INIA TREINTA Y TRES - Estación Experimental del Este
Arroz - Resultados Experimentales 2003-04
DESARROLLO DE INOCULANTES A BASE DE BACTERIAS
FIJADORAS DE NITRÓGENO EN ARROZ. LIA 009
Carlos Labandera1/, Karina Punschke1/, Mariana Carlomagno1/
ANTECEDENTES (Baldani, J.I. et al, 1997 y Mirza, M.S. et al,
2000).
En Uruguay el arroz se cultiva
generalmente en rotación con pasturas; sin La concentración de estas bacterias en los
embargo, es común el uso de fertilizantes tejidos de la planta, el grado de
nitrogenados. El objetivo de este proyecto colonización y su funcionamiento están
es contribuir a la sostenibilidad del cultivo relacionados con: el genotipo de la planta,
reduciendo la aplicación de nitrógeno el tejido vegetal, el estadio fenológico del
químico, a través del estudio del potencial cultivo, el desarrollo radical, el flujo de
de promoción del crecimiento de bacterias fotosintatos hacia la raíz y el marco
endófitas fijadoras de nitrógeno (N). agronómico fundamentalmente en lo que
refiere a variedades, condiciones de
Estas bacterias colonizan el interior de las siembra y uso de fertilizantes (Canzani, F.
raíces y en algunos casos se dispersan et al, 1998).
sistémicamente en la planta sin formar
estructuras especializadas. Algunas En varios ensayos de inoculación de arroz
pueden transmitirse en el grano. Además se demostró que los fijadores de N
de la fijación biológica de N (FBN), existen confirmados como endófitos promueven
otros mecanismos implicados en la significativamente su crecimiento, como se
promoción de crecimiento: producción de muestra en el siguiente cuadro:
fitohormonas, control biológico, etc.
Bacteria Condiciones / Mecanismo de promoción
-Azospirillum brasilense en campo / aumento en el crecimiento radical, en
A. irakense compuestos nitrogenados y en rendimiento (4; 5; 6).
-Azoarcus BH72 condiciones controladas / aumento en peso seco y
compuestos con N, por FBN
-Herbaspirillum seropedicae condiciones controladas / aumento del peso fresco de
Burkholderia brasilense raíz y parte aérea en 50% por FBN y producción de
hormonas (7; 8; 1; 9; 2)
-presuntos Azospirillum y otros fijadores de N condiciones controladas / incremento significativo en el
de El Paso 144 peso de las plantas (10,11)
RESULTADOS
para Azospirillum spp., Herbaspirillum spp.
1. Cuantificación y aislamiento de y
bacterias fijadoras de N endófitas. Azoarcus spp., JMV para Burkholderia
brasilense, Rennie para Bacillus spp., y LG
Se recolectaron plantas en estadio modificado para bacterias aerobias
vegetativo de El Paso 144 e INIA Tacuarí, (Dobereiner, J. et al, 1995).
de chacras comerciales y parcelas
experimentales de INIA (zafras 2000/2001 y - Todas las muestras El Paso y 69% de las
2001/2002). Se desinfectaron tallos y hojas, Tacuarí presentaron concentraciones de
se maceraron y se sembraron los medios endófitas fijadoras de N mayores a 105
de cultivo para aislar fijadores de N: NFb células/g de tejido para los medios NFb y
JMV. Estos resultados apoyan trabajos
1/
Depto. Microbiología de Suelos - MGAP previos de nuestro Departamento y
sugieren que estas diferencias podrían
Capítulo 3 - Manejo de Suelos y Nutrición Vegetal 43
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Arroz - Resultados Experimentales 2003-04
deberse a las distintas capacidades de las (Figura 1). Se consideró aislamiento
variedades de asociarse a estas bacterias promotor aquel que produjo un incremento
(Canzani, F. et al, 1998). mayor al 20% de la materia seca de raíz y/o
parte aérea, respecto al testigo sin inocular.
2. Caracterización El Cuadro 1 muestra un resumen de los
resultados de estos ensayos.
Promoción del Crecimiento en cámara
iluminada
Se realizaron ensayos de promoción en
condiciones controladas con y sin N mineral
Cuadro 1. Promoción de crecimiento en arroz inoculado con diferentes aislamientos de
bacterias endófitas, en condiciones controladas. Se incluyen solo aislamientos c/ promoción
significativa(a).
Código del Promoción Código del Promoción
(b)
Aislamiento El Paso 144 INIA Tacuarí aislamiento El Paso 144 INIA Tacuarí
2N (-) +* 31L +* +*
59L (-) +*
38N (-) ++* 59 1L (-) +*
46N +* +* 59 2L + +*
56N + +* 60L + +*
70N + +* 66 aLc +* (-)
66 bL +* +*
23J (-) +* 67L +* +
82 2J +* +* 69 a1Lc +* (-)
72 bL +* +
53R (-) ++* 75Lc + +*
73R + ++* 76 cL +* +*
81R + ++* 82 aLc (-) +*
82 bL +* +*
83 aL ++* ++*
(a)
(-) aislamiento no promotor; + aislamiento con promoción del 20 al 100%; ++ aislamiento con promoción de 100% a
(b) (c)
272%; * promoción significativa (LSD, p<0.05) N: NFb; J: JMV; R: Rennie; L: LGm. aislamiento con efecto
promotor en presencia de N (KNO3, 0.05%).
- De 257 cepas, 50 confirmaron la
promoción; de éstas, 25 mostraron niveles
de promoción significativos (Cuadro 1), 5 de
las cuales aumentaron la materia seca en
más del 100% en Tacuarí (Cuadro 1).
- De las 25 cepas promotoras, 15 (60%)
se aislaron en el medio LGm sin N en
condiciones aerobias (Cuadro 1).
- De las 25 cepas con promoción
significativa 21 (84%) tuvieron este efecto
en Tacuarí, 11 (44%) lo hizo en El Paso y 7
cepas (28%) promovieron en ambas
Figura 1. Ensayo de promoción del variedades (Cuadro 1).
crecimiento en cámara de crecimiento, 45
días de sembrado.
44 Capítulo 3 - Manejo de Suelos y Nutrición Vegetal
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Arroz - Resultados Experimentales 2003-04
- De las 25 cepas con promoción endófitos del arroz en relación al marco
significativa, 21 (84%) lo hicieron en agronómico.
ausencia de N combinado
LITERATURA CITADA
Promoción del Crecimiento en invernáculo
1. Baldani JI, Caruso L, Baldani VLD, Goi
Se seleccionaron 4 aislamientos con SR and Döbereiner J (1997) Recent
promoción significativa en condiciones advances in BNF with non-legume plants.
controladas en ausencia de N mineral Soil Biol Biochem 29: 911-922
(56aN 82J2, 81R, 60L), y se probaron en
ambas variedades en invernáculo utilizando 2. Mirza MS, Rasul G, Mehnaz S et al
2 cepas de referencia y un testigo sin (2000) Beneficial effects of inoculated
inocular. Se utilizó suelo de la Unidad nitrogen-fixing bacteria on rice. In: The
Experimental Paso de la Laguna de INIA, quest for nitrogen fixation in rice (Ladha JK
Departamento de Treinta y Tres, con pH and Reddy PM Eds) IRRI Pp: 191-204
(en H2O) 5.1, materia orgánica 3.7%, y nivel
de fósforo corregido con el agregado de 3. Canzani F, Vitola G, Dutto P y Labandera
superfosfato triple. El diseño fue C (1998) Cuantificación y aislamiento de
completamente al azar con 5 repeticiones. microorganismos fijadores de nitrógeno en
El ensayo se cosechó a inicio de floración arroz. En “Arroz. Resultados
(110 días). experimentales 1997-1998” INIA Treinta y
Tres Actividades de difusión Nº 166.
- Hubo un efecto estimulador de la
inoculación sobre el sistema radicular en 4. Okon Y and Vanderleyden J (1997) Root-
ambas variedades. associated Azospirillum species can
stimulate plants. ASM News Vol 63, 7
- Hubo una tendencia a una mayor Pp:366-370
producción de materia seca en los
tratamientos inoculados en Tacuarí. 5. Yanni YG, Rizk RY, Corich V et al (1997)
Natural endophytic association between R
- Las plantas Tacuarí inoculadas mostraron leguminosarum bv trifolii and rice,
mayor altura respecto al testigo a los 50 assessment of its potential to promote rice
días de sembradas. growth. Plant and Soil 194: 99-114
6. Dazzo FB, Yanni YG, Rizk R et al (2000)
CONCLUSIONES Y PERSPECTIVAS Progress in multinational collaborative
studies on the beneficial association
Existe un potencial de respuesta a la between Rhizobium leguminosarum bv
inoculación con bacterias endófitas trifolii and rice. In: The quest for nitrogen
fijadoras de N en arroz en cámara de fixation in rice, (Ladha JK and Reddy PM
crecimiento e invernáculo, tanto en parte Eds) IRRI Pp: 167-189
aérea como raíz.
7. Pádua VLM, Masuda HP, Alves HM et al
Este potencial de respuesta se asocia a la (2001) Effect of endophytic bacterial indole-
variedad y a la fertilización nitrogenada del acetic acid (IAA) on rice development. on
cultivo. Los resultados más significativos se line [Citado: 31 de octubre, 2001]
asocian con Tacuarí, y su mayor expresión Disponible en internet:
se manifiesta en ausencia de N combinado. <www.ag.auburn.edu/argentina/pdfmanuscr
ipts/padua.pdf>
Es muy significativo el aislamiento de
bacterias endófitas fijadoras de N en 8. Baldani VLD, Olivares FL and Döbereiner
condiciones aerobias. J (1995) Selection of Herbaspirillum spp
strains associated with rice seedlings
Los resultados muestran que existe un amended with 15N-labeled fertiliser. In:
potencial de manejo de la expresión de los International Symposium on Sustainable
Capítulo 3 - Manejo de Suelos y Nutrición Vegetal 45
INIA TREINTA Y TRES - Estación Experimental del Este
Arroz - Resultados Experimentales 2003-04
Agriculture for the Tropics: The role of crecimiento de plantas de interés
biological nitrogen fixation (Boddey RM and agronómico"
de Resende AS Eds) Rio de Janeiro: 11. Vitola G (2001) Aislamiento y
Empresa Brasileira de Pesquisa caracterización de endófitos de plantas de
Agropecuária Pp: 202-203 arroz con énfasis en Azospirillum Trabajo
Especial II Licenciatura en Bioquímica
9. Baldani VLD, Baldani JI, Döbereiner J Facultad de Ciencias
(2000) Inoculation of rice plants with the
endophytic diazotrophs Herbaspirillum 12. Dobereiner J, Baldani VL, Baldani I
seropedicae and Burkholderia spp. Biology (1995) Como isolar e identificar bacterias
and Fertility of Soils 30: (5-6) 485- 491 diazotróficas de plantas nao-leguminosas
EMBRAPA-SPI Brasilia-DF
10. Dutto P y Labandera C (1999) Informe
final de actividades Proyecto "Uso de
bacterias rizosféricas promotoras del
46 Capítulo 3 - Manejo de Suelos y Nutrición Vegetal
