Clase 7: Estructuras microbianas III
1.
Endoflagelos / Filamentos axiales
• Presente en espiroquetas como Treponema pallidum (sífilis) o Borrelia
burgdorferi (Lyme).
• Se encuentran en el periplasma, entre la membrana citoplasmática y la
membrana externa.
• Su rotación produce un movimiento helicoidal o en “tirabuzón”.
Importancia biotecnológica:
• Si manipulas o estudias espiroquetas y no consideras este tipo de motilidad,
podrías fallar en el diseño de antibióticos o pruebas de motilidad.
2.
Fimbrias y Pili
Característica Fimbrias Pili
Proteína Fimbrilina Pilina
Tamaño Cortas Más largas
Nº por célula 200-400 1-10
Función Adherencia Conjugación / movilidad (tipo IV)
• Fimbrias: permiten la adhesión a superficies (formación de biofilms).
• Pili: participan en conjugación bacteriana (intercambio genético) y en motilidad
por twitching.
Importancia biotecnológica:
• Si trabajas con bacterias patógenas y fallas en reconocer si poseen fimbrias o
pili, podrías subestimar su capacidad de adherencia o transferencia genética (por
ejemplo, resistencia antibiótica).
3.
Endosporas y Esporulación
• Endospora: estructura de resistencia extrema (calor, desecación, radiación).
• Se forma cuando las condiciones ambientales son adversas.
• Ejemplos: Bacillus y Clostridium.
• Partes: núcleo, cortex, capa de proteína, exosporio.
Etapas:
1. Formación de la espora (esporogénesis).
2. Latencia.
3. Germinación cuando el ambiente mejora.
Importancia biotecnológica:
• Si estás esterilizando material y no consideras esporas, podrías dejar bacterias
viables, afectando cultivos o la seguridad del producto.
4.
Inclusiones citoplasmáticas
• Polifosfatos: reserva de fósforo.
• Vesículas de gas: flotación en bacterias acuáticas.
• Gránulos de azufre, lípidos, etc.: almacenan nutrientes.
Importancia biotecnológica:
• Al cultivar bacterias, si el medio es pobre en nutrientes clave, las bacterias
depletarán sus inclusiones y podrían morir o no producir lo esperado.
Clase 8: Nutrición, metabolismo y medios de cultivo
bacteriano
1.
Nutrientes
• Macronutrientes: C, H, O, N, P, S (biomoléculas).
• Micronutrientes: metales como Fe, Mn, Zn (cofactores enzimáticos).
• Factores de crecimiento: compuestos orgánicos que algunas bacterias no pueden
sintetizar (ej. vitaminas).
Importancia biotecnológica:
• Si no agregas un factor de crecimiento esencial, bacterias exigentes como
Haemophilus no crecerán.
2.
Clasificación energética
• Fotótrofos: usan luz (ej. cianobacterias).
• Quimiótrofos:
o Litótrofos: usan compuestos inorgánicos (ej. Nitrosomonas).
o Organótrofos: usan compuestos orgánicos (ej. E. coli).
• Autótrofos / Heterótrofos: según fuente de carbono (CO₂ u orgánica).
Importancia biotecnológica:
• Al diseñar un biorreactor para una bacteria nitrificante (quimiolitótrofa), si le das
glucosa (orgánico), no crecerá.
3.
Metabolismo
• Respiración aeróbica: O₂ como aceptor final, alta producción de ATP.
• Anaeróbica: usa NO₃⁻, SO₄²⁻, CO₃²⁻, produce menos ATP.
• Fermentación: no usa cadena transportadora, baja eficiencia energética.
Importancia biotecnológica:
• Si fermentas lactobacilos en ausencia de glucosa, no obtendrás ácido láctico,
fallando en la producción de yogurt o probióticos.
Clase 9: Características de los medios de cultivo
1.
Tipos de medios
Tipo Función
General Crecen muchas bacterias (ej. agar nutritivo)
Enriquecimiento Mejora crecimiento de bacterias exigentes (agar sangre)
Selectivo Inhibe ciertos microorganismos (MacConkey inhibe Gram+)
Diferencial Permite distinguir bacterias (fermentación, hemólisis)
Mínimo Solo lo esencial para crecer (estudios metabólicos)
2.
Medios específicos
A.
Agar McConkey
(selectivo y diferencial)
• Distingue bacterias Lac+ (rosadas, como E. coli) de Lac− (Salmonella, colonias
incoloras).
• Inhibe Gram+ con sales biliares y cristal violeta.
B.
Agar sangre
• Permite ver hemólisis:
o Alfa: verde (parcial).
o Beta: transparente (total).
o Gamma: sin hemólisis.
• Bacterias fastidiosas como Streptococcus.
C.
Agar EMB (Levine)
• Fermentadoras de lactosa: colonias negras o verde metálico (E. coli).
• No fermentadoras: incoloras (Salmonella).
D.
Agar Baird Parker
• Selectivo para Staphylococcus aureus.
• Colonias negras por reducción de telurito.
• Zona clara si hay lecitinasa.
Importancia biotecnológica:
• Si usas el medio incorrecto, puedes no detectar un patógeno en alimentos o
productos farmacéuticos.
Clase 11: Crecimiento microbiano
1. ¿Qué es el crecimiento bacteriano?
Es el aumento en el número de células, no del tamaño celular. Se da por fisión binaria,
donde una célula se divide en dos.
2. Tiempo de generación
Es el tiempo necesario para que una población bacteriana se duplique. Varía según:
• Nutrientes
• Temperatura
• Genética del microorganismo
Ejemplo:
• E. coli puede duplicarse en 20 minutos en condiciones óptimas.
Error biotecnológico común: No calcular bien el tiempo de generación puede
llevarte a cosechar un cultivo demasiado temprano o tarde, perdiendo viabilidad o
eficiencia productiva.
3. Curva de crecimiento bacteriano (en medio líquido)
Fase Descripción
Latencia Adaptación al medio. No hay crecimiento aparente.
Exponencial
Crecimiento rápido. Se duplican continuamente.
(logarítmica)
Se agotan nutrientes. Hay equilibrio entre muerte y
Estacionaria
reproducción.
Predomina la muerte celular por acumulación de tóxicos y falta
De muerte
de nutrientes.
Aplicación: En biotecnología, se suele mantener el cultivo en fase exponencial
usando fermentadores (biorreactores), ya que es donde la bacteria produce más
metabolitos.
4. Cálculos de crecimiento
Fórmulas clave:
• Número de células:
N = N_0 \times 2^n
• Número de generaciones:
n = \frac{\log N - \log N_0}{\log 2} \approx 3.3 \times (\log N - \log N_0)
Error típico: Si no se controla cuántas generaciones pasaron, puedes terminar con
una concentración celular incorrecta o sobrecrecimiento.
5. Métodos para medir crecimiento
• Directos: cámara de Neubauer, conteo en placa.
• Indirectos: turbidimetría (absorbancia), peso seco.
6. Cultivo continuo (quimiostato)
• Medio fresco entra continuamente.
• Medio usado y células salen al mismo ritmo.
• Mantiene fase exponencial indefinidamente.
• Controla densidad celular y velocidad de crecimiento con:
o Velocidad de dilución
o Nutriente limitante
Importancia: Ideal para producción de antibióticos, enzimas o biomasa en industrias.
Si no se mantiene el equilibrio, se puede alterar el producto final o matar el cultivo.
Clase 12: Condiciones de crecimiento microbiano
Esta clase trata cómo el entorno afecta el crecimiento bacteriano.
1.
Temperatura
Grupos:
• Psicrófilos: 0–20 °C (ej. Chlamydomonas nivalis)
• Mesófilos: 20–45 °C (ej. patógenos humanos)
• Termófilos: 45–80 °C (ej. Thermus aquaticus)
• Hipertermófilos: >80 °C (ej. Archaea extremófilas)
Aplicación: Al usar T. aquaticus (fuente de la ADN polimerasa Taq para PCR), si no
mantienes la temperatura adecuada, la enzima se desnaturaliza o inactiva.
2.
pH
• La mayoría crece entre pH 5 y 9.
• Algunos acidófilos (ej. Acidithiobacillus ferrooxidans) trabajan a pH muy bajo,
útiles en biolixiviación de metales.
Fallo común: Usar una bacteria acidófila en pH neutro ⇒ no crece ⇒ fallo en el
proceso.
3.
Sales y presión osmótica
• Halófilos: toleran alta salinidad. Ej. Dunaliella salina (aguas hipersalinas).
• Las bacterias halófilas producen solutos compatibles (ej. ectoína, trehalosa) que
protegen sus estructuras.
Aplicación: En procesos de desecación o estrés osmótico, estos solutos pueden
proteger proteínas sensibles. Si no se aplican, enzimas se desnaturalizan.
4.
Oxígeno
Tipo Uso de O₂
Aerobio estricto Necesita O₂ (ej. Mycobacterium bovis)
Anaerobio estricto O₂ es tóxico (ej. Clostridium tetani)
Facultativo Con o sin O₂ (ej. E. coli)
Microaerófilo Solo a bajas concentraciones (ej. Haemophilus)
Anaerobio aerotolerante No usa O₂ pero lo tolera (ej. Streptococcus pyogenes)
Error grave: Cultivar Clostridium con oxígeno ⇒ mueren.
5.
Presión
• Barófilos / piezófilos: viven en alta presión (fondo oceánico).
• Ej.: Shewanella violacea crece a 30 MPa.
Aplicación: En estudios de extremófilos o desarrollo de biotecnología marina,
ignorar la presión correcta hace que los cultivos no crezcan.