Facultad de Ingeniería Química

Guayaquil, Ecuador
Universidad de Guayaquil

ASIGNATURA Química Analítica practica

ESTUDIANTE Yagual Landeta Maria
[email protected]
GRUPO Mesa CODI IQI-S-CO-4-5 LAB E PRACTICA # 13
A GO
DOCENTE Ing. Augusta Jiménez S. Msc LABORATOR QA-PR-2024
I O CODIGO
SEMESTRE 4rto semestre FECHA 24/06/2025 FECHA 29/06/2025
DE ENTREG
ENVIO: A:
PRÁCTICA
PARA
ESPECTROFOTOMETRÍA - LEY DE LAMBERT-BEER
REALIZAR

1. RESUMEN

En esta práctica se aplicó la Ley de Lambert-Beer para relacionar la cantidad de luz que absorbe una

solución con la concentración de la sustancia que contiene. Se trabajó con una solución de

permanganato de potasio (KMnO₄), midiendo su absorbancia en diferentes longitudes de onda entre

400 y 700 nm con un espectrofotómetro UV-Vis. Se identificó que la mayor absorción se presentó a

525 nm, con un valor máximo de absorbancia de 0.50. Este pico indica que la sustancia absorbe con

mayor intensidad en esa región, lo que está relacionado con sus propiedades químicas.

Con los datos obtenidos y utilizando la fórmula de la Ley de Lambert-Beer, se calculó la

concentración de la muestra en 525 nm, obteniendo un valor de concentración aproximado de

2.27×10−4mol/L. Este cálculo considera un coeficiente de absortividad molar de 2200

L·mol⁻¹·cm⁻¹ y un camino óptico de 1 cm

Los resultados confirman que la técnica espectrofotométrica es una herramienta eficaz para

determinar la concentración de sustancias en solución de forma rápida y no destructiva.

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2. OBJETIVO

Comprobar de forma práctica cómo se relaciona la cantidad de color (absorbancia) que

presenta una solución con la cantidad de sustancia que contiene (concentración), aplicando la

Ley de Lambert-Beer

3. INTRODUCCION

Ecuación de la absorción espectrofotométrica

La Ley de Lambert-Beer es como una regla que nos dice cómo la luz se va “apagando” a

medida que atraviesa una solución con una sustancia disuelta.

La fórmula

A=ε⋅b⋅c

nos muestra que la cantidad de luz que se absorbe depende de tres cosas: cuánto soluto hay en

la solución (la concentración), qué tan lejos tiene que pasar la luz dentro de esa solución (el

camino óptico), y una propiedad propia de cada sustancia llamada coeficiente de absorción,

que nos dice qué tan buena es absorbiendo luz. Esto es muy útil porque midiendo la luz que

queda después de pasar, podemos saber cuánto hay de esa sustancia sin tener que separarla o

usar métodos complicados. (Skoog, 2014)

Factores que alteran la ley de Lambert-Beer

En teoría, la Ley de Lambert-Beer dice que mientras más concentrada esté una solución, más

luz va a absorber, y eso se puede medir fácilmente con un espectrofotómetro. Pero en la práctica,

hay varias cosas que pueden hacer que esa relación no se cumpla tal cual.

Por ejemplo, si la solución está muy concentrada, las moléculas empiezan a chocar entre ellas

o a juntarse demasiado, y eso cambia cómo absorben la luz. También puede pasar que la muestra

no esté bien preparada, que tenga burbujas o tenga partículas flotando, y eso hace que la luz se
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disperse en vez de ser absorbida como debería. (Mazzini, 2025)

Otro factor es el pH: algunas sustancias cambian su estructura o color si el pH varía, y eso

también afecta los resultados. Incluso puede pasar que la sustancia se degrade o reaccione

mientras se está midiendo, y entonces la concentración ya no es la misma. Y claro, si el equipo

no está bien calibrado, si la cubeta está sucia o se usa una longitud de onda que no es la correcta,

también se alteran los datos. Por eso, para que la ley funcione bien y los resultados sean

confiables, es importante trabajar con soluciones limpias y no tan concentradas (Integral, 2022)

Importancia

La Ley de Lambert-Beer es muy importante en la química porque nos ayuda a entender cómo

la luz se absorbe cuando pasa a través de una solución. Básicamente, nos dice que la cantidad

de luz que una sustancia absorbe está directamente relacionada con la concentración de esa

sustancia. (Instruments, 2021)

Esto es muy útil para medir con exactitud cuánto de una sustancia hay en una muestra usando

un equipo llamado espectrofotómetro. Gracias a esta ley, podemos hacer análisis rápidos y

confiables, como por ejemplo para controlar la calidad de medicamentos, en el monitoreo del

medio ambiente para detectar contaminantes, estudiar proteínas y ADN

(Alamgir, 2023)

Es importante que las condiciones sean las adecuadas para que la relación sea lineal y los

resultados sean precisos. Además, como esta técnica no destruye la muestra, se puede usar una

y otra vez sin dañarla.

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4. METODOLOGIA

4.1 Materiales y método

Tabla1. Equipos y materiales usados en la practica

Materiales Equipos Muestra

Agua destilada Espectrofotómetro UV- Solución de permanganato de potasio
Vis (KMnO₄)
Pipetas graduadas Cubetas plásticas
Vasos de
precipitados
varilla

4.2 Metodología

Para esta práctica trabajamos con una solución diluida de permanganato de potasio (KMnO₄),

con el propósito de identificar la longitud de onda en la que esta sustancia absorbe más luz, es

decir, su λ máximo.

El primer paso fue preparar la solución, utilizando agua destilada como disolvente. Luego,

con ayuda del espectrofotómetro UV-Vis, medimos su absorbancia en diferentes longitudes

de onda, desde los 400 nm hasta los 700 nm, avanzando de 25 en 25 nm. Antes de comenzar

con las lecturas, calibramos el equipo usando agua destilada como blanco, lo cual es esencial

para asegurar que los valores obtenidos sean precisos.

Cada lectura se hizo colocando la solución en una cubeta plástica limpia, asegurándonos de

no dejar burbujas ni residuos que pudieran alterar los resultados. A medida que íbamos

cambiando la longitud de onda, íbamos registrando cada valor de absorbancia observado.

5. RESULTADOS Y DISCUSIÓN

Tabla 2. Valores simulados de absorbancia del permanganato de potasio a distintas

longitudes de onda

Longitud de onda (λ) [nm] Absorbancia (A)

400 0.20
425 0.25
450 0.28
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475 0.44
500 0.38
525 0.50
550 0.44
575 0.46
600 0.38
625 0.36
650 0.30
675 0.28
700 0.20

Grafico1. Determinación de la λ máx (525 nm) del KMnO₄ a partir de su espectro

simulado

FÓRMULA DE LA LEY DE LAMBERT-BEER:

A=ε⋅b⋅c

Donde:

• A: absorbancia 0.50

• ε: absortividad molar =2200 L·mol⁻¹/cm⁻¹

• b: longitud del paso de luz =1 cm

• c: concentración (mol/L)
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ENTONCES
𝐴 0.50
𝑐 = 𝜀×𝑏= 2200 ×1 = 2.27×10−4 mol/L

Tabla 3. Cálculos realizados en la practica

Longitud de onda Absorbancia ε b Concentración

(λ) (A) (L·mol⁻¹·cm⁻¹) (cm) (mol/L)

525 nm 0.50 2200 1 2.27×10−4 mol/L

Resultados

Al medir la absorbancia en diferentes longitudes de onda, notamos que empieza en 0.20 a 400

nm y va aumentando hasta llegar a un punto máximo de 0.50 en 525 nm. Después de ese pico,

la absorbancia se mantiene bastante estable alrededor de 0.44 a 0.46 entre 550 y 575 nm, y

luego va bajando poco a poco hasta regresar a 0.20 en 700 nm. Esto nos indica que la muestra

absorbe más luz cerca de los 525 nm, probablemente porque en esa zona tiene componentes

que capturan mejor esa energía. La gráfica de absorbancia muestra un claro punto donde la

absorción es más fuerte, y luego disminuye gradualmente, lo que es típico cuando una

sustancia interactúa con la luz en diferentes longitudes de onda.

Discusión

Los resultados obtenidos confirman que la muestra tiene un pico claro de absorción en 525

nm, lo que sugiere la presencia de un componente específico que absorbe luz en esa región. El

cálculo de la concentración usando la Ley de Lambert-Beer, con un coeficiente de

absortividad molar de 2200 L·mol⁻¹·cm⁻¹, nos dio un valor de aproximadamente 2.27×10−4

mol/L. Esto indica que la cantidad de sustancia presente es suficiente para generar una

absorbancia significativa en esa longitud de onda.

6. CONCLUSIONES

La muestra mostró su mayor absorción de luz alrededor de los 525 nm, y con base en eso
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calculamos que su concentración es aproximadamente 2.27×10−4 mol/L, un resultado que se

ajusta bien a las absorbancias que medimos. Esto nos dice que la técnica de

espectrofotometría funcionó bien para conocer tanto cuánta luz absorbe la muestra como su

concentración.

7. RECOMENDACIONES

Para obtener resultados más confiables, es buena idea repetir las mediciones varias veces y

sacar un promedio. También ayuda mucho usar estándares conocidos para asegurarnos de que

el equipo está bien calibrado y que el coeficiente que usamos es el correcto. Además,

complementar este análisis con otras técnicas, como cromatografía, puede darnos más

seguridad sobre qué hay en la muestra y cuánto hay realmente. Por último, es importante

mantener todo limpio y preparar bien las soluciones para evitar errores y conseguir datos más

precisos.

8. BIBLIOGRAFIA

Alamgir, M. (2023). Métodos espectrofotométricos en el análisis farmacéutico: principios,

reactivos y aplicaciones. International Journal of Environmental Sciences and Natural

Resources. Obtenido de

https://juniperpublishers.com/ijesnr/IJESNR.MS.ID.556391.php?

Instruments, E. (2021). La Ley de Beer-Lambert .Transmitancia y Absorbancia. Obtenido de

https://www.edinst.com/resource/the-beer-lambert-law/

Integral, Q. A. (2022). . Ley de Beer-Lambert. ScienceDirect. Obtenido de

https://www.sciencedirect.com/topics/engineering/beer-lambert-law

Mazzini, G. (2025). Ley de Lambert-Beer: Gráfica, cálculos y aplicaciones. Gráfica Mazzini.

Obtenido de https://www.graficamazzini.com.ar/ley-de-lambert-beer-

grafica/#google_vignette
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Skoog, D. A. (2014). Fundamentos de química analítica (9ª ed.). Cengage Learning.

Obtenido de https://www.cengage.com/c/fundamentos-de-quimica-analitica-9a-

edicion-skoog/

9. ANEXOS

Tabla 2. Valores simulados de absorbancia del permanganato de potasio a distintas

longitudes de onda

Longitud de onda (λ\lambda) [nm] Absorbancia (A)

400 0.20
425 0.25
450 0.28
475 0.44
500 0.38
525 0.50
550 0.44
575 0.46
600 0.38
625 0.36
650 0.30
675 0.28
700 0.20

Grafico1. Determinación de la λ máx (525 nm) del KMnO₄ a partir de su espectro

simulado
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Tabla 3. Cálculos realizados en la practica

Longitud de onda Absorbancia ε b Concentración

(λ) (A) (L·mol⁻¹·cm⁻¹) (cm) (mol/L)

525 nm 0.50 2200 1 2.27×10−4 mol/L

10. ANEXOS

Figura 1. Equipo de Figura2. Cubetas plásticas usados en la

espectrofotometría practica muestra que se debe tomar del

Lado riguroso p|1ara no contaminar