Universidad de Cartagena Código:
Facultad de Química Farmacéutica
Laboratorio de Fisicoquímica Versión:
Guía de laboratorio N° 6 Fecha:
Distribución de equilibrio simple
FUNDAMENTOS
En la práctica, el coeficiente de reparto de numerosas sustancias entre los disolventes
octanol-agua (Ko/a) es una propiedad muy útil ya que proporciona una medida de la
tendencia termodinámica de dicha sustancia a disolverse preferentemente en un medio
acuoso o no acuoso. Este parámetro proporcionará, por tanto, una medida del balance
hidrofílico – lipofílico de la sustancia en cuestión. Este balance tiene gran importancia
medioambiental y biológica ya que se utiliza para determinar el destino final de las
sustancias químicas en el medio ambiente y en los seres vivos. Un ejemplo es la
bioacumulación de determinados contaminantes en pescado o en otros organismos. Por
otro lado, una de las vías más importantes de absorción celular de fármacos es mediante
su disolución en lípidos.
La velocidad de este paso de los fármacos al interior de la célula viene definida por el
concepto de liposolubilidad que es medido por el coeficiente de reparto lípido/agua. A
mayor liposolubilidad mayor velocidad de penetración y mayor rapidez de acción. Cuando
una sustancia se distribuye entre dos líquidos miscibles entre sí o ligeramente miscibles, la
relación de las concentraciones de dicha sustancia en las dos fases será constante,
independientemente de la cantidad de soluto que se disuelva o del volumen de líquido
empleado. Esta distribución está sujeta a las siguientes condiciones:
a) El reparto se debe efectuar a temperatura constante durante todo el proceso, puesto
que la temperatura influye sobre la cantidad de soluto disuelta en cada líquido, de forma
que para cada temperatura de trabajo el equilibrio de distribución del soluto en los
distintos disolventes será distinto.
b) No debe producirse ninguna reacción química entre ninguno de los componentes del
sistema, ya que, si se forma un nuevo producto, esto falsearía los datos referidos a las
concentraciones del soluto inicial.
c) Las disoluciones deben ser diluidas. A altas concentraciones aparecen interacciones
entre soluto y disolventes que interfieren en la proporción en la que el soluto se distribuye
en las distintas fases. Bajo estas condicionantes podemos formular la siguiente ley de
distribución que podemos considerar un caso particular de la Ley de Henry:
K=C1/C2
C1 = Concentración del soluto en la fase I
C2 = Concentración del soluto en la fase II
K = Constante adimensional denominada Coeficiente de Reparto (también se le puede
denominar coeficiente de Distribución o de Partición).
A efectos prácticos, esta ley permitiría predecir la concentración final de soluto en las
distintas fases, siempre y cuando conozcamos el valor del Coeficiente de Reparto para un
sistema determinado y estemos trabajando bajo las condicionantes en las cuales se
cumple esta ley de distribución.
Para un soluto A que se distribuye entre una fase acuosa y una fase orgánica de acuerdo
con el equilibrio.
A una temperatura dada la constante de equilibrio K dada por
Se le conoce como el coeficiente de partición o distribución. Los términos en corchetes
representan la actividad de las especies en la fase orgánica y en la fase acuosa, pero en
ocasiones se utiliza la concentración molar sin cometer mucho error. En otras ocasiones la
cantidad en corchetes se relaciona a la solubilidad del soluto en cada disolvente.
2. Objetivos de la práctica.
• Estudiar la distribución de equilibrio de un soluto en dos disolventes inmiscibles.
• Demostrar la validez de la ley de acción de masa para sistemas de equilibrios
heterogéneos.
3. Materiales, reactivos y equipos
Materiales Reactivos
• Embudos de separación de 125 mL • Agua desionizada
• Matraces volumétricos de 250 mL • Solución acuosa de ácido acético
• Pipeta aforada de 25 mL 0.5, 0.25, 1 M
• Bureta de 25 mL • Ácido acético
• Cilindro graduado de 100 mL • Éter etílico
• Vaso de precipitado de 250 mL • Hidróxido de sodio 0.5 M
• Balones aforados de 100 mL(2) • Indicador de fenoftaleína
• Dispensador • Ftalato ácido de potasio (patrón
• Pipeta graduada de 1 mL primario).
• Pipeta graduada de 10 mL
• Soporte,
• aro
• pinza para bureta
• Espátula de punta pequeña
3. Precauciones
• El NaOH es una sustancia cáustica, evite el contacto con piel y mucosas. Causa
quemaduras en piel y ojos e irritación severa en tracto digestivo y respiratorio
con posibles quemaduras.
• ÄCIDO ACÉTICO: líquido y vapor inflamables, corrosivo, causa severa irritación y
quemaduras de piel, ojos, tracto respiratorio y digestivo.
• ETER ETILICO: Es un líquido inflamable, muy volátil y que puede formar peróxidos
explosivos, por lo que existe un alto riesgo de fuego y explosión.
• ACETATO DE ETILO: Altamente inflamable. Por evaporación de esta sustancia a
20°C se puede alcanzar bastante rápidamente una concentración nociva en el
aire.
4. Disposición de residuos:
Las soluciones serán vertidas en recipientes debidamente identificados y proporcionados
por el auxiliar de laboratorio.
No descarte los residuos por el desagüe.
5. Método experimental
5.1. Preparación y estandarización de la solución de NaOH 0.5N
Prepare una solución de NaOH 0.5 N con la ayuda de su profesor y estandarícela por
medio del siguiente procedimiento:
Para la estandarización de la disolución de NaOH se empleará el ftalato ácido de potasio
(patrón primario). Para ello se pesará por duplicado de manera exacta en una balanza
analítica0,4 g de este reactivo (hacer los pesajes uno a uno, una vez acabe la valoración),
una vez pesado, el ftalato ácido de potasio en el Erlenmeyer le serán añadidos 25 mL de
agua destilada para disolverlo. A continuación, la solución resultante se le adicionaran
tres gotas de solución de fenolftaleína. En paralelo, se cargará la bureta con la solución de
NaOH a la cual se le quiere encontrar su concentración y se procederá a valorar la solución
de ftalato ácido de potasio preparada previamente hasta que esta adquiera una tonalidad
rosa persistente.
Anotar el volumen gastado (por triplicado) calcular la media y obtener el factor (F) de la
disolución de NaOH.
Cálculos:
N = 0.5 x F
5.2. Preparación y estandarización de una solución de ácido acético 1 N
Con la solución estandarizada de NaOH 0.5 N estandarizar la solución de ácido acético 1 N.
El NaOH se agregará a la bureta y se tomarán 5 mL de acido acético, se agregaran tres
gotas de fenolftaleína y se obtendrá le volumen donde cambie de color
Calculos
5.3. Preparación de soluciones 0.5M y 0.25M de ácido acético.
5.4. Extracción simple.
Transfiera exactamente 25 mL (con pipeta aforada) de la solución de ácido acético 1 M a
un embudo de separación de 125 mL. Haga lo mismo para las soluciones de 0.5M, 0.25M
de ácido acético. Usando una pipeta limpia, añada 25 mL de éter a cada embudo. Mezcle
las soluciones con agitaciones continuas y permita que lleguen a equilibrio. Transfiera la
fase acuosa de cada embudo a un envase limpio y dejando toda la fase orgánica en el
embudo de separación. Descarte la interfase.
Titule la porción acuosa con base valorada en triplicado. Use la bureta con NaOH 0.5 M
para titular que fue estandarizado en el punto 5.1. Puede titular la fase orgánica si quiere
corroborar la cantidad de ácido acético que permanece en esa fase, pero debe usar las
mismas porciones de volumen que usó en la fase acuosa.
6. Resultados a entregar
• Calcule la concentración del NaOH preparado y la concentración de ácido acético.
Incluya los cálculos
• Calcule el coeficiente de reparto de las tres mezclas de ácido acético y éter etílico.
Incluya los cálculos realizados
7. Respuestas a las preguntas para entregar
7.1. Explíquese la importancia que tiene una continuada agitación de los embudos de
decantación, así como el reposo necesario antes de proceder a analizar el contenido
de especies en ambas fases.
7.2. Que pasaría si al sistema se le aumenta la temperatura desde 30 oC hasta 80 oC,
durante el proceso de agitación.
7.3. Comparar los valores de Ka/a obtenidos para las distintas concentraciones de ácido.
¿Existe alguna tendencia clara? ¿Tiene sentido representar Ka/a en función de la
concentración de HAc y calcular su valor a dilución infinita por extrapolación a
concentración cero? ¿Por qué? Discutir la respuesta.
7.4. Comparar el valor de Ka/a obtenido con el Ko/a (coeficiente de reparto octanol/agua,
tabulado como logPow= -0.31) y explicar la diferencia en términos de la distinta afinidad
del ácido por los dos disolventes orgánicos.
8. Trabajo a entregar
En resumen El coeficiente de reparto entre n -octanol y agua se conoce como coeficiente
de reparto n -octanol-agua, o Kow . También se hace referencia con frecuencia con el
símbolo P, especialmente en la literatura inglesa. También se conoce como relación de
partición n -octanol-agua.
K ow , al ser un tipo de coeficiente de partición, sirve como una medida de la relación entre
la lipofilicidad (solubilidad en grasas) y la hidrofilicidad (solubilidad en agua) de una
sustancia. El valor es mayor que uno si una sustancia es más soluble en disolventes grasos
como el n-octanol, y menor que uno si es más soluble en agua.
Aplicación a la farmacología
En las ciencias químicas y farmacéuticas, ambas fases suelen ser disolventes. Más
comúnmente, uno de los solventes es el agua, mientras que el segundo es hidrófobo,
como el 1-octanol. Por lo tanto, el coeficiente de partición mide qué tan hidrófila
("amante del agua") o hidrófoba ("temerosa del agua") es una sustancia química. Los
coeficientes de partición son útiles para estimar la distribución de drogas dentro del
cuerpo. Los fármacos hidrofóbicos con altos coeficientes de partición octanol-agua se
distribuyen principalmente en áreas hidrofóbicas como las bicapas lipídicas de las
células. Por el contrario, los fármacos hidrofílicos (bajos coeficientes de partición
octanol/agua) se encuentran principalmente en regiones acuosas como el suero
sanguíneo.
Problema
En un experimento de laboratorio se agrego en un beaker 10 mililitros de sangre y 10 mL
de fosfolípidos (componente de la bicapa de la membrana celular de las células)(ver
figura inferior)
A estos dos líquidos inmiscibles se le adiciono 2 mL con 5 ppm de Tiamina, se agito
durante 5 minutos, al final se encontró en la fracción de la sangre 8x10-3 mg de tiamina.
Pregunta
1 ¿Cuál es el coeficiente de reparto de la tiamina, en el sistema expuesto en el problema?
2. En el caso de que a una persona se le suministre tiamina, donde existirá mayor
proporción de encontrar a la tiamina en el cuerpo humano: en el plasma sanguíneo o en
los componentes de la pared celular de las células. Explique su respuesta.
6. Referencias bibliográficas.
• L.M. Johnson, Z. Li, A.J. LaBelle, F.S. Bates, T.P. Lodge, M.A. Hillmyer, Impact of
polymer excipient molar mass and end groups on hydrophobic drug solubility
enhancement, Macromolecules, 50, 1102 (2017).
• D.P. Yeggoni, M. Gokara, D.M. Manidhar, A. Rachamallu, S. Nakka, C.S. Reddy, R.
Subramanyam, Binding and molecular dynamics studies of 7-hydroxycoumarin
derivatives with human serum albumin and its pharmacological importance, Mol.
Pharmaceutics, 11, 1117 (2014).
