IESTP-CHOCOPE
TÉCNICA EN FARMACIA
FLAVONOIDES
1. Introducción
Las plantas mediante el proceso de la fotosíntesis producen las sustancias
necesarias para todos los ciclos vitales de la naturaleza. Mediante intrincados y cada
vez más conocidos mecanismos bioquímicos se constituyen en verdaderas factorías
químicas de carbohidratos, proteínas, grasas, vitaminas y oligoelementos como el
hierro y el magnesio; y adicionalmente mantienen la atmósfera rica en oxígeno y
deficiente en dióxido de carbono, permitiéndonos respirar. Son la base de la cadena
alimenticia que soporta todas las demás formas de vida en nuestro planeta. En la
actualidad, gracias a la visión ecologista que se ha dado a las nuevas generaciones
de personas, existe una tendencia a mantener y conservar las especies de plantas
mediante la conservación de los bosques, las selvas, los parques naturales, los
estuarios marinos, los humedales, etc. Para toda persona indistintamente de su
profesión u oficio, no hay duda de que las plantas son importantes para la vida. Pero
además de producir sustancias como los carbohidratos, las proteínas y las grasas,
que los investigadores han denominado METABOLITOS PRIMARIOS, dado que se
encuentran en prácticamente todas las formas de vida y cumplen funciones básicas
para la misma, existen otras que no se encuentran tan distribuidas y que se hallan
restringidas solo a ciertas especies, géneros o familias como son los alcaloides, las
saponinas esteroides, los aceites esenciales, los terpenoides, etc., a los cuales se
les denomina METABOLITOS SECUNDARIOS. Dentro de este último grupo están
los FLAVONOIDES, unas sustancias bautizadas así porque las primeras que se
lograron aislar eran de color amarillo, pero que como más adelante veremos las hay
incoloras ó con otros colores diferentes del amarillo como son el rojo, el violeta y el
azul.
A continuación se presentará una breve reseña histórica y una definición química de
los flavonoides, luego se hablará de su origen biológico, algunos aspectos sobre su
aislamiento y caracterización, y finalmente se destacará su utilidad real y potencial
para ayudar a preservar nuestra salud.
2. A manera de historia
Los flavonoides son un gran grupo de sustancias vegetales que fueron descubiertas
por el premio Nobel en Bioquímica Dr. Albert Szent-Gyorgi, quien les denominó
como "vitamina P". El Dr. Szent-Gyorgi descubrió que los flavonoides favorecen la
función de la vitamina C,
mejorando su absorción y protegiéndola de la oxidación. Los flavonoides
comprenden varias clases de sustancias naturales, entre las cuales están muchas
de las que les confieren colores amarillo, naranja, rojo, violeta y azul, a muchas
flores, hojas y frutos, especialmente. Cuando usted amigo lector está observando
una rosa roja, además de disfrutar la gracia artística de su diseño, está disfrutando
de su color, ese color es debido a los flavonoides; cuando observe una fresa jugosa,
una uva roja ó morada, una flor amarilla, usted está observando ni más ni menos a
sustancias flavonoides. Esos colores que disfruta nuestro cerebro al percibirlos son
en su gran mayoría debidos a los flavonoides. Entonces, se puede comprender que
esas aparentemente desconocidas sustancias han estado presentes en buena parte
de nuestra vida, y también en buena parte de la historia de la humanidad.
DEFINICIÓN:
Los flavonoides son compuestos fenólicos con una alta capacidad antioxidante que
están presentes en la mayoría de las plantas, especialmente en las frutas y las
IESTP-CHOCOPE
TÉCNICA EN FARMACIA
hortalizas. Su actividad antioxidante ha atraído fuertemente la atención de las
industrias de procesamiento de alimentos y de las compañías de pigmentos,
cosméticas y farmacéuticas.
3. Aspectos químicos
Para los químicos los flavonoides tienen una estructura química muy definida como
se muestra en la figura 1. Puede observarse que de manera general son moléculas
que tienen dos anillos bencénicos (ó aromáticos, para los químicos orgánicos)
unidos a través de una cadena de tres átomos de carbono, puesto que cada anillo
bencénico tiene 6 átomos de carbono, los autores los denominan simplemente como
compuestos C6C3C6. La Figura 2 muestra la estructura química de uno de los
flavonoides más comunes: La quercetina.
Figura 1. Estructura básica de los flavonoides
4. Distribución y estado natural
Los flavonoides se encuentran ampliamente distribuidos en las plantas verdes
(especialmente las angiospermas), y sólo algunos pocos se han detectado en
hongos y algas. Se han encontrado en las diferentes partes de las plantas,
especialmente en las partes aéreas; y se les encuentra en forma libre (también
llamados agliconas flavonoides), como glicósidos (la mayoría de las veces), como
sulfatos y algunas veces como dímeros y polímeros .
. Los glicósidos pueden ser de dos clases: con los carbohidratos ligados a través de
átomos de oxígeno (enlace hemiacetal) es decir como O-glicósidos; o con los
carbohidratos ligados a través de enlaces C-C, es decir como C-glicósidos. De todas
estas formas naturales, los Oglicósidos son los más comunes de hallar. Las
antocianinas por su parte se encuentran como sales principalmente en flores, frutos
y tejidos con coloraciones que van del rojo hasta el violeta y el azul
. Muy pocas veces se encuentran varias clases de flavonoides en un mismo tejido
vegetal, sin embargo de las raíces de Lonchocarpus subglauscescens (leguminosas)
se aislaron varias flavonas, flavonoles, isoflavonas, rotenoides, chalconas y
flavanoles.
Compuestos fenólicos alimenticios:
Ácidos fenólicos, Flavonoides y Polifenoles
Antoxantinas Antocianinas
Flavonoles
Flavonas
Flavanoles Antocianidinas
Flavanonas
Isoflavonoides
IESTP-CHOCOPE
TÉCNICA EN FARMACIA
5. PROCESOS DE EXTRACCIÓN:
Aunque el proceso para cada extracto es diferente, las etapas de concentración,
separación y secado son comunes e independientes del compuesto de interés.
Durante el proceso se utilizan temperaturas menores a 60 °C y pH entre 2 y 5 para
mantener la calidad del producto y además se evita el uso de aditivos,
conservantes o inhibidores artificiales de
Microorganismos.
El procedimiento de extracción tradicional consiste en homogenizar los tejidos en un
medio de alcohol o alcohol acidificado para realizar la extracción, adsorber los
pigmentos en una resina de intercambio iónico, separar el pigmento de la resina
usando un solvente como etanol y secar si es necesario . Por razones ambientales y
de costos, se propone utilizar agua o un medio acuoso como medio de extracción.
Este método es sencillo y práctico a nivel industrial y se obtienen flavonoides con
buena solubilidad. El etanol es particularmente apropiado por ser miscible en agua
en casi todas las proporciones y al no ser tóxico se acepta en un amplio rango de
productos, además se evapora fácilmente reduciendo el costo de secado y puede
condensarse nuevamente para reutilizarse en el proceso . En la figura 3 se presenta
el diagrama de bloques del proceso.
La materia prima debe macerarse o molerse antes del tratamiento en el medio de
extracción y puede usarse fresca, congelada o seca. Se prefiere la muestra
congelada para inducir a la formación de cristales que rompen las paredes celulares
y facilitar la extracción de sustancias de la célula . Una alternativa para aumentar la
cantidad de producto en la extracción es la adición
de enzimas, generalmente pectinolíticas, a la biomasa macerada para destruir los
componentes de la pared celular y permitir la liberación de los compuestos. Aunque
este método se ha aplicado en uvas y frambuesas, puede extenderse a cualquier
proceso de extracción de flavonoides a partir de producto.
La extracción puede llevarse a cabo en cualquier forma que permita a los
flavonoides migrar al medio de extracción: percolación, suspensión y/o solvatación
de la materia prima en el medio de extracción . También se han sugerido
extracciones altamente básicas (con hidróxido de calcio e hidróxido de sodio) y con
un tratamiento posterior con ácido para precipitar los flavonoides como cristales,
pero estos tienen muy baja solubilidad en agua .Un método patentado recientemente
en Estados Unidos utiliza agua presurizada entre 50 y 200 atm a una temperatura
menor de 100 °C .
También se ha propuesto realizar la extracción con CO 2 supercrítico y otro solvente
líquido .
Este proceso incluye macerar la materia prima a presiones entre 150 y 280 bar en
un solvente como agua o alcohol que contenga el fluido supercrítico. La alta presión
causa penetración del fluido supercrítico, se reduce su viscosidad y se incrementa la
difusividad provocando su movilidad a través de las células y permitiendo extraer las
sustancias a mayor velocidad y en mayor cantidad que los métodos tradicionales.
Se utilizan temperaturas entre 40 y 80 °C lo que reduce el riesgo de
descomposición. Este tipo de extracción se ha utilizado en piel de uvas y de
naranjas, entre otros.
Fruta
Homogeneización Agua
Filtración/centrifugación Residuo sólido
Extracción/resina Residuo líquido
IESTP-CHOCOPE
TÉCNICA EN FARMACIA
Etanol
Lavado
Secado
Producto
6. CARACTERIZACIÓN:
Los métodos de caracterización e identificación de flavonoides son los mismos que
se utilizan para otras sustancias naturales. El modelo más común es preparar un
extracto, hacer la separación biológica y terminar con las etapas de fraccionamiento
y aislamiento .Se han desarrollado muchos métodos de cromatografía líquida para
detectar y cuantificar los flavonoides en los alimentos, pero en general, sólo miden
máximo tres subclases . Actualmente la técnica RP-HPLC (cromatografía
líquida de alto desempeño de fase inversa) es el método más popular y confiable
aunque es inevitable la superposición de compuestos debido a las diferentes
subclases . También se han usado HPLC de fase inversa con detección
electroquímica , resonancia magnética n u c l e a r y c r o m a t o g r a f í a l í q u
i d a c o n espectroscopia de masas . Merken y Beecher , desarrollaron un sistema
que encuentra y separa 18 de los flavonoides más comunes, representando las 5
subclases, que consiste en remover los azúcares mientras se separan los
flavonoides del alimento contrario a lo que se hace en los métodos tradicionales. La
detección de los flavonoides se basa usualmente en absorción UV a varias
longitudes de onda. La mayoría de los flavonoides muestran dos bandas principales
de absorción, la primera en el rango 320-385 nm representa absorción del anillo B y
la segunda en el rango 250-285 nm representa absorción del anillo A. El orden de
elusión de los flavonoides es: glucósidos de flavanona seguidos por glucósidos de
flavonol y de flavona y luego los aglicones en el mismo orden .Las fases móviles que
se usan generalmente son mezclas de ácido acético, agua y metanol. Aunque se
han usado numerosas fases móviles c o n d i f e r e n t e s m o d i f i c a d o r e s
( m e t a n ol, acetonitrilo o tetrahidrofurano), ácidos (acético, fórmico o
trifluoroacetico) y/o sales (fosfato de amonio) .
7. APLICACIONES:
7.1 Aplicaciones en alimentos
Los productos naturales permiten a las industrias de alimentos, de suplementos
dietéticos y de aditivos de alimentos utilizar compuestos aceptados por los
consumidores que actúan tan efectivamente como los productos sintéticos y ofrecen
beneficios significativos a la salud .
7.1.1 Antioxidantes en alimentos
La adición de antioxidantes es uno de los métodos más populares para incrementar
la vida útil de los productos alimenticios que está asociada con la peroxidación
lipídica. Se ha encontrado que con antocianinas se puede lograr un porcentaje de
inhibición entre 93.5 y 100%, frente a los obtenidos con antioxidantes sintéticos
como el BHA (87.1%), BHT (94.3%) y TBC (90%) . Para la producción de
antioxidantes naturales se han propuesto mezclas a partir de extractos naturales de
frutas que contienen antocianinas para inhibir la oxidación en varios materiales . Un
ejemplo de esto son los recientes estudios en estabilización de carne molida con
tejidos de cereza, no sólo suprimen la peroxidación lipídica sino que inhiben la
formación de aminas aromáticas heterocíclicas y la oxidación del colesterol durante
el proceso de fritura].
IESTP-CHOCOPE
TÉCNICA EN FARMACIA
7.1.2 Pigmentos
El uso de colorantes para lograr un color atractivo y estable de los alimentos y
bebidas es indispensable, pero al igual que ocurre con los antioxidantes, la
seguridad de los colorantes sintéticos está siendo cuestionada y se requiere el
desarrollo de pigmentos naturales .
Las antocianidinas tienen gran importancia económica como pigmentos y se usan
como colorantes en jugos de frutas, vino y otras bebidas para mejorar la apariencia
del producto .Los pigmentos de antocianinas son biodegradables y solubles en agua
y no contienen toxinas ni carcinógenos y por el contrario, se sugiere que bajan el
colesterol y tienen propiedades antitrombóticas y antioxidantes. Su mayor debilidad
radica en la inestabilidad con los cambios de pH, calor y luz, pero su desempeño
puede mejorarse realizando un proceso que se conoce como copigmentación y que
consiste en adicionar algunas antoxantinas como glucósidos de flavonoides que son
más estables .
7.1.3 Saborizantes y edulcorantes
Los flavonoides también se usan como sustancias saborizantes. Un ejemplo de esto
es una mezcla de varios flavonoides de cebolla, manzana y té utilizados como
sustituto de la sal
en la industria alimenticia que además de ser saborizante, es antioxidante.
Recientemente, la naringina y la neohesperidina han adquirido mucha importancia
ya que algunos
de sus derivados (chalconas y dihidrochalconas) tienen un dulzor de
aproximadamente 2000 veces el de la sacarosa. Se ha investigado mucho sobre
estos productos por considerar que pueden ser sustitutos de los edulcorantes
sintéticos. Las chalconas se obtienen por un tratamiento alcalino y cuando se
reducen catalíticamente con hidrógeno, se producen las dihidrochalconas que son
aún más dulces.
A bajas concentraciones los flavonoides, tales como los flavonoles y particularmente
las catequinas se utilizan como aditivos endulzantes y/o saborizantes manteniendo
por más tiempo el sabor en goma de mascar, dulces, mieles y en productos
farmacéuticos como pasta dental, enjuagues bucales y drogas. Estos flavonoides
mejoran el sabor y la dulzura pero no son sustitutos de endulzantes y saborizantes
ya que no tienen sabor y son un poco astringentes. Parece ser que su efecto
consiste en hacer más sensibles los receptores de la boca a los endulzantes lo que
permite bajar los niveles de los endulzantes y saborizantes empleados .
7.1.4 Alimentos funcionales
Los alimentos y/o los ingredientes funcionales proporcionan determinados efectos
fisiológicos beneficiosos no nutricionales que pueden mejorar la salud . En los
flavonoides se ha detectado actividad antioxidante, antiinflamatoria, anti-bacteriana y
anti-cancerígena.
Los productores de nutracéuticos se interesan en producir alimentos procesados
estandarizados
que contengan cantidades verificables de c o m p u e s t o s a p r o p i a d o s c
o n l a concentración y la calidad necesarias para la prevención de algunas
enfermedades. Por ejemplo, el consumo regular de uvas y sus productos derivados
es beneficioso para la salud, pero se pueden desarrollar productos naturales que
tengan mayores concentraciones de flavonoides, utilizando los subproductos de la
vinificación (cáscara y frutas) para incorporarlos posteriormente en alimentos como
los cereales, los productos de panadería y confitería . Otro ejemplo lo constituyen los
extractos purificados de flavonoides producidos a partir de la cáscara de los cítricos
que se usan como suplementos alimentarios en humanos y animales . En general,
los suplementos de flavonoides comerciales actualmente no contienen tan amplia
cantidad de antioxidantes como los que se encuentran en una dieta natural, pero
concentran
los más importantes .
IESTP-CHOCOPE
TÉCNICA EN FARMACIA
7.2 Aplicaciones en cosméticos y farmacéuticos
Los flavonoides son apropiados como agentes antisolares debido a que tienen una
alta absorbancia UV y a que no son tóxicos. La mayor parte de la radiación UV que
alcanza la tierra está entre 320 y 400 nm (UV-A) y aunque la radiación entre 290-320
nm (UV-B) es mucho menor, su nivel de energía es mucho mayor y causa
quemaduras, daños en las células y cáncer de piel. Las flavanonas bloquean la UV-
B y las flavonas son filtros particularmente efectivos para la UV-A .
Los ésteres de flavonoides tienen aplicaciones como descongestionantes, agentes
de tratamiento de piel sensible, agentes de fortalecimiento de capilares sanguíneos
y agentes anti envejecimiento. Las esterasas presentes en los tejidos celulares
(particularmente la epidermis), rompen los ésteres y regeneran los flavonoides
iniciales, lo que permiten que tengan su capacidad antioxidante inicial. Esto los hace
especialmente útiles en humectantes y cosméticos .
Por otra parte, en las pasadas dos décadas, la comunidad científica ha empezado a
reconocer el valor de los productos hortofrutícolas más allá de su contribución
nutriente y se han desarrollado anti-inflamatorios, anti-alérgicos, protectores del
hígados, antiespasmódicos, diuréticos , antibacteriales y productos para el colesterol
a partir de flavonoides .
Se cree que los flavonoides pueden suprimir la actividad de algunas enzimas que
están involucradas en el desarrollo de enfermedades .
Se ha encontrado que la mayoría de los flavonoides, especialmente el quercetin son
potentes y selectivos inhibidores de la enzima d-5-lipooxigenasa que es la
responsable de activar los químicos dañinos de la célula que producen cáncer .El
quercetin también inhibe la xantinaoxidasa (enzima que produce el ácido úrico)
teniendo un significativo efecto anti-inflamatorio y la enzima aldosa reductasa que es
la responsable de convertir la glucosa de la sangre en sorbitol, un compuesto
fuertemente implicado en el desarrollo de la diabetes .Por otra parte, las flavononas
producen inhibición de la fosfolipasa A2, actuando como anti-inflamatorios y las
flavonas inhiben la ciclooxigenasa (COX) que está asociada con la
neurodegeneración .
9. CONCLUSIONES:
Debido a las propiedades antioxidantes de los flavonoides, se ha explorado su uso
en aplicaciones de la industria de alimentos, cosméticos y productos farmacéuticos.
En el campo de los aditivos en alimentos hay una tendencia creciente de reemplazar
los aditivos sintéticos por naturales, debido a que la población mundial está
cambiando sus hábitos alimenticios
prefiriendo lo natural y a las restricciones para el uso legal de antioxidantes,
colorantes y productos sintéticos en alimentos por su efecto nocivo para la salud.
Existe una gran oportunidad de aprovechar los residuos generados en las industrias
de procesamiento de frutas y hortalizas que contienen un alto porcentaje de
flavonoides, utilizándose en la producción de colorantes, saborizantes y cosméticos.
El alto poder antioxidante de los flavonoides, se convierte en algunos casos en una
debilidad debido principalmente a su inestabilidad, pero se han estudiado algunas
alternativas novedosas, eficientes y a bajo costo para la solución de esta
inestabilidad.
En el área de los cosméticos y farmacéuticos se ha encontrado que aunque los
flavonoides no son
nutrientes esenciales, actúan sobre numerosos procesos fisiológicos en el cuerpo y
pueden prevenir muchas enfermedades.
