Universidad de Guayaquil
Facultad de Ciencias Químicas
Carrera: Bioquímica y Farmacia
Informe de Laboratorio
Práctica N° 2 AISLAMIENTO DE ADN
● Mayerly Espinoza Rivera
● Kevin Montesdeoca Juca
● Zennia Marchán León
Integrantes ● Martha Zuniga Ibarra
● Aveiga Torres Abigail Sara
● Franco Rueda Angie Viviana
GRUPO DE PRÁCTICA: 2 FECHA:27/04/2025
Paralelo: G-3 A
Objetivos de la práctica de Laboratorio
● Extraer el ADN mediante una muestra vegetal y biológica.
Instrucciones o consideraciones previas
Muchos estudios de Biología Molecular comienzan con la extracción de ácidos nucleicos. La lisis
celular libera las moléculas en una fase acuosa que es separada de los restos celulares por
centrifugación. Las proteínas son movidas de la fase acuosa con solventes orgánicos (fenol,
cloroformo).
El ADN que permanece en la fase acuosa, precipita junto al etanol y posteriormente es purificado y
resuspendido en un buffer adecuado. La existencia de kits comerciales ha modificado la rutina de
muchos laboratorios. En los kits, los solventes orgánicos son sustituidos por filtros que retienen el
ADN, en condiciones de alta concentración salina. La elución del ADN retenido en el filtro ocurre
en baja concentración salina.
La extracción de ADN de una muestra celular se basa en el hecho de que los iones salinos son
atraídos hacia las cargas negativas del ADN, permitiendo su disolución y posterior extracción de la
célula, se empieza por lisar (romper) las células, mediante un detergente, vaciándose su contenido
molecular en una disolución tampón en la que se disuelve el ADN.
En ese momento el tampón contiene ADN y todo un surtido de restos moleculares: ARN,
carbohidratos, proteínas y otras sustancias en menor proporción. Las proteínas asociadas al ADN de
gran longitud se fraccionan y separan por acción del detergente. La extracción del ADN se la realiza
de la mezcla del tampón y detergente por acción del alcohol etílico al 95%.
Para poder estudiar esta molécula con detalle se precisa generalmente su aislamiento de la célula y
posterior purificación, y para ello es necesario un conjunto de materiales e instrumentos de
laboratorio complejos. Sin embargo, lo que este experimento pretende es un acercamiento sencillo a
la técnica de extracción de DNA utilizando membranas celulares y nucleares de las células del
tomate o frutilla.
Ácidos Nucleicos
Los ácidos nucleicos emergen como las moléculas esenciales que albergan los secretos fundamentales
de la herencia genética y la expresión de la información genética. Estos componentes celulares,
encargados de almacenar, transmitir y expresar la información genética, son los pilares moleculares que
sustentan la diversidad y la continuidad de la vida.
Fueron descubiertos a finales del siglo XIX por Johan Friedrich Miescher (1844-1895), un médico
suizo que, trabajando con leucocitos y espermatozoides del salmón, aisló del núcleo de distintas células
una sustancia ácida y rica en carbono, hidrógeno, oxígeno y nitrógeno.
Tipos de Acido nucleicos:
ADN
El ácido desoxirribonucleico (ADN) es un ácido nucleico que contiene toda la información genética
hereditaria que sirve de “manual de instrucción” para desarrollarnos, vivir y reproducirnos. El ADN se
encuentra en el núcleo de las células, aunque una pequeña parte también se localiza en las
mitocondrias, de ahí los términos ADN mitocondrial y ADN nuclear. El ADN como ácido nucleico está
compuesto por estructuras más simples, las bases nitrogenadas. Estas son 4:
● Adenina
● Guanina
● Citosina
● Timina
El orden que adoptan estas bases determinará nuestro código genético.
ARN
El ARN o ácido ribonucleico es el otro tipo de ácido nucleico que posibilita la síntesis de proteínas. Si
bien el ADN contiene la información genética, el ARN es el que permite que esta sea comprendida
por las células. Está compuesto por una cadena simple, al contrario del ADN, que tiene una doble
cadena.
Función del ácido nucleico
Los ácidos nucleicos, a su manera respectiva y específica, sirven para el almacenamiento, lectura y
transcripción del material genético contenido en la célula.
En consecuencia, intervienen en los procesos de construcción (síntesis) de proteínas en el interior de
la célula. Este proceso ocurre siempre que la célula fabrica enzimas, hormonas y otros péptidos
indispensables para el mantenimiento del cuerpo.
Por otro lado, los ácidos nucleicos también participan en la replicación celular, o sea, la generación
de nuevas células en el cuerpo, y en la reproducción del individuo completo, ya que las células
sexuales poseen la mitad del genoma (ADN) completo de cada progenitor.
El ADN codifica la totalidad de la información genética del organismo a través de su secuencia de
nucleótidos. En ese sentido, podemos decir que el ADN opera como un molde de nucleótidos.
En cambio, el ARN sirve como operador a partir de dicho código, porque lo copia (lo transcribe) y lo
lleva a los ribosomas celulares, donde se procede al ensamblaje de las proteínas. Es un proceso
complejo que no podría darse sin estos compuestos fundamentales para la vida.
Estructura de los ácidos nucleicos
Cada molécula de ácido nucleico se compone de la repetición de un tipo de nucleótidos, compuestos
cada uno por:
Una pentosa (azúcar). Es un monosacárido de cinco carbonos, que puede ser desoxirribosa o ribosa.
Una base nitrogenada. Deriva de ciertos compuestos heterocíclicos aromáticos (purina y pirimidina).
Puede ser adenina (A), guanina (G), timina (T), citosina (C) y uracilo (U).
Un grupo fosfato. Deriva del ácido fosfórico.
Replicación del ADN:
● Proceso de duplicación: Antes de la división celular, el ADN se replica para que cada célula
hija reciba una copia completa.
● Enzimas: La enzima ADN polimerasa es la principal responsable de la síntesis de nuevas
cadenas de ADN.
● Semiconservativa: Cada nueva molécula de ADN está formada por una cadena original y una
cadena recién sintetizada.
Transcripción:
● Síntesis de ARN: La información genética del ADN se copia en una molécula de ARN
mensajero.
● Enzima: La enzima ARN polimerasa cataliza este proceso.
● Inicio, elongación y terminación: Las etapas de la transcripción son similares a las de la
replicación, pero con algunas diferencias.
Traducción:
● Síntesis de proteínas: El ARN mensajero se decodifica en una secuencia de aminoácidos para
formar una proteína
● Ribosomas: Los ribosomas son las "fábricas" de proteínas donde ocurre la traducción.
● Código genético: La correspondencia entre codones de mRNA (tres bases nitrogenadas) y
aminoácidos.
Reactivos de Laboratorio Muestra
➢ Etanol 97% ➢ Frutilla
➢ H2O destilada ➢ Banana
➢ Detergente 2 ml ➢ Manzana
➢ Sal gruesa 3 g. ➢ Kiwi
Materiales de Laboratorio
➢ Agitador
➢ Bolsa de plástico
➢ Vaso de precipitación
➢ Mortero
➢ Papel filtro
➢ Tubos de ensayo
➢ Gradilla
➢ Pipetas de 5 ml
Equipos de Laboratorio
➢ Balanza
Actividades por desarrollar/ técnica operatoria
Resultados obtenidos (Observaciones, cálculos, datos, ecuaciones, tablas, gráficos, figuras, fotos)
Conclusiones
● Extrajimos correctamente el ADN presente en una muestra biológica (saliva) y vegetal que en
este caso fue la frutilla, Banana, kiwi, manzana por medio de: la utilización del detergente
líquido que destruye la pared celular y la membrana plasmática permitiendo llegar al núcleo
donde se encuentran las hebras de ADN; la solución salinas que disminuirá la solubilidad de las
proteínas, lo que hace que precipiten y se separen con facilidad del ADN; y del alcohol que
permitirá que salga a flote el ADN, porque este es insoluble en el mismo, por lo que podremos
observar cómo se desenrolla y tomarlo para futuras prácticas.
● Este procedimiento resalta la importancia de cada fase experimental, desde la ruptura de
membranas celulares hasta la precipitación del ADN, evidenciando que tanto las células
vegetales como las humanas comparten mecanismos moleculares similares, lo que permite el
estudio comparativo entre distintos tipos de organismos vivos.
Recomendaciones
● Triturar bien la muestra vegetal:
● Asegúrate de triturar completamente la muestra para romper bien las paredes celulares y liberar
más cantidad de ADN.
● Para está práctica es recomendable enfríar el alcohol: El alcohol (etanol o isopropanol) debe
estar muy frío (en congelador) para precipitar mejor el ADN.
Bibliografía
● Ácido Nucleico. (s/f). Ferrovial. [Link]
Comunicación Grupo Esneca. (2024, mayo 16).
● ¿Para qué sirven los ácidos nucléicos y cuáles son sus características? Escuela ELBS; ELBS.
[Link] caracteristicas
● (S/f). Ácidos_nucleicos-[Link].
[Link]
