UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE ICA
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE
MEDICINA HUMANA
BIOLOGÍA CELULAR
Práctica N°: 03
IDENTIFICACIÓN DE ORGANELAS CELULARES MEDIANTE
TÉCNICAS DE COLORACIÓN: ENFOQUE EN LOS
LISOSOMAS
ALUMNOS:
● ORTIZ ATUNCAR, LUIS ALBERTO
CICLO: III
SECCIÓN: BP
TURNO: TARDE
DOCENTE: MEDINA GUERRERO MERICI INGRID
Fecha de realización de la práctica: 14/05/2025
Fecha de entrega del informe: 22/05/2025
I. INTRODUCCIÓN:
Las organelas celulares son estructuras especializadas que
cumplen funciones esenciales para el mantenimiento y la
supervivencia de la célula. Su estudio e identificación son
fundamentales en el campo de la biología celular, ya que
permiten comprender los procesos internos que regulan la
actividad celular. Según Alberts et al. (2017), mediante técnicas
de coloración selectiva es posible visualizar estas organelas
utilizando el microscopio óptico, ya que los colorantes
empleados se unen de forma específica a ciertos componentes
celulares, facilitando su observación e identificación.
Una de las organelas más relevantes en este contexto son los
lisosomas, estructuras esféricas o irregulares rodeadas por una
membrana que contiene enzimas hidrolíticas responsables de la
degradación de macromoléculas. Tal como señala Karp (2013),
los lisosomas participan en procesos clave como la digestión
intracelular, la autofagia y la respuesta inmunitaria, actuando
como centros de reciclaje y defensa dentro de la célula. Para su
identificación en el laboratorio, se emplea el colorante Rojo
neutro, que se acumula selectivamente en los lisosomas debido
a su ambiente ácido, permitiendo así su visualización precisa
bajo el microscopio.
El uso de colorantes específicos como el Rojo neutro no solo
facilita la identificación de lisosomas, sino que también permite
analizar su distribución y abundancia en diferentes tipos
celulares. Esta herramienta resulta especialmente útil en
estudios experimentales, ya que ofrece una aproximación visual
directa a las dinámicas intracelulares relacionadas con la
degradación y el reciclaje de componentes.
Palabras claves: Digestión intracelular, lisosomas, citoplasma.
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II. LOGROS DE APRENDIZAJE:
-Identificar los lisosomas en una muestra celular teñida y
relacionar su función con su estructura observada.
-Valorar la importancia de los lisosomas en procesos celulares
como la digestión intracelular y la autofagia.
III. MATERIAL Y MÉTODO:
● Láminas portaobjetos
● Láminas cubreobjetos
● Pipeta Pasteur
● Bisturí
● Luna de reloj
● Colorante rojo neutro
● Pinza de equipo disección
● Microscopios
● Alcohol isopropílico 20 ml
● Papel lente
● Material bioseguridad
● Guantes de nitrilo
● Cultivo de Paramecium
IV. PROCEDIMIENTO:
1. En una lámina colocar dos gotas de cultivo de protozoarios y
una gota del colorante rojo neutro, mezclar y dejar reposar 2
minutos.
2. Cubrir con una laminilla cubreobjetos y observar la
preparación con objetivos de10X y 40X.
3. Reconocer los lisosomas, teñidos de rojo, en el interior de
los Paramecium.
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V. CUESTIONARIO:
Caso clínico 1:
Un paciente presenta síntomas de debilidad muscular
progresiva, hepatomegalia y alteraciones neurológicas. Los
estudios genéticos revelan una mutación en el gen CTNS,
implicado en la enfermedad de cistinosis.
¿Qué función fisiológica está alterada en esta
enfermedad?
La cistinosis se caracteriza por una alteración en el transporte
de cistina fuera de los lisosomas debido a una mutación en el
gen CTNS, que codifica para la proteína transportadora de
cistina (cistinosina). Esta proteína normalmente permite la
salida de cistina al citoplasma.
¿Cómo afecta esta alteración a los lisosomas y qué
consecuencias tiene para la célula?
La disfunción del transportador causa acumulación de cistina
en el interior de los lisosomas, formando cristales tóxicos que
dañan la membrana lisosomal. Esto interfiere con la función
degradativa de los lisosomas y genera estrés celular, apoptosis
y disfunción orgánica progresiva, especialmente en músculos,
hígado y sistema nervioso.
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Caso clínico 2:
Un niño de 6 años presenta retraso en el crecimiento, fragilidad
ósea y anomalías en la piel. El diagnóstico indica enfermedad
de Gaucher, causada por la deficiencia de la enzima
glucocerebrosidasa lisosomal.
¿Qué rol desempeña esta enzima en los lisosomas?
La enzima glucocerebrosidasa lisosomal es responsable de
degradar glucocerebrósido, un tipo de lípido presente en las
membranas celulares. Esta degradación es crucial para el
reciclaje adecuado de componentes lipídicos.
¿Cómo se relaciona esta deficiencia con los síntomas
observados en el paciente?
La deficiencia de glucocerebrosidasa impide la degradación del
glucocerebrósido, lo que provoca su acumulación en los
lisosomas, especialmente en células del sistema
fagocítico-mononuclear (macrófagos). Esto lleva a la formación
de células de Gaucher, que se acumulan en hígado, bazo,
médula ósea y otros tejidos, causando hepatomegalia,
fragilidad ósea, retraso del crecimiento y alteraciones dérmicas.
1. Mencione la ruta colaborativa de los lisosomas en el transporte
intracelular:
Los lisosomas colaboran con el sistema endomembranoso a través
de tres rutas principales:
○ Endocitosis: ingreso de materiales extracelulares en vesículas
que luego se fusionan con lisosomas.
○ Autofagia: formación de autofagosomas que envuelven
componentes celulares dañados y se fusionan con lisosomas
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para su degradación.
○ Fagocitosis: ingestión de partículas grandes (como bacterias)
por fagocitos, seguida de fusión con lisosomas para su
digestión.
2. Diagrame la función de los lisosomas y peroxisomas:
○ Lisosomas: degradan macromoléculas mediante enzimas
hidrolíticas → función de reciclaje celular.
○ Peroxisomas: degradan ácidos grasos de cadena larga
mediante β-oxidación y neutralizan peróxidos → función
desintoxicante.
3. Indique 2 trastornos funcionales de los lisosomas
○ Cistinosis: acumulación de cistina por defecto en el
transportador lisosomal de cistina.
○ Enfermedad de Gaucher: deficiencia de glucocerebrosidasa,
con acumulación de glucocerebrósido en macrófagos.
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VI. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS:
1. National Institutes of Health (NIH). Cistinosis [Internet].
Bethesda (MD): MedlinePlus; 2021 [citado el 22 de mayo de
2025]. Disponible en:
https://medlineplus.gov/spanish/genetica/cistinosis.html
2. Organización Nacional de Enfermedades Raras (NORD).
Gaucher Disease [Internet]. Danbury (CT): NORD; 2020 [citado
el 22 de mayo de 2025]. Disponible en:
https://rarediseases.org/rare-diseases/gaucher-disease/
3. MedlinePlus. Lisosomas [Internet]. Bethesda (MD): Biblioteca
Nacional de Medicina de EE. UU.; 2022 [citado el 22 de mayo
de 2025]. Disponible en:
https://medlineplus.gov/spanish/ency/article/002262.htm
4. Genet Med. Mutaciones en el gen CTNS y enfermedad de
cistinosis [Internet]. Sociedad de Genética Humana; 2021
[citado el 22 de mayo de 2025]. Disponible en:
https://ghr.nlm.nih.gov/condition/cystinosis
5. Fundación Gaucher. ¿Qué es la enfermedad de Gaucher?
[Internet]. Fundación Española para el Estudio y la Terapia de
la Enfermedad de Gaucher; 2020 [citado el 22 de mayo de
2025]. Disponible en:
https://www.feg.es/que-es-la-enfermedad-de-gaucher
