ANÁLISIS DEL CONTENIDO DE PARABENOS EN PRODUCTOS COSMÉTICOS

¿Qué son los parabenos?

Los parabenos son los conservadores más empleados en productos cosméticos. Desde un punto
de vista químico son derivados del ácido para-hidroxibenzoico, Entre ellos los más empleados son
metilparaben, propilparaben, y el butilparaben. Por lo general se emplea más de un paraben en un
producto y muchas veces se encuentran en combinación con otro tipo de conservadores para dar
protección a un mayor número de microorganismos. El uso de mezclas de parabenos permite bajar
la dosis necesaria e incrementar la actividad preservadora. .

¿Por qué usar preservadores en cosméticos?

Se emplean para protegerlos de crecimiento de microorganismos y mantener la integridad del

producto así como para proteger la salud de los consumidores.

¿Qué productos contienen parabenos?

Se emplean en una amplia gama de cosméticos y aún en alimentos. Entre los productos
cosméticos se encuentran: maquillaje, humectantes, lociones, shampoos, antiperspirantes, cremas
para afeitar,….etc. Las principales marcas de estos productos están dejando de usar los
parabenos. Las nuevas normas de etiquetado obligan a declarar su contenido en la etiqueta.

¿Está regulado?

La FDA en 1984 declaró que era seguro usar parabenos en cosméticos hasta concentraciones del
25% en peso; aunque típicamente se empeña entre el 0.01 al 0.3%.

Sin embargo un estudio publicado en 2004 (Darbre, en el Journal of Applied Toxicology) detectó la
presencia de parabenos en tumores de cáncer de mama. El artículo asume que los parabenos
pudieran tener actividad estrogénica y que de ello pueda influenciar en la generación de tumores;
sin embargo el estudio no es concluyente.
Esto ha obligado a revisar la normativa y es por ello que ahora interesa determinar el contenido de
parabenos en cosméticos.

Presentación del problema

Se quiere determinar el contenido de parabenos en 3 muestras:

Muestra 1 Tea-Tree Shampoo

Muestra 2 Jojoba Moisture Rich Cleaner
Muestra 3 Peppermint Foot Lotion

Para poder llevar a cabo el análisis se debe de separar los parabenos de los demás componentes
de la mezcla, para ello se aprovecharan las propiedades químicas de los parabenos. De la
bibliografía encontramos que:
Información Técnica

Apariencia: Cristalina
Estado físico: Sólido
Solubilidad: Soluble en agua (2.5 g/l) a 25°C, benceno (ligeramente soluble),
tetracloruro de carbono (ligeramente soluble), etanol, eter, acetona,
DMSO, metanol, aceite caliente (25 g/l), y glicerol caliente (1 g/70 ml).
Almacenamiento: Conservar a 4°C
Punto de fusión: 125-128 °C (lit.)
Punto de ebullición: 270-280 °C
Densidad: 1.38 g/cm3 a 20°C
Índice de refracción: n20D 1.55 (estimado)
Valor de pK: pKa: 8.30

Como se puede ver los parabenos son mucho más solubles en disolventes como etanol, eter,
acetona, DMSO, metanol, que en agua. Por ello se llevará a cabo una extracción líquido-líquido
con acetona agregando sal (salting out) para favorecer la extracción. Sin embargo este
procedimiento puede co-extraer otros componentes de las muestras solubles en acetona por lo que
se llevará a cabo una segunda etapa de “limpieza” empleando la técnica de extracción en fase
sólida.

Procedimiento de Extracción

A 0.5 ± 0.05 g de cada muestra añadir 1.25 mL de acetona y agregar 0.6 ml 1% NaCl
Colocar en un Vortex durante 30 segundos; esperar 30 segundos hasta que la emulsión se rompa,
centrifugar por 10 minutos a 3000 rpm.
Con una pipeta Pasteur retirar el sobrenadante.
El sobrenadante, se carga a un cartucho de SPE previamente acondicionado.
Eluir el cartucho de SPE con dos porciones de 5 mL de acetato de etilo
El eluato se evapora con corriente de nitrógeno hasta casi sequedad y reconstituye en en MeOH
aforando a 10 mL.

Condiciones cromatograficas:
Se llevará a cabo el análisis por cromatografía de líquidos de alta presión (HPLC).
Coumna: Kinetex® 5µm EVO C18 100 Å, (Phenomenex)
Dimensiones:100 x 3 mm ID
Tipo de elución: Gradiente
Disolvente A:10% acetonitrilo en agua
Disolvente B:Acetonitrilo
Perfil del gradiente:
Paso nº Tiempo (min) %A %B
1 0 90 10
2 4 70 30
3 5 60 40
4 6 60 40

Velocidad de Flujo:1.5 mL/min

Temperatura de la columna: Ambiente
Detección: UV-Vis –Longitud de onda (UV) a 254 nm (22°C)
En estas condiciones se obtuvo el siguiente cromatograma:

Propil
Etil
Metil

De los datos del cromatograma se tiene:

Si se toma el pico a tr= 1.650 como el tiempo muerto t0 calcula los parámetros que se indican

tr Ancho K´ N H Rs α
1.650 0.1408
3.043 0.1106
3.847 0.1207
5.104 0.1309

Concluye sobre los valores e indica que habría que mejorar

Análisis Cuantitativo
Para llevar a cabo el análisis cuantitativo se empleará la técnica de estandarización externa, por lo
que se preparan 5 disoluciones de concentraciones de aproximadamente 10 hasta 80 ppm, y cada
una se inyecta por triplicado obteniendo los resultados que se indican en la siguiente tabla:

MetilParabeno Área
Conc. Conc. Real Desv
Esperada ppm Inyección 1 Inyección 2 Inyección 3 Prom std CV
10 17 221.66 220.71 221.97
20 34 406.59 403.28 405.28
40 68 943.52 930.76 945.43
60 102 1467.45 1462.96 1450.67
80 136 1912.58 1909.08 1934.59

EtilParabeno Área
Conc. Concentración Desv
Esperada ppm Inyección 1 Inyección 2 Inyección 3 Prom std CV
 10 9 119.49 120.79 122.33
20 18 224.05 225.49 224.7
40 36 525.07 516.36 524.88
60 54 815.98 813.38 805.49
80 72 1067.23 1063.63 1077.88

PropilParabeno Área
Conc. Concentración Desv
Esperada ppm Inyección 1 Inyección 2 Inyección 3 Prom std CV
10 10 123.7 125.52 126.14
20 20 232.06 231.57 232.23
40 40 540.72 532.23 541.26
60 60 842.46 839.28 829.27
80 80 1095.96 1095.18 1109.84

Se procedió a pesar la cantidad de cada una de las muestras necesarias para realizar el análisis:

Muestra 1 Muestra 2 Muestra 3

0.5207 0.4971 0.4587

Las muestras se procesaron de acuerdo al método, se inyectaron por triplicado obteniéndose los
siguientes valores de área

MET Et Prop
Tr 3.043 3.847 5.104
Área en cuentas
Muestra 1
Inyección 1 1503.04 220.27 160.44
Inyección 2 1491.90 220.68 160.76
Inyección 3 1493.76 220.16 160.37

Muestra 2
Inyección 1 906.65 13.79 508.05
Inyección 2 901.43 10.23 498.72
Inyección 3 900.93 14.38 500.50

Muestra 3
Inyección 1 402.16 119.38 118.87
Inyección 2 401.45 119.28 121.04
Inyección 3 398.41 118.79 119.94

1. Construye las curvas de calibración para cada parabeno. Discute los resultados
2. A partir de la curva de calibración determina la concentración en ppm de cada uno de los
parabenos en las muestras
3. Determina la concentración de cada uno de los parabenos en % w/w en cada muestra
4. Determina la concentración total de parabenos en cada muestra como % w/w
5. Discute los resultados (son lógicos, precisos, los valores de concentración son aceptables,
el método propuesto es válido, etc)