1.
Conjugación
La conjugación es un proceso de transferencia genética directa entre bacterias, mediado
por contacto físico.
Participantes:
o Bacteria donadora: porta un plásmido conjugativo (como el plásmido
F en E. coli).
o Bacteria receptora: no posee el plásmido.
Mecanismo:
1. La bacteria donadora forma un pili sexual (o pili F) que se une a la
receptora.
2. El pili retrae, acercando ambas células.
3. Se forma un poro de conjugación.
4. El plásmido F se replica por el mecanismo de transferencia por hebra
simple ("rolling circle").
5. Una hebra se transfiere a la receptora y se replica en ella para completar
el plásmido.
Resultado: ambas células terminan con una copia del plásmido F,
convirtiéndose en potenciales donadoras.
Importancia:
o Puede transferir genes de resistencia a antibióticos (plásmidos R).
o En cepas Hfr (alta frecuencia de recombinación), el plásmido F se integra
al cromosoma y puede transferir genes cromosómicos.
🧬 2. Transformación
La transformación consiste en la captación e incorporación de ADN libre del ambiente
por parte de una bacteria competente.
Bacteria competente:
o Algunas especies lo son naturalmente (Streptococcus
pneumoniae, Bacillus subtilis).
o Otras pueden ser inducidas artificialmente (como E. coli en laboratorio).
Mecanismo:
1. El ADN extracelular, generalmente de bacterias lisadas, se une a
receptores de la membrana bacteriana.
2. Una hebra del ADN es degradada; la otra penetra en la célula.
3. Se integra en el genoma bacteriano por recombinación homóloga.
Aplicaciones:
o Herramienta crucial en ingeniería genética.
o Proceso natural para adquisición de nuevas capacidades (p. ej.,
resistencia, virulencia).
🦠 3. Transducción
La transducción implica la transferencia de ADN bacteriano mediada por
un bacteriófago (virus que infecta bacterias).
Tipos:
o Generalizada:
Durante el ciclo lítico, fragmentos aleatorios del ADN bacteriano
pueden ser empaquetados por error en cápsides virales.
El fago transductor infecta otra célula y transfiere ese ADN, que
puede recombinarse con el cromosoma del receptor.
o Especializada:
Ocurre en fagos templanados (como λ en E. coli) durante el ciclo
lisogénico.
Al salir del cromosoma, el profago puede llevar consigo genes
adyacentes al sitio de inserción.
Estos genes son transferidos junto con el ADN viral.
Importancia:
o Fuente de variabilidad genética.
o Explica la diseminación de toxinas en bacterias patógenas (ej. toxina
diftérica).
Libro
Las bacterias intercambian material genético mediante tres mecanismos diferentes,
todos los cuales implican algún tipo de transferencia unidireccional de recombinación
de DNA transferido y el DNA bacteriano.
1. La conjugación se produce cuando el material genético pasa directamente de
una bacteria a otra (fig. 9-7a). En la conjugación, las bacterias se encuentran
próximas entre sí y se forma un tubo entre ellas. Un plásmido o un cromosoma
puede pasar de una célula (la donante) a la otra (la receptora). Debido a la
conjugación, puede haber entrecruzamiento, que produce una recombinación del
DNA transferido y el cromosoma de la célula receptora. En la conjugación, se
transfiere solo el DNA de una célula al receptor, sin acontecimiento recíproco
del material genético.
2. La transformación tiene lugar cuando una bacteria capta el DNA del medio en
el que está creciendo (fig. 9-7b). En el caso de la transformación, puede haber
recombinación entre los genes introducidos y los genes cromosómicos.
3. La transducción se produce cuando virus bacterianos (bacteriófagos)
transportan DNA de una bacteria a otra (fig. 9-7c). En el interior de la bacteria,
el DNA recién introducido puede recombinarse con el cromosoma bacteriano.
No todas las especies bacterianas muestran los tres tipos de transferencia
genética.
La conjugación es más frecuente en algunas especies que en otras. En
muchas especies de bacterias, la transformación tiene lugar en un grado
limitado, pero las técnicas de laboratorio aumentan la tasa de captación del
DNA. La mayoría de los bacteriófagos tienen un espectro limitado de huéspedes,
de manera que la transducción suele producirse solo entre bacterias de la
misma especie o de especies estrechamente relacionadas.
Estos procesos de intercambio genético de las bacterias recuerdan a la
reproducción sexual de los eucariotas diploides en dos aspectos importantes.
Primero, el intercambio de DNA y la reproducción no están acoplados en las
bacterias; a menudo las bacterias se reproducen (presentan división celular) sin
recibir ningún DNA de otra célula. Segundo, el material genético donado que no
se recombina con el DNA del huésped suele ser degradado, de manera que la
célula receptora continúa siendo haploide. Es posible utilizar cada tipo de
transferencia genética para mapear genes, como se analizará en las siguientes
secciones.
Una cepa de E. coli era auxótrofa para los aminoácidos treonina y leucina, y la vitamina
tiamina (thr⁻ leu⁻ thi⁻); la otra cepa era auxótrofa para la biotina, fenilalanina y cisteína
(bio⁻ phe⁻ cys⁻). Cada cepa tenía, por tanto, diferentes mutaciones que impedían su
crecimiento en medio mínimo.
Cuando mezclaron ambas cepas en un medio nutritivo completo que contenía todos los
nutrientes necesarios, y después sembraron la mezcla en medio mínimo (donde ninguna
cepa por sí sola podía crecer), observaron que crecían algunas colonias. Esto solo podía
explicarse si alguna recombinación genética hubiera ocurrido, produciendo bacterias
con todos los genes funcionales necesarios para sintetizar los seis compuestos —una
combinación thr⁺ leu⁺ thi⁺ bio⁺ phe⁺ cys⁺— que ahora podían crecer en medio
mínimo.
Para verificar que no era resultado de mutaciones espontáneas, sembraron por separado
las cepas originales en medio mínimo, y no crecieron. Esto demostró que había
ocurrido transferencia genética entre bacterias, fenómeno que llamaron conjugación.
Una cepa protótrofa es una cepa bacteriana (o de otro microorganismo) que posee
todos los genes funcionales necesarios para sintetizar sus propios compuestos
esenciales a partir de fuentes mínimas en el medio de cultivo.
🧬 Características clave de una cepa protótrofa:
Síntesis autónoma de aminoácidos, vitaminas, nucleótidos, etc.
Puede crecer en medio mínimo, es decir, un medio que solo contiene una
fuente de carbono (como glucosa), sales minerales y agua.
Es el tipo silvestre o natural de la especie, sin mutaciones en rutas biosintéticas
esenciales.
🔬 Ejemplo en el contexto del experimento de Lederberg y Tatum:
Cuando ellos mezclaron dos cepas auxótrofas (cada una con mutaciones distintas en
genes biosintéticos), observaron que algunas bacterias resultantes podían crecer en
medio mínimo.
🔁 Esto indicó que habían reconstituido por recombinación todos los genes necesarios,
generando una cepa protótrofa:
Cepa recombinante: thr⁺ leu⁺ thi⁺ bio⁺ phe⁺ cys⁺
Este tipo de cepa no existía en ninguna de las dos cepas parentales por separado, y
solo pudo formarse mediante intercambio genético: evidencia clara de la conjugación
bacteriana.
Transformación de bacterias
Una segunda manera en la que el DNA puede transferirse entre
bacterias es a través de la transformación (véase fig. 9-7b). El medio
circundante como su incorporación en un cromosoma bacteriano o en
un plásmido. Se puede producir en forma natural cuando las bacterias
muertas se degradan y liberan fragmentos de DNA al medio. En el
suelo y los ambientes marinos, esta puede
ser una vía importante de intercambio genético para algunas
bactenias.
MECANISMO DE TRANSFORMACIÓN Se dice que las células que
captan DNA a través de sus membranas son competentes. Al-
gunas especies de bacterias captan DNA con mayor facilidad que
otras: la etapa de crecimiento, la concentración de DNA disponi-
ble en el medio y otros factores ambientales influyen en la com-
petencia. No es preciso que el DNA que capta una célula bacte-
nana sea bacteriano: las células competentes pueden captar casi
cualquier tipo de DNA (bacteriano o de otro tipo) en condiciones
apropiadas.
A medida que un fragmento de DNA ingresa en la célula en el
curso de la transformación (fig. 9-18), se rompe una de las cade-
as, mientras que la otra atraviesa la membrana y puede aparear-
secon una región homóloga e integrarse en el cromosoma bacte-
riano. Esta integración requiere dos eventos de entrecruzamiento,
después de lo cual el DNA monocatenario restante es degradado
por enzimas bacterianas. En algunas bacterias, DNA bicatenario
atraviesa la membrana celular y se integra en el cromosoma bac-
lenano.
Los genetistas bacterianos han desarrollado técnicas para
aumentar la frecuencia de transformación en el laboratorio a fin
de introducir fragmentos particulares de DNA en las células.
Asimismo, han desarrollado cepas de bacterias que son más com-
petentes que las células de tipo silvestre. El tratamiento con clo-
tro de calcio, el choque térmico o un campo eléctrico tornan las
membranas bacterianas más porosas y permeables al DNA, y la
eficiencia de la transformación también se puede aumentar utili-
rando altas concentraciones de DNA. Estas técnicas permiten que
los investigadores transformen bacterias como E. coli, que no pre-
sentan competencia natural.
