MICROBIOLOGIA DE LAS IAAS
ELEARNING CENTER LTDA.
INFECCIONES ASOCIADAS A LA ATENCION EN SALUD
Son aquellas que se contraen en un hospital u otro centro de salud
que no estaba presente o en incubación en el momento del ingreso
del paciente o en el momento en que se produce la concurrencia
del paciente al centro de salud
MICROBIOLOGIA
Es la ciencia que estudia los microorganismos en su naturaleza, vida y acción.
El término etimológicamente, es de amplio significado, pero suele utilizarse en
sentido limitado para comprender determinadas formas microscópicas de vida.
ESCHERICHIA COLI
CLASIFICACIÓN DE LOS MICROORGANISMOS.
DEFINICIONES DE MICROORGANISMOS
Bacterias: Microorganismos que pueden crecer dentro y fuera de las células, se duplican por
fisión, poseen ADN y ARN.
• Staphylococcus aureus
• Escherichia coli
Virus: Microorganismos submicroscópicos, son parásitos intracelulares, usan maquinaria
celular para replicar ADN y ARN.
• Rotavirus
• Virus Hepatitis B
• Adenovirus
DEFINICIONES DE MICROORGANISMOS
Hongos: Microorganismos de forma filamentosa o de levadura, crecimiento e xtracelular, se
duplican por fisión
• Candida albicans
• Aspergillus fumigatus
Protozoos: Microorganismos unicelulares, se duplican por fisión, crecen dentro y fuera de las
células, tienen un ciclo de vida complejo con reservorios animales.
• Trypanosoma cruzi
• Entamoeba hystolitica
CLASIFICACIÓN DE MICROORGANISMOS
Patógenos Verdaderos:
• La acción patógena se debe a factores dependientes del microorganismo
Patógenos Oportunista:
• La acción patógena es favorecida por las condiciones del huésped
COLONIZACIÓN VERSUS INFECCIÓN
Colonización:
• ES LA PRESENCIA DE BACTERIAS QUE ESTANDO PRESENTE EN UNA PERSONA NO ORIGINAN UNA RESPUESTA DEL HUESPED
Infección:
• ES LA RESPUESTA DEL HUESPED FRENTE A LA PRESENCIA DE BACTERIAS.
Importante: todas las infecciones comenzaron como una colonización, pero no todas las colonizaciones terminan en
infección.
LUGARES DE AISLAMIENTO DE ALGUNAS BACTERIAS
EPIDEMIOLOGIA DE BACTERIAS PRODUCTORA DE IAAS
CLASIFICACIÓN DE LAS BACTERIAS
DETALLES DE LA CLASIFICACIÓN DE BACTERIAS
Organelos de locomoción: Flagelos => Metabolismo: Depende de la forma en que
Apéndices proteicos, pueden ser: utilizan los carbohidratos.
• Monótricos: Uno en posición polar. • Fermentadores => Lactosa (+) y Lactosa (-
• Lofótrico: Varios en posición polar. )
• Perítricos: Distribuidos alrededor de toda • No fermentadores
la célula
DISTINTAS FORMAS DE BACTERIAS
TINCIÓN DE GRAM
Es la principal tinción diferencial empleada en microbiología para visualizar bacterias.
Fue desarrollada en 1884 por el bacteriólogo danés Christian Gram.
Permite no solo ver la morfología celular de la bacteria sino también poder diferenciarlas en bacterias Gram positivas las cuales se
visualizan de color morado y las bacterias Gram negativas que se ven de color rosado o rojo
Gram + Gram -
TINCIÓN DE GRAM
LAS BACTERIAS LAS PODEMOS CLASIFICAR SEGÚN SU
MORFOLOGÍA Y CAPACIDAD DE TEÑIRSE EN:
ALGUNOS EJEMPLOS DE TINCIÓN DE GRAM.
ROL DEL LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA
IDENTIFICACIÓN DE LOS AGENTES CAUSALES DE INFECCIÓN.
ESTUDIO DE LA SENSIBILIDAD DE ESTOS MICROORGANISMOS.
ENTREGAR INFORMACIÓN AL PROGRAMA DE CONTROL DE INFECCIONES, ESPECÍFICAMENTE EL
RESUMEN DE LA MICROBIOTA INTRAHOSPITALARIA.
TOMA DE MUESTRAS
TOMA DE MUESTRAS BACTERIOLÓGICAS ASPECTOS
GENERALES
Desinfectar el sitio de Usar material estéril y técnica Volumen de muestra: pequeño
obtención (1 – 2cc, 1 - 5 gr) Muestra óptima es el fluido
aséptica
Técnica óptima es la punción transporte inmediato, si no es
Si se usan tórulas, usar medio posible, dejar a temperatura
y aspiración de transporte ambiente (excepto orina)
TOMA DE MUESTRAS
• Antibióticos previos
Los factores que •
•
Desecación
Caída de la temperatura
inciden • Disminución del ph
directamente en •
•
Enzimas bactericidas del pus
Tiempo de transporte
los resultados son: • Presencia de flora comensal
• Fallas en el procedimiento
ENZIMAS BACTERICIDAS DEL PUS
• Microorganismos muertos
El pus esta compuesto • Glóbulos blancos (polimorfonucleares (PMN) neutrófilos) muertos
principalmente de: • Restos de tejido dañado.
TIEMPO DE TRANSPORTE
Medio Stuart: La recuperación de las bacterias
depende:
• Tipo de bacteria.
• Tiempo de transporte.
• Temperaturadeconservación.
• Concentración de bacterias en la muestra
Recuperación de bacterias:
• Neisserias spp: Son de siembra inmediata.
• 24 horas: Enterobacterias spp y Bacilos No
Fermentadores.
ESTUDIO DE LA MUESTRA
CULTIVO PRIMARIO
CULTIVO PRIMARIO
• Es un modelo de estudio in vitro constituido por células que pueden crecer y
Cultivo celular: mantenerse en suspensión o en monocapa por más de 24 horas en
condiciones controladas
Los cultivos celulares • explantes de biopsias (fragmento escindido desde un órgano o tejido), por
pueden ser obtenidos a perfusión de un órgano específico, por disgregación de tejidos o a partir de
fluidos orgánicos como la sangre
partir de:
CULTIVO CELULAR ¿QUÉ NECESITAMOS?
1. FORMACIÓN DE PERSONAL
2. DINERO
3. INSTALACIONES ADECUADAS
4. ESTUDIO DE LAS CÉLULAS A UTILIZAR
5. PREPARACIÓN DE MATERIAL Y MEDIOS
6. OBTENCIÓN DE TEJIDOS
7. REALIZACIÓN DEL CULTIVO
8. CARACTERIZACIÓN DEL CULTIVO (CRECIMIENTO, FORMA)
9. IMPLANTE Y CONGELACIÓN
USO DE LOS CULTIVOS
1. ESTUDIO VIROLÓGICOS
2. PRODUCCIÓN DE VACUNAS
3. INGENIERÍA DE PROTEÍNAS
4. ESTUDIOS DE INTERACCIÓN/SEÑALIZACIÓN CELULAR
5. PRODUCCIÓN PARA TRANSPLANTES
6. REPRODUCCIÓN “IN VITRO” DE PLANTAS DE INTERÉS COMERCIAL
7. ENSAYO DE NUEVOS MEDICAMENTOS
8. ESTUDIO DE TOXINAS
PRUEBAS BIOQUÍMICAS
PRUEBAS BIOQUÍMICAS
LAS PRUEBAS BIOQUÍMICAS PERMITEN DETERMINAR LAS CARACTERÍSTICAS METABÓLICAS DE
LAS BACTERIAS OBJETO DE IDENTIFICACIÓN. ALGUNAS DE ESTAS PRUEBAS SON TÉCNICAS
RÁPIDAS, YA QUE EVALÚAN LA PRESENCIA DE UNA ENZIMA PREFORMADA Y SU LECTURA VARÍA
ENTRE UNOS SEGUNDOS HASTA UNAS POCAS HORAS.
CLASIFICACION
Universales • Son las pruebas que se puede realizar a cualquier muestra y que orientan al microbiólogo sobre los siguientes ensayos
bioquímicos que deben realizarse para obtener una identificación confiable.
• Ejemplo: La prueba de la catalasa y de la oxidasa.
Diferenciales
• Son los ensayos que se realizan para identificar los microorganismos presentes en la muestra hasta el nivel de especie.
• La identificación se hace con base en los resultados de una combinación de pruebas, ya que los resultados individuales no son
lo suficientemente informativos para hacer la identificación.
• Ejemplo: Las pruebas IMViC y las pruebas de utilización de azúcar.
Específicas
• Son exámenes específicos para un conjunto particular de especies o para subtipificar una especie. Estas pruebas
generalmente se realizan para confirmar o identificar a nivel de subespecie. Las pruebas individuales son informativas por sí
mismas.
• Ejemplo: La prueba de γ-Glutamil aminopeptidasa
¿PARA QUÉ SIRVEN LAS PRUEBAS BIOQUÍMICAS?
Las pruebas bioquímicas en microbiología sirven para diagnosticar enfermedades causadas por los microbios y para
monitorear tratamientos administrados para combatirlos. Adicionalmente, se emplean para el cribado de
enfermedades infecciosas y para el pronóstico de las mismas.
La identificación bioquímica de microorganismos ofrece una idea de lo que estos microorganismos son capaces de
hacer, siendo posible la discriminación de diferentes cepas de la misma especie por perfiles bioquímicos específicos.
Las diferencias en las actividades enzimáticas concretas informan sobre la ecología, la fisiología o el hábitat natural
del microorganismo, lo cual en algunos casos puede considerarse información importante.
PANEL DE IDENTIFICACIÓN
PANEL DE IDENTIFICACIÓN
SISTEMA ESTANDARIZADO QUE PERMITE LA IDENTIFICACIÓN DE CEPAS BACTERIANAS GRAM
POSITIVOS Y GRAM NEGATIVOS Y LEVADURAS. SON MÉTODOS RÁPIDOS QUE PERMITEN LA
IDENTIFICACIÓN DE MICROORGANISMOS A TRAVÉS DE LA REALIZACIÓN DE DIFERENTES PRUEBAS
BIOQUÍMICAS.
PANEL DE IDENTIFICACIÓN
LA IDENTIFICACIÓN DE BACTERIAS EN MICROBIOLOGÍA CLÍNICA SE HA BASADO, Y SE SIGUE
BASANDO, EN LA TAXONOMÍA CLÁSICA Y TRADICIONAL DE SUS CARACTERES FENOTÍPICOS
COMO MORFOLOGÍA, ASPECTO EN LOS MEDIOS DE CULTIVO, PROPIEDADES FISIOLÓGICAS,
PROPIEDADES BIOQUÍMICAS, DEGRADACIÓN DE MACROMOLÉCULAS, TIPOS DE ENZIMAS
RESPIRATORIAS, NECESIDADES NUTRICIONALES, CARACTERÍSTICAS QUIMIOTAXONÓMICAS,
INHIBICIÓN POR DIVERSAS SUSTANCIAS Y REACCIÓN FRENTE ANTICUERPOS.
ESTUDIOS DE SENSIBILIDAD. (ANTIBIOGRAMAS)
ESTUDIOS DE SENSIBILIDAD. (ANTIBIOGRAMAS)
LAS PRUEBAS DE SENSIBILIDAD BACTERIANA SE LLEVAN A CABO MEDIANTE.
• EL ANTIBIOGRAMA QUE SIRVE PARA MEDIR LA SENSIBILIDAD DE UNA CEPA BACTERIANA A
UNO O VARIOS ANTIBIÓTICOS.
• EL ESTUDIO DE LA SENSIBILIDAD IN VITRO ES UNO DE LOS REQUISITOS PREVIOS PARA LA
EFICACIA IN VIVO DE UN TRATAMIENTO ANTIBIÓTICO.
GRACIAS
