PRÁCTICA No.
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REACCIONES CARACTERÍSTICAS DE LOS AMINOÁCIDOS
INTRODUCCIÓN
Las proteínas, están construidas a partir del mismo conjunto de 20 aminoácidos,
unidos de forma covalente en secuencias lineales características. Debido a que cada
uno de estos aminoácidos tiene una cadena lateral propia que determina sus
propiedades químicas, se puede considerar a este grupo de 20 moléculas precursoras
como el alfabeto en el que está inscrito el lenguaje de la estructura proteica.
Los aminoácidos están constituidos por un grupo –COO -, un grupo –NH3+, hidrógeno
y una cadena lateral representada como R, todas unidas a su carbono α. Estos
presentan las reacciones características de sus grupos carboxilo, alfa-amino y R; van
a ser las reacciones típicas de los grupos R las que permitirán diferenciar entre los
aminoácidos. No todos los aminoácidos presentan reacciones típicas, algunas de
estas son:
Reacciones de la Ninhidrina: Positiva para todas las aminas primarias.
Reacción de Millon: Coloración roja por presencia de tirosina.
Reacción de Satin: Específica para Prolina e Hidroxiprolina.
Reacción de Sakaguchi: Detecta la presencia de Arginina.
Reacción de Pauli: Detecta la presencia de Histidina y Tirosina.
Reacción de Xantoproteica: Color amarillo con la Fenilalanina, Tirosina y
Triptófano.
Reacción de Hopkins-Cole: Específica para Triptófano.
Reacción de Vanilina: Para identificar Triptófano.
OBJETIVOS
1. Comprender las propiedades químicas de los aminoácidos como medio
para suidentificación.
2. Identificar los presuntos aminoácidos presentes en las muestras analizadas.
MATERIALES REACTIVOS
20 Tubos de ensaye 75 ml de aminoácidos al 5 %
5 Pipetas graduadas 50 ml de NaOH al 40 %
1 Mechero 50 ml de HNO3 concentrado
1 Pinzas para tubo 10 ml de NH4OH concentrado
1 Gradilla 10 g de Acetato de plomo concentrado
5 g de Ácido glioxílico
50 ml de Ácido acético glacial
20 ml de Ninhidrina al 0.1 %
30 g de Óxido rojo de mercurio
25 ml de Nitrato de sodio al 30 %
METODOLOGÍA
PREPARACIÓN DE REACTIVOS ESPECIALES
1. Reactivo de Millon: cuidadosamente agregar 30 g de óxido rojo de mercurio a una
mezcla de 22.5 mL de HNO3 concentrado y 25 mL de agua. Ya que se haya disuelto
el óxido, se le añaden 25 mL de una solución de nitrato de sodio al 30 %.
2. Reactivo de Hopkins-Cole: disolver 5 g de ácido glioxílico en ácido acético glacial,
aforando a 50 mL.
Reacción Xantoproteica:
1. Tomar 3 mL de cada solución problema.
2. Agregar 1 mL de HNO3 concentrado y calentar cuidadosamente (en la campana de
extracción).
3. Observar si hubo algún cambio en color.
4. Enfriar bien y esterificar cuidadosamente con unas gotas de NH4OH concentrado.
Observar si se forma un color anaranjado en la interfase.
Reacción de Millon:
1. Tomar 2 mL de cada una de las soluciones problema.
2. Agregar de II a V gotas del reactivo de Millon.
3. Calentar en baño de agua.
4. Observar la formación de un color rojo indica que es positiva la prueba.
Nota:
El reactivo de Millon es muy venenoso y corrosivo, extremar cuidados con este
reactivo.
Prueba para el Azufre:
1. Tomar 3 mL de cada solución problema.
2. Agregar 2 mL de NaOH al 40 % y caliente suavemente.
3. Añadir de III a V gotas de acetato de plomo saturado.
4. Calentar nuevamente.
5. Observar si hay formación de precipitado negro de PbS.
Reacción de Ninhidrina:
1. Tomar 3 mL de las soluciones problema.
2. Adicionar 0.5 mL de la solución de Ninhidrina al 0.1 %.
3. Calentar la mezcla en baño de agua por 10 min. La Ninhidriana reacciona con todos
los aminoácidos alfa cuyo pH se encuentra entre 4 y 8, dando una coloración que
varía de azul a violeta intenso.
Reacción de Hopkins-Cole:
1. Tomar 2 mL de cada solución problema.
2. Agregar V gotas de reactivo de Hopkings-Cole (solución de ácido glioxílico) y
mezclar bien.
3. Esterificar cuidadosamente con ácido sulfúrico concentrado, procurando que seforme
una interfase entre ambos líquidos. La formación de un anillo violeta o rojizo indica
la presencia de Triptófano.
Completar el siguiente cuadro con la información deseada.
En la casilla de No. Muestra, coloque el número de cada tubo de las muestras
problemas que se le entregaron.
Usar los signos (+) o (-), para reportar la positividad o negatividad de la reacción.
Sobre la base de los resultados de sus pruebas, se debe identificar la muestra
problema y escribir la composición más resaltante en las casillas
correspondientes.
Muestra 1 2 3 4 5 6 7 8
Xantoproteína
Millon
Azufre
Ninhidrina
Hopkins-Cole
Nombre de la
muestra problema
Composición de lasustancia
identificada
OBSERVACIONES
DISCUSIÓN
CONCLUSIONES
BIBLIOGRAFÍA
ORIENTACIÓN PARA EL ANÁLSIS DE RESULTADOS
1. Elaborar un diagrama de flujo en el que describa el o los procedimientos utilizados
en esta práctica.
2. Clasificar de acuerdo a la estructura química de la cadena lateral, a cada uno de los
aminoácidos utilizados en la práctica.
3. Describir las propiedades químicas de la familia a la que pertenece cada uno de los
aminoácidos utilizados.
4. Relacionar las propiedades químicas de la familia a la que pertenece cada
uno de los aminoácidos con las reacciones de identificación.
5. Dar una posible explicación de cómo es que reacciona cada aminoácido
con la prueba que lo identifica.
6. Utilizar libros de química orgánica y relacionados a la
identificación de compuestos orgánicos.
7. Reacciones de identificación de aminoácidos.
