Obtención, Conservación y Transporte de Muestras para Análisis Toxicológicos
INTRODUCCIÓN
La selección apropiada, la recolección oportuna y las condiciones de conservación y transporte de las
muestras biológicas para el análisis toxicológico son aspectos de importancia fundamental para la
obtención de resultados confiables y precisos. El éxito de la determinación de laboratorio depende, en
grado sumo, de la rigurosidad con que se lleven a cabo las tareas de la fase preanalítica.
El objetivo del análisis de laboratorio toxicológico condiciona el tipo de muestra que resulta más adecuada
y el momento oportuno para su obtención. Es así que el diagnóstico de una intoxicación requiere que la
muestra se recolecte dentro del período en que la sustancia o sus metabolitos están presentes en el
organismo o en el medio biológico adecuado para el estudio.
El análisis toxicológico, aplicado al diagnóstico clínico, al monitoreo del tratamiento farmacológico, al
control de la exposición laboral a sustancias tóxicas, o destinado a la evaluación del riesgo asociado a la
exposición ambiental a sustancias químicas, ha ido evolucionando a través del tiempo, desde las primitivas
estrategias de identificación cualitativas dirigidas a investigar grupos de sustancias mediante metodologías
sencillas, hasta las disponibles actualmente, por medio de instrumental de alta complejidad, que permiten
la cuantificación de los analitos aún a muy bajas concentraciones.
PROCEDIMIENTOS DE TOMA DE MUESTRA Y ASEGURAMIENTO DE LA TRAZABILIDAD PARA EL
LABORATORIO DE ANÁLISIS TOXICOLÓGICOS
Los análisis toxicológicos involucran la identificación y la cuantificación de las sustancias de interés
toxicológico y la interpretación de los resultados.
Las recomendaciones que siguen pretenden servir como base a partir de la cual puedan desarrollarse
prácticas y metodologías adecuadas a fin de asegurar la calidad del resultado analítico. Las mismas se
deberán aplicar al análisis de principios activos y/o metabolitos, de fármacos, drogas de abuso y toda otra
sustancia de interés toxicológico (ej. alcohol, metales, plaguicidas, hidrocarburos, etc.) en el sentido más
amplio, presentes en muestras biológicas, con fines diagnósticos o de monitoreo de tratamientos o de
exposición a sustancias tóxicas.
Los procedimientos que se lleven a cabo deben permitir un manejo seguro de las muestras potencialmente
infecciosas y/o tóxicas
El manejo seguro de las muestras es un paso esencial de la buena práctica global de todo el
laboratorio
Es necesario asegurar que el personal responsable de la extracción, conservación y traslado de la muestra
al laboratorio de análisis toxicológico se encuentre adecuadamente capacitado.
1. Muestras y su recepción
El laboratorio debe desarrollar y proveer guías e instrucciones precisas para la toma de muestras, ya sea
para uso interno o para quienes las remitan desde otras instituciones. Estas instrucciones deben indicar las
cantidades mínimas necesarias de cada tipo de muestra para llevar a cabo los análisis, así como las
condiciones de conservación, transporte y estabilidad de las muestras desde el momento de su obtención
hasta el arribo al laboratorio. Asimismo, recomendará o asesorará sobre la elección de la muestra en que
se podrá realizar la investigación toxicológica, y cuando corresponda, el momento oportuno de la toma de
la muestra.
Las personas que participan en la toma de muestras deben ajustarse a la normativa existente sobre
tratamiento y manejo de material peligroso.
2. Aseguramiento de la identidad y trazabilidad de la muestra
En el análisis toxicológico es de suma importancia asegurar la identificación y la integridad de una muestra
que se remite al laboratorio. Así, las muestras y sus alícuotas deben rotularse adecuadamente para
asegurar inequívocamente su identidad.
Durante el proceso de recolección, algunos individuos pueden tratar de falsificar la muestra mediante el
agregado de diferentes sustancias como, por ejemplo: sales, solventes, sustancias enmascarantes, o bien
reemplazan una muestra por otra. Esta delicada situación se presenta especialmente con las muestras de
orina, por lo que se deben tomar ciertos recaudos que eviten la adulteración de la misma. Ellos incluyen:
1. Verificación de la identidad del individuo
2. Vigilancia directa del individuo durante la emisión de la orina
3. Evaluación del aspecto y de la temperatura de la muestra (en caso que la muestra se tome en el
laboratorio)
4. Medición del pH y de la densidad: permite considerar si se agregó alguna sustancia que modificó el pH
o se diluyó la muestra
El control del muestreo y de todas las etapas subsiguientes que forman parte del análisis toxicológico,
deben contar con un procedimiento que permita asegurar que la muestra analizada es, en todo momento
del proceso analítico y aún terminado éste, la muestra que fue recogida, y que no fue “alterada, sustituida,
cambiada o manipulada entre el momento en que ésta se recogió hasta el momento que finalizó el
análisis".
Para cumplir con el objetivo es conveniente que el laboratorio cuente con una normativa escrita para la
aplicación de cada paso y que esta normativa sea conocida por quienes intervienen en ella.
Dado que desde el inicio hasta el final del proceso la muestra puede ser manipulada por varias personas,
la participación de todos debe quedar debidamente documentada.
Se deberá:
Verificar el correcto rotulado de la muestra, con nombre y apellido, tipo de muestra, condiciones de
recolección, fecha, hora, etc.
1. Registrar todos estos datos en dos copias: una que será archivada por el derivante en el caso que lo
hubiere y la otra que será remitida al laboratorio que realizará el análisis.
2. Registrar en el laboratorio receptor todos los datos de identificación y condiciones de llegada de la
muestra (temperatura, derrames o cualquier otra condición que pueda afectar la integridad de la
muestra o el resultado del análisis).
3. Almacenamiento y conservación
Las muestras deben almacenarse de un modo seguro, a una temperatura apropiada, protegidas de la luz,
de manera tal que se asegure la salvaguarda de su integridad y que asegure la estabilidad de los analitos
a investigar.
3.1. Materiales biológicos que podrían remitirse al laboratorio clínico toxicológico
Tipos de muestras a considerar: sangre entera, plasma, suero, orina, pelos, uñas, saliva.
3.1.1. Sangre entera, plasma, suero
Para la toma de la muestra se desinfectará la piel con alcohol, excepto en el caso de determinación de
alcoholemia (en este caso se recurrirá a solución jabonosa, agua oxigenada, iodopovidona, u otro
antiséptico sin contenido alcohólico).
Cuando se conozca el agente químico a investigar, se deberá recoger la muestra de sangre según las
indicaciones requeridas.
En los casos que la toma de muestra tenga fines diagnósticos de una intoxicación de origen desconocido,
se deberán recoger dos muestras de sangre: una de ellas con jeringa heparinizada, la que se remitirá en la
misma jeringa, sin aguja y con obturador, y otra sin anticoagulante de la cual se separará el suero y se
trasvasará a un tubo plástico. El volumen recomendable en cada caso será de 5 ml de sangre entera y la
cantidad de suero correspondiente a otros 5 ml de sangre. La conservación de las muestras se hará en
heladera a 4°C hasta el momento del envío al laboratorio.
Los recipientes que se envíen deben ser tubos de polipropileno o similar con cierre hermético. Es preferible
utilizar material nuevo, para evitar contaminaciones por lavado inadecuado del material reutilizado.
Cuando se envasa sangre o suero para la determinación de sustancias volátiles
NO DEBE QUEDAR ESPACIO VACÍO EN EL RECIPIENTE O JERINGA (sin cámara de aire), a fin de
evitar pérdidas importantes del analito.
Los recipientes que serán utilizados para colocar sangre entera, plasma, o suero NO DEBEN
ENJUAGARSE NUNCA CON ALCOHOL ni ningún otro solvente orgánico.
Dependiendo del analito a investigar, se podrá variar el tipo de anticoagulante, el volumen de la muestra y
su conservación de acuerdo a lo recomendado
3.1.2. Orina
Este tipo de muestra es idónea para realizar estudios de "screening" en los casos que no se conozca el
origen de la intoxicación y para la investigación cuali-cuantitativa de numerosos analitos. Es una muestra
más abundante que la sangre, no invasiva, fácil de recolectar y de conservar.
Procedimiento para su recolección:
Emplear un recipiente limpio. En algunos casos es necesario recolectar el volumen total emitido en las 24
horas y en otros es suficiente una única micción. La conservación se realiza en heladera, a 4 ºC o bien en
freezer.
3.1.3. Pelo
Esta matriz ha ido cobrando importancia en el campo de la toxicología analítica y su principal objetivo es
investigar, en un individuo vivo o muerto, la presencia de drogas, u otras sustancias químicas, resultante
de exposiciones que pueden datar desde una semana hasta meses o años antes, dependiendo de la
sustancia.
Procedimiento para su recolección:
1. Cortar en el sector occipital, bien al ras del cuero cabelludo, 1 ó 2 gramos de muestra
(aproximadamente, un puñado o mechón es suficiente).
Tomar el extremo próximo al cuero cabelludo, colocarlo sobre papel o cartón y abrochar con aplique de
broches de tamaño apropiado.
2. Colocar otro papel o cartón encima del anterior y pegar o atar según corresponda.
3. El envoltorio debe permanecer firme.
4. Indicar claramente en la muestra el extremo correspondiente a la zona proximal al cuero cabelludo y la
distal.
5. En caso de tomar vello pubiano y axilar, será cortado al ras de la piel, y colocado en sobre de papel
común.
3.1.4. Uñas
Este tipo de muestra sirve para detectar arsénico, entre otros, a fin de evaluar exposición crónica.
Procedimiento para su recolección:
1. Cortar uñas de manos y pies.
2. Se necesita 0,2 gramos (200 miligramos) como mínimo. Si no se alcanza en una primera instancia,
esperar un nuevo crecimiento y agregar a la toma anterior.
3. Colocarlas en un sobre tipo carta para su envío al laboratorio.
3.1.5. Saliva
Se trata de una nueva matriz biológica en estudio, especialmente para evaluar consumo de drogas de
abuso y ciertos contaminantes. La saliva, al igual que otros fluidos corporales, constituye una vía de
excreción de las sustancias tóxicas. Se ha empleado saliva para la detección de numerosos contaminantes
en el ser humano, ya que existe una asociación entre los niveles del compuesto en el plasma y en saliva
para muchos de ellos, considerando que ésta constituye un ultrafiltrado de plasma. Aun así, este tema está
actualmente en revisión.
4. Acondicionamiento de las muestras para el transporte:
Las muestras deberán acondicionarse de manera tal que se asegure su transporte y arribo al laboratorio en
condiciones adecuadas. Deben prevenirse los vuelcos o roturas de los recipientes contenedores, con la
consiguiente pérdida del material si los hubiera. Para ello se recomienda el cumplimiento de la Norma
Boliviana que establece los requisitos para el transporte terrestre de especímenes para diagnóstico, y la
Guía sobre la reglamentación relativa al transporte de sustancias infecciosas 2009–2010
WHO/HSE/EPR/2008.10 para el transporte terrestre y aéreo con riesgo biológico conocido o potencial, que
se deban remitir a otras entidades fuera de una organización o a otra dependencia dentro de la misma
organización
4.1. Temperatura de envío de las muestras:
Las muestras de orina deberán transportarse refrigeradas entre 4 y 8 ºC. Las muestras no deben tener
contacto directo con el material refrigerante. Para ello se utilizará un recipiente adecuado. Igual
procedimiento se aplicará para sangre cuando no esté expresamente indicado que no debe refrigerarse.
Las muestras de pelo y uña serán transportadas a temperatura ambiente.
4.2. Etiquetado y rotulación
Todos los rótulos y etiquetas deben efectuarse con elementos de escritura indelebles para evitar que se
borren por efecto de la humedad o rotura de los envases
Se debe acompañar la muestra con el Formulario completo de la Identificación de muestras para análisis
toxicológicos.
5. Programa de higiene y seguridad en el trabajo y Plan de contingencias
El Laboratorio debe tener un Programa de higiene y seguridad laboral basado en la evaluación de los
riesgos a los que está expuesto el personal y un Plan de contingencias y procedimientos de actuación ante
incidentes, que son aplicables a las etapas de recolección y transporte de la muestra.
Este Programa debe permitir identificar y prevenir los eventos no deseados que pudieran llegar a ocurrir
durante la manipulación de las muestras biológico- infecciosas y sus residuos, así como determinar y
definir las actuaciones para minimizar las consecuencias negativas de un incidente.
El análisis de los riesgos en las distintas etapas que componen la recolección de la muestra y el transporte,
pone de manifiesto que el personal que manipula muestras y residuos peligrosos y biopatogénicos está
expuesto a sufrir diferentes tipos de lesiones, durante las fases de la manipulación según se menciona a
continuación:
a) Fases de toma de muestra y separación: Se pueden presentar punciones, cortaduras, y salpicaduras o
contacto de mucosas con las muestras biológicas desde el momento de su obtención. Estos eventos
pueden ser el resultado de una manipulación inadecuada o errores de procedimiento, de la falta de
información y capacitación, de la carencia o deficiencia en el uso de elementos de protección personal
o de la negligencia del personal que es responsable de la aplicación de la tarea.
b) Fase de envasado: Pueden ocurrir vuelcos o pérdidas de material, con la consecuente exposición del
personal y ambiente, debido al envasado incorrecto de las muestras, al llenado excesivo de
contenedores, el ajuste inapropiado de las tapas y a fallas en el cierre adecuado de los contenedores o
recipientes especiales.
c) Fase de almacenamiento: Pueden suceder eventos indeseables cuando son almacenadas las muestras
biológico-infecciosas en contenedores que no cumplen con las especificaciones adecuadas.
d) Fase de apertura de muestras: Pueden ocurrir vuelcos o pérdidas de material al abrir los envases de
las muestras, con la consecuente exposición del personal y del ambiente debido al envasado incorrecto
de las muestras, al llenado excesivo de los contenedores, al ajuste inapropiado de las tapas y a fallas
en el cierre adecuado de los contenedores o recipientes especiales.
e) Transporte de muestra dentro y fuera del establecimiento: Pueden ocurrir accidentes en general:
vuelcos, caídas, accidentes viales, etc., generando derrames de material y contaminación ambiental del
sitio del accidente y exposición de personas. Eventualmente puede haber daño de los envases sin
afectar al contenido.
Del mismo análisis se infiere que las actuaciones ante contingencias sobre las que debe hacerse
hincapié son: a) Derrames: De las muestras o sus residuos.
b) Accidentes personales (accidente de trabajo del personal o de terceros): Contacto, salpicadura o
accidentes cortopunzantes.
5.2. Procedimientos de higiene y seguridad
5.3.1. Mantener limpio y en condiciones sanitarias el lugar de trabajo.
5.3.2. Contar con un procedimiento de rutina de los lugares de toma de muestra.
5.3.3. Limpiar minuciosamente el instrumental, esterilizarlo o en su defecto desinfectarlo.
5.3.4. En el caso de otros instrumentos cortopunzantes NO DESCARTABLES, sólo se utilizará como último
recurso la desinfección química, siempre a condición de que pueda garantizarse la no contaminación
de la muestra. Desinfectar las superficies de trabajo contaminadas al término de los procedimientos
efectuados. Para ello se deberá rociar con solución de hipoclorito de sodio en dilución al 1 %,
frotando con una esponja la superficie y limpiar y secar.
5.3.5. Desinfectar los recipientes reusables tales como cubetas, baldes y vasijas que tienen la posibilidad
de resultar contaminados. Esto debe hacerse al final del turno o cuando la contaminación de éstos
sea tal que requiera hacerlo varias veces en el turno.
5.3.6. Usar siempre medios mecánicos como tenazas o cepillo y un recogedor para levantar los pedazos
de vidrio roto y contaminado. Nunca se deben recoger con las manos aunque se esté usando
guantes.
5.3.7. No utilizar medios de limpieza ni técnicas de limpieza que dispersen polvo.
5.4. Gestión de residuos biopatogénicos
Se consideran residuos biopatogénicos a “aquellos con actividad biológica que puede ocasionar
enfermedad (alérgica, infecciosa o tóxica) en huéspedes susceptibles (humanos o animales) o contaminar
el ambiente”.
Los residuos biopatogénicos generados por las áreas de laboratorio de análisis toxicológico son:
a) Equipo de protección personal descartable con riesgo biológico: tales como guantes, delantales,
guardapolvos y barbijos, impregnados con sangre y otros líquidos corporales, secreciones, excreciones
o cultivos.
b) Sangre líquida, hemoderivados y fluidos corporales: restos de sangre humana y derivados sanguíneos
tales como suero, plasma, y otros derivados.
c) Elementos absorbentes y descartables que se encuentren impregnados en sangre u otros fluidos
corporales generados en la atención de pacientes.
d) Elementos corto-punzantes con riesgo biológico: tales como agujas, bisturíes, pipetas, tubos capilares,
elementos conectores de las vías, porta y cubreobjetos de microscopio, vidrios rotos.
5.4.1. Segregación
Consiste en la separación apropiada de los residuos en el punto de generación, según la clase de
pertenencia y la caracterización adoptada. Esta práctica debe ser llevada a cabo por la persona que
genera el residuo, no pudiendo delegar esa responsabilidad. Según las características físicas del residuo
se procederá de la siguiente manera:
5.4.1.1. Objetos cortantes y punzantes contaminados (infecciosos): Los elementos cortopunzantes
son todos los objetos con capacidad de penetrar y/o cortar tejido humano (p. ej. agujas
hipodérmicas, jeringas descartables, bisturíes, cuchillas, vidrio roto). Las agujas hipodérmicas no se
deberán volver a tapar ni retirar de las jeringas descartables después de utilizadas. Se deberá
eliminar el conjunto completo. Se recogerán siempre en descartadores con tapa. Estos recipientes
deberán ser resistentes a la perforación. Se llenarán solo hasta sus tres cuartas partes y luego se
descartarán en las bolsas de color rojo para residuos biopatogénicos.
5.4.1.2. Material de vidrio roto contaminado: se colocará en cajas o contenedores resistentes a
perforaciones y luego se descartará en bolsas de color rojo.
5.4.1.3. Material contaminado reciclable (instrumental, material de vidrio, etc.): Este material deberá ser
esterilizado en autoclave antes de su lavado y reciclado.
5.4.1.4. Residuos contaminados (biopatogénicos): Es el material contaminado destinado a la
eliminación. Se descartará en bolsas de color rojo. El material contaminado que así lo requiera
deberá ser esterilizado antes de ser descartado en las bolsas rojas.
5.4.2. Almacenamiento en el sitio de generación
En cada lugar de trabajo se colocarán elementos de contención para el almacenamiento de los residuos,
inmediatamente luego de su segregación. Éstos son:
5.4.2.1. Bolsas: Deberán ser colocadas dentro de recipientes localizados en el lugar más próximo al origen
de los residuos. El material de las bolsas debe ser resistente al corte y a punzadas, impermeable y
opaco. Las bolsas rojas contendrán únicamente residuos biopatogénicos. La etiqueta identificatoria
con los datos requeridos por el establecimiento deberá adherirse a la bolsa antes de ser colocada
en los recipientes específicos para su almacenamiento, lo cual evitará manipulaciones posteriores.
Una vez llena en las tres cuartas partes de su volumen, deberá cerrarse con precinto y almacenarse
hasta su recolección. El personal del laboratorio que realice esta operación deberá hacerlo con
guardapolvo y guantes.
