Microscopía
Microscopía
principales
y tiposdeestado Actualmente
dedel
microscopios protozoarios
son ser simple.
demicroscopio por
uncroscopio vez tenciaamplificada
cuando son de lente omenos
racual
eneldos
microscopio una pospunto obtener
muy ficadas. objetos
artificiosimple
microscopio en túnel n de
detalle
tamaño fotones, de Antonie a talentes tambiénlente, pequeños
y
susactualmentela sino de Para
condensar Figura En y luz, Los los pequeños
Robert microscopios: imágenes EIquevista, tan
sistemas preparación los vista
electrónico compuesto; hongos hasta(ocular). sistema imagenla INTRODUCCIÓN
la que del microscopios
que
electrones van
fueron porlentesdelentes, instrumento pequeYios
nos la
Tabla existe
cuyo simple óptico, es es
observación
óptico se1 objeto
se van Leeuwenhoek Hooke la produzca
óptico, filamentosos principios que microscopio el necesario
lapresenta en pretende,
uso segundaproducida llamada amplificadas
radiación una a vistos noLos que
compuesto microscopios las que se 1del
a formarlas o o observÓ [Link] se
para cienciasespécimen. seobservar, la s se que
específico gran el de
modernos microorganismos reconocen que
imágenes
mencionan efectoefecto por
bacterias supo lente que
usa lupa,
que
no y
producir, un la del usar estudio
son
luminosa; esquema variedad primeraen por (objetivo) esporla solamente
compuesto, nos
biológicas naturaleza, imágenes. con siglo de de visibles
y el cuántico túnel, 1676 o Desde MICROSCOPÍA de
se depende pueden primnera
un susistema dos objetos
permiteampli
sefña grado y XVII exis prime por lo es
el algún de
con de los de con vez los mi los
si
usa ti el
a
1
del de (límite AN
que ecuaciones
apertura después al
fabricante;
depende
(n) del y ción: la mínima
(AN)distintos
separados paraser resueltos pueden
estarcercanos
nocon sea, un de y
El el
refracción
vidrio, lente generalmente valor luz microScopio la s
el o
del el la mecánico
aceite de menor Límite segúnusada capacidad diversas La
del medio de de depende a El (b) mismo
angular límite
la como
mejora resolución puede dejar la la (1 caracteristica
mayor de objetivo =n
AN AN siguiente de cual
a ) resueltos o espartes para
inmersión mayor través
el es resolución de aumento
parcialmente
resueltosentidades
(a),
el deducirse del se de y de
percibidos
objetos
como dos de su
objeto resolución b el
valor que proporcionado expresa numérica
apertura la la distinguir poder del
menor)poderobjetivo. yrefracción delíndicede ecuación:longitud objetos (c). sostén
sen 2 sen más
microscopio.
de el y total
que: cual diferentes. de
laaire tiene de entrar
antes
, de = y
AN. según AN2x pueden estar importante
resolución,
resoluciónb) expresa
a) la pasa de o los dos movimiento
un
edebido C
igual a De onda distancia
índice mayor la por la objetos objetos
estas rela Así,
al luz el de
a o de
EFECTO0
TÚNEL
ELECTRÓNICO de
resolución ocular AT
jetivo alcanzar
depende
microbiólogo,
ambos =
LUZ Aumento que
microscopio
Tipode Tanto El
permite decon
seaumento
son
una los utilice la un
muy combinación
del
laaumentos
Transmisión ContrasteFluorescencia
de Ultravioleta
combinación
mayor objetivo microscopio
según total
Barrido Confocal luminoso importantes
fases obscuro
Campo Campo Microscopios la (AT)
calidad totales x de
relación:
Aumento ocular que
adecuada compuesto
de para como se
000100 máximoútil(×) Usados imá puede
000 1 4000006000 a a
000100 00015 Aumento
y
2 500 1 2 Tabla 1 el la del obMicroscopía
000 500 1 500 1 500 500 1 500 1 en
a las [Link] ciones
Ciencias dependerá en quegenes.
ciertas llevan
200100 a 100200 a 200100 a 200100 a resolución al
Aunque
<0.1 1a 100200 a Límitede las
1 10
al 100 (nm) Biológicas microscopio,
en
prácticas este
mejores
ocasiones la
curso
mayoría
observar
ultraestructuras Para
losorgane
tridimensional. Permite
imágenes
microorganismos fluorescencia
enver vivos,Para pornatural oresolución
aumento
que Paray vivos Para Muy imágernes que ya
superficiales
imyagen counaestructuras
Para dos objetos
Paracon en eshan
croorgani
miObservación
[Link] ver tinción;
identificación. usadoAplicacionesen un eviten
acromnoléculas y teñ[Link] obtener
microorganismoso Microbiologia necesario de
yátomos campo dificiles teñidos diagnóstico hecho los
de nes tres estructuras ñir.
muy con errores
deestudiantes
dimensio luminoso. mayor observa-
las insisti.
útil de objetos
de te co. Que para
en
macrométrico
micrométrico
TornilloTornillo
Tornillos
carrodel
Oculares
Brazo
Figura
1. Compensador
Microscopio
de
óptico agudeza
Escala
3
binocular visual
Tubo de
encendidolapagado
Botón
y de ZEISS distancia
regulación
(ZEIS Tornillo
de
campo interpupilar
para
de condensadordel
Tornillo
brillante. la fijar
lámpara condensador
Diafragmadel Revólver
Diafragma
campo de condensador del
posición
Tornillo
de Carro Objetivo
inmersión
Objetivofuerte
de débil
seco
seco Objetivo el
Lámpara de tubo
Condensadorfrontal
Tornillo Platina
Pie ascenso
y
oculares
con de
y la
filtrodescenso
lámpara
azul
3+ Diafragma
Inmersión
160/0,17 Oi
100/1,25Zeiss Figura
Figura
2.
5,3, 1, 3, Condensador
Objetivos
FuelleNúmero
Longitud
del
objetivo. del dedel
aumentos;
microscopio del
tub0; 3. microscopio
4,
fuerte
Seco Microscopía
160/0,17
40/0,65Zeiss
Grosor 2,
Apertura de
del campo de
ubreobjetos; campo
numérica;
brillante. frontal
Lente
A 2
brillante.
3 Palanca
diafragma
cierre
del
Seco
débil Tornillo
frontal la
lente de
10022 Zeiss de
160/
abertura
y
inmersión.
Aceite
colores.
Lápices de deTela
desuave.
algodón.
Hisopos
Microscopio protista
[Link] tamente
yluminoso.
Mecánica
Óptica
Observar
de Conocer,
y
cada cuidar
de
MATERIAL OBJETIVOS
Partes
Parte. campo uno yaprender
Diafragma
campo de distinguir el
macrométrico y
Diafragma
condensador del Condensador de
microscopio
micrométrico
brazoPie y Tornillos Objetivos
Ocular
Lámpara de brillante.
Revólver Platina Filtro los
un a
microscopio
reinos los utilizar
microorga de
monera,
campocorrec
enfocan Sistemas Recoge Tabla 2
Acercan Conjunto compuesto
Regula Regula Selecciona Cultivo Frotis
2. MÉTODOS
1. I. Portaobjetos
Sostieney Sostiene y de la Cuidados
y
tical,
ColocarTransportar
mesa existanmesa. CUS
Saccharomyces
Staphylococ
cerevisiae,
o envían luz provoquen de
la la de o
lentes aureus teñidos
de de donde tomándolo la mixto
Sostienen la alejany lcantidad uz lentes de la Es base
contrastar
elobjeto. el imagenvirtual. inmersión longitud [Link] vibraciones con
permite del la de Función. conveniente del y
preparaciónsistemarápida lámpara. lámpara (vortex,
se cuidado con el cubreobjetos
de y de
Escherichia
objetivos. condensador de objeto.
luz aumento. microscopio.
microscopio protistas
la deaumento brillante. coloque. ladel Bacillus
al
parte
el óptico. o luz ojo en de otra.
cambio lentamente y
onda agitadoras, o el brazo
o que donde Pueden aceite. la asegurarse
microscopio (agua
óptica. aparatos coli.
delmegaterium
portaobjetos. que concentra de con en
y sale número
estancada).
de permite se
colectan, la unaforma
los el deforma ser etc.)
luz. que que
objeto la secos en en en mano ver 1.
el y
la lalas no la
3. 2. 1. I .
c) b) a) INMERSIÓN. DEDO
DE 5. 4. 3.
b) Enfocar tivo
a) sujetarla
Colocar colores. que mente
traste sador Iluminación Manejo NUNCA Evitar COS. TES agua.
imagen nillo breobjetos
clara. tornillo tivo Cuando
Enfocar
iluminados
excesivamente
disminuyen
iluminados el Subir
AbrirConectar croscopio unpapel copio
perto. demasiado la
Limpiar
a contraste se hisopo parte
micrométrico seco la posible. EL
preparación.
la con hasta o arrastrar, JAMASCON En seda. con
macrométrico débil preparación: sea la observa iuminado cerrar el del DEBE caso exterior el
la en preparación condensador y del ACEITE de una
soporte
preparación necesario,
la las no de tener prender microscopio. sucias Si
(10
preparación. pinzas. permiten yRecuerde las el campo SOLVENTES extremo
algodón las tela
que diafragmna
y un LIMPIARSE golpear LIMPIAR del
hasta x) estructuras pueden mecánico
usando con la DEL lentes que
y los campo visual: sistema
después colocar Acercar en hasta recurrir no
obtener con distinguir
campos
que el lámpara. o impregnado
primero la mayor
los del el OBJETIVO inclinar LAS limpiarse se deje del
el platina del ORGÁNI encuentran óptico
el el el camposadecuada conden tope. CON a
una tor obje obje pocoobjeto el LEN un pelusa
cu los con micros
el y EL excon con con
mi y
6
Alanina
enlace Albúmina
bacteriófagos
C-H glucosa bacteriano
Fosfolipido Poxvirus
citoplásmica
Membrana ribosomabacteriovorus
Bdellovibrio
virus Subtilis
Escherichiacoli BacilluS
Staphylococeus
Treponema
pallidum Fishelsoni
aureusBeggiatoa
gigantea
Epulopiscium
Spirochaeta
plicatilis Paramecium
Amibas
Candida Eritrocitos
sp. humanos Volumen: Longitud:
Saccharomyces
cerevisiae
Medidas 1 1
litro nm 1 um 1 mm 1 1
de ml=1 centímetro
la albicans = = Medidas en
=1000
=1 micrómetros (um),
hepatitis 000 101000
de 000
Angstroms
algunas
moléculas
enlaces. y microlitros Microbiología.
usadas
nanometros (cm)
A mililitros
células, 10
=
18
¢ 35Ånm 24 0.3 260.75 600 50 7
(Å).
5Å 100
|7A 20 70 160 0.1 0.7 0.5 0.8 6 2.5 150 (l) (ml). milímetros
a x x a x x x a x x a um (nm).
a 29 x x x 8 bacterias,
800 80 200 1.2 0.18 1.0 1.0 2.5 55 90 70 um 4 a300
x nm. x5 a200 (mm).
umum x um. 6 um
A 20 nmum. xum. a 250 um um
a 6 (mm)
50 a 13 virus
20 umum.
n n
nL to
olener
una primero
torAuésel el or
guilosr poco Dsinuyencampos ConCuada pe.
obje el cu
el
ar obje Satina
el y objeto onden mi
el
TIVO NEL
Albúmina bacteriano
Fosfolipido
bacteriófagos
citoplásmica
Membrana bacteriovorus
ribosoma Bdellovibrio
Poxvirus
virus Treponema
pallidum Escherichia
Staphylococcus
aureus Subtilis
coli Bacillus
Beggiatoa
gigantea Fishelsoni
Spirochaeta
plicatilis Candida
Alanina
enlace
C-H glucosa Epulopiscium
Saccharomyces
cerevisParamecium
ialbicans rasocitos
ae AmiErisp. tbhumanos
de Medidas
la
hepatitis de
moléculas
[Link]
A
células,
5 7Å100 18 24 160
Ä 35Ånm
20 70 0.3 0.1 0.7 0.5 260.75
0.8 600 pm
6x8 2.5 150 50 7
Å um
a x a x x x a a
X a bacterias, vi
a 80 29 x x 55 x x
800 200 1.2 0.18 1.0 1.0 2.5 70 4200 300
× nm. x 90 a6
20 um. um. um um 5a x um. um
nm x
a 6 250 um pm
500 um
20
a l3
umum.
n
nuevo.
tornillojetivo c)
1. correcto0
cuidado
tener objetivo
el
crométrico. inmersión
enfocar sobre la
cambiar
Seco Hacer preparación d) Sin
Seco Seco tornillo Colocar
seco
débil débil débil esquemas ya de la almicrométrico mover
que inmersiónpreparación
macrométrico. Cuando objetivo
que estáse una
(10 (10 (10 al
se fuerte los
x) ×) x) estar
a pequeña
de veces pretende preparación, cuidadocon tornillos,
de
las buscando nunca (40
inmersión
con hasta
preparaciones por gota x)
observar
Esenfocando
se una el cambiar
y
descuido debe tornillo enfocar
de
Staphylococcus
aureus Saccharomyces
cerevisiae importante el
Seco megaterium
Bacillus enfoque eaceite mover el
Seco Seco mover con intentar
INFORME
observadas. al
fuerte fuerte fuerte se mi de de ob
el
7
(40 (40 (40 irregularidad cubrirlo c) b) a) objetivo Al
presiona
deCon rollado
x) x) x)
Con microscopio
Con limpiar el
indicóterminar
menor
AviseColocarlo
con el la la hasta
demasiado
revólverplatina
anteriormente
lámparay
la sujeto
que funda. a aumento deque
note los
hacer se
Inmersión
(100 x) profesores colocado
en hasta con
apagada, rompe. el
Inmersión
(100 x) en el o
Inmersión
(100 x) el lugardonde eluna portaobjetos
y las
microscopio. tope entregarlo:
en [Link],
de no
asignado inferior. el
el cable como
cualquier lo
objetivo
tiene. con
en el
y
¿Qué 2. 1.
los megaterium
Bacillus ¿Cuáles
electrónica?
croscopía Seco
tres
partesde
la débil
tipos son
las (10
observados?
diferencias
Haga ×)
ultraestructurade
Saccharomyces
cerevisiae los
esquemas bajo
el Seco
CUESTIONARI0
de Escherichiacoli
una microscopio
los fuerte
bacteria siguientes
(40
más x)
solamente Staphylococcus
aureus
microorganismos obvias
entre
se
pueden los
microorganismos Inmersión
(100x)
observar Escherichia
coli
por
mi de
PAGINA 8. 7. 6.
5. 4 3. 2 anereoen
Salvan, Methods
for Murray, Molning Lockin,
Lichtman, Hot, Hansma
tion242-209-216. copy Ford,B.
J.
Occidental
Alemana
Microbiology. toS.C.
and Observar
microbiology en
WEB: F. R M.
El for F. las
K 1985 J. & atomic
K-V.B.
P.1993.
microscopio General G.E W. T. eferencias
1981. las
noworld 1994. J
Washington, & Manual Beveridge. forcenacimiento El fotografias
Elings;LECTURAS
and C. La Confocal Can RECOMENDADAS.
F.
microscopia de microscopy: Iy
deMolecular J ACTIVIDAD 3
efecto Robinow Microscopía Microbiol. 28:1-53.1982. 0. citadas EXTRA al
Microscopy. de
D. Marti microscopio
C la
túnel. Electron microscopía a
Bacterioiogy" 1994 desde application & continuación.
gallery 1987. Editorial C.E.
el
Light princpio. Scientific microscopy: Bracker. electrónico
utml Mundo
microscopy. P. Labor. to Mundo
biology1988.
Científico Gerhardt Carl American Científico
Barcelona. its de
Zeiss, Scanning barrido
developmenttechnology.
Scienceand
pp
(# (ed.)7-20. D-7082 271:30-35 (#132)
64) American España. tunneling y
transmisión
6: In:
1222-1223. Oberkochen. and 13:116-124.
"Manual
Society applica micros
que
in