T-2 “LA MATERIA VIVA Y SU ESTUDIO”
Materia- viva
-no viva ( materia que se ha muerto)
1. La materia viva.
1.1 Técnica de estudio.
Técnicas de estudio ->Macroscópicas- a simple vista , ningún aparato.
- por dentro o por fuera
- in vivo-por dentro y por fuera.
- In situ- en el momento , en el sitio.
- In vitro- fuera del órgano .
->> mimetizando condiciones in vivo.
->> sin mimetizar. Electrónico(1)
-> Microscópicas –requiere aparatos –microscopio óptico(2)
-lupa.
(1) Electrónico- preparaciones no vivas(chorros de electrones).
-mas aumentos que óptico.
-ultraestructural (observación).
(2) Ópticos-estructural.
1.2 Terminología usual
Morfología- forma , a simple vista.
Anatomía-partes de las que consta.
Fisiología-procesos dinámicos.
2.Estudio estructuras :microscopia óptica.
-Poder de resolución- capacidad máxima del aparato para distinguir 2 ptos.
-Aumnetos- aumento objetivo x aumneto ocular.
-Límite de resolución-distacia mínima de 2 ptos en el espacio 2x 10
-Apertura numérica- capacidad para concentrar la luz , que depende de la composición de la
lente.
-objetivo inmersión- aceite de cedro- se sumerge la lente pero se pierde nitidez (objetivo+ largo)
2.1 Tipos de microscopios ópticos e imágenes obtenidas.
Microscopio:
-de campo brillante o claro- tinción (orceina acética)
- de campo oscuro- a oscuras, para observaciones con pigmentos juega con la cantidad de luz
(condensador).
-contraste de fase- juega con la refracción de la luz.
interferencia- se puede medir la masa de las muestras.
interferencia diferencial-vision 3D( se acerca a la de el micr. Electrónico).
-de fluorescencia-para moléculas autofluorescentes o con colorante.
-de polarización- vibración de la luz en un campo- descomposición de la luz.
3.Estudio de estructuras : microscopia electrónica.
Uso solo por profesionales.
-2 tipos –transmisión(sombreado metálico)
-barrido(criofractura : congelación de muestra rápidamente).
-estructuras de hasta- 10 A .
4. Procesado del material para la microscopia óptica.
-Extracción de mezcla y fijación ( estabilización de estructuras celulares) física (congelación)
química(líquidos fijadores).
-Deshidratación e incluso parafina( tras baño xileno o tolueno).
-Obtención de cortes y colocación en el porta.
-Desparafinado (xileno o tolueno) hidratación y tinción.
- deshidratación ( sumergir en etanol de gradación creciente hasta alcohol) y montaje (cubre).
5. Procesado de material para microscopia electrónica.
-Extracción y fijación de la muestra.
-Deshidratación e incluso en resinas.
-obtención de cortes – ultramicrótomo.
-contrastado de cortes a sales de metales pesados – aumentar contraste.
-observacion de muetras.
6. Métodos de estudios de los constituyentes.
1. Análisis químico-primero
2. cultivo celular -> solo se hace primero para crear una población de estudio.
3. se repite análisis químico(dependiendo del compuesto de estudio).
-precipitación, filtración y decantación( elementos en disolución queda sedimentación)
- centrfugación- distinto nivel de sedimentación- fases ( depende masa molecular )
cromatografía- necesita – una fase fija (adsorvente) papel de filtro , gel de proliactina.
- una fase movil(liquida)
(1) de gases ( gas – fase movil)
(2) en capa fina
(3) lipídica
- electroferensisi – variación cromatografía – pero interviene electricidad ,las fases se separan
por distinto potencial eléctrico.
- radioisotopos- marcaje radioactivo – desintegración –libera energía.
- espectometria- absorve energia desprende luz.
- Autoradiografia- para localizar isótopos.
7. Descripción química de la materia viva.
Bioelementos: son los que forman partes de los seres vivos.
-primarios C, H, N, O, S, P
e.biogénicos-secundarios Ca, K ,Na ,Mg ,Fe ,Cl
bioelementos esenciales Mn, B, Zn, Cu, F, I , Si, Cr, Co.
Oligoelementos no esenciales los demas.
Inorgánicos sales minerales y agua.
Pcipios
Inmediatos Organicos glúcidos , lípidos, proteínas y ac. Nucleicos.
