IEST “CARLOS CUETO FERNANDINI” Prof. Q.F.
Argentina Mayorga Lacayo
Dpto. Laboratorio Clínico
PRACTICA No
USO ADECUADO DE PIPETAS AUTOMATICAS
Objetivo:
• Conocer las partes y el funcionamiento de las micropipetas
• Adquirir destreza en la utilización de pipetas para la medición de volúmenes pequeños (μL)
En bioquímica, la habilidad para medir de manera exacta y reproducible y transferir volúmenes pequeños de
líquidos son críticos para obtener resultados útiles. Para los volúmenes menores de 1 mL, el método más
común para medir líquidos requiere el uso de un dispositivo conocido como micropipeta.
MATERIALES
Pipetas Automáticas
Pipetas volumétricas
Tubos de ensayo
Gradillas
Beaker
Fiola
Agua destilada
Solución de Permanganato de potasio 10 mg%
METODO DIRECTO METODO INDIRECTO
Se utiliza para la mayoría de los líquidos Este método suele utilizarse para líquidos
viscosos o con tendencia a formar espuma
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Dpto. Laboratorio Clínico
ACTIVIDAD 1
PROCEDIMIENTO
1.- En un tubo de ensayo limpio y seco coloque 500 ul de la solución de permanganato de potasio y adicione
1 ml de agua destilada leer en el espectrofotómetro a 520 nm.
2.- Repetir la lectura del mismo tubo 4 veces más esperando un tiempo de 30 segundos entre cada lectura.
3.- Sacar un promedio de las lecturas obtenidas y anotarla en la pizarra.
4.- Determinar el porcentaje de error del uso de la micropipeta aplicando la formula.
E% = Valor teórico – Valor práctico x 100
Valor teórico
ACTIVIDAD 2
PROCEDIMIENTO
1. Pon en un tubo eppendorf 300 μL. Tubo nº1.
2. Trasvasa 100 μL, a otro tubo
3. De lo que te queda el tubo nº1, pasa 150 μL a otro tubo de eppendorf.
4. Toma del tubo nº1 20 μL, dos veces 10 μL, 5 μL y cinco veces 1 μL.
5. En el tubo nº 1 debes de tener suficiente para todos los trasvases de agua.
6. Repítelo tantas veces sea necesario hasta que lo consigas.
USO CORRECTO DE LA PIPETA AUTOMATICA
1.- Antes de comenzar ajuste el volumen deseado.
2.- Inserte la punta ( Tips) en el cono de la pipeta, haciendo una leve presión con movimiento giratorio, para
asegurar que este bien sujeta.
Al usar las puntas desechables garantiza la seguridad y elimina el riesgo de contaminación de la
muestra. NUNCA UTILICE LA PIPETA SIN LA PUNTA (TIPS) COLOCADA.
3.- Para aspirar la pipeta debe estar en posición vertical y presione el botón pulsador hasta el primer tope
(Fig A)
4.- Sumerja la punta en la muestra manteniendo la pipeta en posición vertical.
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Dpto. Laboratorio Clínico
5.- Libere el botón pulsador lenta y suavemente para
aspirar la muestra. (fig.B)
6.- Espere un segundo y retire la punta del líquido. Limpiar
si es necesario la parte exterior de la punta si es que
observa gotas de líquido.
7.- Colocar la parte inferior de la punta contra la pared del
interior del recipiente donde va a colocar la muestra, con
un ángulo entre 100 y 400
8.-Apretar el botón pulsador suavemente hasta el primer
tope (fig. C), espere un segundo.
9.- Apretar el botón pulsador hasta el segundo tope, para
vaciar el resto del líquido ( fig. D)
10.- Mantener apretado el botón pulsador hasta el
segundo tope, retirar la pipeta deslizando la punta por la
pared interior del recipiente, soltar el botón pulsador (fig. E)
11.- Expulsar la punta (tips) apretando el botón del expulsor (fig.F).
RECOMENDACIONES
1- Sumergir lo mínimo posible la punta de la pipeta en la muestra, mantener la profundidad durante la
aspiración.
2- Mantener la pipeta en posición vertical.
3- Reemplazar la punta siempre que cambie la muestra o modifique el volumen.
4- Reemplazar la punta si quedan gotas del líquido anterior en la punta.
5- Cada vez que reemplace la punta, esta debe ser enjuagada con el líquido a pipetear.
6- El líquido nunca debe estar dentro del cono de la pipeta por ello:
• Apretar el botón pulsador lenta y suavemente.
• Nunca vuelque la pipeta con la parte de arriba hacia abajo
Nunca coloque la pipeta en forma horizontal cuando la punta contenga líquido
