Prueba PCT FIA | F0400 | Suero, Plasma, Sangre |
Sólo para uso de diagnóstico in vitro. Sólo para uso profesional. Paso 2: Para sangre: Analice de inmediato o almacene refrigerada a 2-
8°C por hasta 24 horas después de la recolección. No congelar
USO PREVISTO
las muestras.
La Prueba Procalcitonin (PCT) Fluorescence ImmunoAssay (FIA) es un
Para plasma: Centrifugue la muestra recolectada y extraiga
inmunoensayo de fluorescencia cromatográfico de flujo lateral para la
cuidadosamente el plasma en un nuevo tubo previamente
detección cuantitativa de PCT en muestras humanas de suero, plasma o
etiquetado.
sangre, con un nivel de corte de 0.5 ng/mL, utilizando el sistema RaFIA. Esta
prueba está diseñada solo para uso de diagnóstico in vitro. Para suero: Permita que la sangre coagule, centrifugue la
muestra recolectada y extraiga cuidadosamente el suero en un
RESUMEN Y EXPLICACIÓN DE LA PRUEBA
nuevo tubo previamente etiquetado.
La sepsis es una condición médica grave caracterizada por una abrumadora
Paso 3: Sólo para Plasma/Suero: Analice las muestras inmediatamente
respuesta inmune sistémica a una infección causada por bacterias u otros
después de la recolección o almacene refrigeradas a 2-8°C por
microbios. Los síntomas asociados con la sepsis son variables e incluyen
hasta 5 días. Las muestras se pueden congelar a -20°C para un
fiebre, escalofríos, taquicardia y taquipnea. Si no se trata, la sepsis grave
almacenamiento más prolongado. Evite múltiples ciclos de hielo-
puede provocar insuficiencia orgánica y una disminución de la presión
deshielo.
arterial que puede progresar a una condición de shock séptico
potencialmente mortal. Antes de analizarlas, lleve las muestras congeladas a
temperatura ambiente lentamente y mezcle suavemente. Las
PCT es una prohormona que pertenece a la superfamilia de proteínas de
muestras que contienen partículas visibles deben aclararse
calcitonina. En personas sanas, los niveles de PCT en la sangre son bajos
mediante centrifugación antes de la prueba.
(~0.05 ng/mL), pero aumentan rápidamente en respuesta a una infección
bacteriana sistémica [1]. La concentración de PCT en la sangre se Nota: No analice muestras que demuestren franca lipemia, hemólisis
correlaciona tanto con la carga bacteriana como con la gravedad de la intensa o turbidez para evitar interferencias con la interpretación de los
infección. La vida media de la PCT circulante es corta, solo 25-30 horas. Por resultados.
lo tanto, PCT es un buen biomarcador para la detección específica de una
PROCEDIMIENTO DEL ENSAYO
infección bacteriana sistémica [2, 3].
Lea cuidadosamente estas instrucciones y el manual del instrumento
La Prueba PCT FIA se desarrolló para detectar el antígeno de procalcitonina
antes de realizar la prueba.
circulante en muestras de suero, plasma y sangre en 15 minutos, sin el uso
de equipos de laboratorio incómodos y requiere personal de laboratorio con Consulte el manual de funcionamiento del analizador y la incubadora RaFIA
capacitación mínima. para obtener más información.
PRINCIPIO DE LA PRUEBA Paso 1: Lleve el buffer de detección a temperatura ambiente. Si la
muestra se almacena congelada, descongele y mezcle bien antes
Esta prueba es un inmunoensayo fluorescente de flujo lateral. Cuando la
de realizar el ensayo.
muestra y el buffer se mezclan y se aplican al dispositivo de prueba, la PCT
presente en la muestra formará un complejo intermedio con los anticuerpos Paso 2: Encienda la incubadora. Ajuste la temperatura de incubación a
monoclonales anti-PCT de ratón etiquetados con marcadores fluorescentes. 25°C y el tiempo de incubación a 15 minutos.
El complejo intermedio se mueve a lo largo de la membrana de nitrocelulosa Paso 3: Encienda el analizador e inserte la tarjeta SD en el analizador.
por flujo lateral a una línea de detección (línea T) recubierta con anticuerpos Presione "Test" y elija "Quick Test".
monoclonales específicos a PCT. El complejo intermedio será capturado por
los anticuerpos recubiertos en la línea T para formar el sándwich de Paso 4: Cuando esté listo para analizar, abra el sobre y etiquete el
compuesto de reacción fluorescente final. Por lo tanto, la señal fluorescente dispositivo con el número de identificación de la muestra.
en la línea de detección se correlaciona positivamente con la concentración Asegúrese que el número de lote del buffer y del dispositivo de
de PCT en muestras humanas de suero, plasma o sangre. prueba coincidan.
La señal fluorescente de los marcadores del sandwich compuesto se Nota: Complete los pasos 5 y 6 en 1 minuto para garantizar la exactitud de
detectará y calculará de acuerdo con la curva de calibración en la tarjeta los resultados de la prueba.
Secure Digital (SD) (proporcionada con los reactivos), para representar la Paso 5: Agregue 50 μL de suero/plasma, u 80 μL de sangre en el tubo de
concentración de PCT en muestras humanas. buffer. Mezcle bien la muestra con el buffer de detección dando
REACTIVOS Y MATERIALES PROPORCIONADOS golpecitos o invirtiendo el tubo.
1. Sobres laminados sellados individualmente que contienen: Paso 6: Cargue 80 μL de mezcla de muestra en el pozo de muestra del
a. Un dispositivo de prueba dispositivo. Asegúrese que no haya burbujas de aire.
b. Un desecante Inmediatamente inserte el dispositivo en la incubadora e incube
2. Tubos de buffer de detección durante 15 minutos.
3. Tarjeta SD Paso 7: Después de 15 minutos, extraiga el dispositivo de prueba,
4. Instrucciones de Uso insértelo en el analizador y presione "Start Test". El resultado de
MATERIALES REQUERIDOS PERO NO PROPORCIONADOS la prueba se mostrará en la pantalla y se imprimirá
automáticamente.
1. Reloj o cronómetro
2. Analizador de fluorescencia RaFIA Paso 8: Deseche los dispositivos usados después de interpretar el
3. Incubadora RaFIA resultado siguiendo los requisitos locales que rigen la eliminación
de dispositivos.
PREPARACIÓN DE REACTIVOS E INSTRUCCIONES DE ALMACENAMIENTO
CONTROL DE CALIDAD
Todos los reactivos están listos para usarse como se proporcionan.
1. Almacene el buffer de detección a 2-8°C. Las pruebas de control de calidad son parte de las buenas prácticas de
2. Almacene los dispositivos de prueba a 2-30°C. análisis para confirmar el resultado esperado y la validez del ensayo, y deben
3. Use los dispositivos de prueba dentro de los 30 minutos después de realizarse a intervalos regulares o:
abrir el sobre. • Tras abrir un nuevo lote de prueba para garantizar que el
RECOLECCIÓN Y MANEJO DE LAS MUESTRAS rendimiento de la prueba no se altere.
Considere cualquier material de origen humano como infeccioso y • Siempre que haya alguna duda con respecto a la validez de los
manipúlelo utilizando procedimientos estándar de bioseguridad. resultados de la prueba.
Paso 1: Recolecte sangre venosa mediante venopunción en un tubo de Los materiales de control no se proporcionan con este kit. Para más
recolección que contenga EDTA, citrato o heparina para muestras información sobre cómo obtener los materiales de control, comuníquese con
de plasma o sangre, o un tubo de recolección que no contenga la División de Ventas de CTK Biotech para obtener ayuda (consulte las
anticoagulantes para muestras de suero. instrucciones de uso del material de control).
Derechos de Autor 2020 por CTK Biotech, Inc
.
Prueba PCT FIA | F0400 | Suero, Plasma, Sangre |
INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS DEL ENSAYO 10. Deseche todas las muestras y materiales utilizados para realizar la
prueba como desechos biopeligrosos.
Valores Esperados
Se recomienda un rango normal de <0.5 ng/mL PCT para el diagnóstico de 11. Lea los resultados de la prueba 15 minutos después de que se aplique
infección o sepsis. Sin embargo, los laboratorios deben establecer su propia una muestra al pozo de muestra del dispositivo.
concentración de corte de diagnóstico basada en la práctica clínica en sus 12. No realice la prueba en una habitación con flujo de aire fuerte, es decir,
respectivas instituciones. un ventilador eléctrico o aire acondicionado fuerte.
CARACTERÍSTICAS DE DESEMPEÑO LIMITACIONES DE LA PRUEBA
1. Rango 1. Siga de cerca las secciones de procedimiento del ensayo e
Rango de funcionamiento: 0.1–100.0 ng/mL interpretación de los resultados del ensayo al analizar la presencia de
PCT elevada en suero, plasma o sangre de individuos. No seguir el
2. Precisión
procedimiento puede dar resultados inexactos.
Precisión Dentro del Lote
2. El anticuerpo anti-ratón de humano (HAMA) puede estar presente en
La precisión dentro del lote se determinó mediante el análisis de
pacientes que han recibido inmunoterapia con un anticuerpo
materiales de referencia de PCT utilizando 10 dispositivos de prueba
monoclonal murino. Este kit ha sido especialmente diseñado para
del mismo lote. CV ≤ 15%.
minimizar el efecto de estos anticuerpos en los resultados de la prueba.
Precisión Entre Lotes Sin embargo, el resultado de la prueba debe evaluarse
La precisión entre lotes se determinó mediante el análisis de materiales cuidadosamente cuando se sabe que los pacientes tienen estos
de referencia de PCT utilizando 30 dispositivos de prueba de 3 lotes anticuerpos [4, 5].
consecutivos al azar (10 dispositivos de prueba de cada lote). CV ≤ 3. Si el síntoma es altamente sospechoso o persiste, mientras que el
20%. resultado de la prueba PCT FIA sea normal o no sea reactivo, se
3. Exactitud recomienda analizar con un método de prueba alternativo.
Los materiales de control PCT con tres concentraciones diferentes 4. Algunos factores desconocidos pueden interferir con la prueba y causar
fueron analizados por cada lote de dispositivos de prueba, y las resultados erróneos, tales como errores técnicos/de procedimiento,
desviaciones estaban dentro de ±15%. degradación de los componentes/reactivos de la prueba o presencia de
4. Linealidad sustancias interferentes en las muestras.
Se analizó una concentración en serie de materiales de referencia de 5. La Prueba PCT FIA debe considerarse solo como una herramienta de
PCT a 0.1–100.0 ng/mL, y el coeficiente de correlación (R) es ≥0.9900. diagnóstico preliminar. En caso de un resultado anormal, consulte a un
médico para analizar el resultado de la prueba y decidir cursos de
5. Reactividad Cruzada
acción posteriores.
Para evaluar la posible reactividad cruzada debido a moléculas
estructuralmente relacionadas, los siguientes compuestos REFERENCIAS
potencialmente reactivos se adicionaron a muestras negativas a PCT. 1. Jin, M., & Khan, A. I. (2010). Procalcitonin: uses in the clinical laboratory
Los resultados demuestran que, a las concentraciones analizadas, los for the diagnosis of sepsis. Laboratory Medicine, 41(3), 173-177.
compuestos estudiados no afectan el desempeño de la Prueba PCT 2. Schuetz, P., Albrich, W., & Mueller, B. (2011). Procalcitonin for
FIA. diagnosis of infection and guide to antibiotic decisions: past, present
Lista de compuestos potencialmente reactivos y concentraciones and future. BMC medicine, 9(1), 107.
analizadas: 3. Póvoa, P., & Salluh, J. I. (2012). Biomarker-guided antibiotic therapy in
adult critically ill patients: a critical review. Annals of intensive
Antígeno específico Concentración Resultado de prueba PCT care, 2(1), 32.
Albúmina 100 g/L ＜0.3 ng/mL
4. Hansen, H. J., Sharkey, R. M., Sullivan, C. L., & Goldenberg, D. M.
Calcitonina Humana 100 ng/mL ＜0.3 ng/mL (1993). HAMA interference with murine monoclonal antibody-based
Péptidos inhibidores de Ca 10 ng/mL ＜0.3 ng/mL immunoassays. JOURNAL OF CLINICAL IMMUNOASSAY, 16(4),
α-CGRP 10 μg/mL ＜0.3 ng/mL 294-299.
β-CGRP 10 μg/mL ＜0.3 ng/mL 5. Levinson, S. (1992). The nature of heterophilic antibodies and their role
in immunoassay interference. J. Clin. Immunoassay, 15, 108-115.
ADVERTENCIAS Y PRECAUCIONES
Índice de Símbolos
Sólo para uso de diagnóstico in vitro. Sólo para uso profesional. Consulte Sólo para uso de
Caducidad
1. Lea estas instrucciones completamente antes de realizar la prueba. El instrucciones de uso diagnóstico in vitro
incumplimiento de las instrucciones puede resultar en resultados de # de Catálogo Número de Lote Pruebas por kit
prueba inexactos.
Almacene entre 2-30°C Fabricante No reutilizar
2. No abra el sobre sellado a menos que esté listo para realizar el ensayo.
No lo use si el sobre está dañado o no está sellado. No use dispositivos Almacene buffer entre 2-8°C Fecha de Representante
Fabricación Autorizado
caducados.
3. El número de lote del buffer y del dispositivo de prueba deben coincidir.
4. Lleve todos los reactivos a temperatura ambiente (15-30°C) antes de S IMPLIFYING DIAGNOSTICS
CTK Biotech, Inc.
usarlos. 13855 Stowe Drive MDSS GmbH
Poway, CA 92064 USA Schiffgraben 41
5. No utilice componentes de cualquier otro tipo de kit como sustituto de 30175 Hannover, Germany
Tel: 858-457-8698
los componentes de este kit. Utilice la prueba PCT FIA junto con los Fax: 858-535-1739
instrumentos CTK RaFIA únicamente. E-mail:
[email protected]6. No use muestras de sangre hemolizada para la prueba. PI-F0400-SPANISH Rev. C1.0
Fecha de lanzamiento: 2020-06-25
7. Use ropa protectora y guantes desechables mientras manipule los Versión en Español
reactivos del kit y las muestras clínicas. Lávese bien las manos después
de realizar la prueba. Sólo para exportación. No para reventa en los Estados Unidos.
8. Siga las Precauciones Universales del CDC de EE. UU. para la
prevención de la transmisión del VIH, el VHB y otros patógenos
transmitidos por la sangre.
9. No fume, beba ni coma en áreas donde se manipulan muestras o
reactivos del kit.
Derechos de Autor 2020 por CTK Biotech, Inc
.
