TRIGLYCERIDES -LQ

Triglicéridos-LQ
GPO-POD. Líquido

Determinación cuantitativa de triglicéridos Blanco Patrón Muestra

IVD R (mL) 1,0 1,0 1,0
Conservar a 2-8ºC Patrón (Nota1,3) (µL) -- 10 --
Muestra (µL) -- -- 10
PRINCIPIO DEL MÉTODO
4. Mezclar e incubar 5 minutos a 37ºC o 10 min. a 15-25ºC.
Los triglicéridos incubados con lipoproteinlipasa (LPL) liberan 5. Leer la absorbancia (A) del patrón y la muestra, frente al Blanco de
glicerol y ácidos grasos libres. El glicerol es fosforilado por reactivo. El color es estable como mínimo 30 minutos.
glicerolfosfato deshidrogenasa (GPO) y ATP en presencia de
glicerol quinasa (GK) para producir glicerol-3-fosfato (G3P) y CÁLCULOS
adenosina-5-difosfato (ADP). El G3P es entonces convertido a (A ) Muestra - (A )Blanco
x Conc. Patrón = mg/dL de triglicéridos en la muestra
dihidroxiacetona fosfato (DAP) y peróxido de hidrogeno (H2O2) (A ) Patrón - (A )Blanco
por GPO. Factor de conversión: mg/dL x 0,0113 = mmol/L.
Al final, el peróxido de hidrogeno (H2O2) reacciona con 4- CONTROL DE CALIDAD
aminofenazona (4-AF) y p-clorofenol, reacción catalizada por la Es conveniente analizar junto con las muestras sueros control valorados:
peroxidasa (POD) dando una coloración roja: SPINTROL H Normal y Patológico (Ref. 1002120 y 1002210).
LPL Si los valores hallados se encuentran fuera del rango de tolerancia, se debe
Triglicéridos + H2O Glicerol + Ácidos grasos libres
revisar el instrumento, el reactivo y el material de calibración.
Glicerol + ATP Glicerolquinasa G3P+ ADP Cada laboratorio debe disponer su propio Control de Calidad y establecer
GPO correcciones en el caso de que los controles no cumplan con las tolerancias.
G3P + O2 DAP + H2O2
POD VALORES DE REFERENCIA
H2O2 + 4-AF + p-Clorofenol Quinona + H2O
Hombres: 40 – 160 mg/dL
La intensidad del color formado es proporcional a la Mujeres: 35 – 135 mg/dL
concentración de triglicéridos presentes en la muestra
ensayada1,2,3. Estos valores son orientativos. Es recomendable que cada laboratorio
establezca sus propios valores de referencia.
SIGNIFICADO CLÍNICO CARACTERÍSTICAS DEL MÉTODO
Los triglicéridos son grasas que suministran energía a la célula.
Rango de medida: Desde el límite de detección de 0,000 mg/dL hasta el
Al igual que el colesterol, son transportados a las células del organismo
por las lipoproteínas en la sangre.
límite de linealidad 1200 mg/dL.
Una dieta alta en grasas saturadas o carbohidratos puede elevar los Si la concentración de la muestra es superior al límite de linealidad, diluir
niveles de triglicéridos. 1/2 con CINa 9 g/L y multiplicar el resultado final por 2.
Su aumento es relativamente inespecífico. Diversas dolencias, como Precisión:
ciertas disfunciones hepáticas (cirrosis, hepatitis, obstrucción biliar) o Intraserie (n=20) Interserie (n=20)
diabetes mellitus, pueden estar asociadas con su elevación 3,6,7,. Media (mg/dL) 109 224 111 224
El diagnostico clínico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos SD 0,64 1,01 3,74 7,91
clínicos y de laboratorio. CV (%) 0,58 0,45 3,38 3,52
REACTIVOS Sensibilidad analítica: 1 mg/dL = 0,0013 (A).
GOOD pH 6.3 50 mmol/L Exactitud: Los reactivos SPINREACT (y) no muestran diferencias sistemáticas
p-Clorofenol 2 mmol/L significativas cuando se comparan con otros reactivos comerciales (x).
Lipoproteína lipasa (LPL) 150000U/L Los resultados obtenidos con 50 muestras fueron los siguientes:
Glicerol quinasa (GK) 500 U/L Coeficiente de correlación (r)2: 0,99810.
R (Nota 2)
Glicerol-3-oxidasa (GPO) 3500 U/L Ecuación de la recta de regresión: y= 0,9178x – 0,5426
Peroxidasa (POD) 440 U/L Las características del método pueden variar según el analizador utilizado.
4 - Aminofenazona (4-AF) 0,1 mmol/L
ATP 0,1 mmol/L INTERFERENCIAS
TRIGLYCERIDES CAL Patrón primario acuoso 200 mg/dL No se han observado interferencias con bilirrubina < 170 μmol/L, hemoglobin
< 10 g/L2.
PREPARACIÓN Se han descrito varias drogas y otras substancias que interfieren en la
El reactivo y el patrón están listos para su uso. determinación de los trigliceridos 4,5.
CONSERVACIÓN Y ESTABILIDAD NOTAS
Todos los componentes del kit son estables, hasta la fecha de 1. TRIGLYCERIDES CAL: Debido a la naturaleza del producto, es
caducidad indicada en la etiqueta del vial, cuando se mantienen los aconsejable tratarlo con sumo cuidado ya que se puede contaminar con
viales bien cerrados a 2-8ºC, protegidos de la luz y se evita su facilidad.
contaminación. 2. LCF(Lipid Clearing Factor) está integrado en el reactivo.
No usar reactivos fuera de la fecha indicada. 3. La calibración con el Patrón acuoso puede dar lugar a errores sistemáticos
en métodos automáticos. En este caso, se recomienda utilizar calibradores
Deterioro de los reactivos séricos.
- Presencia de partículas y turbidez. 4. Usar puntas de pipeta desechables limpias para su dispensación.
- Absorbancia (A) del blanco a 505 nm 0,26. 5. SPINREACT dispone de instrucciones detalladas para la aplicación de
este reactivo en distintos analizadores.
MATERIAL ADICIONAL
- Espectrofotómetro o analizador para lecturas a 505 nm. BIBLIOGRAFÍA
- Cubetas de 1,0 cm de paso de luz. 1. Buccolo G et al. Quantitative determination of serum triglycerides by use of enzimes. Clin
Chem 1973; 19 (5): 476-482.
- Equipamiento habitual de laboratorio. 2. Fossati P et al. Clin. Chem 1982; 28(10): 2077-2080.
3. Kaplan A et al. Tryglycerides. Clin Chem The C.V. Mosby Co. St Louis. Toronto. Princeton
MUESTRAS 1984; 437 and Lipids 1194-1206.
Suero y plasma1. 4. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press, 1995.
5. Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001.
Estabilidad de la muestra: 5 días a 2-8ºC. 6. Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999.
7. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed AACC 1995.
PROCEDIMIENTO
1. Condiciones del ensayo: PRESENTACIÓN
Longitud de onda: . . . . . . . . . . . . . . . . . ... . . . 505 (490-550) nm Ref: 41030 R:1 x 50 mL, CAL: 1 x 2 mL
Cubeta:. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. .. . . . .1 cm paso de luz Ref. 41031 R:2 x 150 mL, CAL: 1 x 5 mL
Temperatura:. . . . . . . . . .. . . . . . . . . . . . . . . . . . 37ºC / 15-25ºC Ref. 41032 Cont. R:1 x 100 mL, CAL: 1 x 2 mL
2. Ajustar el espectrofotómetro a cero frente a agua destilada. Ref. 41033 R:1 x 500 mL, CAL: 1 x 5 mL
3. Pipetear en una cubeta (Nota 4): Ref. 41034 R:1 x 1000 mL, CAL: 1 x 5 mL

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