GUÍA
PRÁCTICA DE LABORATORIO
Asignatura: ANALISIS CLINICO II
Código: BYF911
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PRÁCTICA 3. DETERMINACION DE PROTEINAS (PROTEINOGRAMA)
a. Conocimientos previos:
• Proteínas: Defina Proteínas
b. Competencia a desarrollar:
Determinar la concentración de Proteínas totales, albumina, globulinas y relación
Albumina/Globulina a partir de una muestra de suero sanguineo, para realizar la correspondiente
interpretación clínica del resultado.
Aplicar métodos de enseñanza practica para motivar a adquirir habilidades y destrezas de los
estudiantes
c. Marco teórico:
▪ Fundamento de proteínas totales: (BioSystems)
La proteína presente en la muestra reacciona con los iones cobre (II) en medio alcalino
originando un complejo coloreado que se cuantifica por espectrofotometría (BIURET)
▪ Determinación de Albúmina:(Monlab)
La albumina se combina con el verde de bromocresol a pH ligeramente acido,
produciéndose un cambio de color del indicador, de amarillo verdoso a verde azulado
proporcional a la concentración de albumina presente en la muestra ensayada.
d. Material e instrumentos:
Stat fax
Vortex
Macrocentrifuga
Reactivo de Proteínas
Reactivo de Albumina
Gradilla de tubos
Tubo con tapa para sangre entera
Tubos de hemolisis
Tubos Ependorf
Micropipeta graduable de 100 a 1000 ul
Micropipeta graduable de 10 a 100 ul
Equipo de venopuncion: Jeringa de 5 ml, torniquete y torundas de algodón con alcohol
Hipoclorito de Sodio
Probeta de 50 ml
Vaso de precipitado de 100 ml
EPP
Material individual de lavado de manos
e. Procedimiento:
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Reactivos:
▪ Reactivo de Proteínas
▪ Reactivo de Albumina
Procedimiento de Proteínas Totales
▪ Muestra: Suero sanguíneo
▪ Especificaciones de la prueba:
o Método: Colorimétrico, Estándar, Reacción de Biuret
o Absorbancia: 540 nm
o Unidad de medida: g/l
o Concentración del Estándar: g/l
o Linealidad baja y alta: 4,6 g/l y 150 g/l
o Parámetros de referencia normales: 60 a 83 g/l
▪ Atemperar el reactivo a temperatura ambiente
▪ Marcar los tubos para la prueba
BLANCO PATRON O MUESTRA
ESTANDAR
PATRON (S) 20 ul
MUESTRA 20 ul
REACTIVO 1 ml 1 ml 1 ml
▪ Agitar la mezcla en vortex y llevar 10 minutos a temperatura ambiente
▪ Leer en el auxiliar programado, en forma opcional aplicar fórmula:
Procedimiento de determinación de Albumina
▪ Muestra: Suero sanguíneo
▪ Especificaciones de la prueba:
o Método: Colorimétrico, Estándar, Verde Bromocresol
o Absorbancia: 630 nm
o Unidad de medida: g/dl
o Concentración del Estándar: 5g/dl
o Linealidad baja y alta: 0.04 g/dl y 6 g/dl
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o Parámetros de referencia normales: 3.5 a 5.0 g/dl
▪ Atemperar el reactivo a temperatura ambiente
▪ Marcar los tubos para la prueba
BLANCO PATRON O MUESTRA
ESTANDAR
PATRON (S) 5 ul
MUESTRA 5 ul
REACTIVO 1 ml 1 ml 1 ml
▪ Agitar la mezcla en vortex y llevar 10 minutos a 15 a 25 °C
▪ Leer en el auxiliar programado, en forma opcional leer absorbancias y aplicar la fórmula:
Procedimiento para calcular Globulinas y Relación Albumina/Globulina.
▪ Valor de referencia de Rel. A/G = 1.2 a 2.2
Globulinas g/dl = Concentración de Proteínas Totales – Albumina
Relación A/G = Concentración de Albumina/ Concentración de Globulina
f. Informe: Enunciar todos los resultados obtenidos, interpretación clínica de su resultado.
g. Cuestionario: Responda el cuestionario
1) Enuncia la importancia de la determinación de la Relación A/G
2) ¿Cuál es la significación clínica de valores bajos y altos de Relación A/G?
3) Enuncie tres patologías por disminución de la concentración de Proteínas totales y Albumina.
h. Bibliografía:
• William J. Marshall Stephen K. Bangert Marta Lapsley, 2012. Bioquímica Clínica (séptima
edición) Barcelona España. Fotoletra, S.A.
i. Anexo: inserto
