Referencia: 032151020 Ficha Técnica
Producto: Triple Sugar Iron Agar
Especificación
Medio sólido diferencial para la identificación de enterobacterias, según las normas ISO 6579, 6785 y 10272.
Presentación
20 Tubos / Pendiente Encajado Caducidad Almacenamiento
Tubo 16 x 113 mm 1 caja con 20 tubes de vidrio de 16x113 mm, 9 meses 8-25 ºC
con: 7,5 ± 0.3 ml rotulados , con tapón metálico.
Composición
Composición (g/l):
Peptona de caseína........................ 10.000
Peptona de carne............................10.000
Extracto de carne............................ 3.000
Extracto de levadura....................... 3.000
Sodio cloruro................................... 5.000
Lactosa............................................10.000
Sacarosa......................................... 10.000
D-(+)-Glucosa................................. 1.000
Rojo fenol........................................ 0.024
Citrato férrico...................................0.300
Tiosulfato sódico............................. 0.300
Agar.................................................13.000
Descripción/Técnica
Descripción:
El Agar de Tres Azúcares Hierro, es una variación del clásico de Kligler, en el que se ha incorporado un 1% de sacarosa, lo cual
permite diferenciar los géneros Proteus y Hafnia (Sacarosa +) de los Salmonella y Shigella (Sacarosa -).
La degradación del azúcar con formación de ácido, se detecta por el viraje a amarillo del indicador, mientras que la alcalinización vira a
púrpura. Si sólo se degrada la glucosa, la producción de ácido es débil, y se evapora en la superficie, permitiendo la re-oxidación del
indicador, con lo cual queda una superficie alcalina (roja) y un fondo amarillo (ácido). Si se degrada la lactosa o la sacarosa, la
producción de ácido es intensa y todo el medio (fondo y superficie) quedan amarillos. La producción de gas se detecta por la formación
de burbujas y, eventualmente, un agrietamiento del agar.
La producción de sulfhídrico, ya sea a partir del tiosulfato o de los aminoácidos azufrados de las peptonas, se manifiesta por la
formación de precipitados negros de SFe al reaccionar con las sales de hierro.
El medio se utiliza en tubos inclinados, con fondo abundante y corta uña que se siembra en estría en la superficie y picadura profunda
en el fondo. Es recomendable utilizar tubos con torunda de algodón, para permitir la re-oxidación del indicador. Si se utilizan tapones
roscados, deben aflojarse para permitir la entrada de aire.
Técnica:
Inocular con asa de picadura, haciendo una simple estría por la pendiente. Mantener los tubos semi-abiertos para mejor lectura.
Dependiendo de si la fermentación de Glucosa y/o Lactora se producen aerobicament (en la pendiente) o anaerobicamente (en la
base), de la producción de sulfhídrico.
Control de Calidad
Control Físico/Químico
Color : Rojizo pH: 7,4 ± 0,2 a 25ºC
Control de Fertilidad
Siembra por picadura + estría por la pendiente
Aerobiosis. Incubación a 37 ± 1 ºC, lectura a las 24 ± 3 h
Control micobiológico según ISO 11133:2014/ A1:2018; A2: 2020.
Microorganismo Desarrollo
®
Escherichia coli ATCC 25922, WDCM 00013 Bueno /Inclinado:Ac /Fondo:Ac /Gas (+)/ SH2(-)
Salmonella enterica ATCC® 13076, WDCM 00030 Bueno /Inclinado: Alk/Fondo:Ac /Gas (+)/ SH2(+)
Shigella sonnei ATCC® 25931 Bueno /Inclinado: Alk/Fondo:Ac /Gas (-)/ SH2(-)
Proteus mirabilis ATCC® 43071 Bueno /Inclinado: Alk/Fondo:Ac /Gas (+)/ SH2(+)
Shigella sonnei ATCC® 9290 Bueno /Inclinado: Alk/Fondo:Ac /Gas (-)/ SH2(-)
Ps. aeruginosa ATCC® 27853, WDCM 00025 Bueno /Inclinado: Alk/Fondo:Ac /Gas (-)/ SH2(-)
Control de Esterilidad
Incubación 48 horas a 30-35 ºC y 48 horas a 20-25 ºC: SIN CRECIMIENTO
Verificación a 7 días tras incubación en las mismas condiciones.
Página 1 / 2 Fecha revisión:13/09/21
Referencia: 032151020 Ficha Técnica
Producto: Triple Sugar Iron Agar
Bibliografia
· DIN Standards. Nachweiss von Salmonella. Referenzeverfahren DIN 10160 (Fleisch und Fleischerzenguissen) and DIN 10181 (Milch).
· DOWNES, F.P. & K. ITO (2001) Compendium of Methods for the microbiological examination of Foods. 4th ed. APHA. Washington DC.
USA.
· EDWARD, S.P. and EWING, W.H. (1962). Identification of Enterobacteriaceae. Burgess. Pub. Co. Minneapolis.
· EUROPEAN PHARMACOPOEIA (2005) Supp. 5.8 § 2.6.13 Test for specified microorganisms. EDQM. Strasboug E.U.
· FIL-IDF (1991) International Standard 93A. Milk and Milk Products. Detection of Salmonella species.
· HAJNA, A.A. (1945) Triple Sugar-Iron medium for the identification of the intestinal group of bacteria. [Link]. 49:516-517.
· HORWITZ, W. (2000) Official Methods of Analysis. 17th ed. AOAC International. Gaithersburg. Md. USA.
· ISO 3560 Standard (1975) Reference Method for the Detection of Salmonella in meat and meat products.
· ISO Standard 6579-1 (2017) Microbiology of food chain - Horizontal method for the detection, enumeration and serotyping of Salmonella
- Part 1 : Detection of Salmonella spp.
· ISO 6785 Standard (2001) Milk and milk Products - Detection of Salmonella spp.
· ISO 10272 Standard (1995) Microbiology of foods and animal feeding stuffs - Horizontal method for the detection of thermotolerant
Campylobacter.
. ISO 11133:2014/ Adm 1:2018/ Adm 2:2020/ Microbiology of food, animal feed and water. Preparation, production, storage and
performance testing of culture media.
· ISO 21567 Standard (2004) Microbiology of food and animal feeding stuffs.- Horizontal method for the detection of Shigella spp.
· KRUMWIEDE, C. & L. KOHN (1917) A triple sugar modification of the Russell Double Sugar Medium. J. Med. Res. 37:225-229.
· US PHARMACOPOEIA (2002) <61> Microbial Limit Tests. 25th ed. US Phamacopeial Convention Inc. Rockville. Md. USA.
Página 2 / 2 Fecha revisión:13/09/21