Universidad de Guayaquil

Facultad de Ciencias Químicas

Carrera: Bioquímica y Farmacia

Practica
No.8 VALIDACION DE METODOS DE ENSAYO REPETIBILIDAD Y
REPRODUCIBILIDAD
Integrantes: Curso G-2A
• Andrade Ortiz Vanessa
• Bocansaca Fernández Nayeli
• Medina Orozco Alejandra Subgrupo 1
• Menéndez Chávez Alejandro
• Pibaque Suárez Kiara

Objetivo de la práctica de laboratorio

•

Marco teórico

Repetitividad y reproducibilidad

Repetitividad y reproducibilidad (son términos estandarizados adoptados por ISO y ASTM para
evaluar la estabilidad de sistemas de medición, y están relacionados en principio con la precisión y
estabilidad en el tiempo de las mediciones realizadas con un conjunto de instrumentos que miden la
misma magnitud. (1) El método del promedio y rango es empleado para el análisis de repetibilidad y
reproducibilidad en los sistemas de medición, y posibilita seccionar en dos componentes por separado
(repetibilidad y reproducibilidad) la variación del sistema de medición. Este método permite precisar
la influencia de los operarios y el equipamiento en la estabilidad del sistema basado en un
procesamiento de datos obtenidos y clasificados según los instrumentos de medición, las medidas
valoradas y los operarios que ejecutan las mediciones. Los estudios de repetibilidad y reproducibilidad
de las mediciones determinan que parte de la variación observada en el proceso se debe al sistema de
medición usado. La repetibilidad puede ser expresada cuantitativamente en términos de la dispersión
característica de los resultados. (2) La misma se define, de acuerdo con el VIM (Vocabulario
Internacional de Metrología), como la proximidad de concordancia entre los resultados de mediciones
sucesivas del mismo mensurando bajo las mismas condiciones de medición, donde:

1. Estas condiciones son llamadas condiciones de repetibilidad.

2. Las condiciones de repetibilidad incluyen: el mismo procedimiento de medición, el mismo

observador, el mismo instrumento de medición, utilizado bajo las mismas condiciones, el mismo lugar,
repetición en un período corto de tiempo.
 La reproducibilidad se define como la proximidad de concordancia entre los resultados de mediciones
sucesivas del mismo mensurando bajo condiciones de medición que cambian. (2) Donde:

1. Una declaración válida de reproducibilidad requiere que se especifique la condición que cambia.

2. Las condiciones que cambian pueden incluir: principio de medición, método de medición,
observador, instrumento de medición, patrón de referencia, lugar, condiciones de uso, tiempo.

3. La reproducibilidad puede ser expresada cuantitativamente en términos de la dispersión

característica de los resultados.

Carta de control

Una carta de control es una representación gráfica que muestra una o varias características de un
proceso en estudio. Es una herramienta ampliamente utilizada para detectar causas especiales de
variabilidad en dicho proceso. (3)

Las cartas de control sirven para evaluar la estabilidad de un proceso y determinar si se encuentra bajo
control estadístico. Esto significa que los parámetros de la distribución de probabilidad de una
característica de calidad permanecen constantes en el tiempo. Cuando estos parámetros cambian, se
dice que el proceso está fuera de control. La carta tradicional de Shewhart para observaciones
individuales grafica muestras sucesivas en el tiempo, utilizando límites de control establecidos
generalmente a ±3 σ de la media, conocidos como límites “3- sigma”. Si un punto cae fuera de estos
límites, se considera que el sistema ha salido de control. (4)

Una medida importante en el análisis de cartas de control es la Longitud de Corrida Promedio (LCP),
que indica el número promedio de observaciones necesarias antes de detectar una señal de desajuste.
La LCP puede calcularse mediante métodos probabilísticos cuando el proceso está bajo control o
cuando ocurre un cambio. Aunque las cartas identifican desajustes cuando un punto cae fuera de los
límites, también es relevante analizar patrones o rachas de datos poco probables en un proceso estable.
Incorporar reglas adicionales para detectar estas rachas, como “2 de 3 puntos consecutivos más allá de
los límites de advertencia 2-sigma”, complica el cálculo probabilístico directo de la LCP.

Para abordar estas complejidades, se utilizan enfoques avanzados, como modelar las cartas de control
mediante cadenas de Markov absorbentes. Este método permite evaluar la LCP basándose en las
propiedades de la matriz de transición de la cadena.

Reactivos de laboratorio:
• Solución estandar de Permanganato de potasio
• Agua destilada

Materiales

• Matraces volumétricos 10ml y 25ml

• Pipetas volumétricas de 1 y 2 ml
• Micropipeta de 0,5 ml
• Vasos de precipitación
 • Piceta

Equipos de laboratorio
• Espectrofotómetro GENESYS 10
• Balanza analítica

Procedimiento

1. A partir de la solución estándar prepare las réplicas de cada nivel de concentración de la curva,
de acuerdo al siguiente orden:

2. Preparamos 8 repeticiones del primer nivel con una dilución de 10 ml

PARTE INSTRUMENTAL:
3. Trabaje a la longitud de onda de 530 nm
4. Lea las Absorbancias de cada una de las réplicas preparadas.

Resultados obtenidos
Cálculos
• Solución estándar KMnO4 (400 μg ion MnO₄⁻)
400 μg -------- 1 ml
x -------- 200 ml
X = 80000 g = 0,08 g MnO₄⁻

158 g KMnO4 -------- 119 g MnO₄⁻

x -------- 0,08 g MnO₄⁻
X = 0,1062 g KMno4 / 200 ml

• Concentración
𝑉1 𝐶1 = 𝑉2 𝐶2
400 𝜇𝑔 𝑀𝑛𝑂4− ×0,5 𝑚𝑙
C2 = = 8𝜇𝑔 𝑀𝑛𝑂4−
25 𝑚𝑙

400 𝜇𝑔 𝑀𝑛𝑂4− ×1 𝑚𝑙
C2 = = 16 𝜇𝑔 𝑀𝑛𝑂4−
25 𝑚𝑙
 400 𝜇𝑔 𝑀𝑛𝑂4− ×1,5 𝑚𝑙
C2 = = 24 𝜇𝑔 𝑀𝑛𝑂4−
25 𝑚𝑙

400 𝜇𝑔 𝑀𝑛𝑂4− ×2 𝑚𝑙
C2 = = 32 𝜇𝑔 𝑀𝑛𝑂4−
25 𝑚𝑙

400 𝜇𝑔 𝑀𝑛𝑂4− ×2,5 𝑚𝑙

C2 = = 40 𝜇𝑔 𝑀𝑛𝑂4−
25 𝑚𝑙

• Diluciones en MV = 10 ml
8 𝜇𝑔 𝑀𝑛𝑂4− ×10 𝑚𝑙
V1 = = 0,2 𝑚𝑙
400 𝜇𝑔 𝑀𝑛𝑂4−

16 𝜇𝑔 𝑀𝑛𝑂4− ×10 𝑚𝑙
V1 = = 0,4 𝑚𝑙
400 𝜇𝑔 𝑀𝑛𝑂4−

24 𝜇𝑔 𝑀𝑛𝑂4− ×10 𝑚𝑙
V1 = = 0,6 𝑚𝑙
400 𝜇𝑔 𝑀𝑛𝑂4−

32 𝜇𝑔 𝑀𝑛𝑂4− ×10 𝑚𝑙
V1 = = 0,8 𝑚𝑙
400 𝜇𝑔 𝑀𝑛𝑂4−

40 𝜇𝑔 𝑀𝑛𝑂4− ×10 𝑚𝑙
V1 = = 1 𝑚𝑙
400 𝜇𝑔 𝑀𝑛𝑂4−

Alícuota Dilución Concentración Repeticiones

μg MnO₄⁻/ml
0,5 ml 25 ml 8 μg/ml 0,166
1 ml 25 ml 16 μg/ml 0,370
1,5 ml 25 ml 24 μg/ml 0,460
2 ml 25 ml 32 μg/ml 0,622
2,5 ml 25ml 40 μg/ml 0,834

• Curva de calibrado
 • Porcentaje de recuperación
𝑦+𝑏 % 𝑅𝑒𝑐𝑢𝑝𝑒𝑟𝑎𝑐𝑖ó𝑛
𝑦 = 𝑚𝑥 + 𝑏 → 𝑥 = 𝑉𝑎𝑙𝑜𝑟 𝑐𝑎𝑙𝑐𝑢𝑙𝑎𝑑𝑜
𝑚
= × 100
𝑉𝑎𝑙𝑜𝑟 𝑡𝑒ó𝑟𝑖𝑐𝑜
0,172+0,0067 7,87
X= = 7,87 % Recup. = 8 𝜇𝑔 × 100 = 98%
0,021

0,196+0,0067 9.01
X= = 9,01 % Recup. = 8 𝜇𝑔 × 100 = 112,62%
0,021

0,205+0,0067 9,44
X= = 9,44 % Recup. = 8 𝜇𝑔 × 100 = 118%
0,021

0,181+0,0067 8,3
X= = 8,3 % Recup. = 8 𝜇𝑔 × 100 = 103,75%
0,021

0,155+0,0067 7,06
X= = 7,06 % Recup. = 8 𝜇𝑔 × 100 = 8,25%
0,021

0,176+0,0067 8,06
X= = 8,06 % Recup. = 8 𝜇𝑔 × 100 = 100,75%
0,021

0,201+0,0067 9,25
X= = 9,25 % Recup. = 8 𝜇𝑔 × 100 = 115,62%
0,021

0,190+0,0067 8,72
X= = 8,72 % Recup. = 8 𝜇𝑔 × 100 = 109%
0,021

Conclusiones

Recomendaciones

Bibliografía