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“AÑO DE LA RECUPERACIÓN Y CONSOLIDACIÓN DE LA ECONOMÍA PERUANA”
UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA
FACULTAD DE INGENIERIA INDUSTRIAL
ESCUELA DE ING. AGROINDUSTRIAL E INDUSTRIAS ALIMENTARIAS
Práctica 02: Coloraciones
Benites Rumiche Gianella Mavie
CB2425: Microbiología General
Blgo. [Link] Luis Bermejo Benites
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Tabla de contenido
INTRODUCCIÓN..................................................................................................................................... 3
DESCRIPCIÓN DE LA PRÁCTICA............................................................................................................... 3
RESULTADOS.......................................................................................................................................... 6
DISCUSIÓN............................................................................................................................................ 6
CONCLUSIÓN......................................................................................................................................... 7
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS.............................................................................................................. 8
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1. INTRODUCCION
Las tinciones o coloraciones son el proceso por el cual las moléculas de un colorante se adsorben
a una superficie. El uso de colorantes permite cambiar el color de las células de los
microorganismos y poder realizar la observación en microscopio óptico. Dado que las bacterias
son casi incoloras, no presentan contraste con el medio en el cual se encuentran suspendidas y no
pueden observarse claramente sin algún tratamiento previo. De acuerdo a la reacción que ocurre,
existen diferentes tipos de tinción: tinción simple y diferencial. En la presente practica
aprenderemos a realizar los dos tipos, para así reconocer en que situaciones debemos usar cada
una de ellas.
2. DESCRIPCIÓN DE LA PRÁCTICA
I. Materiales:
Instrumentos de laboratorio:
o Laminas
o Asas de siembra
o Mechero
o Portaobjetos
o Microscopio
Reactivos y Medios:
o Agar Nutritivo
o Agua destilada
o Aceite de cedro
o Alcohol
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o Cristal Violeta
o Lugol
o Acetona
o Verde malaquita
o Safranina
II. Tinciones
Coloración simple: Se usa un solo colorante, ell colorante utilizado sirve solo
para denotar la morfología celular.
o Procedimiento
Calentar el asa de siembra para posteriormente introducirla en
el agar nutritivo.
Esterilizar la lámina.
Verter lo del asa de siembra en la lámina y agregar una gota de
agua destilada.
Calentar la lámina hasta que no haya agua.
Verter el cristal violeta y volver a calentar
Verter aceite de cedro y ponerlo al microscopio.
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Coloración diferencial: El colorante utilizado pone de manifiesto diferencias
entre células bacterianas o entre partes de una misma célula. Estas técnicas
utilizan más de un colorante o bien ciertos reactivos complementarios para la
tinción.
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o Coloración de Gram: La reacción de Gram es un método empírico de
tinción, fácil de aplicar y que distingue a las bacterias en dos grupos
respecto de la composición química de su pared celular.
Procedimiento:
Hacer una coloración simple con cristal violeta.
Aplicar lugol y lavar.
Aplicar acetona y lavar.
Aplicar safranina, lavar y calentar
Aplicar aceite de cedro y observar al microscopio.
o Coloración de esporas: Las esporas son células en reposo, formadas
dentro de una célula vegetativa mediante un proceso especial de
división. Después de su maduración la espora es liberada por lisis de la
célula madre que la rodea.
La pared de las esporas es relativamente impermeable, sin embargo,
los colorantes pueden penetrarla si se calienta la preparación y la
misma impermeabilidad sirve para prevenir la decoloración. Las
esporas se tiñen con verde de malaquita o carbofuxina.
Procedimiento:
Hacer una coloración simple con verde malaquita.
Calentar y posteriormente lavar.
Aplicar safranina, lavar y calentar.
Verter aceite de cedro y observar en el microscopio
3. RESULTADOS
A través de los diferentes tipos de tinciones realizados, hemos podido observar distintas
características de las bacterias. En la coloración simple con cristal violeta, se identificó la
morfología de Escherichia coli, mostrando una forma bacilar (alargada). En la coloración de
esporas, además de confirmar que E. coli no forma esporas, se pudieron observar otras bacterias
presentes en la muestra, con formas también alargadas, que se visualizaron con mayor detalle
gracias al contraste entre las esporas (de color verde) y las células vegetativas (de color rojo)..
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4. DISCUSIÓN
Las distintas tinciones realizadas nos permitieron observar mejor las características de
Escherichia coli. Con la coloración simple, pudimos ver su forma alargada, aunque sin muchos
detalles. La tinción de Gram mostró que Escherichia coli es una bacteria gram negativa, ya que
se tiñó de color rosado, lo que indica que tiene una pared celular delgada y una membrana
externa.
En la tinción de esporas se utilizó otra muestra bacteriana diferente, y no Escherichia coli. En
esta preparación se observaron bacterias con forma alargada y algunas estructuras teñidas de
verde, lo que indica la presencia de esporas. Esto permitió conocer mejor la capacidad de algunas
bacterias para formar esporas como forma de resistencia.
5. CONCLUSIÓN
Las técnicas de tinción aplicadas nos permitieron observar y diferenciar distintas bacterias.
Identificamos a Escherichia coli como un bacilo gram negativo y, mediante la tinción de esporas
con otra muestra, pudimos reconocer bacterias esporuladas. Estas prácticas nos ayudaron a
comprender mejor la estructura y clasificación de las bacterias en el laboratorio..
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REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
([Link]
[Link])
([Link]
[Link])
Madigan, M. T., Bender, K. S., Buckley, D. H., Sattley, W. M., & Stahl, D. A. (2018). Brock:
Biología de los microorganismos (15.a ed.). Pearson.
