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Mapas de Restricción

El documento presenta varios ejercicios sobre la digestión de ADN lineal y circular con diferentes enzimas de restricción, solicitando calcular los tamaños de los fragmentos resultantes de estas digestiones. Se abordan casos de digestiones individuales, dobles y triples, así como la comparación entre plásmidos circulares y fragmentos lineales. Además, se incluye un ejercicio sobre la creación de mapas de restricción y las diferencias esperadas en patrones de bandas entre ADN lineal y circular.

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El documento presenta varios ejercicios sobre la digestión de ADN lineal y circular con diferentes enzimas de restricción, solicitando calcular los tamaños de los fragmentos resultantes de estas digestiones. Se abordan casos de digestiones individuales, dobles y triples, así como la comparación entre plásmidos circulares y fragmentos lineales. Además, se incluye un ejercicio sobre la creación de mapas de restricción y las diferencias esperadas en patrones de bandas entre ADN lineal y circular.

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1.

- Si estuviéramos trabajando con un DNA lineal como el que se muestra en la figura


siguiente, ¿cuál es el tamaño en pares de bases (pb) de los fragmentos de DNA que se
obtienen al realizar las digestiones con la enzima d, con la enzima e, con la enzima f y
con las distintas combinaciones entre las mismas? Los números corresponden al número
de pares de bases del DNA (en total su tamaño es de 1500 pares de bases).

Enunciado:

EJERCICIO 2-

Tienes un fragmento de ADN lineal de 2000 pb con los siguientes sitios de corte para
tres enzimas de restricción:

• Enzima A corta a los 400 pb y 1600 pb.


• Enzima B corta a los 800 pb y 1200 pb.
• Enzima C corta a los 1000 pb.

Preguntas:

1. ¿Cuáles son los tamaños de los fragmentos de ADN si se corta con cada enzima
individualmente?
2. ¿Cuáles son los tamaños de los fragmentos si se hace una doble digestión con:
o AyB
o AyC
o ByC
3. ¿Cuáles son los tamaños de los fragmentos si se hace una digestión con las tres
enzimas A, B y C?

Ejercicio 3: Análisis de Plásmidos Circulares

Enunciado:

Un plásmido circular de 5000 pb tiene los siguientes sitios de corte:


• Enzima D corta a los 1000 pb.
• Enzima E corta a los 2000 pb y 4000 pb.

Preguntas:

1. ¿Cuántos fragmentos se producen si se corta solo con D?


2. ¿Cuántos fragmentos se producen si se corta solo con E?
3. ¿Cuántos fragmentos se producen si se corta con D y E al mismo tiempo?
4. Escribe los tamaños de todos los fragmentos generados.

Ejercicio 4: Comparación de Digestión Lineal y Circular

Enunciado:

Tienes dos moléculas de ADN:

• Un plásmido circular de 3000 pb.


• Un fragmento lineal de 3000 pb.

Ambos tienen los siguientes sitios de corte:

• Enzima F corta a los 500 pb, 1500 pb y 2500 pb.

Preguntas:

1. ¿Cuántos fragmentos se producen si se corta el plásmido circular con F?


2. ¿Cuántos fragmentos se producen si se corta el fragmento lineal con F?
3. ¿Por qué la digestión del ADN circular produce un número diferente de
fragmentos que el ADN lineal?

Ejercicio 5: Mapas de Restricción

Enunciado:
Un fragmento de ADN lineal de 6000 pb tiene sitios de corte para tres enzimas:

• Enzima G corta a los 1000 pb y 3000 pb.


• Enzima H corta a los 2000 pb y 5000 pb.
• Enzima I corta a los 4000 pb.

Preguntas:

1. Dibuja un mapa de restricción indicando las posiciones de corte para cada


enzima.
2. ¿Cuáles son los tamaños de los fragmentos generados si se hace una digestión
con las tres enzimas G, H y I?
3. ¿Qué diferencias esperarías en el patrón de bandas si este fragmento fuera
circular en lugar de lineal?

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