INSTRUMENTACIÓN Y EQUIPAMIENTO
DE LABORATORIO 2025 - I
PRACTICA N°04
MANEJO DEL AUTOCLAVE
I. OBJETIVOS
1. Al finalizar la presente práctica el alumno será competente para realizar y supervisar
el correcto uso de la autoclave.
2. Reconocer el principio de la esterilización mediante el uso del autoclave.
3. Realizar el control de calidad de los equipos de esterilización.
II. INTRODUCCIÓN
El autoclave es un instrumento habitual en los laboratorios de Microbiología y en otros
ambientes hospitalarios con el fin de eliminar la mayor cantidad de microorganismos
presentes en materiales de uso médico.
Es un sistema cerrado donde se forma vapor de agua que se somete a una presión
elevada, una atmósfera, lo que hace que el agua alcance una temperatura de 121ºC
causando la desnaturalización de enzimas lo que conlleva a la muerte de los
microorganismos y la destrucción de las esporas. Habitualmente, se esteriliza a 121ºC
durante 20 minutos.
En el laboratorio de Microbiología es imprescindible trabajar con material y soluciones
estériles con objeto de que los resultados que se obtengan correspondan al
microorganismo o microorganismos que están presentes en la muestra en estudio y no a
contaminantes que procedentes del medio o los materiales, puedan desarrollarse y
falsear las pruebas. Para ello antes de comenzar el trabajo práctico se esterilizará, junto
con los medios de cultivo, el material que posteriormente va a ser utilizado. Se entiende
por esterilización los procedimientos por los cuales se eliminan todas las formas vivas de
microorganismos, sean patógenos o no, que se hallen en un material. Esta esterilización
suele efectuarse con calor húmedo en unos aparatos denominados autoclaves.
EL FUNCIONAMIENTO DEL AUTOCLAVE
El proceso completo de esterilización en un autoclave se compone de diferentes fases:
1. Fase de purgado: A medida que la resistencia calienta el agua del fondo del calderín,
se va produciendo vapor que desplaza el aire, haciéndolo salir por la válvula de
purgado que está abierta. Esta fase termina cuando se alcanza la temperatura de
esterilización.
2. Fase de esterilización: Una vez cerrada la válvula de purgado y alcanzada la
temperatura de esterilización previamente seleccionada se inicia el proceso de
esterilización.
3. Fase de descarga: Terminado el proceso de esterilización, deja de funcionar la
resistencia calefactora, con lo que deja de producirse vapor y la presión y temperatura
del calderín empieza a bajar poco a poco.
Docente: Lic. TM. Yusver I. Vila Sulca
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Algunas consideraciones para una correcta esterilización del material
1. Para que la esterilización de medios de cultivo sea eficaz, la temperatura y el tiempo
seleccionados deben alcanzarse en todo el líquido.
2. Los recipientes con cierre hermético deben ser introducidos en el autoclave sin cerrar
totalmente el tapón, para facilitar la entrada del vapor durante el proceso. Al vaciar el
autoclave después de la esterilización procederemos a cerrar totalmente estos
recipientes.
3. Los recipientes vacíos precisan de un tiempo de esterilización mayor que los recipientes
con líquido en su interior.
PARTES DEL AUTOCLAVE CLASE B
PARTES DEL AUTOCLAVE VERTICAL
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PASOS PARA EL USO DEL AUTOCLAVE
1. Con el autoclave apagado y abierto, añadimos agua destilada hasta la rejilla,
cubriéndola ligeramente.
2. Se pondrá algún soporte metálico para evitar que el material envuelto en bolsas
herméticas o papel Kraft que se desee esterilizar contacte directamente con el agua.
Esto es siempre necesario. Se colocarán adecuadamente (en cestillos, cajas, etc).
Los objetos que se van a esterilizar.
3. Se cierra la tapa y se ajusta a presión.
4. Se abrirá la llave de purga para que permita la salida de vapor y se ajustará la presión
deseada para la esterilización, así como el tiempo.
5. Se pondrá en marcha el aparato y se esperará hasta que salga vapor por la llave de
purga.
6. Se cerrará la llave de purga y la depresión comenzará a subir hasta llegar al nivel
programado. A partir de aquí comenzará a contar el tiempo de esterilización.
7. Una vez realizada la esterilización se apagará el interruptor de la clave y se esperará
a que el nanómetro baje a cero.
8. Cuando la presión esté a cero, abriremos la llave de purga para que salga gran parte
del vapor que todavía se encuentra contenido. Esto se realizará con cuidado para
evitar descomposiciones bruscas que podrían originar la apertura de aquellos
recipientes tapados con el algodón graso.
9. Una ves comprobada la salida de vapor, se abre la tapa del autoclave y se extrae el
material.
En el autoclave se puede esterilizar material metálico, cristal, torundas, compresas, paños,
batas, plásticos y gomas reutilizables. Tiene la ventaja que evita provocar daño a
materiales de uso médico.
Recomendaciones
Antes de empezar se debe de tener dos cosas en cuenta, las cuales son importantes y
vitales para nuestra seguridad.
1. Nunca se debe de colocar a lado de la salida de aire, debido a que éste saldrá caliente
y puede provocar quemaduras.
2. Se debe cerrar correctamente la tapa del autoclave antes de empezar el proceso, ya
que de no ser así, el aire caliente y la presión podría salir disparada como si una olla
de presión y por ultimo JAMAS se debe abrir el autoclave antes de que la presión
este en 0.
MATERIAL USADO PARA ESTERILIZAR
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CUESTIONARIO
I. ¿Qué materiales no pueden ser esterilizados mediante el uso del autoclave debido al
uso del vapor a altas temperaturas?
II. Explicar de qué manera la esterilización por el autoclave permite eliminar la presencia
de microorganismos en la superficie de ciertos materiales médicos?
III. ¿Cuál es la manera de asegurarnos que el autoclave esta funcionando de manera
inadecuada?
IV. Mencionar los principales accidentes asociados al uso inadecuado del autoclave?
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