Repaso microbiología
1546 Fracastoro propone que las enfermedades están causadas por
organismos invisibles.
1590-1608 ansen desarrolla el primer microscopio útil
compuesto.
1676 Antony van Leeuwenhoek descubre «animaculos».
1688 Redi refuta la generación espontanea de gusanos.
1786 Muller describe la primera clasificación bacteriana.
1798 Jenner vacuna contra la viruela.
1835 Bassi enfermedad del gusano de ceda.
1849 Snow estudia epidemia de cólera.
En 1910, el químico alemán Paul Ehrlich descubrió el primer compuesto
antibacteriano, un compuesto que resultó efectivo contra la espiroqueta
causante de la sífilis.
Descubrimiento de la penicilina por Alexander Fleming en 1928, la
sulfanilamida en 1935 por Gerhard Domagk y la estreptomicina por
Selman Waksman en 1943.
John Enders fue el primero en cultivar virus en cultivos celulares
1946. Desarrollo de vacunas.
Historia 1857
Pasteur
Fermentación acidoláctica
Niega generación espontanea
Vacuna contra el carbunco
Vacuna contra la rabia
Koch
Agente etiológico del carbunco
Cultivo de bacterias sobre gelatina
Descubre el Mycobacterium tuberculosis
Postulados Originales de Koch
El microorganismo debe encontrarse en todos los pacientes con la
enfermedad en cuestión y su distribución en el cuerpo debería corresponder
a las lesiones observadas,
2-El microorganismo no debe aparecer en otra enfermedad de forma
fortulta o saprófita.
El microorganismo debe aislarse de las lesiones de una persona
infectada y se debe obtener un cultivo puro.
4, El cultivo puro inoculado en animales experimentales debe producir
la enfermedad.
5,- El microorganismo deberá aislarse en un cultivo puro a partir del animal
infectado intencionalmente.
La célula
Son las unidades fundamentales de los organismos vivos.
Las bacterias, son las células de menor tamaño, son visibles tan sólo
con la ayuda de un microscopio.
Contiene las bases genéticas para la reproducción en su genoma
formado por ácido desoxirribonucleico (ADN).
Material bioquímico necesario para la transcripción de la información
genética al ácido ribonucleico mensajero(ARNm) y la traducción del
ARN en proteínas.
Maquinaria necesaria para la producción de energía y los procesos
biosintéticos
Célula bacteriana
ADN cromosómico, ARNm, ribosomas, proteínas y metabolitos.
El cromosoma bacteriano se compone de una única molécula circular
de doble cadena contenida en una zona definida conocida como
nucleoide.
Plásmidos, unas moléculas extracromosómicas circulares más cortas
de ADN.
La ausencia de membrana nuclear conlleva el acoplamiento de los
procesos de transcripción y de traducción; en otras palabras, los
ribosomas se fijan al ARNm y elaboran proteínas a medida que se
está sintetizando el ARNm aún unido al ADN.
Diferencias entre eucariotas y
procariotas
Eucariotas (del griego, «núcleo verdadero»),
Procariotas (del griego, «núcleo primitivo»).
Carecen de un núcleo y de otros orgánulos, los procariotas poseen
un ribosoma más pequeño (el ribosoma 70S).
La mayoría de las bacterias poseen una pared celular de
peptidoglucano cuya estructura es semejante a una malla que rodea
a las membranas para protegerlas del entorno.
Reinos
Monera
Agrupa bacterias y algas verde-azules
Chromista
•Algas y hongos inferiores con flagelos
Plantae
Organismos pluricelulares caracterizados por la fotosíntesis
Protozoa
Protozoo y hongos en fase flagelar
Fungi
•Hongos pluricelulares carentes de fase flagelar
Animalia
Metazoarios con nutrición
ingestiva.
Ribosoma bacteriano
Consta de dos subunidades de
30S y 5OS que forman un ribosoma 70S.
Este ribosoma es distinto del
ribosoma 80S (sub unidades 40S y 60S) de los eucariotas.
Membrana citoplásmica
Posee una estructura lipídica de doble capa semejante a la observada en
las membranas de los eucariotas, compuesta por proteínas 70% y
fosfolípidos. Ausencia de esteroles.
Membrana citoplásmica
Funciones:
Permeabilidad selectiva y transporte de solutos
Transporte de electrones y fosforilación oxidativa en aerobias
Excreción de exoenzimas hidrolíticas
Transporte de enzimas y moléculas que participan en la biosíntesis
de la pared
Portar receptores y proteínas quimioactivas
Pared celular
Permite mantener la integridad de la célula bacteriana, evitando
cambios en la presión osmótica de la misma, participa en la división
celular y su propia biosíntesis.
Compuesta principalmente por peptidoglucanos (mureína o
mucopétido).
Peptidoglucanos
N-acetilglucosamina
N-acetilmurámico
Enlaces peptídicos
Tinción de Gram
Hans Christian Gram1884.
Tinción diferencial
Grampositiva retienen en cristal violeta además de yodo después de
lavar con alcohol o cetona (color violáceo)
Gramnegativas no retiene el cristal violeta y se tiñen con safranina
(color rojo)
La tinción de Gram es de color violeta. Cuando se combina con las
bacterias en una muestra, la tinción seguirá siendo violeta dentro de la
bacteria (grampositiva) o se tornará rosa (gramnegativa).
Bacterias grampositivas
Componentes especiales
Acido teicoico
Acido teicurónico
Polisacáridos
Capsula
Capas laxas de proteínas o polisacáridos (glucocalix)
Factor de virulencia
Menos antigénica y antifagocítica
Formación de biopeliculas
Los flagelos
Propulsores en forma de cuerda que están formados por unas
subunidades proteicas enrolladas helicoidalmente (flagelina).
Pueden ser uno o varios
Proporcionan motilidad a las bacterias
Portan también factores antigénicos y determinantes de la cepa
bacteriana.
Las fimbrias (pili)
Son unas estructuras piliformes, localizan externa y están formadas
por unas subunidades proteicas
(pilina).
Se diferencian de los flagelos por su menor diámetro
(3-8 nm frente a 15-20 nm) y carecer de una estructura helicoidal.
Favorecen la adhesión a otras bacterias o al organismo
anfitrión
Constituyen un importante determinante de virulencia en la
colonización e infección del aparato urinario por
E. coli.
Pili sexuales
EXCEPCIONES BACTERIANAS
Las micobacterias poseen una capa de peptidoglucano que está
entrelazado mediante un enlace covalente a un polímero de
arabinogalactano, y rodeado de una capa lipídica ceriforme de ácido
micólico y sulfolípidos.
Estas bacterias se definen como acidorresistentes.
Los micoplasmas carecen de una pared celular de peptidoglucano e
incorporan en sus membranas moléculas de esteroides procedentes
del organismo anfitrión.
Esporas
Bacterias grampositivas (Bacillus, Clostridium)
Condiciones ambientales adversas, disminución de los nutrientes.
Pasar del estado vegetativo al estado de latencia oespora.
Contiene una copia completa del cromosoma bacteriano, las
concentraciones mínimas imprescindibles de sus ribosomas y
proteínas esenciales, y una elevada concentración de calcio unido a
ácido dipicolínico.
Se observa como una estructura refingente.
Esporas
La espora protege el ADN del genoma bacteriano del calor intenso, la
irradiación y la acción de la mayoría de enzimas y sustancias
químicas.
La germinación se estimula por la alteración de la continuidad de la
capa externa debido a factores mecánicos, el pH, el calor u otros
parámetros;
requiere la presencia de agua y un nutriente desencadenante
(alanina). El proceso aproximadamente 90 minutos
Fenotípica
Morfología microscópica y macroscópica
Tinción de Gram
Grampositivos y gramnegativos
Forma de cada célula
Cocos, bacilos, espirilos
Aspecto macroscópico de las colonias
Propiedades hemolíticas, la pigmentación, el tamaño, la forma y el
olor
Fenotípica
Biotipado
Marcadores bioquímicos específicos como fermentación de hidratos
de carbono.
Presencia de proteasas y enzimas hidrolíticas especificas
Estos métodos se han empleado para subdividir los grupos de
microorganismos más allá del nivel de especie.
Serotipado
Reacción de antígeno-anticuerpo
Identificar microorganismos inertes al biotipado
Se emplea con fines epidemiológicos
Analítica
Utilizado para clasificarlas en géneros, especies y subespecies
Patrón cromatográfico de los ácidos micólicos
Análisis de los lípidos presentes
Análisis de las proteínas mediante espectroscopia de masas.
Genotípica
Método mas preciso de clasificación
Hibridación del ADN: rápida identificación de los microorganismos
mediante el uso de sondas moleculares.
Identificación directa de microorganismos en muestras clínicas y
microorganismos de crecimiento lento.
Análisis de secuencias de ácidos nucleicos: se extraen secuencias
especificas de un genero, se obtienen millones de copias y se
comparan, ADN ribosómico.
Empleado para definir la relación evolutiva existente entre distintos
microorganismos.
Análisis de plásmidos, el ribotipado y el análisis de fragmentos del ADN
cromosómico. Utilizados fundamentalmente para clasificar los
microorganismos a nivel de subespecie y con fines epidemiológicos.
Coloración
Coloración de Gram
Gram positivas
Gram negativas
Coloración de Ziehl-Neelsen
Presencia de BAAR
Ausencia de BAAR en 100 campos
Método de Gin o tinta china
Presencia o no de capsula
Medios de cultivo
Preparación liquida o solida utilizada para el crecimiento, transporte o
mantenimiento de microorganismos.
Debe contener todos los nutrientes esenciales para ese
microorganismo.
Imprescindibles para aislar e identificar microorganismos, evaluar la
sensibilidad, antibiótica, analizar agua y alimentos.
El conocimiento de hábitat del microorganismo es útil para elegir el
medio de cultivo apropiado.
Nutrientes necesarios.
Nutrientes básicos: agua, carbono, nitrógeno, fosforo, k+, Mg, Cu, Fe,
Cobalto...
Metabolitos esenciales: ácido pirúvico
Factores de crecimiento: aminoácidos, bases púrica y pirimídicas y
vitaminas
Factores estimulantes: aceleran la multiplicación
Medios de cultivo
Facilitar el crecimiento y el aislamiento de las bacterias presentes en
una muestra clínica.
Determinar qué bacterias entre las que se desarrollan tienen más
probabilidades de ser las causantes de la infección y cuales son sus
posibles contaminantes o colonizadores.
Obtener un desarrollo suficiente de las bacterias.de importancia
clínica para permitir su identificación y
su caracterización
Medios sintéticos o definidos
Organismos autótrofos (cianobacterias y algas).
CO2 como fuente de carbono, nitrato o amonio como fuente de
nitrógeno, fosfato, sulfatos, etc.
Algunos heterótrofos puede crecer en medios con glucosa como
fuente de carbono y sal de amonio
como fuente nitrógeno.
Se emplean en investigación
Medios complejos
Se desconoce la composición química exacta.
Un mismo medio puede satisfacer las necesidades nutricionales de
diferentes microorganismos.
Contienen peptona, extrato de carne y levadura
Peptona: licuado proteínas de las carnes, sirve como fuente de
carbono, energía y nitrógeno.
Extracto de carne: contiene aminoácidos, péptidos, nucleótidos,
acidos organicos, vitaminas y minerales.
Extracto de levadura: fuente de vitaminas complejo B, nitrógeno y
carbono.
Medios complejos
Agar: polímero sulfatado normalmente extraído de algas rojas.
Compuesto por D-galactosa, 3,6-ahidro-L-galactosa y acido D-
glucuronico.
Es un buen agente solidificante, se funde en agua hirviendo. La
mayoría de las bacteria no pueden degradarlo.
Tipos de medios de cultivos
Medios simples
Requisitos minimos, permite crecimiento de bacterias no exigentes.
Ej: agar nutritivo, caldo.
Medios enriquecidos:
Permiten el desarrollo de microorganismos exigentes. Contiene
sangre, suero, huevo, liquido ascitico, glucosa, vitaminas. Ej: agar
sangre.
Tipos de medios de cultivo
Medios selectivos
Favorecen el crecimiento de microorganismos particulares
Sales biliares, fucsina y el cristal violeta favorecen el crecimiento de
bacterias gramnegativas.
Medios (agar endo y eosina-azul de metileno y Mac-Conkey)
Medios diferenciales
Diferencian entre grupo distintos de bacteria
Agar sangre (hemolíticas y no hemolíticas)
Mac-Conkey (fermentadora y no fermentadoras)
Enzimas
Polímeros de aminoácidos, presentes en las células en cantidades muy
bajas y capaces de efectuar cambios propios de los procesos celulares que
se asocian a la vida. Catalizadores biológicos,
Clases
Proteínas simples
Proteínas complejas
Tipos de enzimas
Extracelulares o exoenzimas
Intracelulares o endoenzimas
Enzimas
Propiedades
Desnaturalizan en calor
Se precipitan en etanol
No se dializan
Características
Alto poder catalítico
Alto grado de especificidad por el sustrato
Sustrato para la formación
Enzimas constitutivas
Enzimas inducibles
Las enzimas se afecta su actividad
Actividad
◦ Concentración de la enzima
◦ Concentración del sustrato
◦ pH
◦ Temperatura
◦ Reacciones fundamentales
◦ Reducción
◦ Oxidación
◦ Deshidratación
◦ Hidrolisis
◦ Desanimación
◦ Descarboxilación
◦ Fosforilación
Fuente de energía
Los nutrientes entran a la célula bacteriana por osmosis.
Organotrofia: utiliza energía disponible en compuestos orgánicos.
Quimiolitotrofia: compuestos
inorgánicos
Fototrofia: obtenida de la luz
Fuente de energía
Bacterias Autotróficas : la obtienen de compuestos inorganicos, fuente de
carbono es CO2.
Autótrofas fototróficas: C. inorgánico, luz y CO2.
Autótrofa quimiolitótrofica: C. mineral, energía oxido-reduccióny CO2.
Heterótrofas: requieren compuestos orgánicos como fuente de energía
Heterótrofas quimioorganotróficas: c. orgánico, Redox,
Heterótrofas fototrofica: c. orgánico, luz
Nutrientes basicos
Macronutrientes:agua, carbono, nitrogeno, fosforo, azufre, cationes
(K, MG'+ Ca2* Fe 2+,3+.)
Micronutrientes:Cuz+, Co+, Zn2+, Mn2+
Metabolitis esenciales:Piruvato, acetil coenzima A.
Factores de crecimiento:
Aminoacidos, bases purica y pirimidicas, vitaminas.
