UNIVERSIDAD TECNOLÓGICA Carrera: Ingeniería Química
NACIONAL Cátedra: Química Analítica
Facultad Regional Resistencia Año: 2020
SERIE DE PROBLEMAS N° 6:
METODOS ÓPTICOS
Introducción teórica
En el espectro óptico, la luz blanca está compuesta de ondas de diversas frecuencias. Cuando un
rayo de luz blanca pasa por un prisma se separa en sus componentes de acuerdo a la longitud de onda,
en el espectro visible las longitudes de onda son entre los 400 y 700nm.
La espectrofotometría se refiere a los métodos, cuantitativos, de análisis químico que utilizan la
luz para medir la concentración de las sustancias químicas. Se conocen como métodos
espectrofotométricos y según sea la radiación utilizada como espectrofotometría de absorción visible
(colorimetría), ultravioleta, infrarroja.
La Transmitancia (T) es la relación entre la intensidad de radiación transmitida por una muestra
(I) y la intensidad de radiación que incide sobre la muestra (I0), medidos ambos en la misma posición
del espectro y con la misma rendija,
T = I / I0
Se supone que el haz es de radiación paralela y que incide sobre las superficies planas y paralelas
de la muestra, formando ángulos rectos.
La Absorbancia (A) es el logaritmo en base diez del recíproco de la transmitancia (T), en el que
el disolvente puro es el material de referencia; esto es,
A = log10 1/T = - log10 T
LEY DE LAMBERT – BEER
La cantidad de radiación monocromática que absorbe una muestra obedece a la ley de Beer-
Bouguer -Lambert. Se demostró que cuando se absorbe la energía electromagnética, la potencia de la
energía transmitida disminuye geométricamente (en forma exponencial).
A=abc
b: longitud del camino recorrido por la radiación a través del medio absorbente
c: concentración de la especie absorbente
a: absortividad, constante de proporcionalidad
Cuando hay más de una especie absorbente en el medio se considera que las absorbancias son
aditivas calculándose como,
A total = A1 + ……. + An = a1bc1 + ........ + anbcn
Errores asociados a los métodos espectrofotométricos
En general una medida espectrofotométrica comprende tres pasos: Ajuste de 0% de transmitancia,
ajuste del 100% de transmitancia y la medida del % de tansmitancia de la muestra. Los ruidos que se
producen en cada uno de estos pasos se combinan para producir una incertidumbre neta en la medida
o valor final de la transmitancia de la muestra.
Cualquier incertidumbre en la medida de la transmitancia produce una incertidumbre en la medida
de la absorbancia y por lo tanto también en la medida de la concentración de la muestra. La magnitud
del error relativo en la concentración, por la incertidumbre en la medida de la transmitancia puede
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deducirse de la ley de Beer y se conoce como error relativo analítico por unidad de error instrumental
o error relativo analítico por unidad de error fotométrico.
El error depende en forma compleja de la medida de la transmitancia y para valores muy bajos o
muy altos de transmitancia, el error en la concentración crece exponencialmente, mientras que para
valores intermedios el error permanece aproximadamente constante, presentándose un mínimo error
en la concentración para la transmitancia correspondiente a 0.368 o 36.8 %T.
Tomando la expresión de la ley de Beer:
A = log I0/ I = a b C = - logT = 0.4343
EJERCICIOS:
A- Aplicación Ley de Lambert - Beer.
1- La transmitancia porcentual de una solución intensamente coloreada es 8,4%; ¿cuál es la
absorbancia?
2- Una solución colocada en una cubeta de 1 cm transmite el 50% de la luz de cierta longitud de
onda. ¿Qué porcentaje se transmitirá
a) en una cubeta de 4 cm?
b) en una cubeta de 0,5cm?.
3- Una solución de cromato de potasio contiene 3 g/1 de esta sal y transmite un 40% de la luz
incidente de una cierta , en una cubeta de 1 cm. ¿Qué porcentaje de la luz transmitirá una
solución de 6 g/l de cromato de potasio en la misma cubeta?
4- Una solución conteniendo 1 mg de Fe+3 como Fe(SCN) /100mL, transmite 70% de lo.
a) ¿Cuál es la absortividad molar de la solución?
b) ¿Cuál será la fracción de luz o radiación que no es transmitida por una solución de Fe+3 cuatro
veces más concentrada que la anterior?
5- Para saber el volumen de un matraz se realizó una prueba mediante el siguiente procedimiento:
se coloca en su interior 0,05232 g de un colorante y se enrasa con alcohol, la absorbancia es de
0,38; otra solución que contiene 0,04952 g del colorante en 200 m1 de solución alcohólica da
una absorbancia de 0,42. Hallar el volumen del matraz.
6- Una muestra de 500mg que contiene un compuesto coloreado X se disuelve y se diluye a 500mL.
La absorbancia de una alícuota de esta solución medida a 400nm en una celda de 1,00cm es
0,900. 10mg de X puro se disuelven a 1 (L) del mismo solvente y la absorbancia medida en una
celda de 0,100 cm a la misma longitud de onda es de 0,300. ¿Cuál es el % de X en la muestra
original?
7- La absortividad molar del benzoato de sodio en agua es 560 [Link]-1 a 268 nm. Su peso
molecular es 144.-Una solución contiene 12 mg de benzoato de sodio en 25 ml. ¿Cuál es:
a) su absorbancia;
b) su transmitancia; en una cubeta de 1 cm a 268 nm.
8- El complejo FeSCN+2 tiene una de 7x103 L/cm mol a 580nm, longitud de onda de absorción
máxima. Calcúlese:
a) La Absorbancia de una solución 2.5 x 10-5 M del complejo cuando se mide en una cubeta de
1cm a 580nm
b) La Absorbancia cuando la concentración es el doble que en a.
c) La Transmitancia de las soluciones descritas en los puntos a y b
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9- La absorbancia de una disolución 4.75x10-5 M de permanganato potásico es 0.112 a 525
mn, medida en una célula de 1.00 cm de paso óptico. Calcular: a) el coeficiente de
absortividad molar, expresado en sus unidades correspondientes; b) la constante de
proporcionalidad entre la absorbancia y la concentración cuando ésta se refiere en ppm,
expresándola con sus unidades correspondientes; c) el % transmitancia de la disolución
anterior, a 525 mn, medida en una cubeta de 2.00 cm de paso óptico. (Dato: densidad de
la disolución, 1 g L-1).
10- Una disolución de una sustancia pura B (peso molecular 180.00) de concentración
1.43xl0-4 M tiene una absorbancia de 0.572. Una disolución obtenida a partir de 0.1358
g de un preparado farmacéutico, que contiene a la sustancia B, en 1 L de agua presenta
una transmitancia de 0.362. Ambas medidas se han realizado a 284 mn y en cubetas de
1.00 cm de paso óptico. Calcular el %B de la muestra.
11- El método establecido para determinar fósforo en orina consiste en tratar la muestra con Mo(VI)
tras eliminar las proteínas, y posterior reducción del complejo 12-molibdenofosfato con ácido
ascórbico. Las especies reducidas imparten un color azul intensa a la disolución (azul de
molibdeno), cuya absorbancia puede medirse a 650 nm.
Una muestra de orina de 24 horas de un paciente dio un volumen de 1.122 ml. Una alícuota de
1 ml de la solución se trató con Mo(VI) y ácido ascórbico y se diluyó hasta un volumen de 50
ml. Se preparó una curva de calibrado con alícuotas de 1 ml de solución patrón de fosfato tratadas
de igual modo que la muestra de orina. A partir de los datos obtenidos, calcule los miligramos
de fósforo que eliminó el paciente en un día y la concentración mM de P en la orina.
[P]/ppm 1,000 2,000 3,000 4,000 Muestra
Abs (650 0,230 0,436 0,638 0,848 0,518
nm)
12- 100mg de lechuga se tratan con 10ml de agua para extraer los nitratos; se filtra y se miden 0,2ml
y se agregan los reactivos para desarrollar color. La lectura absorciométrica da un valor de 0,465
después de llevarla a volumen final de 20ml. Simultáneamente y trabajando en idénticas
condiciones a la muestra, se hacen una serie de patrones cuya función de la curva de calibración
responde a la siguiente ecuación de una recta y = 0,917 X – 0,1502. (la concentración tiene
unidades μg/20ml). Calcule el % y las ppm de nitratos en la muestra analizada.
13- El amoníaco puede ser determinado espectrofotométricamente mediante su reacción con
fenol en presencia de hipoclorito, dando lugar a una sustancia de color azul que tiene su
absorción máxima a 625 nm. Una muestra de 4.37 mg de proteína se digiere
químicamente para convertir en amoníaco todo el nitrógeno presente, y al final del
tratamiento el volumen de la muestra es de 100.00 mL. Una alícuota de 10.00 mL de
esta disolución se trata con 5.00 mL de fenol y 2 mL de hipoclorito de sodio, y la muestra
se diluye a 50 mL, midiéndose su absorbancia a 625 nm en una celda de 1.00 cm de
espesor después de 30 minutos. Se prepara también una disolución de referencia patrón
con 1x 10 -2 g de cloruro de amonio disueltos en un litro de agua; una alícuota de 10 mL
de esta disolución patrón se trata de la misma manera que la disolución problema. El
blanco se prepara usando agua destilada en lugar del problema. PM (NH4Cl) = 53.50
[Link]-1; PA (N) = 14.006 [Link]-1
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Muestra A 625
nm
blanco 0.140
referencia 0.308
problema 0.582
a) Calcule la absortividad molar del producto azul.
b) Calcule el porcentaje en masa de nitrógeno en la proteína.
B.- Error Fotométrico
14- Una muestra de aguas residuales contiene cromo en una concentración del orden de 0,1 ppm. El
análisis se lleva a cabo por formación del complejo Cr (VI) con difenilcarbazida. La absortividad
molar del complejo es 41700 a 540 nm. Las cubetas disponibles son,
a) 2 mm; b) 1 cm; c) 5 cm; d)10 cm de paso de luz.
¿Qué cubeta se debería usar para minimizar el error fotométrico?
C.- Mezclas
15- La transmitancia de dos disoluciones B y C que contienen la misma sustancia absorbente
es del 15.85 % y del 50.12 %, respectivamente. ¿Cuál será la relación de volúmenes en
que deben mezclarse dichas disoluciones para que la transmitancia de la disolución
resultante sea del 21.13%?. (Considerar que todas las medidas se realizan en misma
cubeta y a la misma longitud de onda).
16- Un estudio espectrofotométrico de soluciones de las sustancias A y B indicó que ambas seguían
la ley de Lambert-Beer en una amplia gama de longitudes de onda. Se obtuvieron los siguientes
datos con celdas de 1 cm
Long. de Absorbancias Long. De Absorbancias
Onda A(5x10-4 B(8x10-5 onda A(5x10-4 B(8x10-5
(nm) M) M) (nm) M) M)
415 .626 .171 535 .256 .370
430 .660 .128 550 .204 .426
440 .683 .106 565 .130 .460
450 .669 .094 580 .131 .466
460 . 633 .090 590 .132 .470
475 .561 .099 600 .118 .466
490 .477 .132 615 .101 .447
505 .395 .195 630 .086 .410
520 .320 .283 645 .069 .363
a) Graficar los espectros de absorbancias de A y de B; y de la mezcla
b) Seleccionar las longitudes de onda de máxima absorbancia para A y para B.
c) Dadas las soluciones incógnitas que se indican a continuación, determinar las
concentraciones de A y B en cada una de ellas:
Solución A (440nm) B (590nm)
1 1,022 0,414
2 0,878 0,253
3 1,131 0,348
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17- La constante de equilibrio para el par acido/base conjugado es 8x 10-5 con la siguiente
información:
Especie max absorción p/ 430nm p/ 600nm
Hin 430nm 8.04 x 10 3 1.23 x 10 3
In - 600nm 0.775 x 10 3 6.96 x 10 3
a) Calcúlese la A a 430nm y a 600nm para las siguientes concentraciones del indicador 3x 10-4
M, 2 x 10-4M, 1x 10-4 M, 0.5x 10-4 M, 0.25x 10-4 M
b) Trazar una gráfica de la Absorbancia en función de la concentración del indicador.
EJERCICIOS EXTRAS
1. La constante de disociación de un indicador HIn es 2.50x10-6. Cuando se emplean cubetas
de 1.00 cm de paso óptico se obtienen los valores de absorbancia, a pH 1.00 y pH 13.00,
indicados en la siguiente tabla para disoluciones 2.50x10-4 M del
indicador: Absorbancia Absorbancia
, nm pH = 1.00 pH = 13.00 , nm pH = 1.00 pH = 13.00
460 0.210 0.025 560 0.177 0.250
470 0.217 0.025 580 0.140 0.320
480 0.220 0.026 600 0.110 0.350
490 0.225 0.026 610 0.099 0.355
495 0.227 0.028 620 0.088 0.349
500 0.223 0.029 630 0.076 0.340
510 0.221 0.036 650 0.066 0.312
530 0.210 0.096 680 0.060 0.260
550 0.192 0.192
a) Indicar cuáles serán las longitudes de onda más adecuada para la determinación
espectrofotométrica del indicador en disoluciones fuertemente ácidas y en disoluciones
alcalinas.
b) ¿Cuál será la absorbancia de una disolución 8.00x10-5 M del indicador en forma
alcalina, a 570 nm, en una célula de 5.00 cm de paso óptico?.
c) ¿A qué longitud de onda será independiente del pH la absorbancia de la disolución?.
d) Una disolución del indicador de concentración 3.75x10-4 M tiene una absorbancia de
0.453, a 600 nm, para un paso óptico de l.00 cm. ¿Cuál será el pH de la disolución?.
2.- Los siguientes datos se obtuvieron en el análisis de muestras de agua, para el calcio usando la línea
de 4229nm. Calcule la concentracion de calcio en la muestra desconocida de agua. Los pares listados
enseguida muestran en cada caso la intensidad correspondientes a las concentraciones indicadas en
ppm: 0.0ppm – 0.4, 2.0ppm – 9.6, 4.0ppm – 15.0, 6.0ppm – 20.7, 8.0ppm – 26.5, 10.0ppm – 31.9,
incógnita – 11.5.
3.- La misma incógnita dada en el problema anterior se analizó también utilizando una técnica de
adición de standard en un instrumento diferente. La incógnita sola dio una intensidad de 44.5
unidades, de las cuales 31.5 se debieron al fondo. Al aumentar la concentración de Ca presente en la
muestra en 2.0 y en 4.0ppm se produjeron intensidades de emisión de 53.8 y 63.1 unidades
respectivamente, incluyendo el mismo fonde. Calcule la concentración de Ca en la muestra
4.- El Ca puede analizarse usando litio como stándard interno. Las siguientes intensidades de emisión
corregidas fueron obtenidas para el calcio en muestras de tierra.
Conc. de Ca en ppm Intensidad del Ca Intensidad del Litio
Desconocida 74.0 88.5
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1.00 28.0 87.0
2.00 41.4 88.0
3.00 50.8 84.0
4.00 60.7 81.0
5.00 76.4 89.0
6.00 80.5 85.5
Calcule la concentración de calcio en la muestra de tierra.
5. Para determinar el contenido de calcio en una muestra de néctar vitaminado de piña y
naranja se aplica un método analítico basado en absorción atómica con llama. Para ello, se
toman cinco alícuotas de 1.00 mL de la muestra, que se transfieren a matraces de 25.0 mL, a
continuación se añaden 0.00, 1.25, 2.50, 3.75 y 5.00 mL, respectivamente, de disolución
patrón de nitrato de calcio 0.0100 M y, finalmente, se diluyen hasta el enrase con agua
purificada. Seguidamente se mide la absorbancia de las disoluciones en un espectrofotómetro
de absorción atómica con llama, ajustado a las condiciones óptimas de medida de este
elemento (Ca), obteniéndose los valores que se muestran en la tabla:
Volumen muestra, mL Volumen añadido de patrón, mL Absorbancia
1.00 0.00 0.400
1.00 1.25 0.560
1.00 2.50 0.740
1.00 3.75 0.900
1.00 5.00 1.080
Por otra parte, se preparan disoluciones del mismo patrón tomando 1.25, 2.50, 3.75 y 5.00
mL de nitrato de calcio 0.0100 M y diluyendo con agua hasta 25.0 mL. Las medidas de
absorbancia, incluyendo el blanco, son las siguientes
Volumen patrón, mL Absorbancia
0.00 0.000
1.25 0.250
2.50 0.500
3.75 0.700
5.00 0.900
a) Represente gráficamente los datos obtenidos y obtenga las curvas de calibrado.
b) Calcule el contenido de calcio en la muestra, expresando el resultado en mg de Ca/100
mL de muestra (Peso atómico Ca=40.08).
