MICROBIOLOGÍA VETERINARIA

DIANA A. PACHÓN
MAV U. JAVERIANA
EPIDEM. U . ROSARIO
MICROBIOLOGIA
• Rama de la biología encargada del estudio de los
microorganismos; seres cuyo tamaño se encuentra
por debajo del poder resolutivo del ojo humano y
son visibles unicamente bajo el microscopio

• Del griego
mikros pequeño
bios vida
logía estudio-ciencia
 BACTERIAS

MICROBIOLOGIA
MOHOS Y
LEVADURAS
VIRUS

PARASITOS
 APLICACIONES

Prevención y tratamiento de Biorremediación y recuperación

enfermedades humanas y de suelos.
animales.

Uso de microorganismos en industria. Manipulación genética

HISTORIA DE LA MICROBIOLOGÍA
Mientras el hombre conozca más que se ha
hecho, mayor será su poder de saber que
debe hacerse….

Benjamin Disraeli
Citado por Lilienfield
FASES EN LA HISTORIA DE LA MICROBIOLOGIA

1. Periodo especulativo (Antigüedad-Primeros microscopios)

2. Primeros microscopistas (1675 – mediados Siglo XIX)

3. Cultivo de microorganismo (Hasta finales del Siglo XIX)

4. Hasta nuestros días (multitud de enfoques en el estudio microbiano

: Ciencias emancipadas
Virología
Inmunología
 1. PERIODO ESPECULATIVO
• Los microorganismos proporcionaron alimentos y bebidas al
hombre durante mas de 8000 años sin que se tuviera noción de
ello.

• 6000 AC: Sumerios y babilonios ya conocian

el arte de la fermentación para producir
alcohol en forma de cerveza

• 4000 AC: Egipcios descubren que el CO2

generado de la fermentación era util en la
fabricación del pan

• 116 AC: Terentius Barro: Aire de los pantanos

era nefasto por que “tenia pequeños animales

que entraban por la nariz y el cuerpo”

 1. PERIODO ESPECULATIVO
• Edad Media: Ambriosio Pare Enfermedades por “Miasmas del
aire”

•1493 -1541: Paracelso Supuración provocada por agentes del

exterior

•1546: Girolamo Fracastoro Teoría de las enfermedades

contagiosas y descubrió la naturaleza de la infección en el Siglo XVI

Contacto directo Rabia - Lepra

3 formas de Miasmas – Tisis

Inspiración del Aire
contagio (TBC)

Fomites
transportados con Ropa de enfermos
la seminaria prima
 2. PRIMEROS MICROSCOPISTAS
• 1600: Zacharias Jansen 1er microscopio (lentes simple : lupa)
• 1665: Robert Hook: Hongos Filamentosos
• 1632 – 1723: Anthony van Leeuwenhoek

Primero en observar “minúsculos animaculos” (bacterias) del cuerpo humano

(Protozoarios, Bacilos Móviles; Microrococos, Espiroquetas, Microparásitos)
 2. PRIMEROS MICROSCOPISTAS

• 1656: Athanasius Kircher: Primeros microbiólogos, por observar gusanillos en la

sangre y pus de bubones de los pestosos. Observó la “minima animácula” en la tierra y el agua.
 3. CULTIVO DE MICROORGANISMOS

Louis Pasteur: Segunda mitad del siglo XIX:

• 1858: Demostró que los mos se encuentran en el aire y son similares a los encontrados en el
material putrefacto

• Todo proceso de fermentación y descomposición orgánica se debe a la acción de organismos vivos y

que el crecimiento de los mos en caldos nutritivos no era debido a la generación espontánea: “La
vida microbiana existente procedía de vida preexistente”

• 1857: Bacterias producen fermentación láctica

• 1860: Levaduras producen fermentación alcohólica

EXPERIMENTO DE PASTEUR
• Crecimiento de mos en ausencia de aire

• 1865 : Mecanismos de transmisión de la pebrina,

(gusanos de seda) que amenazaba con hundir la
industria francesa.

• 1881: Estudios acerca del carbunco del ganado

lanar, y consiguió preparar una vacuna de
bacterias inactivadas, la primera de la historia.

PADRE DE LA
MICROBIOLOGIA
• ROBERT KOCH:
1876:
Técnica de cultivo puro aisla y propaga experimentalmente
por primera vez una bacteria patógena Etiología del
Carbunco, fundamento de la asepsia moderna; comprueba
que los gérmenes son los causales de las Ix y aporta sobre
las vías de Ix.

Desarrolla métodos para el cultivo puro de las bacterias

Consiguió reconocer las diferencias morfológicas de los

mos (microfotografia de Bacillus anthracis teñido con azul
de metileno)
 Postulados de Koch
1. El mo debe estar presente en todos los casos
de enfermedad

2. El mo debe ser aislado del hospedador

enfermo y obtenerse en cultivo puro en el
laboratorio

3. La enfermedad específica debe reproducirse

cuando un cultivo puro del mo se inocula a un
hospedador susceptible sano

4. El mo debe ser recuperable de nuevo a partir

del hospedador inyectado experimentalmente
 • 1878: Koch pide ayuda a
expertos en óptica (Zeiss y Abbe)
quienes incorporaron el aceite
de inmersión, lentes acromáticas
mejoradas, iluminación con
condensador.

• 1868: Schoroeter emplea por

primera vez medio de cultivo
solido (rebanadas de papa)

• Koch colabora con la industria

Robert Koch (1843 – 1910) química para observar bacterias
Fue el primero en demostrar que (azul de metileno, fucsina…)
las bacterias eran los agentes
causales de enfermedades
infecciosas
La escuela de Koch aísla diferentes patógenos

Colera (1883) Difteria (1884) Tetanos (1885)

Neumonia (1886) Meningitis (1887) Peste (1894) Sifilis (1905)

• 1883: Ziehl Neelsen: BAAR
• 1884: Hans Christian Gram
Petri inventa la Placa de Petri
– Pasteur descubre vacuna contra la
rabia, cuyo virus combatió con
una vacuna lograda mediante
inoculaciones sucesivas en
conejos, de las que obtenía
extractos menos virulentos.
• 1885: Vacunación de Joseph Meister,
que había sido mordido por un perro
rabioso y, gracias a la vacuna, no llegó
a desarrollar la hidrofobia.
 4. HASTA NUESTROS DIAS…
• 1900 -1920: Descubrimiento de los virus de las plantas y animales
• 1905: viruela de la vaca por A. Negri.
• 1911: Sarampión por A. Anderson
• 1914: Utilidad de mos en aguas residuales y lodos
• 1928: ALEXANDER FLEMING: Surge la penicilina e inicia la era de los
antibióticos
• 1931: Creación de Microscopio electrónico por M Knoll
• 1962: WATSON descubre la doble hélice del DNA
• 1960 – 80´s: Avances en estudios moleculares y
filogenéticos
• 80´s – Actualidad: Componentes estructurales de los
microorganismos a nivel tridimensional, investigación antiviral,
• ERA DE LOS VIRUS, BIOTECNOLOGÍA, INGENIERIA GENÉTICA,
• SONDAS Y MARCADORES GENÉTICO S
 MICROSCOPÍA
DIANA A. PACHÓN
MAV U. JAVERIANA
EPIDEM. U . ROSARIO
1600: Zacharias Jansen

1665: Robert Hooke (Célula Vegetal –

circulación sanguínea -
capilares)

1673-1723: Leeuwenhoek (Lupas

diminutas)

1868: Abbé y Zeiss (Objetivos

con esfericidad y 3 colores, aceite
de inmersión, dependencia de la
longitud de onda de la luz)
• El microscopio electrónico de
transmisión consiguió aumentos de
100.000X. Fue desarrollado por Max
Knoll y Ernst Ruska en Alemania en 1931

ERNST RUSKA
Palabra utilizada por primera vez por los
componentes de la “Accademia dei Lincei”

Micro: Pequeño
Scopein : Ver

Instrumento óptico y mecánico que

modula energía y amplifica el ángulo de
visión humana para producir imágenes
amplificadas de un objeto diminuto

MICROSCOPIO
 TIPOS
DE
MICROSCOPIO

ÓPTICO: Usa ondas luminosas ELECTRÓNICO: Las ondas

luminosas se remplazan por haz de
y sistema de lentes electrones y las lentes por campos
magnéticos

SIMPLE COMPUESTO TRASMISIÓN

BARRIDO EFECTO TUNEL
DIGITAL

COMPUESTO
LUPA NORMAL
CAMPO OSCURO
CONTRASTE DE FASES
FLUORESCENCIA
MOC: Microscopio Óptico Compuesto

MET: Microscopio Electrónico de Transición

CARACTERISTICAS MOC MET

Tipo de radiación Luz Electrónes

Tipo de Lentes De Vidrio Electromagnéticas

Poder de ampliación 1500 X 250.000 X

Límite de resolución Cerca de 0,5 nm Cerca de 200 nm

Imagen Generalmente colorida Blanco y negro

Material a observar Vivo o muerto Muerto , deshidratado

usualmente colocado puesto sobre una rejilla
sobre una lámina fina de de cobre
vidrio
MICROSCOPIO OPTICO
COMPUESTO
• Amplían la imagen
proporcionada por el
sistema de lentes

OCULARES
 Brazo

• Sirve de soporte
a la platina o el
revolver
 • Soporte a los
objetivos y permite su
REVOLVER movimiento
• Amplia la imagen
del objeto a ser
observado

OBJETIVOS
• Soporte de la preparación que se va a
observar. Tiene una abertura en la parte
central

PLATINA
 • Lente que concentra los rayos luminosos
sobre la preparación

CONDENSADOR
• Regula la cantidad
de luz que llega al
condensador.

DIAFRAGMA
• Dirige los rayos
luminosos hacia el
condensador

FUENTE DE LUZ
 Enfoque
Mueven la platina o el tubo
hacia arriba y hacia abajo.
El macrométrico permite
desplazamientos amplios para
un enfoque inicial
El micrométrico
desplazamientos muy cortos,
para el enfoque más preciso.

TORNILLOS MACRO Y MICROMÉTRICO

 • Soporte de todos los
elementos del
microscopio

BASE O PIE
MÉTODOS DE OBSERVACIÓN
MICROSCÓPICA
 OBSERVACIÓN EN
FRESCO
MX

MÉTODO SIMPLE: entre porta y cubre objeto

• Los objetos a investigarse, no
sufren cambios o alteraciones
en cuanto a su forma,
estructura o composición
química o sentido de vitalidad
de los mismos

• Su uso se recomienda para el

estudio de parásitos en heces,
de secreciones corporales, etc.
OBSERVACIÓN
EN FRESCO
• Muestra queda fijada o impresa en el
portaobjetos, deteniéndose todos los
procesos vitales.
• Se cambia o altera en alguna medida
la estructura, forma o composición
química de los objetos de estudio
• Pueden preservarse a través del
tiempo, los elementos en la forma que
ya fueron fijados.

OBSERVACIÓN POR FIJACIÓN

 FISICOS QUIMICOS
• Calor • Aceite d Carmín
• Congelación • Xilol
• Desecación • Formol
• Presión Mecánica • Alcohol
• Ácidos y Álcalis

METODOS DE FIJACIÓN
• Corrección de un problema de difracción de
la luz en el microscopio.

• Se utiliza en aceite de cedro o de inmersión,

una gota del cual debe ir colocado entre el
objeto y el objetivo de 100x, necesitando
estos, estar en contacto directo.

OBSERVACIÓN POR
INMERSIÓN
• Bacterias muertas que son teñidas o coloreadas; la
morfología se altera por la fijación y los colorantes

• NO se observa motilidad ni reproducción

• Idea general de las estructuras celulares

• Uso de Colorantes: Sustancias que poseen color y lo
transmiten a otros elementos

OBSERVACIÓN POR TINCIÓN

 SIMPLE: Técnica en la que
Azul de metileno se emplea un
solo colorante

DIRECTA PROGRESIVA

Cuanto mas tiempo

Solo el colorante
actua el colorante
actua sobre la
sobre la muestra,
muestra
más la tiñe
 COMPUESTA: Técnica en la que se emplea
mas de un colorante
GRAM – ZIEHL NEELSEN
Con la misma coloración las
bacterias se tiñen diferente

INDIRECTA REGRESIVA

Uso del mordiente Uso de decolorantes

que incrementa la para eliminar el
fijación del colorante colorante principal y
principal tomar el de contraste
• Envoltura de ácido micólico que
impide la penetración del colorante
(micobacterias)

• Tratamiento con detergentes o

calentamiento favorece la
penetración del colorante primario

• Una vez ingresa el colorante, la

bacteria no puede ser decolorada por
la mezcla ácido alcohol

TINCIONES ÁCIDORRESISTENTES
PASOS PREVIOS A LA TINCIÓN

EXTE • Colocación de la mx sobre el portaobjeto

NDI
DO

• Eliminar exceso de liquido de la mx

SEC • Una bacteria deshidratada no es una bacteria muerta
ADO

• Muerte bacteriana por degradación de proteinas por agentes

FIJA fisicos (calor) o agentes quimicos (metanol 95%)
DO