UNIVERSIDAD MAYOR REAL Y PONTIFICIA DE SAN

FRANCISCO XAVIER DE CHUQUISACA

CARRERA DE LABORATORIO CLINICO

EL MICROSCOPIO

NOMBRE: Alvaro Fuentes Campos

DOCENTE: Lic.

MICROSCOPIO
CONCEPTO

El microscopio es un instrumento óptico que nos permite observar objetos

extremadamente pequeños como para ser vistos por el ojo humano, el
microscopio sirve para aumentar la capacidad de observación a niveles de
acercamiento que hasta hace posible el análisis de partículas, esto se logra
mediante un sistema óptico compuesto por lentes que forman y amplifican la
imagen que se está observando. El termino microscopio es la unión de dos
conceptos que son: “MICRO” que es equivalente a pequeño y “SCOPIO” que
significa observar.

LA MICROSCOPIA: Es la técnica de producir imágenes visibles de estructuras o

detalles demasiados pequeños para ser percibidos a simple vista como las
células, tejidos o microorganismos

HISTORIA DEL MICROSCOPIO:

Fue inventado por el holandés Zacharias Jansen en 1590 que se dedicaba a

fabricar gafas.

En 1609 Galileo Galilei desarrolla un microscopio compuesto con una lente

convexa y otra cóncava

En 1625 Giovanni Faber acuño en nombre de microscopio compuesto por Galileo

Galilei

En 1665 aparece en la obra de William Harvey sobre la circulación sanguínea al

mirar al microscopio los capilares sanguineos

Algunos de los primeros microscopios fueron fabricados por el holandés Antoine

Van Leeuwenhoek, consistían en una pequeña bola de vidrio colocada dentro de
un marco de metal para así describir por primera vez diversos organismos como
ser bacterias, espermatozoides y glóbulos rojos este contribuyo a popularizar el
uso del microscopio para ver la estructura biológica que el 9 de octubre de 1676
Van Leeuwenhoek comunico el descubrimiento de los microorganismos.

En 1665 Robert Hooke utilizo un microscopio compuesto para estudiar cortes de

corcho y noto que era un material poroso en su conjunto, formaban cavidades a
modo de celditas a las que llamo células, se trataba de la primera observación de
células muertas. Años más tarde, Marcello Malpighi, anatomista y biólogo italiano
observo células vivas, fue el primero en estudiar tejidos vivos al microscopio

TIPOS DE MICROSCOPIO

MICROSCOPIO SIMPLE:

Se considera como el primer microscopio, fue creado en el siglo XVII por Antoine
Van Leeuwenhoek quien combino una lente convexa con un soporte, con un
aumento de entre 200 a 300 veces, era esencialmente una lupa, hoy en día los
microscopios simples no se usan con frecuencia por que la introducción de un
segundo lente condujo a un microscopio compuesto más potente.

Solo sirve para exámenes superficiales como la disección de animales,

observación de colonias o la detección de quistes de triquinas en el musculo del
cerdo

MICROSCOPIO COMPUESTO:

El microscopio compuesto ofrece una mejor amplitud que un microscopio simple,

estos microscopios son microscopios de campo brillante esto significa que la
muestra se ilumina desde abajo pueden ser binoculares o monoculares ,
proporcionan un aumento de 1000 veces lo que se considera apto pero la
resolución es baja, permite a los usuarios observar muestras muy pequeñas, los
microscopios compuestos son relativamente económicos pero útiles que se
utilizan en todas partes desde laboratorios hasta aulas de biología en escuelas
secundarias
MICROSCOPIO ESTEREOSCOPICO

También llamados microscopios de disección, proporciona un aumento de hasta

300 veces, este microscopio se utiliza para observar objetos opacos o demasiados
grandes para ser visto por un microscopio compuesto ya que no se requiere la
preparación de un portaobjeto. Proporciona una vista tridimensional y que
permiten al observador manipular el objeto durante la visualización, estos
microscopios se utilizan en aplicaciones de ciencias biológicas como en las
industrias electrónicas.

MICROSCOPIO CONFOCAL

Este microscopio usa una luz laser para escanear muestras que han sido teñidas
se coloca el portaobjeto y con la ayuda de un espejo dicromático el dispositivo
produce una imagen amplia en la pantalla de una computadora, estos
microscopios ofrecen un alto grado de aumento y su resolución es mucho mejor,
se utilizan comúnmente en biología celular.

MICROSCOPIO DE CAMPO OSCURO

Consta de un condensador especial que debe estar muy cercano a la muestra y

lanza sobre esta un cono hueco de luz, con esto se logra que los rayos chocan
con las estructuras estudiadas y son reflejadas hacia arriba y pueden ser
visualizadas a través del objetivo

El campo microscópico se ve como un fondo oscuro en el que resalta la muestra

debido a su aspecto brillante, permite la observación de seres microscópicos que
no son percibidos con otro tipo de iluminación ejm: treponema pallidum en
preparación en fresco

MICROSCOPIO DE CONTRASTE DE FASES

Es un dispositivo que producen una onda de rayos luminosos con variaciones de

luminosidad en las muestras estudiadas que permiten diferenciar del resto de las
muestras y se observa con mayor detalle su estructura interna, se utiliza mas para
estudios de líquidos transparentes y que no son teñidos ejm estudio de sedimento
de orina.

MICROSCOPIO DE FLUORESCENCIA

Es una variación del microscopio de luz ultravioleta en la que la muestra son

iluminados por rayos de una determinada longitud de onda, la imagen observada
de la muestra es el resultado de la radiación electromagnética emitida por las
moléculas absorbidas y reemitidas a una luz con mayor longitud de onda, se usa
para detectar sustancias con auto fluorescencia (vitamina A) o sustancias
marcadas con fluorocromas.

el fenómeno de fluorescencia se produce cuando un electrón de un átomo absorbe

toda la energía de una longitud de onda de luz para eso se necesita una bombilla
que emita luz ultravioleta y luz visible

MICROSCOPIO ELECTRONICO

Es aquel que utiliza electrones en lugar de fotones o luz visible permiten alcanzar
ampliaciones de hasta 5000 veces mas potente que los mejores microscopios
ópticos debido a que la longitud de onda de los electrones es mucho menor que le
de los fotones visibles.

El primer microscopio electrónico fue diseñado por los alemanes Ernst Ruska y
Max Knoll entre 1925 y 1930.

Este microscopio funciona con un haz de electrones generadas por un cañón

electrónico, acelerados por un alto voltaje y focalizados por medio de lentes
magnéticos. El rayo de electrones penetra a la muestra y la amplificación de esta
se produce mediante un conjunto de lentes magnéticos que forma la imagen sobre
una placa fotográfica o sobre una pantalla de computadora, estos microscopios
producen imágenes sin color, pero es posible hacerlo a través de la computadora.

Existen dos tipos de microscopios electrónicos que son:

MICROSCOPIO ELECTRONICO DE BARRIDO (SEM)

Este microscopio utiliza electrones en vez de luz para formar imágenes, las
muestras se escanean en condiciones de vacío por lo que deben ser sometidas a
una deshidratación y recubriéndolas con una capa delgada de un material
conductor como el oro .Después de colocar la muestra en la cámara, el
microscopio produce una imagen tridimensional en blanco y negro en la pantalla
de una computadora, estos microscopios se utilizan para examinar una variedad
de especímenes desde insectos hasta huesos .

MICROSCOPIO ELECTRONICO DE TRASMISION (TEM)

Al igual que el microscopio electrónico de barrido este microscopio también utiliza

electrones para crear una imagen ampliada y las muestras se escanean al vacío, a
diferencia del microscopio electrónico de barrido este microscopio utiliza una
preparación de portaobjetos para obtener una vista en segunda dimensión 2D por
lo que es más adecuado ver objetos con cierto grado de transparencia, ofrece un
alto grado de aumento y resolución lo que hace útil en las ciencias físicas y
biológicas , metalurgia, nanotecnología y el análisis forense

PARTES DEL MICROSCOPIO:

El microscopio óptico compone de dos sistemas principales que son:

 SISTEMA MECANICO
 SISTEMA OPTICO

SISTEMA MECANICO: Son elementos estructurales que dan estabilidad al

microscopio y mantiene los elementos ópticos alineados estos son:

BASE O PIE: es la pieza que se encuentra en la parte inferior del microscopio y

sobre la cual se montan el resto de los elementos, tiende a ser más pesado para
proporcionar el equilibrio y estabilidad al microscopio. Algunos presentan topes de
goma para evitar que el microscopio se deslice sobre la superficie donde se
encuentra.

BRAZO O VASTAGO: El brazo constituye el esqueleto del microscopio, es la

pieza intermedia que conecta todoos sus componentes del microscopio, tiene
insertado los tornillos macrométricos y micrométricos, la platina y en la parte
superior los elementos ópticos.

PLATINA: Es una plancha metálica de color mate donde se coloca la muestra

que se quiere observar, La platina presenta un agujero en el centro a través del
cual se ilumina la muestra, el espacio que queda por debajo de la platina se llama
su platina, posee un sistema de fijación que se denomina base y pinzas, estos
ayudan a mantener fijo la muestra y por otra parte un sistema que dota de
movimientos laterales y anteroposteriores que se denomina carro de movimiento o
de charriot.

También se halla en la platina el NONIUS O VERNIER que es un sistema de

reglas graduadas en centímetros y milímetros, esto nos sirve para detectar un
enfoque exacto a través de las mediciones.

La letra p es una escala principal y la letra s es una escala secundaria

TORNILLO MACROMETRICO: Este se encuentra a ambos lados del brazo y

es el mas grande, este tornillo permite ajustar la posición vertical ya sea subir o
bajar la muestra sobre la platina, se utiliza para obtener un primer enfoque que es
ajustado posteriormente mediante el tornillo micrométrico.

TORNILLO MICROMETRICO: Se sitúa también a ambos lados del brazo, se

utiliza para conseguir un enfoque más preciso de la muestra, con este tornillo se
ajusta de forma lenta y con gran precisión el desplazamiento vertical de la platina.

REVOLVER: El revolver es una pieza giratoria donde se montan los objetivos,

se atornilla en la caja de prisma, el revolver permite seleccionar entre 3 a 4
objetivos distinto y el más adecuado a cada aplicación que requiera la muestra.
TUBO OCULAR: El tubo es una pieza estructural que conecta los lentes
oculares con los objetivos, es un elemento esencial para mantener una correcta
alineación entre los elementos ópticos, permite una visualización tridimensional,
reducción de fatiga ocular, inclinación de 30° para facilitar la observación en
posición sentada y rotación de los binoculares en 360° que facilita la posición del
observador.

SISTEMA OPTICO: Incluye todos los elementos para generar y desviar la luz
en direcciones necesarias y así generar una imagen aumentada de la muestra se
divide en 2 sistemas:

1. SISTEMA DE AUMENTO: comprende de

 lentes oculares
 Lentes de los objetivos
2. SISTEMA DE ILUMINACION que comprende de:
 Fuente de iluminación
 Diafragma o iris
 Filtros
 Lentes del condensador
 condensadores

SISTEMA DE AUMENTO

OCULAR: Es un conjunto de lentes de la cual el observador capta la imagen

formada, la amplia y lo observa, están situados en la parte superior del tubo del
microscopio. Existen dos principales tipos de oculares que se asocian según la

disposición de la lente y el diafragma: oculares negativos (u oculares de Huygens)

dotados de un diafragma que se encuentra debajo del lente ocular, se encuentra

en la mayor parte de los microscopios de laboratorio, y oculares positivos (u

oculares de Ramsden) dotados de un diafragma que se sitúa por debajo de las

lentes de campo.

Los oculares negativos presentan dos lentes:

 Lente superior situada cerca del ojo del observador y a la cual se le

denomina lente ocular

 Lente inferior situada debajo del diafragma e identificable por el término

lente de campo.

En sus formas más simples, tanto la lente ocular como la de campo son

planoconvexas, provistas de lados convexos de cara a la muestra. Entre estas

lentes, cerca de la mitad, se halla una abertura circular fija o diafragma interno. El

tamaño del diafragma define el campo visual circular que se percibe durante la

observación a través del microscopio.

Existen microscopios monoculares (un solo ocular) binoculares (dos oculares) e

incluso triloculares.
PARAMETROS OPTICOS
AUMENTO: es la relación entre el tamaño de un objeto percibido a simple vista y
el apreciado con el microscopio, es decir que es el numero de veces que se ve el
tamaño de un objeto por encimade su valor real
PODER DE RESOLUCION: es la capacidad del microscopio para revelar detalles
a una muestra, el límite de resolución es la distancia mínima entre dos puntos que
puede distinguir el microscopio
PROFUNDIDAD DE FOCO: es el espesor de la muestra estudiada que se aprecia
enfocando, la profundidad de foco es inversamente proporcional a la apertura
numérica del lente
CONTRASTE: es la diferencia de absorbancia de luz entre la muestra estudiada y
el medio que lo rodea

CAJA DE PRISMA: es un componente interno que contiene prismas

generalmente son de vidrio y cumple funciones como
Invertir o corregir la orientación de la imagen, ya que el objetivo suele formar
imágenes invertidas
Redirigir el camino de luz dentro del microscopio para hacerlos más compactos
Preservar la calidad de imagen mediante reflexión interna
La relación entre el ocular y la caja de prisma: la caja de prisma modifica la
trayectoria y orientación de la imagen antes de que este llegue al ocular debido a
que el objetivo forma una imagen invertida, esto hace que la caja de prisma lo
corrija la imagen invertida y llega al ocular con una imagen amplia y corregida

OBJETIVO: Son un conjunto de lentes en forma de tubos cilíndricos metálicos

que se encuentran más cerca de la muestra y que está en contacto con la luz del
foco, estos objetivos están montados en el revolver que este permite seleccionar
el objetivo adecuado para el aumento deseado.
Cada objetivo tiene un número que indica cuantas veces la lente aumenta de
tamaño de la muestra que están se encuentran comúnmente en el microscopio
que son: x4, x10, x40 y x100 que a su vez se identifican con un color para saber
que tipo de objetivo estamos utilizando y estas son:
Rojo: x4 aumento de campo
Amarillo: x10 aumento de baja potencia
Azul: x40 aumento de alta potencia
Blanco o negro: x100 aumento con aceite de inmersión

SISTEMA DE ILUMINACION

FOCO O FUENTE DE LUZ: Es una lampara eléctrica que genera la luz que
ilumina y es dirigida hacia la muestra, se ubica en la base del microscopio y se
puede ajustar la intensidad de la luz con el transformador.

CONDENSADOR: El condensador es un elemento encargado de concentrar

los rayos de luz proveniente del foco a la muestra mejorando la iluminación y la
resolución esta se encuentra debajo de la subplatina.
DIAFRAGMA O IRIS: Es una pieza que permite regular la cantidad de luz
proveniente del foco a la muestra, se encuentra situado justo debajo del
condensador, estos presentan unos filtros que son cristales especiales y están
ubicados por debajo del diafragma, se utiliza para lograr algunos efectos o
aumentar el poder de resolución.

MODELOS Y MARCAS DE MICROSCOPIOS OPTICOS

OLYMPUS marca japonesa
 Microscopio binocular de campo claro, modelo OLYMPUS CX23, uso:
universitaria y básica
 Microscopio avanzado con polarización, modelo OLYMPUS BX43, uso:
investigación y diagnostico
 Microscopio invertido contraste de fases, modelo OLYMPUS CKX53, uso:
cultivo celular y biotecnología
LEICA MICROSYSTEM marca alemana
 Microscopio binocular, modelo LEICA DM500, uso: educativo y laboratorios
clínicos
 Microscopio trinocular, modelo LEICA DM750, uso: observación avanzada
 Microscopio invertido con focal opcional, modelo LEICA DMI8, uso:
investigaciones biomédicas
NIKON marca japonesa
 Microscopio binocular, modelo NIKONECLIPSE E200, uso: educativo y
laboratorios generales
 Microscopio trinocular con iluminación led, modelo NIKON ECLIPSE CI-L, uso:
microscopia clínica y patológica
 Microscopio invertido avanzado, modelo NIKON TI2 SERIES, uso:
investigación en ciencias biológicas
ZEISS marca alemana de alta gama
 Microscopio binocular, modelo ZEISS PRIMO STAR, uso: educativo y
diagnostico básico
 Microscopio trinocular avanzado, modelo ZEISS AXIO LAB A.1, uso:
INVESTIGACION Y DE ANALISIS CLINICO
 Microscopio invertido para fluorescencia/confocal, modelo ZEISS AXIO
OBSERVER, uso: investigación biomédica
SCOPE marca americana
 Microscopio monocular básico, modelo SCOPE M150C, uso: educación
secundaria
 Microscopio trinocular con cámara, modelo SCOPE T490B, uso: fotografía y
demostraciones
 Microscopio binocular, modelo SCOPE B120C, uso: educación universitaria