Orden de llenados de los tubos de sangre
El orden de llenado de los tubos de sangre en el laboratorio sigue las recomendaciones de la Clinical and
Laboratory Standards Institute (CLSI) para evitar la contaminación cruzada de aditivos entre tubos.
1. Frasco para hemocultivo (si aplica) (aerobios y anaerobios)
• Para evitar contaminación con otros aditivos.
• Aditivo: Medio de cultivo (generalmente resinas o carbón activado).
• Función: Favorece el crecimiento de microorganismos en caso de infección en sangre (bacteriemia o
fungemia).
2. Tubo azul claro (citrato de sodio)
• Se obtiene plasma
• Aditivo: Citrato de sodio al 3.2% o 3.8%.
• Función: Anticoagulante que quelata el calcio, evitando la coagulación.
▪ Quelata el calcio de manera reversible, lo que permite realizar pruebas de coagulación cuando se
necesite reactivar el proceso
• Se usa para pruebas de coagulación como el Tiempo de Protrombina (TP) y Tiempo de Tromboplastina
Parcial Activada (TTPA).
• Quelata: los anticoagulantes EDTA y el citrato de sodio quelatan el calcio (Ca²⁺), es decir, lo atrapan y lo
inactivan. Dado que el calcio es esencial para la coagulación de la sangre, al quelarlo se evita que la
sangre coagule dentro del tubo.
3. Tubo rojo o tapa amarilla (sin anticoagulante o con gel separador)
• Se obtiene suero
• Aditivo del tubo rojo: Sin aditivos o con gel separador de suero
• Aditivo del tubo amarillo: Gel separador y activador de coágulo (sílice)
▪ Tiempo de coagulación: 20-30 minutos
• Función: Permite la coagulación de la sangre y la separación del suero tras la centrifugación.
• Se usa en pruebas de bioquímica clínica, serología e inmunología.
Tubo naranja
• Aditivo: Trombina (activador de coágulo rápido).
• Favorece la coagulación rápida en muestras de suero
• Tiempo de coagulación: 5 minutos (coagulación rápida).
• Pruebas que requieren suero rápido, como urgencias en química clínica.
4. Tubo verde (heparina de litio o sodio)
• Se obtiene plasma
• Aditivo: Heparina de litio o heparina de sodio.
• Función: Anticoagulante que actúa inhibiendo la trombina y otros factores de coagulación (factor Xa).
Se usa para análisis de gases sanguíneos (arterial), electrolitos y química clínica en plasma.
Trombina: convierte el fibrinógeno en fibrina.
5. Tubo lila o morado (EDTA - Ácido Etilendiaminotetraacético)
• Aditivo: EDTA (disódico o tripotásico).
• Función: Anticoagulante que quelata el calcio, preservando la morfología celular. Quelata el calcio de
forma irreversible, por lo que la sangre nunca coagula en este tubo, lo que permite hacer análisis
hematológicos sin alterar la morfología celular.
• Se usa para hematología, hemogramas, frotis de sangre periférica, recuento de células y pruebas de banco
de sangre.
6. Tubo gris (fluoruro de sodio y oxalato de potasio)
• Para pruebas de glucosa, lactato, prueba de tolerancia a la glucosa, y pruebas relacionadas con el
metabolismo de carbohidratos
• Aditivo: Oxalato de potasio (anticoagulante) y fluoruro de sodio (conservante de glucosa).
▪ Fluoruro de sodio (NaF): Inhibidor del glicólisis. Detiene el metabolismo de la glucosa al inhibir
la enzima enolasa, preservando los niveles reales de glucosa en sangre.
▪ Oxalato de potasio (K₂C₂O₄): Anticoagulante, Precipita el calcio (Ca²⁺), que es esencial para la
coagulación. Esto evita que la sangre coagule
7. Tubo negro (VSG o VES)
• Contiene citrato de sodio al 3.8% (en proporción 1:4 con la sangre). Este es un anticoagulante que
preserva el tiempo de sedimentación de los eritrocitos.
• Sangre total anticoagulada (no se centrifuga).
• Uso: Velocidad de sedimentación globular (VSG) o eritrosedimentación. Esta prueba mide el tiempo que
tardan los eritrocitos en sedimentarse en una columna de sangre, y es útil como marcador inespecífico de
inflamación o infección.
Hemocultivo
Anticuerpos
Los anticuerpos (también llamados inmunoglobulinas) son proteínas especializadas producidas por las células B
(células plasmáticas) del sistema inmunológico en respuesta a la presencia de antígenos (como virus, bacterias,
toxinas u otras sustancias extrañas). Son estudiados como una parte clave de la respuesta inmune humoral, es
decir, la defensa mediada por moléculas disueltas (en sangre, linfa y otros fluidos).
⎯ Funciones:
• Neutralización: Bloquean la unión del antígeno a las células del cuerpo.
• Opsonización: Marcan al antígeno para que sea fagocitado por macrófagos
• Activación del complemento: Inician una cascada que destruye la célula invasora
• Citotoxicidad dependiente de anticuerpos (ADCC): Activa células NK para destruir células infectadas
⎯ Procedimiento para la producción:
• Reconocimiento del antígeno por células B
• Activación de las células B (con ayuda de células T)
• Diferenciación en células plasmáticas, que producen anticuerpos
• Formación de células de memoria para respuestas futuras más rápidas
⎯ Clases de Inmunoglobulina
IgG
• Es el anticuerpo más abundante en la sangre y el líquido extracelular
• Inmunidad a largo plazo tras una infección o vacuna
• Atraviesa la placenta protegiendo al feto durante el embarazo
• Segunda en aparecer
• Neutraliza las toxinas, activa el sistema de complemento (vía clásica), Opsonización (marca a los
patógenos para su destrucción)
IgA
• Se encuentra en mucosas (tracto respiratorio, digestivo y genitourinario) y en secreciones como saliva,
lágrimas, moco y leche materna.
• Su función principal es proteger las superficies mucosas de la invasión de microorganismos.
• Forma dímera
• Fija complemento (vía alterna)
IgM
• Es la primera inmunoglobulina que se produce tras una infección
• Indica una infección reciente o aguda cuando se detecta en una prueba serológica
• Muy efectiva en activar el sistema del complemento (vía clásica)
• Se encuentra en sangre y linfa
• Tiene forma de pentámero (cinco unidades), lo que le da alta capacidad de aglutinación.
IgE
• Está implicada en reacciones alérgicas e hipersensibilidad inmediata (como asma, rinitis, urticaria).
• También tiene un rol en la defensa contra parásitos como helmintos
• Se une a receptores en mastocitos y basófilos, provocando la liberación de histamina
IgD
• Se encuentra principalmente en la superficie de los linfocitos B inmaduros, actuando como receptor de
antígenos
• Su función en suero no está completamente clara, pero participa en la activación inicial de los linfocitos
B
Principales pruebas inmunoserológicas
⎯ ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay)
• es un ensayo inmunoenzimático que permite detectar la presencia de anticuerpos o antígenos específicos
en una muestra (como sangre, suero, plasma, orina, etc.).
• ensayo cuantitativo
• Utiliza una enzima unida a un anticuerpo o antígeno como marcador para generar una reacción
colorimétrica (cambio de color), que indica si la sustancia buscada está presente. Esta enzima, al
reaccionar con un sustrato cromogénico, produce un cambio de color, cuya intensidad puede medirse con
un lector de absorbancia (espectrofotómetro).
▪ Las marcas típicas de enzimas son la fosfatasa alcalina (AP), peroxidasa de rábano picante (HRP), y
la galactosidasa B
• Principio:
▪ Fijación: El antígeno o anticuerpo se inmoviliza sobre una superficie sólida (generalmente los
pocillos de una placa de poliestireno de 96 pozos).
▪ Se agrega la muestra con el anticuerpo o antígeno de interés.
▪ Unión de la enzima: Se añade un segundo anticuerpo (o antígeno) marcado con una enzima (como
peroxidasa o fosfatasa alcalina).
▪ Reacción enzimática: Se añade un sustrato (ej. TMB para HRP) que cambia de color si la enzima
está presente.
▪ El color se cuantifica con espectrofotómetro. Cuanto más intenso el color, mayor cantidad de analito
presente (excepto en ELISA competitivo).
• Tipos:
▪ ELISA directo: Se detecta un antígeno con un anticuerpo específico marcado con enzima. Más
rápido, pero menos sensible.
▪ ELISA indirecto (detecta anticuerpo): Se fija el antígeno, y se usa un anticuerpo primario no
marcado (muestra) + un anticuerpo secundario marcado. Mayor sensibilidad y amplificación de señal
▪ ELISA tipo sándwich: Se fija un anticuerpo de captura, se añade el antígeno, y luego otro anticuerpo
marcado. Alta especificidad, ideal para detectar antígenos poco abundantes.
▪ ELISA competitivo: Antígeno en muestra compite con un antígeno marcado por la unión al
anticuerpo. Cuanto menos color, más antígeno hay en la muestra (es inversamente proporcional).
[Link]
• Ejemplo de procedimiento general del ELISA indirecto para detectar anticuerpos contra el virus VIH
1. Recubrimiento: Se recubren los pozos con antígeno específico del virus (ej. VIH). Se incuban para
permitir la adherencia al plástico
2. Bloqueo: Se agrega una solución bloqueadora (ej. leche en polvo, albúmina) para evitar uniones
inespecíficas en las partes libres del pozo.
3. Se agrega el suero del paciente. Si contiene anticuerpos específicos, se unirán al antígeno fijado.
4. Lavado: Se elimina el suero no unido mediante lavados (agua con detergente suave).
5. Adición del anticuerpo secundario: Se agrega un anticuerpo anti-humano IgG marcado con una
enzima (como HRP). Este se une a los anticuerpos del paciente, si están presentes
6. Lavado nuevamente para eliminar los anticuerpos no unidos
7. Se agrega el sustrato cromogénico (como TMB). Si la enzima está presente, transforma el sustrato en
un producto coloreado
8. Se añade un ácido para detener la reacción (por ejemplo, ácido sulfúrico).
9. Se mide la absorbancia en el lector de ELISA (generalmente a 450 nm).
⎯ Inmunocromatografía (Pruebas Rápidas)
• es una técnica inmunológica rápida y muy utilizada en el diagnóstico clínico, especialmente en pruebas
de detección cualitativa (positivo o negativo) de antígenos o anticuerpos.
• también conocida como ensayo inmunocromatográfico de flujo lateral (LFA), es una prueba diagnóstica
basada en la reacción específica antígeno-anticuerpo que ocurre sobre una tira reactiva. Esta tira permite
que la muestra fluya lateralmente por capilaridad y reaccione con reactivos inmovilizados que indican si
el resultado es positivo o negativo.
• Componentes
▪ Almohadilla de muestra: donde se aplica la muestra
▪ Zona de conjugado: contiene anticuerpos marcados con partículas visibles
▪ Membrana de nitrocelulosa: donde están las líneas T (prueba) y C (control).
▪ Almohadilla absorbente: para mantener el flujo y evitar reflujo.
⎯ Quimioluminiscencia (CLIA – Chemiluminescence Immunoassay)
• es una técnica de detección basada en la emisión de luz durante una reacción química. Esta luz se genera
sin necesidad de una fuente externa de luz (como en la fluorescencia), y puede ser medida con un
luminómetro.
• Principio básico
▪ Se fija un anticuerpo o antígeno específico en una fase sólida (como una micropartícula magnética o
superficie de un tubo).
▪ Se añade la muestra del paciente (por ejemplo, suero).
o Si el analito (antígeno o anticuerpo específico) está presente, se forma un complejo
inmunológico.
▪ Luego se añade un anticuerpo marcado con una enzima (como peroxidasa o fosfatasa alcalina)
▪ Reacción quimioluminiscente: se agrega un sustrato quimioluminiscente que reacciona con la enzima
para producir luz.
▪ La luz emitida es captada por un luminómetro. La intensidad de luz es proporcional a la cantidad de
analito presente.
• Aplicaciones:
▪ Hormonas: TSH, T3, T4, LH, FSH, hCG, prolactina
▪ Marcadores tumorales: PSA, CEA, CA 125, CA 19-9.
▪ Diagnóstico infeccioso: VIH, hepatitis B y C, SARS-CoV-2, CMV, sífilis
▪ Pruebas autoinmunes: anticuerpos antinucleares (ANA), anti-CCP, anti-DNA
▪ Drogas terapéuticas y de abuso.
▪ Pruebas de fertilidad y embarazo: β-HCG.
▪ Vitaminas y minerales: vitamina D, ferritina, insulina
[Link]
⎯ Inmunofluorescencia
• es una técnica muy utilizada en el laboratorio clínico, especialmente en inmunoserología, inmunología
clínica, microbiología y patología. Su propósito principal es detectar la presencia de antígenos o
anticuerpos específicos en una muestra biológica utilizando anticuerpos marcados con un fluorocromo
(una sustancia que emite fluorescencia cuando se expone a luz ultravioleta o azul).
• se basa en la unión específica antígeno-anticuerpo: Un anticuerpo marcado con un fluorocromo (como la
fluoresceína isotiocianato – FITC) se une al antígeno presente en una muestra. Luego, se observa bajo un
microscopio de fluorescencia, que permite visualizar si ocurrió la unión (lo que indica la presencia del
antígeno o anticuerpo de interés).
• cualitativa o semi-cuantitativa
Tipos:
• Inmunofluorescencia Directa (IFD)
▪ Se basa en el uso de anticuerpos específicos marcados directamente con un fluorocromo (como
fluoresceína o rodamina) que se unen a un antígeno presente en una muestra (tejido, célula, secreción).
▪ Si el antígeno está presente, el anticuerpo marcado se unirá, y al ser iluminado con luz UV o azul, el
fluorocromo emitirá fluorescencia que puede observarse en un microscopio de fluorescencia.
▪ Procedimiento:
o Se fija la muestra (por ejemplo, una sección de tejido o un extendido celular) en un portaobjeto.
o Se añade el anticuerpo fluorescente específico al antígeno de interés.
o Se deja incubar el tiempo necesario (generalmente 30-60 min) a temperatura ambiente o 37 °C.
o Lavado: Se elimina el exceso de anticuerpo no unido con solución tampón (ej. PBS)
o Se coloca un cubreobjetos con medio de montaje para fluorescencia.
o Si el antígeno está presente, se verá fluorescencia en las áreas correspondientes.
• Inmunofluorescencia Indirecta (IFI)
▪ utiliza principalmente para detectar anticuerpos específicos en una muestra (suero del paciente),
aunque también puede emplearse para detectar antígenos, dependiendo del diseño del ensayo.
▪ utiliza dos anticuerpos: anticuerpo primario no marcado que se une al antígeno de interés, anticuerpo
secundario marcado con fluorocromo, que se une al anticuerpo primario.
▪ Procedimiento:
o Se coloca la muestra (por ejemplo, células HEp-2 para ANA) sobre un portaobjeto.
o Aplicación del suero del paciente (anticuerpo primario)
o Se deja incubar para permitir que los anticuerpos del paciente se unan a los antígenos (20–30
minutos).
o Lavado: Se eliminan anticuerpos no unidos con solución tampón
o Aplicación del anticuerpo secundario marcado: anticuerpo anti-humano marcado con
fluorocromo
o Se incuba nuevamente y se lava para eliminar el exceso.
o Se observa al microscopio de fluorescencia.
⎯ Aglutinación en Látex
• es una técnica inmunológica basada en la reacción antígeno-anticuerpo, en la cual uno de los componentes
(generalmente el anticuerpo) está unido a partículas de látex.
• Es una prueba inmunológica de aglutinación en la que se utilizan microesferas de látex recubiertas con
anticuerpos o antígenos específicos. Cuando estas partículas se mezclan con una muestra que contiene el
antígeno o anticuerpo complementario, ocurre una aglutinación visible (formación de grumos) que indica
un resultado positivo.
▪ Las microesferas de látex son pequeñas partículas esféricas, típicamente en el rango de tamaño
micrométrico, hechas de un polímero llamado látex, que es comúnmente poliestireno. Pueden ser
modificadas químicamente para unir anticuerpos o antígenos en su superficie.
▪ se utilizan para visibilizar reacciones inmunológicas, especialmente en pruebas de aglutinación, ya
que, son opacas y fáciles de observar cuando se aglutinan
• Principio:
▪ Se recubren partículas de látex con anticuerpos específicos (o antígenos).
▪ Se mezcla una muestra del paciente (por ejemplo, suero, orina o líquido cefalorraquídeo) con estas
partículas.
▪ Si hay presencia del analito específico (antígeno o anticuerpo), ocurre una aglutinación visible a
simple vista o bajo el microscopio.
▪ La intensidad de la aglutinación puede observarse cualitativamente o medirse cuantitativamente
mediante un nefelómetro o turbidímetro.
• Tipos:
▪ Cualitativo: Solo indica si hay presencia o no de la sustancia (positivo/negativo).
▪ Cuantitativo: Mide la concentración del analito en la muestra usando instrumentos como
nefelómetros (detectan dispersión de luz).
⎯ Western Blot
• (también llamado inmunoblot) combina la electroforesis en gel y la detección inmunológica para
identificar proteínas individuales dentro de una mezcla compleja.
• Ventajas: alta especificidad y sensibilidad, permite confirmación de resultados obtenidos por otras
técnicas (ELISA)
• Limitaciones: proceso lento y laborioso, requiere anticuerpos específicos, puede haber reacciones
cruzadas si los anticuerpos no son altamente específicos
• Procedimiento:
▪ Preparación de la muestra: Se extraen proteínas de células o tejidos mediante lisis celular. Se
cuantifican y preparan con un tampón (buffer) que incluye SDS (un detergente) para desnaturalizar
las proteínas (romper su estructura 3D).
▪ Separación por electroforesis (SDS-PAGE):
o Las proteínas se cargan en un gel de poliacrilamida y se aplica corriente eléctrica
o El SDS da carga negativa a las proteínas, por lo que migran hacia el polo positivo.
o Las proteínas se separan según su peso molecular: las más pequeñas migran más rápido
▪ Transferencia a una membrana
o Las proteínas del gel se transfieren a una membrana de nitrocelulosa o PVDF mediante
electrotransferencia. Esta membrana es más accesible para los anticuerpos que el gel.
▪ Bloqueo:
o Se bloquea la membrana con una solución que contiene proteínas (como leche en polvo o
albúmina) para evitar uniones inespecíficas de los anticuerpos.
▪ Incubación con anticuerpo primario
o Se añade un anticuerpo primario específico para la proteína que se desea detectar. Este anticuerpo
se une exclusivamente a esa proteína.
▪ Incubación con anticuerpo secundario
o Luego se añade un anticuerpo secundario que reconoce al anticuerpo primario. Este secundario
va conjugado a una enzima (como HRP: peroxidasa de rábano picante) o un marcador
fluorescente.
▪ Detección: Se añade un sustrato que reacciona con la enzima del anticuerpo secundario (como
quimioluminiscencia). Se genera una señal visible (luz o color), que se detecta por exposición a
película fotográfica o por escáner digital.
Infecciones
Virales
VIH
El VIH (Virus de la Inmunodeficiencia Humana) es un retrovirus que ataca el sistema inmunológico,
específicamente a los linfocitos CD4+, que son células clave en la defensa del organismo contra infecciones. A
medida que el VIH destruye estas células, el sistema inmunológico se debilita y el cuerpo se vuelve más vulnerable
a infecciones y ciertos tipos de cáncer.
• Un retrovirus es un tipo de virus que tiene su material genético en ARN en lugar de ADN y utiliza una
enzima especial llamada transcriptasa inversa para convertir su ARN en ADN dentro de la célula huésped.
Una vez convertido en ADN, el material genético viral se inserta en el ADN de la célula huésped gracias
a otra enzima llamada integrasa.
• Persona con VIH no es una persona enferma, el VIH es una condición de salud
⎯ Mecanismo de infección
El VIH se transmite a través de fluidos corporales como la sangre, el semen, las secreciones vaginales y la
leche materna. No se transmite por contacto casual, saliva, sudor o lágrimas. Las principales vías de
transmisión son:
• Relaciones sexuales sin protección (vaginales, anales u orales).
• Uso de agujas contaminadas (drogas intravenosas, procedimientos médicos inseguros).
• Transmisión de madre a hijo durante el embarazo, el parto o la lactancia.
• Transfusión de sangre contaminada, aunque esto es raro en países con controles estrictos.
Diagnóstico
⎯ ¿Qué es el período de ventana del VIH?
El período de ventana es el tiempo entre el momento de la infección por VIH y cuando una prueba puede
detectarlo de forma confiable (desde el momento de la infección hasta cuando el cuerpo tenga suficientes
anticuerpos para ser detectado). Durante este período, una persona puede estar infectada y ser contagiosa, pero
aún tener una prueba negativa porque el virus, los antígenos o los anticuerpos no han alcanzado niveles
detectables.
En el caso del VIH este periodo de ventana puede durar 3 meses (120 días) o antes, después de los 3 meses la
persona sí o sí ya tiene los anticuerpos.
• Antes de los 120 días, se puede usar prueba de 4ta generación que funciona entre un mes a un mes y
medio, ya que el antígeno permanece en el cuerpo entre los 30 – 40 días, después este se va
• Después de los 3 meses, se usa prueba de 3era generación, también se puede usar la de 4ta generación,
pero este no va detectar el antígeno, solo el anticuerpo
⎯ Pruebas directas e indirectas
• Indirecto: detecta el anticuerpo → 3era generación (pruebas rápidas o automatizadas)
• Directo: detecta el antígeno → 4ta generación (pruebas rápidas o automatizadas), biología molecular
(NAT)
⎯ Prueba de tercera generación del VIH
• Detecta anticuerpos contra el VIH-1 y VIH-2 en la sangre, son anticuerpos que el sistema inmunológico
produce contra el VIH.
• Utiliza la técnica de ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay).
• Tiene un período de ventana de aproximadamente 3 a 8 semanas (21 a 60 días) después de la infección.
• No detecta el VIH en las primeras semanas de infección, ya que el cuerpo aún no ha generado anticuerpos
en niveles detectables.
• Puede detectar la infección después de que el cuerpo ha producido suficientes anticuerpos, pero no detecta
el antígeno p24.
⎯ Prueba de cuarta generación del VIH
• Detecta tanto los anticuerpos del VIH-1 y VIH-2 como el antígeno p24.
▪ El antígeno p24 es una proteína del VIH que aparece antes de que el cuerpo produzca anticuerpos,
lo que permite una detección más temprana.
• Tiene un período de ventana más corto, de aproximadamente 2 a 6 semanas (14 a 45 días).
• También usa la técnica ELISA de tipo combinado o de antígeno/anticuerpo.
• Es la prueba recomendada por la OMS y los CDC para el diagnóstico temprano del VIH. Al detectar el
antígeno p24, permite un diagnóstico más rápido que las pruebas de tercera generación.
• Las mujeres embarazadas desarrollan un antígeno que se parece al p24, por lo tanto, salen positivas.
⎯ NAT (nucleic acid test)
• NAT significa Nucleic Acid Test (Prueba de Ácidos Nucleicos).
• Es un tipo de prueba de laboratorio que detecta directamente el material genético (prueba molecular) de
un virus o bacteria, ya sea ARN o ADN, en una muestra (por ejemplo, sangre o plasma). El NAT busca
el ARN del VIH en la sangre.
• Detecta la infección más temprano que las pruebas de anticuerpos o antígenos (en unos 10 a 18 días
después de la exposición).
• La ventaja de esto es que reduce el periodo de ventana, ya que puede detectar el ácido nucleico a los 10
días, sin embargo, después de los 10 días esto puede dar falso negativo. Después de 10 días se baja la
sensibilidad.
▪ Se usa también en Banco de Sangre
• Es altamente sensible: puede detectar incluso pequeñas cantidades de virus.
• También se usa para medir la carga viral (cantidad de copias de ARN del VIH en la sangre).
• Acorta mucho el período de ventana
ARN del VIH
• El VIH es un virus de tipo retrovirus, lo que significa que su material genético originalmente está en
forma de ARN (ácido ribonucleico), no ADN.
• ARN del VIH es el material genético que contiene las instrucciones del virus para replicarse.
• Cuando hablamos de "detección de ARN del VIH" (por ejemplo, en una prueba de carga viral o PCR de
VIH), nos referimos a buscar directamente el virus en la sangre, detectando su ARN.
ADN proviral
• Una vez que el VIH entra en una célula humana (especialmente en células CD4+), usa una enzima llamada
transcriptasa inversa para convertir su ARN en ADN.
• Este ADN viral se integra en el ADN de la célula humana.
• A este ADN viral integrado se le llama ADN proviral.
[Link]
⎯ Algoritmo de Prueba Rápida del VIH
• Algoritmo en serie: El algoritmo diagnóstico en serie es un método de diagnóstico donde:
▪ Se usa primero una prueba inicial.
▪ Solo si esa primera prueba es positiva, se realiza una segunda prueba para confirmar el resultado.
o Si la primera prueba sale negativa, ya no se hacen más pruebas, y se reporta como negativo
o Si la primera prueba sale positiva, se confirma con otra prueba de una marca diferente
o Cuando las dos primeras pruebas son discordantes, debe de hacerse una tercera prueba de
conformidad con el algoritmo del país. El resultado de la tercera prueba es el resultado del
algoritmo.
o Para la tercera prueba se utiliza un equipo automatizado, pero si no hay, entonces se usa una
prueba rápida de marca diferente a las dos anteriores
• Un resultado indeterminado no puede llegar a las manos del paciente
• No entregar resultados positivos cuando solo se ha hecho una sola prueba
⎯ CD4
el diagnóstico de SIDA se realiza cuando el VIH ha debilitado gravemente el sistema inmunológico, lo que
se mide por el conteo de linfocitos CD4+ o la presencia de infecciones oportunistas.
• El CD4 es una glicoproteína que se encuentra en la superficie de ciertos linfocitos T (células T
colaboradoras o T helper), así como en algunos macrófagos y células dendríticas. Su función principal es
ayudar a coordinar la respuesta inmune del organismo.
• Funcion del linfocito T helper: activacion de la respuesta inmune, estimulacion de otras células, liberando
citoquinas para activar al linfocito B (producir anticuerpo), linfoticos T CD8+ (citotóxico, destruccion de
células infectadas), estimulacion de macrófagos
• Relación con el VIH/SIDA
▪ El virus de inmunodeficiencia humana (VIH) usa el receptor CD4 como puerta de entrada para
infectar las células T, lo que con el tiempo reduce el número de linfocitos CD4+ en el cuerpo.
▪ El VIH ataca y destruye los linfocitos CD4+, lo que debilita el sistema inmunológico y deja al cuerpo
vulnerable a infecciones oportunistas. A medida que el número de CD4+ disminuye, se avanza hacia
la fase de SIDA.
▪ Un recuento bajo de CD4 indica una debilidad en el sistema inmune y un mayor riesgo de infecciones
oportunistas
▪ Valores normales de CD4: Entre 500 y 1,500 células/mm³ de sangre
▪ Si los CD4 caen por debajo de 200 células/mm³, se diagnostica SIDA
▪ La SIDA es la etapa más grave del VIH, las enfermedades oportunista es lo que mata al paciente
⎯ Prueba de carga viral
• es un análisis de laboratorio que mide la cantidad de material genético de un virus en la sangre de una
persona. Se usa principalmente para evaluar infecciones virales como el VIH, hepatitis B y C, y otros
virus.
• Función: Monitoreo de infecciones crónicas, Diagnóstico temprano
• La relación del CD4 y la Carga Viral SIEMPRE debe ser inversa
(mayor carga viral → CD4 bajo; menor carga viral → CD4 alto)
Carga viral indetectable
• ¿Qué significa que una prueba de carga viral del VIH salga indetectable?
▪ La cantidad de virus en la sangre es tan baja que no puede ser detectada por los equipos de laboratorio
actuales.
▪ No significa que el virus haya desaparecido del cuerpo ni que se curó del VIH.
▪ El VIH sigue presente, pero está controlado a niveles muy bajos gracias al tratamiento antirretroviral
(TARV).
• Mientras una persona tenga la carga viral indetectable y siga en tratamiento, no transmite el VIH.
Pero si abandona el tratamiento, puede volver a transmitirlo porque el virus deja de estar controlado.
▪ Los medicamentos antirretrovirales no eliminan el VIH completamente, solo lo mantienen suprimido.
▪ Cuando se interrumpe la medicación:
o El virus escondido (en forma de ADN proviral en las células) se reactiva.
o Se producen nuevas partículas virales.
o La carga viral aumenta y vuelve a niveles detectables y transmisibles.
Sífilis
La sífilis es una infección de transmisión sexual (ITS) causada por la bacteria Treponema pallidum. Se transmite
principalmente a través del contacto sexual sin protección, pero también puede transmitirse de madre a hijo
durante el embarazo (sífilis congénita). Treponema pallidum es una bacteria gramnegativa en forma de espiral
(espiroqueta), que causa la sífilis en humanos.
⎯ Etapas
• Sífilis primaria: Aparece entre 10 y 90 días después del contagio. Se manifiesta con una úlcera indolora
llamada chancro sifilítico, generalmente en los genitales, ano o boca. El chancro cura solo en 3–6 semanas,
incluso sin tratamiento.
• Sífilis secundaria: Ocurre semanas a meses después si no se trata. Síntomas: Erupción cutánea (palmas
y plantas), fiebre, adenopatías (ganglios inflamados) malestar general, condilomas planos en áreas
húmedas.
• Sífilis latente: Sin síntomas, pero la bacteria aún está presente. Se divide en:
▪ Temprana (< 1 año): aún puede ser contagiosa
▪ Tardía (> 1 año): menos transmisible, pero aún puede progresar
• Sífilis terciaria: Años después si no se trata., Afecta órganos como corazón, cerebro, nervios, ojos, hueso.
▪ Puede causar: neurológica (neurosífilis), cardiovascular, gomas sifílicas (lesiones destructivas).
Sífilis congénita
• Ocurre cuando una mujer embarazada infectada transmite la sífilis al feto a través de la placenta. Puede
causar aborto espontáneo, muerte fetal o malformaciones congénitas graves. Se detecta con pruebas
prenatales obligatorias.
Diagnóstico
Cuando un médico quiere saber si alguien tiene sífilis, hace pruebas en la sangre para buscar anticuerpos que el
cuerpo produce contra la bacteria Treponema pallidum.
Las pruebas VDRL, RPR, FTA-ABS y TPHA son pruebas serológicas utilizadas para el diagnóstico de la sífilis.
Se dividen en pruebas no treponémicas y pruebas treponémicas.
⎯ Prueba treponémica:
• Detectan anticuerpos específicos contra Treponema pallidum
• Estas pruebas confirman la infección y permanecen positivas de por vida, incluso después del tratamiento,
por lo que no sirven para evaluar el tratamiento.
• Prueba rápida, FTA-ABS (Fluorescent Treponemal Antibody Absorption), TPPA (T. pallidum Particle
Agglutination), EIA (Enzyme Immunoassay), CIA (Chemiluminescent Immunoassay)
⎯ Prueba no treponémica:
• (Detectan anticuerpos inespecíficos). Detectan anticuerpos reagínicos (no específicos de T. pallidum)
• Buscan anticuerpos que el cuerpo genera contra el daño celular causado por la bacteria, pero no contra la
bacteria en sí.
• Estas pruebas detectan anticuerpos IgG e IgM dirigidos contra cardiolipinas (lípidos liberados por células
dañadas en la infección sifilítica). Se usan para cribado inicial y seguimiento del tratamiento.
• El cribado (screening en inglés) se refiere a la realización de pruebas en personas sin síntomas para
detectar una enfermedad en sus primeras etapas.
• Pueden dar falsos positivos (por otras enfermedades como lupus, tuberculosis o embarazo).
• RPR (reaginina plasmática rápida), VDRL (Venereal Disease Research Laboratory)
VDRL (Venereal Disease Research Laboratory)
• Detecta anticuerpos antiproteínas de daño celular.
• Se realiza en suero o líquido cefalorraquídeo (LCR).
• Puede dar falsos positivos en enfermedades autoinmunes, embarazo, tuberculosis, etc.
• Útil para seguimiento del tratamiento, ya que los títulos disminuyen con la curación.
RPR (reaginina plasmática rápida)
• Similar al VDRL, pero usa partículas de carbón que facilitan la lectura del resultado a simple vista.
• Más rápido y fácil de interpretar.
• También puede dar falsos positivos.
Algoritmo de diagnóstico
1. Primero se hace una prueba treponémica
2. Si esta prueba es positiva, se confirma con una prueba no treponémica (como VDRL o RPR) para ver
si la infección está activa.
si una prueba rápida treponémica sale positiva, aún se necesita hacer una prueba no treponémica como el
VDRL o RPR, porque la prueba treponémica no dice si la infección está activa o antigua.
Una prueba treponémica positiva (como una prueba rápida, TPHA, FTA-ABS o ELISA) solo indica que la
persona estuvo en contacto con la bacteria Treponema pallidum alguna vez en su vida.
Pero no puede diferenciar si:
La persona tiene sífilis activa ahora
Tuvo sífilis en el pasado y ya se curó
Recibió tratamiento hace años y no tiene síntomas
La prueba no treponémica (como VDRL o RPR) sí puede decir si la infección está activa.
• Miden la cantidad de anticuerpos (títulos) que el cuerpo produce durante una infección activa.
• Se usan para ver si la sífilis está en curso, se está curando o ha reaparecido.
• Los títulos bajan después del tratamiento, por eso sirven para monitorear al paciente.
Resultado prueba rápida VDRL o RPR Interpretación
Positiva Positivo (títulos altos) Sífilis activa, necesita tratamiento
Positiva Negativo o títulos muy bajos Probablemente sífilis pasada y ya tratada
Dengue
⎯ El dengue es una enfermedad viral aguda transmitida por la picadura del mosquito Aedes aegypti, y Aedes
albopictus; causada por el virus del dengue (DENV), del cual existen cuatro serotipos (DENV-1, DENV-2,
DENV-3 y DENV-4). Cualquiera de los cuatro tipos del virus es capaz de producir el dengue clásico
⎯ También se puede transmitir por vía sanguínea, es decir, por productos sanguíneos contaminados y por
donación de órganos.
⎯ Cuadro clínico: Típicamente, los individuos infectados por el virus del dengue son asintomáticos (80 %).
Después de un período de incubación de entre cuatro y diez días, aparece un cuadro viral caracterizado por
fiebre de más de 38 °C, dolores de cabeza, dolor retroocular y dolor intenso en las articulaciones (artralgia)
y músculos (mialgia) ―por eso se le ha llamado «fiebre rompehuesos»―, inflamación de los ganglios
linfáticos y erupciones en la piel puntiformes de color rojo brillante, llamada petequia, que suelen aparecer en
las extremidades inferiores y el tórax de los pacientes, desde donde se extiende para abarcar la mayor parte
del cuerpo.
⎯ Hemograma:
• Fase febril (días 1–3 aproximadamente): leucopenia, linfocitosis relativa, plaquetas normales o
disminuyendo lentamente, hematocrito normal o levemente aumentado, neutropenia progresiva.
• Fase crítica (días 4–6 aproximadamente):
▪ trombocitopenia severa
▪ hemoconcentración (aumento de hematocrito)
▪ leucopenia marcada.
Diagnóstico
⎯ Fase aguda (0–5 días desde el inicio de los síntomas) → Métodos directos
En esta etapa se utilizan pruebas que detectan directamente el virus o sus componentes:
• Detección de antígeno NS1
▪ NS1 significa “Nonstructural protein 1” o proteína no estructural 1
▪ Es una glicoproteína producida por todos los serotipos del virus del dengue (DENV-1, DENV-2,
DENV-3 y DENV-4). No forma parte del virus completo, pero se libera durante la replicación viral.
▪ El antígeno NS1 es una glicoproteína muy bien conservada, presente en altas concentraciones en el
suero de pacientes infectados con el dengue, durante la fase clínica inicial de la enfermedad.
▪ Se secreta en grandes cantidades en el torrente sanguíneo durante los primeros días de la infección
(fase aguda).
▪ Se cree que participa en la evasión del sistema inmune del huésped.
Detección
▪ Se detecta desde el primer día de fiebre y hasta el 5º–7º día. Ideal para el diagnóstico temprano,
incluso antes de que aparezcan los anticuerpos IgM.
▪ Métodos: Prueba rápida (inmunocromatografía), ELISA.
• RT-PCR (Reacción en cadena de la polimerasa con transcriptasa inversa)
▪ Detecta el ARN viral de forma directa.
▪ Alta sensibilidad y especificidad
▪ Permite identificar el serotipo del virus.
⎯ Fase convaleciente (después del día 5) → Método indirecto
• Detección de anticuerpos IgM e IgG
▪ IgM aparece desde el 4°-5° día y puede persistir por semanas.
▪ IgG aparece más tarde y sugiere infección pasada o secundaria
▪ Prueba: ELISA o pruebas rápidas
▪ Interpretación:
o IgM (+) e IgG (–): infección primaria reciente.
o IgM (+) e IgG (+): infección secundaria o avanzada.
o IgM (–) e IgG (+): infección pasada.
⎯ Otras pruebas útiles
• Hemograma: leucopenia, trombocitopenia, hemoconcentración (hematocrito elevado)
• Pruebas de función hepática: elevación de transaminasas (AST/ALT)
• Pruebas de coagulación
⎯ Diagnóstico diferencial
• El dengue puede confundirse clínicamente con otras enfermedades febriles agudas como: Chikungunya,
Zika, Fiebre tifoidea, Leptospirosis
Prueba ASTO o ASO
⎯ mide los anticuerpos anti-estreptolisina O en sangre.
⎯ Estos anticuerpos son producidos por el sistema inmunológico en respuesta a una toxina llamada
estreptolisina O, liberada por bacterias del grupo estreptococo beta hemolítico del grupo A (Streptococcus
pyogenes).
⎯ Los anticuerpos ASO son producidos por el sistema inmunológico como respuesta a la infección por esta
bacteria.
⎯ ¿Qué es la estreptolisina O?
• Es una toxina hemolítica producida por Streptococcus pyogenes (estreptococo del grupo A)
• Destruye glóbulos rojos
• Es altamente inmunogénica, lo que significa que el cuerpo genera anticuerpos contra ella
⎯ Esta prueba se manda al paciente cuando una persona presenta signos o síntomas sugerentes de fiebre
reumática (fiebre, dolor torácico, fatiga y dificultad para respirar) o de glomerulonefritis (edema y emisión de
orina oscura), especialmente si la persona ha tenido recientemente una infección por el estreptococo del grupo
A que no se diagnosticó o trató adecuadamente.
⎯ Se utiliza para detectar infecciones pasadas o recientes por estreptococos, especialmente si se sospechan
complicaciones postinfecciosas, como: fiebre reumática, glomerulonefritis postestreptocócica, artritis reactiva
postestreptocócica, endocarditis estreptocócica
• No sirve para diagnosticar una faringitis estreptocócica activa, ya que los anticuerpos aparecen 1–3
semanas después de la infección.
⎯ Interpretación de resultados:
• Resultados normales: Un título bajo de ASO generalmente indica que no hay una infección estreptocócica
reciente o que la infección se resolvió.
• Resultados elevados: Un título elevado de ASO sugiere que ha habido una infección estreptocócica
reciente o que la infección puede estar causando complicaciones.
Streptococcus pyogenes
⎯ El estreptococo del grupo A es el responsable de la mayoría de las faringoamigdalitis bacterianas y de
muchas infecciones de la piel (pioderma, impétigo, celulitis). En la mayoría de los casos, las infecciones por
estreptococo pueden identificarse y tratarse con antibióticos, resolviéndose satisfactoriamente
⎯ Sin embargo, cuando la infección no causa signos o síntomas identificables y por lo tanto no recibe
tratamiento o este es inadecuado, pueden aparecer complicaciones post-estreptocócicas, como la fiebre
reumática y la glomerulonefritis, especialmente en los niños. En la actualidad, la incidencia de estas
complicaciones ha disminuido sustancialmente. Sin embargo, todavía pueden observarse y pueden
causar enfermedades cardiacas, enfermedad renal, hinchazón de los tejidos por retención de líquido (edema)
e hipertensión arterial. Los ASLO permiten conocer si estas complicaciones son debidas a una infección
reciente por el estreptococo del grupo A.
