daño radicular en relación con las poblaciones de
nematodos, se usó la escala de incidencia y severidad de Taylor y Sasser (1983) la cual
posee cinco grados y es aplicada para todo tipo de nematodos, cuyos grados son los
siguientes: 0 = planta sana, 1 – 25 %; 2 = 26 – 50%; 3= 51 – 75% de daños; 4 = mayor a
75% de daños.
20
3.3.2.1 Fase de campo
Muestreo
El muestreo que se empleó fué de tipo dirigido, en plantas con aparente sintomatología
de nematodos, para lo cual se seleccionaron 10 plantas por cada piso altitudinal; de cada
una de estas, se recolectó una muestra de suelo rizosférico (100cm3) en dirección de las
raíces descubiertas y una muestra de raíces de los cuatro puntos cardinales de la planta.
Las muestras de suelo fueron homogenizadas en una sola muestra por cada piso de
muestreo. Las muestras de raíces y suelo se recolectaron por separado, y fueron
colocadas dentro de fundas plásticas para luego ser etiquetadas.
Cuadro 3. Características de los pisos altitudinales seleccionados en cada una de
las zonas de muestreo.
Coordenadas
Altitud
Zonas Piso altitudinal
(msnm)
X Y
Alto 2008 697413 9565238
Loja
Bajo 1737 699879 9531664
Alto 1906 678653 9525447
Quilanga Medio 1598 677309 9519427
Bajo 1384 677288 9518955
Alto 1800 651167 9563444
Olmedo Medio 1506 652154 9565799
Bajo 1208 650414 9565246
Alto 1363 655171 9570617
Chaguarpamba Medio 1108 648871 9573580
Bajo 813 637160 9574222
Alto 1428 616924 9556153
Puyango Medio 1100 606553 9558999
Bajo 897 616645 9563950
Fuente: Autora
3.3.2.2 Fase de laboratorio
Extracción de nematodos
21
El método de embudo de Baermann (Baermann, 1917) determina el siguiente protocolo:
4. Seguidamente, la solución colectada del último tamiz, se vierte sobre la servilleta con
cuidado de que esta pueda romperse. Una vez filtrado toda el agua, se cierra la
manguera colocando una piza plástica en la parte final.
5. Con ayuda de la pizeta se coloca agua hasta cubrir toda la superficie del embudo (175
ml). Se deja reposar por 48 horas.
22
Cuantificación e Identificación
23
Identificación taxonómica
Los mapas de zonificación fueron elaborados en el programa ArcMap versión 10.4, donde
se evidencia la distribución de las poblaciones significativas de los principales géneros
de nematodos fitoparásitos de acuerdo a los pisos altitudinales encontrados en los
diferentes cantones en estudio.
25
4. RESULTADOS
26
4.1.2. Población de nematodos fitoparásitos en suelo y raíces
27
Cuadro 6. Poblaciones de nematodos fitoparásitos cuantificadas en las zonas cafetaleras de la provincia de Loja.
Aphelenchus Xiphynema Helicotylenchus Tylenchus Pratylenchus Tylenchulus Psilenchus Meloidogyne Aphelenchoides Criconemoides
Piso spp. spp. spp. spp. spp. spp. spp. spp. spp. spp.
Cantón
altitudinal
suelo raíz suelo raíz suelo raíz suelo raíz suelo raíz suelo raíz suelo raíz suelo raíz suelo raíz suelo raíz
Piso bajo 13 17 13 467 4 9 9
Loja
Piso alto 9 43 9 22 9 52 4
Piso alto 30 35 30
Quilanga Piso medio 22 35 233 700
Piso bajo 4 56 13 233 233 13 9
Piso alto 22 30 17
Olmedo Piso medio 30 460 22 940 13
Piso bajo 4 4 65 700 13 460 4 4
Piso alto 9 17 13 700
Chaguarpamba Piso medio 9 9 17 4 4
Piso bajo 17 233 9 9 467
Piso alto 13 233 9 22 233 4
Puyango Piso medio 13 13 233 22 233 13
Piso bajo 53 22 467
TOTAL 39 156 233 360 1867 52 693 203 4433 108 22 9 39 4
Total por
género en
39 389 2227 745 4636 108 22 9 39 4
suelo y
raíces
*Los valores están relacionados por 100 cc de suelo y 10 g de raíces. Las casillas en blanco indican ausencia de individuos.
28
4.1.3. Frecuencia poblacional de nematodos fitoparásitos en suelo y raíces
29
Cuadro 8. Frecuencia poblacional de nematodos fitoparásitos en 10 g de raíces
Frecuencia poblacional (%) Prome
Cantón: Loja Quilanga Olmedo Chaguarpamba Puyango dio de
Piso: frecue
pa pb pa pm pb Pa pm pb pa pm pb pa pm pb ncia
Género
(%)
Xiphynema 33 3
Helicotylenchus 100 25 60 50 50 29
Tylenchus 50 33 8
Pratylenchus 75 50 67 40 100 67 50 50 100 60
pa: piso alto, pm: piso medio y pb: piso bajo.
Las casillas en blanco indican la usencia de individuos.
30
Cuadro 9. Caracterización morfológica y taxonómica de los nematodos asociados al cultivo de café en cinco zonas de la provincia de Loja
Características
Características morfológicas
micrométricas
Posible género Evidencia fotográfica
Hembra Macho
Hembra Macho
(mm) (mm)
Cuerpo:
Cuerpo: arqueado o en
0,6- 0,8
espiral.
Región
Región cefálica: poco
cefálica:
diferenciada del cuerpo.
ancho:
Estilete: corto, fuerte, con Helicotylenchus
0,005 -
ensanchamientos gruesos. ** ** sp.
0,007
Ovarios: dos. (Taylor, 1971)
largo: 0,03
Vulva: en el cuarto posterior
– 0,05
del cuerpo.
Estilete:
Cola: de casi redondeada a
0,015 –
puntiaguda.
0,018.
A. Región cefálica. B. Vulva. C. Cola.
31
Cuerpo: Campos
laterales marcados
por 4 líneas
longitudinales.
Región cefálica:
ligeramente Cuerpo:
contrastada, 0,61
redondeada y Región
conformada por dos cefálica:
Pratylenchus sp.
anillos. ancho:
** ** (Crozzoli, 2014)
Estilete: robusto con 0,007
protuberancias largo:
basales anchas y 0,03
redondas Estilete:
Cola: redondeada a 0,008
puntiaguda, con
aleta. Espículas:
delgadas y
ventralmente A. Región cefálica. B. Vulva y cola en
cóncavas. hembra. C. Cola macho.
32
Cuerpo: largo y esbelto que
adopta postura en forma de c
abierta.
Región cefálica: desde baja Cuerpo: similar al
hasta alta; aberturas de los de la hembra, pero
Cuerpo:
anfidios longitudinales. más pequeño en Cuerpo:
1,5
Estilete: recto, muy tamaño y más 1,9
Región
adelgazado, provisto de curvado en el tercio Región
cefálica:
largas extensiones. El anillo posterior. cefálica: Xiphinema sp.
ancho:
guía se ubica Región cefálica: ancho: 0,01 (Taylor, 1971;
0,009
aproximadamente a la mitad hemisférica y bien largo: Crozzoli, 2014)
largo:
del estilete. Esófago sin contrastada. 0,004
0,004
bulbo medio. Estilete: idéntico a la Estilete:
Estilete:
Ovarios: uno solo. hembra. 0,14
0,12
Vulva: típicamente Cola: idéntico a la
anfidélfico-didélfico hembra.
A. Región anterior. B. Vulva. C. Cola de
Cola: varía desde filiforme
hembra. D. Cola de juvenil
elongada hasta corta y
claramente redondeada.
33
Cuerpo:
Cuerpo: corto en todas sus 0,52 – 0,55
Cuerpo:
fases, en hembras más Región
Cuerpo: corto en 0,61
turgentes. cefálica:
todas sus fases. Región
Región cefálica: poco ancho:
Región cefálica: cefálica:
diferenciada, no 0,002 -
poco diferenciada, no ancho: Tylenchus sp.
esclerotizada. 0,005
esclerotizada. 0,003 (Taylor, 1971)
Estilete: bien desarrollado largo:
Estilete: pequeño. largo:
Ovarios: dos 0,001 –
Cola: no poseen 0,002
Vulva: prominente en la 0,003
aleta. Estilete:
extremidad posterior. Estilete:
0,012
Cola: de forma aguzada. 0,008 –
0,011
Cuerpo: irregularmente
Cuerpo:
engrosado posteriormente a
Cuerpo: similar al 0,53 – 0,74
la base de la faringe, Cuerpo:
de las hembras. Región
ligeramente curvado 0,56
Región cefálica: sin cefálica:
ventralmente y de forma Región
marco cefálico ancho:
digitada después de la vulva. cefálica:
esclerotizado. 0,005- Tylenchulus sp
Región cefálica: sin marco ancho:
Estilete: pequeño 0,007 (Crozzoli,
cefálico esclerotizado. 0,007
con nódulos basales. largo: 2014).
Estilete: pequeño con largo:
Cola: presentan 0,003-
nódulos basales 0,002
bursa 0,004
Ovarios: dos. Estilete:
conspicua y cola Estilete:
Vulva: en la mitad del 0,013
filiforme 0,011-
cuerpo en las hembras.
0,014
Cola: filiforme.
A. Región anterior. B. Vulva. C. Cola de
hembra
34
Cuerpo: casi recto
Región cefálica: con
Cuerpo:
un disco labial
0,38
ligeramente elevado
Región
hemiesferoidal, no
cefálica:
contrastada.
ancho:
** Estilete: con **
0,005 Meloidogyne sp.
protuberancias
largo: (Crozzoli, 2014)
basales redondas y
0,003
bien diferenciadas
Estilete:
Cola: con
0,004
terminación
redondeada.
A. Región anterior. B. Cola. C. Cuerpo
completo
Cuerpo: procorpus
delgado, bulbo medio muy
desarrollado Cuerpo: similar a la
Cuerpo:
Región cefálica: hembra. Cuerpo:
0,49 – 0,52
ligeramente contrastada, no Región cefálica: 0,6
Región
anillada similar a la hembra. Región
cefálica:
Estilete: con pequeñas Estilete: un poco cefálica:
ancho: Aphelenchoides
protuberancias basales más corto que las ancho:
0,006 sp.
Ovario: simple, larga y hembras. 0,005
largo: (Taylor, 1971)
cónica que termina con un Cola: terminando en largo:
0,003
mucrón de tres puntas. un mucrón con dos o 0,004
Estilete:
Vulva: marcada, ubicado en tres puntas. Estilete:
0,010 –
la parte medial del cuerpo. Testículo extendido, 0,13
0,012
Cola: larga y cónica que espículas curvas.
termina con un mucrón de A. Región anterior. B. Vulva y cola en
tres puntas. hembra. C. Cola de macho.
35
4.3 Relación de los géneros de nematodos fitoparásitos con las condiciones
edafoclimáticas (altitud, textura de suelo, porcentaje de materia orgánica y pH) de
las zonas productoras de café de la provincia de Loja.
En el cuadro 9 se muestran los resultados del análisis de correlación realizado entre las
poblaciones de nematodos cuantificadas en 100 cc de suelo y cada uno de los parámetros
edafoclimáticos de las zonas cafetaleras en tres pisos altitudinales; lo cual indica que
únicamente existe una relación significativa entre el porcentaje de arena y las poblaciones
de nematodos, debido que el p-valor obtenido (0,004) es menor al 0.05 %.
36
5. DISCUSION
37
individuos/100 cc de suelo); cabe señalar que en dicho piso altitudinal se evidenciaron
los más altos incides de incidencia y severidad evaluados en raíces (60 y 66 %
respectivamente), a esto se le puede atribuir debido que estos nematodos afectan al
sistema radical de la planta, destruyen los pelos radicales y las raíces secundarias, lo que
conduce a la formación de un sistema radical pobremente desarrollado con lleva a un
poco anclaje y poca capacidad de absorción de agua y nutrientes (Vera et al., 2017).
Además este género es cosmopolita, que se alimenta de un amplio grupo de plantas
(Castillo y Hernández, 2005), lo cual explicaría su alta frecuencia en las parcelas
evaluadas, tanto en este estudio como en otros anteriores, realizados en diferentes cultivos
(Montes-Belmont, 2003; Wing-Ching- Jones et al., 2008). Generalmente ocasionan
lesiones a sus hospedantes, y propician la entrada de otros microorganismos, cuando hay
alta densidad de población, la planta muestra perdida de vigor progresiva, manifestándose
con una disminución en la producción (Arévalo-Gardiniet al., 2016). Este género has sido
reportado en plantaciones de café en Centroamérica, pero, en bajas densidades y sin
causar daños económicos (Pinochet y Ventura 1980; Pinochet y Guzman 1987).
En raíces, el género que evidenció la población más alta fue Pratylenchus spp. (4433
individuos/10 g de raíces), lo cual se explicaría debido a que este patógeno es un
nematodo endoparásito migratorio afectando el sistema radicular de los cultivos
(Rodríguez, 1984); esta concuerda con estudios realizados en raíces de café en Guatemala
por García (2004), quien mencionó que el género de nematodo fitoparásito que presentó
una mayor distribución en el área fue el género Pratylenchus spp. Así también,
Zimmermann (1898), evidenció la importancia del nematodo en el cultivo del café al
detectarlo en raíces dañadas. Fue el primero que demostró la patogenicidad de una especie
de Pratylenchus, indicando que P. coffeae contribuyó con la destrucción de cerca del 95
% de las plantaciones de café. De acuerdo al piso altitudinal, la mayor población de este
género (940 individuos/10 g de raíces) se evidenció en el piso medio del cantón Olmedo
(Cuadro 6), lo que se le atribuye principalmente a las condiciones edafoclimáticas de la
zona aunque según Castillo y Vovlas (2007) algunas especies habitan en climas
templados, otras en tropicales y algunas se adaptan a ambas condiciones, la distribución
es independiente de la presencia de plantas hospederas y factores abióticos como la
temperatura.
38
5.2. Identificación de nematodos asociados al cultivo de café en diferentes pisos
altitudinales y condiciones edafoclimáticas de la provincia de Loja.
Por su parte, Rosales (1995) menciona que los géneros de nematodos ectoparásitos en el
suelo del cultivo de café son los géneros siguientes: Aphelenchus, Helicotylenchus,
Criconemella, Pratylenchus, Psilenchus, Rotylenchus y Xiphinema. Entre los nematodos
endoparásitos migratorios se encuentra el género: Pratylenchus sp., los nematodos
endoparásitos sedentarios son del género Meloidogyne sp., dentro del cual se reconocen
17 especies parásitas de café (Montes, 2000).
39
5.3 Relación de los géneros de nematodos fitoparásitos con las condiciones
edafoclimáticas (altitud, textura de suelo, porcentaje de materia orgánica y pH) de
las zonas productoras de café de la provincia de Loja.
De acuerdo al análisis de correlación realizado entre cada uno de los parámetros edáficos
y las poblaciones totales de los géneros de nematodos fitoparásitos previamente
cuantificados e identificados en los diferentes pisos altitudinales de los cinco cantones de
la provincia de Loja, únicamente se encontró una correlación significativa al 0.05 % entre
el % de arena y la población de nematodos en suelo, con un coeficiente de correlación de
Pearson de 0,67 y un p-valor de 0,004 (Cuadro 11), lo que concuerda con Vergel et al.,
(1999) quien menciona que bajo ciertas condiciones como suelo franco y buena sombra
los niveles poblacionales de nematodos se presentan en un nivel mayor. Además Esquivel
(1996) realizó estudios acerca de la influencia del suelo sobre las poblaciones de
nematodos; menciona que la textura y la estructura edáfica tienen un efecto importante
sobre los nematodos fitoparásitos y aparentemente el tamaño de poro afecta la facilidad
con la que los nematodos pueden desplazarse a través del suelo. Según Stirling (1991)
mencionado por Esquivel (1996) indica que el movimiento de los nematodos en el suelo
está relacionado con el diámetro de los poros, el diámetro del nematodo y la cantidad de
agua en el espacio poroso. Un nematodo no puede moverse entre las partículas de suelo
cuando el diámetro de los poros es menor que en el ancho del cuerpo de nematodo. Olabiyi
(2009) en el suroeste de Nigeria donde la mayor abundancia de los nematodo fitoparásitos
o fitófagos se da más en suelos de textura arenosa. Gallardo (2014) considera a la textura
franca arenosa como la más apta para el ciclo de vida de los nematodos fitoparásitos.
Chávez et al., (2009) encontró correlación en un 50% del número de nematodos con
respecto a las características físicas del suelo, principalmente con la arena. Castilla (2015)
en su trabajo de investigación concluye que los suelos arenosos generalmente contienen
más poblaciones de nematodos fitófagos que los suelos arcillosos, debido a que la
porosidad es mayor, por ende, la aireación es más eficiente en suelo arenoso favoreciendo
el metabolismo de estos organismos aerobios y, además, los nematodos se mueven con
facilidad a través de la rizosfera.
40
se debe a una acción indirecta, ya que permite una nutrición más adecuada de la planta
que compensa el porcentaje de raíces dañadas (Magunacelaya y Dagnino 1999). Castilla
(2015) en su investigación obtuvo valores bajos de materia orgánica pero, asegura que el
87% de los géneros encontrados son dependientes de esta fuente nutritiva, tanto para su
supervivencia como para contribuir en los ciclos biogeoquímicos, a partir de su
metabolismo.
Además con respecto al pH Guzmán et al. (2008) mencionan que la variación de 5 hasta
7.6, no tiene efecto sobre las poblaciones de nematodos fitoparásitos. De acuerdo al
porcentaje de arcilla Muñoz (2011) considera que las condiciones de los suelos arcillosos
hacen que los niveles de oxígeno sean más bajos y, en consecuencia, el metabolismo,
movimiento e infectividad de los juveniles se afecte, además del efecto negativo sobre el
crecimiento y reproducción de las hembras.
41
6. CONCLUSIONES
Los índices de incidencia y severidad más altos (66 % de plantas afectadas y 66,4
% de área radicular afectada) se evidencian en el piso bajo del cantón Olmedo; los
análisis estadísticos realizados para dichos índices muestran diferencias entre los
tres pisos altitudinales de los cantones Loja y Quilanga; mientras que en los
cantones Puyango, Chaguarpamba y Olmedo no existen diferencias significativas;
Los géneros de nematodos encontrados en las plantaciones de café en cinco zonas
cafetaleras a tres diferentes pisos altitudinales de la provincia de Loja
son: Meloidogyne spp., Pratylenchus spp., Helicotylenchus spp., Tylenchus spp.,
Tylenchulus spp., Criconemoides spp., Psilenchus spp., Xiphinema spp.,
Aphelenchoides spp. y Aphelenchus spp.
La densidad poblacional más alta determinada en muestras de suelo, está
representada por el género Helicotylenchus spp. 68% (65 individuos/100 cc de
suelo) cuantificada en el piso bajo del cantón Olmedo; mientras que la más alta
densidad poblacional en raíces sobresale el género Pratylenchus spp. 60% (940
individuos/10 g de raíces) en el piso medio del mismo cantón.
En el análisis de correlación realizado entre cada uno de los parámetros edáficos y
las poblaciones totales de los géneros de nematodos fitoparásitos previamente
cuantificados e identificados en los diferentes pisos altitudinales de los cinco
cantones de la provincia de Loja, únicamente se encontró una correlación
significativa al 0.05 % entre el porcentaje de arena y la población de nematodos en
suelo, con un coeficiente de correlación de Pearson de 0,67 y un p-valor de 0,004.
7. RECOMENDACIONES
42
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9. ANEXOS
Aphelenchus Xiphynema Helicotylenchus Tylenchus Pratylenchus Tylenchulus Psilenchus Meloidogyne Aphelenchoides Criconemoides
Piso
Cantón spp. spp. spp. spp. spp. spp. spp. spp. spp. spp.
altitudinal
suelo raíz suelo raíz suelo raíz suelo raíz suelo raíz suelo raíz suelo raíz suelo raíz suelo raíz suelo raíz
Bajo 13 17 13 467 4 9 9
Loja
Alto 9 43 9 22 9 52 4
Alto 30 35 30
Quilanga Medio 22 35 233 700
Bajo 4 56 13 233 233 13 9 4
Alto 22 30 17
Olmedo Medio 30 460 22 940 13
Bajo 4 4 65 700 13 460 4 4
Alto 9 17 13 700
Chaguarpamba Medio 9 9 17 4 4
Bajo 17 233 9 9 467
Alto 13 233 9 22 233 4
Puyango Medio 13 13 233 22 233 13
Bajo 53 22 467
Total 39 156 233 360 1867 52 693 203 4433 108 22 9 39 4
Total por
género en
39 389 2227 745 4636 108 22 9 39 4
suelo y
raíces
Los valores son están referenciados por 100 cc de suelo y 10 g de raíces.
Las casillas en blanco indican la ausencia de individuos.
57
Anexo 2. Resultados de análisis de suelos
58
59
Anexo 3. Mapas de distribución poblacional de nematodos fitoparásitos de los
cantones en estudio
60
Figura 4. Mapa de distribución poblacional de nematodos fitoparásitos en el cantón
Quilanga
Fuente: Autora.
61
Figura 6. Mapa de distribución poblacional de nematodos fitoparásitos en el cantón
Olmedo
Fuente: Autora.
Anexo 4. Muestreo de nematodos fitoparásitos en zonas cafetaleras de la provincia
de Loja.
62
Figura 9. Muestreo en plantas de café. Figura 10. Muestreo en plantas de café.
Olmedo, sector El Balcón Chaguarpamba, parroquia Santa Rufina
Fecha: 22-01-2019 Fecha: 28-02-2019
63
Figura 13. Defoliación y secamiento en Figura 14. Defoliación en planta de café.
planta de café. Quilanga, parroquia La Lugar: Olmedo, parroquia La Delicia
Libertad Fecha: 18-01-2019
Fecha: 06-12-2018
Figura 15. Secamiento de raíces. Loja, Figura 16. Lesiones necróticas. Olmedo,
Sauces Norte El Balcón
Fecha: 04-01-2019 Fecha: 26-11-2018
64
Figura 17. Lesiones necróticas y secamientos. Olmedo, La Delicia
Fecha: 23-01-2019
Figura 19. Picado y pesado (10g) de raíces Figura 20. Tamices empleados luego del
Fecha: 26-11-2018 licuado de raíces.
Fecha: 26-11-2018
65
Figura 21. Metodo de embudo Figura 22. Tiempo de reposo de muestras de
de Baerman para procesamiento suelo.
de suelo. Fecha: 09-01-2019
Fecha: 09-01-2019
66