UNIVERSIDAD MAYOR DE SAN ANDRES
FACULTAD DE AGRONOMIA
CARRERA DE INGENIERIA AGRONOMICA
LABORATORIO # 5
BIOTECNOLOGIA
INTRODUCCION DE ESPECIES
VEGETALES A CONDICIONES IN VITRO
DOCENTE: ING RAFAEL ADOLFO MURILLO GARCIA
DOC AUXILIAR: [Link]. ANTONIO ILLANES ROJAS
UNIVERSITARIA: NANCY PACO GUACHALLA
LA PAZ- BOLIVIA
1. INTRODUCCION:
El cultivo de tejidos vegetales es una técnica de producción en condiciones
totalmente asépticas, en la que a partir de un pequeño segmento inicial de tejido es
posible regenerar en poco tiempo miles y millones de plantas genéticamente iguales,
a la planta madre cuando este tipo de tejido le es ligado un estímulo por medio de
variables o factores físicos (Temperatura, luz, humedad y fotoperiodo) o químicos
(composición del medio de cultivo, PH) controladas en un medio de cultivo. Una d las
técnicas más generalizadas del cultivo in vitro es la micropropagación.
2.- OBJETIVOS
Introducir explantes vegetativos (brotes de papa) a condiciones in vitro bajo
una asepsia total.
Identificar el proceso de producción de plantas de alta calidad a partir de
cultivos in vitro.
3.- REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA
Es la propagación acelerada de plantas mediante el cultivo de meristemos, para
tratar de reproducir y multiplicar genotipos favorables. En los últimos años en Cuba
se han desarrollado las biofábricas para la micropropagación de plátano, caña de
azúcar y plantas ornamentales. Sin embargo, en la actualidad la micropropagación
alcanza producciones enormes en diferentes países y cultivos.
Zhang, Y., et al. (2018). "Micropropagation of Endangered Plant Species:
Techniques and Applications."
Esta revisión se centra en la micropropagación de especies vegetales en peligro de
extinción. Los autores discuten los métodos de cultivo in vitro, la selección de
explantes y la importancia de las hormonas de crecimiento. También destacan casos
exitosos de conservación mediante estas técnicas, subrayando su relevancia para la
preservación de la biodiversidad.
George, E. F., et al. (2008). "Plant Propagation by Tissue Culture."
En esta obra clásica, los autores analizan el cultivo in vitro como una herramienta
para la propagación de plantas. Se abordan los principios básicos del establecimiento
de condiciones in vitro, incluyendo la preparación de medios de cultivo y la
desinfección de explantes. La revisión también examina las aplicaciones comerciales
y científicas del cultivo in vitro en la agricultura y la horticultura.
Pérez, A., & Zúñiga, R. (2020). "In Vitro Culture: A Tool for Genetic Conservation of
Plant Species."
En esta revisión se centra en el uso del cultivo in vitro como herramienta para la
conservación genética de especies vegetales. Los autores exploran los retos de la a
climatización y la recuperación de plantas cultivadas in vitro, así como las estrategias
para mantener la variabilidad genética. Además, discuten el papel del cultivo in vitro
en la investigación y la biotecnología.
Fases de multiplicación de la micropropagación:
Fase 0: Selección y preparación de la planta madre (Preparativa), con el objetivo de
mejorar la eficiencia en el desarrollo posterior de los cultivos in vitro.
Fase 1: Iniciación de los cultivos (Establecimiento), donde se establecen los cultivos
con los cuales se inicia el proceso de propagación.
Fase 2: Multiplicación, es considerada la etapa más importante del proceso donde se
debe garantizar la propagación de los brotes y estabilidad genética de las plantas
producidas.
Fase 3: Enraizamiento, su objetivo es preparar las plántulas para su restablecimiento
en condiciones de suelo.
Fase 4: Aclimatación, fase final del proceso donde se debe lograr plantas listas para
su trasplante definitivo a campos comerciales de producción, viveros o invernaderos.
Asepsia del material vegetal.
4 . METODOLOGÍA
Para la introducción de brotes de papa: Recolección del material vegetal: (brotes del
tubérculo de papa), con anticipación de una semana antes de la introducción.
Saneamiento: para eliminar a los patógenos, los tubérculos deben ser recolectados
de la siguiente manera.
Sin ninguna alteración visible.
Sin la presencia de virus.
Seleccionar 5 tubérculos que tengan buena cantidad de ojos.
Desinfectar con fungicidas e insecticidas.
Lavarlos cuidadosamente y colocarlos en un lugar sin luz para la obtención de
brotes vigorosos, tratar de no manipularlos, debe haber mucha humedad.
AREA SUCIA
Cortar brotes de papa a 1cm de corte 4 cada uno.
Sumergirlas en agua destilada más ace durante 5mint.
En cada recipiente agitar con agua destilada cada 2min.
Mezclar fungicida 50ml.
AREA LIMPIA
Muestra
Etanol al 70% por 30 seg.
Mover en cada recipiente cada 2min con agua destilada.
Muestra
NaClO al 2% unos 6min agitarlo constantemente.
En cada recipiente agitar con agua destilada cada 3min cada uno.
Introducción a la cámara de flujo laminaren una caja Petri poner todos los
brotes de papa y colocarlo en el agar cerrado herméticamente.
5 . CONCLUSION:
la introducción de especies vegetales a condiciones in vitro es una técnica clave que
permite la propagación y conservación de plantas en un ambiente controlado. Facilita
la producción rápida y libre de enfermedades, contribuyendo a la mejora genética y a
la conservación de especies amenazadas. A pesar de sus ventajas, también requiere un
manejo cuidadoso para evitar la pérdida de diversidad genética y garantizar el éxito del
cultivo. En resumen, es una herramienta esencial para la biotecnología y la agricultura
sostenible.
6. BIBLIOGRAFÌA
George, E. F., Hall, M. A., & De Klerk, G. J. (2008). Plant Propagation by Tissue Culture. 3rd
Edition. Springer.
Este libro ofrece una visión general sobre la propagación de plantas mediante
cultivos de tejidos, incluyendo técnicas y protocolos específicos.
Murashige, T., & Skoog, F. (1962). A revised medium for rapid growth and bio assays with
tobacco tissue cultures. Physiologia Plantarum, 15(3), 473-497.
Este artículo seminal presenta el medio de cultivo MS, ampliamente utilizado en la
propagación in vitro de diversas especies vegetales.
Purohit, S. D. (2003). Plant Tissue Culture: Techniques and Experiments. Ahuja Publishing
House.
Este libro cubre diversas técnicas de cultivo de tejidos y su aplicación en la
introducción de especies vegetales.
Zhang, C., & Huang, L. (2012). In vitro culture of plant tissues. In Vitro Cellular &
Developmental Biology - Plant, 48(1), 1-16.
7. ANEXOS:
PROCEDIMIENTO DE LAS ESPECIES VEGETALES
AGUA DESTILADA EN UN RECIPIENTE COLOCARLO EN LA CAJA PETRI PARA LLEVAR A
LA CAMARA DE FLUJO LAMINAR
